载rhBMP2凝胶微球控释系统的设计与合成实验

目的:设计与合成rhBMP2新型控释载体,初步探讨其载药及降解性能。方法:用右旋糖酐 (dextran,dex)与甲基丙烯酸缩水甘油酯(glycidylmethacrylate,GMA)合成甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐 (dex GMA),测定该凝胶微球溶胀系数Q,并对其载药、降解性能进行初步研究。结果:dex GMA在一定条件下可以成球,粒径与制备工艺密切相关;该凝胶微球溶胀参数 10. 9±5. 3;载药性能良好,在葡聚糖酶的作用下 20~40d内可以完全降解。结论:右旋糖酐基凝胶微球具有良好的溶胀性能,可生物降解,其粒径可控,作为生长因子载体,有望达到控释给药的目的,其制备工艺及理化性能有待进一步研究。     

rhBMP2缓释微球对牙龈成纤维细胞的生物学作用

目的：观察甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐(dex-GMA)载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP2)缓释微球(MPs)对体外培养的人牙龈成纤维细胞(GFCs)的生物学作用。方法：采用体外细胞培养技术,将rhBMP2缓释微球和GFCs一起培养,采用M1Tr法检测其对GFCs的增殖状况的影响;碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测细胞ALP活性以反映rhBME2缓释微球对其分化状况的影响,并与单纯rhBMP2的作用进行比较。结果：rhBMP2缓释微球具有良好的生物学活性,能显著促进的GFCs增殖及分化,并维持10d以上,其效应高于单纯施加rhBMP2的效应。结论：所制备的rhBMP2微球比单纯rhBMP2对GFCs有更为明显的生物学效应,可以达到对生长因子的有效缓释。     

釉基质蛋白控释微球的研制及其生物学性能的初步研究

目的　探讨载釉基质蛋白(EMPs)的右旋糖酐基凝胶微球(dex-MPs)的制备工艺及其理化与生物学性能。 方法　采用乳化化学交联技术制备载EMPs的dex-MPs (EMPs-dex-MPs),正交设计法优化制备工艺;观察EMPs-dex- MPs形态和粒径,测定其包封率与载药量;测定微球的溶胀、降解性能,动态透析法检测其体外释药特征及其影响因 素;通过EMPs-dex-MPs对体外培养的人牙周膜细胞(PDLCs)增殖和分化的影响,评价其生物学性能。结果　EMPs- dex-MPs形态规则,粒径25μm左右,分布较为均匀;EMPs载药量(32·8±1·2)%,包封率(78·9±1·0)%。体外释药 实验表明EMPs-dex-MPs中80%的EMPs在前20 d释放,在葡聚糖酶存在下40 d左右可以完全降解。与单纯EMPs 相比,EMPs-dex-MPs能持续促进PDLCs的增殖和分化达12 d左右。结论　dex-MPs作为活性生长因子载体,具有确 定的缓释作用,并可以通过制备工艺的改变控制其释药行为;EMPs-dex-MPs作为EMPs的一种新的给药方式,比传 统给药方式可以更加有效地促进牙周组织相关细胞的增殖与分化。     

右旋糖酐基骨形态发生蛋白2微凝胶缓释系统的理化性能

目的观察载骨形态发生蛋白2(BMP2)的右旋糖酐基微凝胶(BMP2-DEX-MP)冻干剂的理化性能和释药特征。方法采用改良的乳化溶液聚合法制备含BMP2的右旋糖酐基微凝胶(BMP2-DEX-MP),并制得冻干品。观察其形态、粒径、包封率、体外释放度及稳定性。结果所制备的BMP2-DEX-MP在光镜下显示圆整均匀,圆度(1.14±0.08)μm,80.0%微球粒径在(35±10)μm范围之内;BMP2包封率为78.0%,溶涨率为85.9%;冷冻干燥后4℃下可稳定放置6个月以上;体外释药符合双项动力学规律。结论所合成的BMP2-DEX-MP理化性能稳定,具有确定的BMP2缓释作用,表明右旋糖酐基微凝胶可以作为生长因子缓释载体。     

