LC-ESI-MS／MS法快速测定人血浆中帕洛诺司琼的浓度

目的建立快速测定人血浆中帕洛诺司琼浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾检测（LC-ESI-MS／MS）法。方法以Agilent C18反相柱（150mm×4．6mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈：0．04mol·L^-1甲酸铵水溶液（含0．04％甲酸）=80：20（V／V）,流速0．8mL·min^-1,柱温25℃,醋酸乙酯：二氯甲烷（4：1,V：V）为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测（SRM）模式对帕洛诺司琼（m／z 297．2→82．2）和内标地西泮（m／z285．1→154．0）进行测定。结果帕洛诺司琼高（8μg·L^-1）、中（5μg·L^-1）、低（0．1μg·L^-1）3个质量浓度血浆溶液的RSD均〈15％;线性范围为0．05—10μg·L^-1,回归方程为F=1．8319ρ＋0．009ρ,r=0．9964（n=9）,权重系数为1／ρ^2,分析方法的定量下限为0．05μg·L^1。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于帕洛诺司琼临床血药浓度监测和药动学研究。     

高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法快速测定人尿中帕洛诺司琼的浓度

目的:建立快速测定人尿中帕洛诺司琼浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法:以AgilentTCC18柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱;流动相为乙腈-0.04mol.L-1甲酸铵水溶液(含0.04%甲酸)(69∶31),流速0.6mL·min-1;柱温25℃;醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,样品通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对帕洛诺司琼(m/z297.2→82.2)和内标地西泮(m/z285.1→154.0)测定。结果:帕洛诺司琼高(80μg.L-1)、中(50μg.L-1)、低(5μg.L-1)3个浓度的平均回收率RSD均小于15%;线性范围为2.5～100μg.L-1,回归方程为F=27.135ρ-0.0582,r=0.9999(n=6),权重系数为1/ρ,分析方法的最低定量限为2.5μg.L-1。结论:该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于帕洛诺司琼临床尿药浓度监测和药动学研究。     

盐酸帕洛诺司琼注射液人体药动学研究

目的:研究盐酸帕洛诺司琼注射液在健康志愿者体内的药动学。方法:30名健康志愿者随机分成三组,每组10人,男女各半,分别单剂量静脉注射0．125,0．25和0．5 mg三种剂量的盐酸帕洛诺司琼注射液后,采用HPLC-MS法测定人血浆中帕洛诺司琼浓度,计算药动学参数。结果:单剂量静脉注射0．125,0．25和0．5mg的盐酸帕洛诺司琼注射液后,达蜂浓度分别为(1．11±0．51),(2．22±0．86)和(5．56±4．83)ng·mL~(-1);AUC分别为(15．9±3．37),(25．4±5．78)和(43．0±8．91)ng·h·mL~(-1);消除半衰期分别为(47．8±10．7),(47．3±12．7)和(43．1±4．8)h。结论:本试验建立的测定方法灵敏、准确、简便。在0．125～0．5 mg剂量范围内帕洛诺司琼在健康志愿者体内呈线性药动学特征。     

我国健康受试者体内帕洛诺司琼的药物动力学研究

目的建立帕洛诺司琼血浆中药物浓度的液-质联用检测方法,研究其在人体的药物动力学。方法9名健康男性受试者随机自身交叉给药,分别注射高、中、低3个不同剂量帕洛诺司琼,样品经MTBE萃取,用HypersilBDS C18柱分离,以格拉司琼为内标,采用HPLC-MS/MS检测血浆中药物浓度。结果帕洛诺司琼在0.23~14.20ng.mL-1呈线性关系,日内、日间变异均<15%,1.5、0.75、0.25 mg不同剂量组帕洛诺司琼药物动力学参数分别是Cmax:(7.46±1.03)、(3.27±0.76)、(1.06±0.23)ng.mL-1。AUC0~∞:(235.68±32.06)、(108.84±35.77)、(32.44±12.69)ng.mL-1.h,t1/2:(41.87±5.36)、(41.88±4.68)、(39.88±3.54)h,达峰时间均为0.083 h。结论本方法准确、灵敏,运用本法研究了9名健康受试者静脉注射不同剂量帕洛诺司琼后药物动力学,为临床确定给药方案提供了很好的理论基础。     