rhBMP2纳米缓释系统的制备及其对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响

目的：制备甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐（dex-GMA）载重组人骨形态发生蛋白2（rhBMP2）凝胶纳米微球（NPs）缓释系统,检测其理化及生物学特性.方法：采用改良乳化溶液聚合法,制备rhBMP2纳米微球（rhBMP2-dex-NPs）;观察其形态、粒径与稳定性,检测其载药、释药特征;采用体外细胞培养技术,将rhBMP2-dex-NPs和兔骨髓间充质干细胞一起培养,MTT法检测其对细胞增殖状况的影响,碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒检测细胞ALP活性,以反应rhBMp2-dex-NPs对其分化状况的影响,并与单纯rhBMP2的作用进行比较;实验按照培养液中所含成分不同分为4组：培养液中加入单纯rhBMP2（A组）、加入rhBMP2-dex-NPs（B组）、加入空白NPs（C组）和对照组（D组）,其中A、B 2组均分别按照rhBMP2的不同量设置100μg/L、200μg/L、400μg/L 3个浓度组,采用SPSS 10.0对结果进行统计学分析.结果：rhBMP2-dex-NPs大小均匀,粒径分析表明,80%的纳米球粒径在20nm左右,包封率高达83%,80%的rhBMP2在前12d释放;其具有良好的生物学活性,能显著促进骨髓间充质干细胞（BMSCs）的增殖和分化,效应高于单纯施加rhBMP2的效应（P＜0.01）.rhBMP2-dex-NPs与BMSCs共培养3d内,反应BMSCs增殖和分化的OD值与A组无显著差异（P＞0.05）,但显著高于C、D组（P＜0.01）;3d后,rhBMP2-dex-NPs对细胞增殖和分化的促进作用较单纯rhBMP2明显加快;5～7d后,A、B组差异具有显著性（P＜0.01）;12d左右,B组细胞仍然有较强的增殖与分化能力,与其他3组有非常显著差异（P＜0.001）,而此时A、C、D组间差异已无统计学意义（P＞0.05）.结论：所制备的rhBMP2-dex-NPs形态良好、包封率高,理化与生物学性能稳定,可以达到对生长因子的良好缓释,比单纯rhBMP2对BMSCs有更为明显的生物学效应,可以持续促进其增殖与分化达10d以上,在组织工程领域有着广阔的应用前景.     

电纺羧甲基壳聚糖复合rhBMP-2生长因子纤维膜的制备

目的：利用静电纺丝技术以羧甲基壳聚糖复合生长因子（rhBMP-2）缓释微球制备牙周组织再生引导膜。方法：将载有生长因子的钙藻酸盐微球与主体羟基磷灰石（CCS/nHA）羧甲基壳聚糖混合利用静电纺丝技术制得具有＂串珠＂丝状结构的复合纤维膜,并观察微球及纤维膜的体外释药过程。结果：电纺技术制备出具有一定力学强度的缓释微球的纤维膜。体外释药在50hr时纤维膜释放速率78%,较微球的释放速率96%缓慢,之后各自接近平缓释放。结论：用静电纺丝技术平台制备缓释再生引导膜是可行的,这一技术为牙周组织再生术的完善和发展提供新的研究空间,其生物学性能尚需进一步研究。     

rhBMP-2聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微球缓释系统对骨髓间充质干细胞的生物学效应

目的 制备rhBMP—2聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微球缓释系统，检测其对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的生物学效应。方法 采用改良的乳化溶液聚合法制备rhBMP—2纳米微球；采用MTT法检测微球对BMSCs的增殖状况的影响；碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测细胞ALP活性以反映微球对其分化状况的影响，并与单纯rhBMP—2的作用进行比较。结果 该微球缓释系统有生物活性，能显著促进BMSCs的增殖及分化，并呈剂量依赖性。其效应高于单纯施加rhBMP—2的效应。结论 在组织工程技术中应用生长因子缓释系统的作用明显优于单纯生长因子的作用。     

rhBMP-2微球温敏型凝胶剂的药剂学特征及对人PDLCs增殖的影响

目的：观察rhBMP-2微球温敏型凝胶的药剂学特征及对人牙周膜细胞（PDLCs）增殖的影响。方法：采用W／O／W型乳化溶剂挥发法以聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）为材料制备空白微球,通过吸附法制备rhBMP-2载药微球。以单甲基聚乙二醇-羟基乙酸共聚物（MPEG—PLGA）为材料制备凝胶,采用夹心酶联免疫吸附法测定释药速度。采用四唑盐比色法（MTT）及酶动力学法测定细胞增殖和碱性磷酸酶活性。结果：rhBMP-2微球呈规则球形,表面多孔,粒径为（19．6±2.3）μm,微球凝胶剂相转变温度为36℃左右,微球凝胶剂体外释药曲线符合Higachi方程,28d的累积释放度为80％。rhBMP-2微球凝胶剂能明显促进牙周膜细胞的增殖和提高ALP活性,随时间推移在第10d时rhBMP微球凝胶促PDLCs生长的作用明显强于rhBMP溶液。结论：rhBMP-2微球温敏型凝胶剂具有明显的缓释特征,与溶液剂相比促进PDLCs增殖作用更持久。     