反相高效液相色谱法测定人肝微粒体中帕洛诺司琼的含量

目的:为了研究帕洛诺司琼的体外代谢,建立人肝微粒体中帕洛诺司琼的反相高效液相色谱测定法。方法:帕洛诺司琼与人肝微粒体共孵育之后,以Nova-park C18(5μm,200×4.6mm)柱为分析柱,甲醇- 0.01 mol/L磷酸二氢钾缓冲盐(80:20,v/v)为流动相,流速1.0mL/min,紫外检测波长为240nm。结果:帕洛诺司琼在5-100μmol/L范围内线性关系良好(r=0.999 8)。检测限为0.2μmol/L(S/N≥3),定量限为1.0μmol/L(RSD=4.81%,n=3)。方法回收率为96.0%-103.0%,日内、日间RSD分别<7.0%和<10% (n=5)。结论:此法简便,准确,可用于研究帕洛诺司琼的体外代谢。     

猪血浆中格拉司琼质量浓度的LC-MS/MS测定方法及应用

目的建立猪血浆中格拉司琼质量浓度液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,考察格拉司琼经皮给药后药物动力学行为。方法色谱柱:Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵-甲酸(体积比为45∶55∶0.1),采用液液萃取法,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式,测定巴马小型猪经皮给予格拉司琼贴剂后血浆中药物的质量浓度。结果猪血浆中格拉司琼质量浓度在0.020²0.0μg·L-1内线性关系良好,r=0.995 9;日内和日间精密度RSD≤13.4%;格拉司琼的平均提取回收率为63.8%20.0μg·L-1内线性关系良好,r=0.995 9;日内和日间精密度RSD≤13.4%;格拉司琼的平均提取回收率为63.8%⁶6.7%(n=6),基质效应为101.4%66.7%(n=6),基质效应为101.4%¹05.8%(n=6);格拉司琼在巴马小型猪血浆中主要药物动力学参数:t1/2为(18.0±1.4)h,ρmax为(15.3±4.0)μg·L-1,MRT为(91.9±4.9)h,Ke为(0.04±0.00)h-1,AUC0-216为(1.22±0.35)mg·h·L-1,AUC0-∞为(1.23±0.35)mg·h·L-1。结论该方法适用于格拉司琼贴剂在巴马小型猪体内药物动力学行为的研究,贴剂可延长格拉司琼作用时间。     

盐酸帕洛诺司琼注射液中异构体含量的NP-HPLC测定

建立了正相高效液相色谱(NP-HPLC)法测定盐酸帕洛诺司琼注射液中(R,S)-异构体的含量.样品经氧氧化钠碱化后,再用二氯甲烷提取.用Inertsil SIL-100A色谱柱,二氯甲烷-甲醇-氨水(448:50:2)为流动相,检测波长261 nm.采用加校正因子的主成分自身对照法计算(R,S)-异构体的含量.     

盐酸帕洛诺司琼胶囊的人体药动学及绝对生物利用度

目的:研究盐酸帕洛诺司琼胶囊在健康受试者体内的药动学及绝对生物利用度。方法:24例健康受试者(男12,女12),平均分为2组,按自身双交叉试验设计。一组分别单剂量口服低、高(0.25,0.75 mg)剂量;另一组分别单剂量口服和静脉注射中剂量(0.5 mg)。给药后0～168 h间隔取血。采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定血浆帕洛诺司琼浓度,应用DAS 2.1程序计算药动学参数并评价口服制剂的绝对生物利用度。结果:单剂量口服0.25和0.75 mg盐酸帕洛诺司琼胶囊后的主要药动学参数Cmax分别为(0.58±0.20)和(1.95±0.94)ng.mL-1,Tmax分别为(8.4±3.9)和(8.3±2.9)h,AUC0～168分别为(35±10)和(82±34)h.ng.mL-1,t1/2分别为(74±18)和(41±9)h;单剂量0.5 mg口服与静脉注射后的主要药动学参数Cmax分别为(0.82±0.17)和(5.58±2.66)ng.mL-1,Tmax分别为(6.3±4.3)和(0.022±0.019)h,AUC0～168分别为(43±12)和(40±12)h.ng.mL-1,t1/2分别为(44±9)和(54±18)h。由AUC0～168估算,口服胶囊的绝对生物利用度为(109.9±26.1)%。结论:在0.25～0.75 mg剂量范围内口服盐酸帕洛诺司琼胶囊具有线性药动学特征;口服生物利用度较高,但是与静脉注射相比,口服给药的Cmax明显降低,Tmax显著延迟;主要药动学参数性别间无差异。     