盐酸米诺环素微球凝胶的制备及对大鼠实验性牙龈炎的抑制作用

目的:制备含盐酸米诺环素微球的功能性壳聚糖温敏凝胶,并观察载药凝胶对大鼠牙龈炎模型的抑菌效果。方法:将小分子药物盐酸米诺环素先制备成微球,共混于温敏凝胶中,观察其理化性质及释药性能;建立大鼠的实验性牙龈炎模型,观察载药凝胶对实验性牙龈炎模型的消炎效果。结果:实验制得的缓释凝胶,T50%可延长至4.24d;动物实验初步结果显示,与对照组相比实验组的牙龈指数和探诊深度有明显的减少,炎症细胞浸润数量少,毛细血管扩张程度轻。结论:加载盐酸米诺环素的缓释凝胶对大鼠实验性牙龈炎有一定的消炎作用。     

缓释人富血小板血浆生长因子壳聚糖微球的制备

目的：制备载人富血小板血浆（hPRP）生长因子壳聚糖微球,观察其体外缓释效果。方法：选用离子凝胶法制备壳聚糖微球,利用微球吸附hPRP生长因子;以微球对hPRP中主要生长因子TGF-β1的吸附率作为评价指标,优化微球制备配方,并观察优化配方微球体外缓释TGF-β1效果;以hPRP中PDGF-AB为对象考察优化配方微球对其吸附率、载生长因子率,验证微球吸附效果。结果：当壳聚糖溶液浓度为2.5mg/ml、10mg/ml多聚磷酸钠溶液滴加量为2.5ml时可获得优化的壳聚糖微球制备配方。优化配方微球对hPRP中主要生长因子TGF-β1、PDGF-AB吸附率分别为78.02%、58.28%,载生长因子率分别为3.70ng/mg、1.31ng/mg;载hPRP生长因子的微球体外21天缓释TGF-β1累计35.80ng,占吸附总量的85.52%。结论：本实验制备的壳聚糖微球可初步实现吸附hPRP复合生长因子,并初步达到体外缓释效果。     

柠檬精油对牙周致病菌抑制作用及其安全性初步研究

目的:探讨柠檬精油对牙周致病菌的体外抗菌活性及对细胞增殖的影响。方法:采用微量液体稀释法测定柠檬精油对Pg、Fn、Aa、Pi的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);以较低浓度的MIC为标准稀释LEO作为实验组,采用MTT法测定柠檬精油对HUVECs的毒性作用,明确抑菌浓度下LEO的安全性。结果:柠檬精油对牙周主要致病菌均有抑菌作用,Pg、Fn、Aa、Pi的MIC分别是9.0 g/L、4.5 g/L、4.5 g/L、9.0 g/L,Aa、Fn的 MBC是9.0 g/L,Pg、Pi的MBC未测得。1/2MIC、1/20MIC浓度的LEO能够抑制人脐静脉内皮细胞的生长,而低于1/200MIC浓度的LEO则对人脐静脉内皮细胞的生长没有影响,其中1/200MIC浓度的LEO作用明显优于0.02%的CHX。结论:体外环境中,柠檬精油对牙周致病菌Pg、Fn、Aa、Pi具有抗菌活性,低浓度应用对机体相对安全。     

Oral cancer: molecular technologies for risk assessment and diagnosis

Purpose: The effective biomarkers related to diagnosis, metastasis, drug resistance and irradiation sensitivity of oral cancers will help the pathologist and oncologist to determine the molecular taxonomy diagnosis and design the individualization treatment for the patients with oral cancers.     

Computer-assisted planning for maxillofacial prosthodontic rehabilitation

Computerized tomography (CT) planning and the use of CT derived surgical templates for implant placement have shown promise for restoring function within months after surgical reconstruction of acquired post-oncologic defects.     