LC-ESI-MS／MS法快速测定人血浆中托莫西汀的浓度

目的建立一种快速灵敏测定人体血浆中托莫西汀浓度的高效液相色谱串联质谱（LC-ESI-MS／MS）检测方法。方法以Agalent C18反相柱（150mm×2．1mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈（1％甲酸）：0．02mol·L-1甲酸铵水溶液=80：20（V/V）;流速0．3mL·min-1,柱温40℃。采用选择反应监测（SRM）对托莫西汀（m／z256．1→44．1）和内标氟西汀（m／z 310．1→44．2）进行测定。结果托莫西汀的高（1000μg·L-1）、中（500μg·L-1）、低（2μ·L-1）质量浓度标准血样的平均回收率分别为107．00％、103．51％和105．76％,日内（n=5）、日间（n=3）RSD均〈15％;线性范围为1—1500μg·L-1,回归方程为Y=0．5821p-2．5814×10^-4,r=0．9975（n=5）,分析方法的最低定量限为1μg·L-1。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于托莫西汀临床血药浓度监测和药动学研究。     

盐酸帕洛诺司琼注射液在健康人体内的药动学研究

目的研究盐酸帕洛诺司琼注射液在健康受试者体内的药动学过程。方法36名健康志愿者随机分成3组,每组12人,男女各半,分别单剂量静脉注射盐酸帕洛诺司琼0．25、0．5和0．75mg,血浆中帕洛诺司琼浓度用HPLC-MS／MS法测定,以DAS2．1．1软件计算药动学参数。结果单剂量静脉注射盐酸帕洛诺司琼注射液0．25、0．5和0．75mg后主要药动学参数如下：t1/2分别为（43．9±10．7）、（44.3±9．8）、（43．2±13．5）h,Cmax分别为（4．18±2．35）、（8．80±6．83）、（12．7±11．3）μg·L^-1,AUC0～t分别为（37．9±11．1）、（69．9±22．5）、（108．4±40．3）μg·h·L^-1,AUC0～∞分别为（41．6±12．2）、（74．8±24．1）、（117．7±48．1）μg·h·L^-1,CL分别为（6．6±2．1）、（7．5±2．9）、（7．3±2．7）L·h^-1。结论中国健康受试者单剂量静脉注射盐酸帕洛诺司琼后,在0.25～0．75mg剂量呈线性药动学特征,本试验建立的测定方法简便、灵敏、准确。     

HPLC-MS/MS测定人体血浆和尿液中罗通定的浓度

目的 建立一种简便、灵敏的测定人体血浆和尿液中罗通定浓度的高效液相色谱串联质谱( HPLC-MS/MS)方法.方法 血浆、尿液样品分别采用乙腈沉淀处理后,进样分析.采用Agilent-ECLIPSE-C18柱(2.1mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.2％甲酸溶液=85∶15为流动相,采用正离子,多反应监测方式测定样品浓度.检测离子为m/z356.3→192.3(罗通定)和m/z 285.0→193.0(地西泮,内标).结果 罗通定血浆及尿样均在2.5～1000 ng· mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.999 4);最低定量浓度均为2.5 ng·mL-1.日内与日间RSD均＜10％,血浆样品回收率在91.4％～109.2％,尿样回收率在88.63％～115.8％.结论 本方法简便快速、灵敏准确,适用于罗通定在人体内的药物动力学研究.     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中氯雷他定

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中氯雷他定浓度。方法:分析柱为Gemini C18(5μm,50 mm×2.0mm),流动相为0.2%甲酸水溶液-甲醇(33.5∶66.5,v/v),流速:0.2 mL.min-1,柱温:25℃。采用四级杆质谱检测器电喷雾离子化(ESI)源,检测方式为正离子多离子反应监测(SRM)。结果:线性范围为0.2～25.6μg.L-1,平均提取回收率68.7%,日间RSD小于13.78%,日内RSD小于6.16%。结论:该方法快速、灵敏、重现性好,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中千金藤素的浓度

目的建立人血浆中千金藤素浓度的HPLC-MS/MS测定法。方法血浆样品1.0 mL经甲基叔丁基醚萃取后,以2.5 mmol/L醋酸铵(含0.05%甲酸)-甲醇(40∶60)为流动相,采用ZORBAX Eclipse XDB-C8(150 mm×4.6 mm,5μm)柱分离,采用电喷雾电离化(ESI)方式和多反应离子监测(MRM)模式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 607.2→365.1(千金藤素)和m/z 247.2→98.0(内标甲哌卡因)。结果千金藤素血药浓度线性范围为0.10～208.40 ng/mL,定量下限为0.10 ng/mL。低、中、高3个浓度提取回收率分别为72.3%、76.8%、79.5%。结论该法操作简便、快速、灵敏,适用于千金藤素在人体内的药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中灯盏乙素的浓度