Stimulated whole saliva components in children with Down syndrome

The authors report on the components of stimulated whole saliva from children with Down syndrome—including pH, flow rate, sialic acid and protein concentrations, and amylase and peroxidase activity. Saliva samples were collected from 35 children aged 6–10 years. Of the participants, 17 had Down syndrome and 18 did not. To stimulate saliva production, the children chewed a piece of parafilm for 10 minutes before the sample was collected. Soon after collecting the saliva sample, the authors measured pH using a portable pH-meter. Sialic acid levels were determined with a thiobarbituric acid assay. Protein content was determined with Folin's phenol reagent. Amylase was assayed and the authors measured the maltose produced by the breakdown of starch and peroxidase using ortho-dianisidine.
No statistically significant difference was observed in levels of sialic acid (free and total) between the two groups. Protein concentration was about 36% higher in the group with Down syndrome. However, the salivary flow rate, pH, and amylase and peroxidase activities were lower among the children with Down syndrome.     

Effect of Pingyangmycin on human venous malformation endothelial cells

Purpose: Venous malformations are common vascular anomalies with a propensity of the head and neck. Intralesional injection of Pingyangmycin (PYM, bleomycin A5 hydrochloride) is a widely used sclerotherapy method for the treatment of venous malformation.     

替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节特征的锥形束CT研究

目的:采用锥形束CT(CBCT)研究替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节的影像学特征,探讨Ⅲ类功能状态下,颞下颌关节的生长、改建机制。方法:从就诊于昆明医科大学附属口腔医院正畸科的患者中选取符合纳入标准的替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者及骨性Ⅰ类错牙合患者各20名,使用NNT viewer 5.3图像处理软件进行三维重建及线距和角度的测量,并进行统计学分析。结果:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者组和替牙期骨性Ⅰ类错牙合患者组对比结果为:矢状面双侧关节前间隙偏小、双侧关节上间隙偏小、双侧关节结节斜度偏小;冠状面双侧关节内间隙偏小,双侧关节上间隙偏小,双侧关节外间隙偏小,右侧髁状突角度偏小;横截面右侧髁状突前后径偏小。结论:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节发育不充分,呈现髁状突,关节窝深度,关节结节斜度;冠状面关节内、外间隙均较小的特征。骨性Ⅲ类错牙合患者髁状突在关节窝中处于前置近关节窝顶位置。骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节影像学特征与其功能状态相适应。     

牙髓再生的研究现状

目前,根管治疗术在临床上已得到了广泛的应用并成功的保存了患牙,但其仍有许多术后并发症。随着组织工程技术在口腔领域的应用,构建一种组织工程化牙髓进行牙髓-牙本质复合体的再生治疗成为可能。近年来国内外已有很多关于牙髓再生的研究,并且已经取得了一定成果。本文将对目前国内外牙髓再生的研究进展现状作一综述。     

Ghlorhexidine as a root canal medicament for treating inflammatory lesions in the periodontal space

Abstract— The purpose of the present study was to investigate the therapeutic effect of intra-canal application of chlorhexidine on inflammatory root resorption. Dental pulps from monkey incisors were infected and resealed prior to extraction of the teeth. Root dentin was mechanically exposed and the teeth were replanted under aseptic conditions. After 4 weeks, the experimental teeth were dressed with chlorhexidine gel and resealed. Animals were sacrificed 4 weeks later, and their jaws prepared for histologic examination. Results showed that both marginal and apical periodontal inflammation and resorption were reduced in the chlorhexidine-treated teeth. It was concluded that the use of intra-canal chlorhexidine may be a useful adjunct in the treatment of inflammatory root resorption, but further human trials need to be undertaken before its clinical use can be recommended.     

小鼠牙髓干细胞同种异体移植后体内免疫反应初探

目的:初步探究小鼠牙髓干细胞同种异体移植后的全身免疫反应。方法:牙髓干细胞分离获得自C57BL/6 小鼠牙髓组织,培养至第3 代,与纳米羟基磷灰石(n-HA)复合培养形成复合物,扫描电镜观察其生长黏附情况。40只4周龄的C57BL/6 小鼠随机分成两组。实验组将复合物移植入上背部皮下,对照组将纳米羟基磷灰石植入上背部皮下,术后均使用外科方法严密缝合创口。两组动物术后均观察4周、6周处死,分离脾脏,制成脾淋巴细胞悬液,流式细胞仪测定CD4⁺、CD8⁺的值。结果:牙髓干细胞在体外与纳米羟基磷灰石结合良好;免疫组化染色实验组4周、6周均可见牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)阳性表达;实验组与对照组相比,术后4周、6周CD4⁺/CD8⁺值均无明显差异。结论:牙髓干细胞同种异体移植后,尚不能够引起机体的免疫排斥反应,其在体内仍具有低免疫原性,有望成为组织工程同种异体种子细胞来源。