目的:建立测定人血浆中灯盏乙素浓度的HPLC-MS/MS法。方法:采用Platisil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.3%甲酸水溶液-甲醇(40∶60),流速为1.0 mL.min-1,以黄芩苷为内标,经乙酸乙酯萃取后,采用电喷雾电离化(ESI)方式和多反应离子监测(MRM)模式进行负离子检测,用于定量分析离子反应分别为m/z 461.1→285.1(灯盏乙素)和m/z 445.1→269.1(黄芩苷)。结果:线性检测范围为0.20～50.00μg.L-1,最低定量浓度0.20μg.L-1,r=0.999 3。低、中、高3个浓度的提取回收率分别为63.5%,69.5%,66.8%,基质效应分别为105.7%,97.5%,96.5%。结论:本法样品处理简单、快速,专属性强,灵敏度高,可用于灯盏乙素在人体内的药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中甲氧氯普胺的浓度

目的建立测定人血浆中甲氧氯普胺浓度的LC-MS/MS方法。方法采用Alltech Alltima C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3μm),以5 mmol.L-1乙酸铵-乙腈-甲醇(体积比为50∶40∶10)为流动相,流速为0.2 mL.min-1,血浆样品在碱性条件下液-液萃取,通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多离子反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为m/z300.20→m/z227.00(甲氧氯普胺)和m/z152.20→m/z134.00(内标,苯丙醇胺)。结果甲氧氯普胺线性范围为0.5~200.0μg.L-1,最低定量限为0.5μg.L-1,平均回收率为(71.38±6.35)%,日内和日间精密度均小于15%。结论该法适用于临床药物浓度监测和药物动力学的研究。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中妥舒沙星的浓度

目的 建立快速、灵敏测定人体血浆中妥舒沙星浓度的高效液相色谱-串联质谱方法。方法 采用Agilent EclipsePlus C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,3.5μm）,乙腈（含0.1%甲酸）-5 mmol.L 1甲酸铵水溶液（36∶64）为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL.min 1,柱温40℃。采用多重反应监测（MRM）对妥舒沙星（m/z 405.2→387.2）和内标环丙沙星（m/z 332.2→314.2）的测定。结果 妥舒沙星的线性范围为6-2 000 ng.mL 1,回归方程为y=0.183 5x＋1.461 9×10 4,r=0.996 2,最低定量下限为6 ng.mL 1（S/N〉5）,日内、日间RSD均〈10%,高（1 800 ng.mL 1）、中（750 ng.mL 1）、低（15 ng.mL 1）浓度标准血样的平均回收率分别为97.5%,103.3%,105.9%。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于妥舒沙星的临床血药浓度监测和药动学研究。     

液-质联用法测定人血浆中卢非酰胺的浓度及其在药动学研究中的应用

目的:建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定人血浆中卢非酰胺浓度的方法。方法:40名健康受试者随机分成4组,分别单剂量口服给药卢非酰胺片200,400,800,1200 mg。血浆样品经乙腈沉淀蛋白提取分离,色谱柱为Ultimate^® AQ-C₁₈(100 mm×2.1 mm,5 μm,Welch Material Inc.);流动相为乙腈-5 mmol·L^-1乙酸胺水溶液(含0.1%甲酸)=32:68;流速为0.30 mL·min^-1;内标为埃索美拉唑。采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:卢非酰胺的血浆浓度在40~5000 ng·mL^-1范围内线性良好,定量下限为40 ng·mL^-1,日内精密度(RSD)均≤8.20%,日间精密度(RSD)均≤6.35%,提取回收率为91.94%~96.48%。卢非酰胺呈非线性药动学特征,单剂量空腹口服给药卢非酰胺片200,400,800,1200 mg后,C_max分别为1803.50±528.06, 2485.00±562.71, 3710.00±965.50和4158.00±1181.91 μg·L^-1。AUC_0-t分别为34522.13±9525.00, 56138.53±18021.98, 88848.53±23348.14和107058.03±34420.08 μg·h·L^-1。结论:该法操作简单,灵敏,准确,重复性好,适用于卢非酰胺片临床药动学研究。从药动学研究可知,卢非酰胺在中国健康受试者中呈非线性药动学特征。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中替加色罗的浓度

目的:建立人血浆中替加色罗浓度的高效液相色谱-串联质谱测定方法。方法:血浆样本经固相萃取(solid-phase extraction,SPE)小柱提取处理后进行色谱分离,质谱条件为电喷雾电离源,采用多反应监测(multiplereaction monitoring,MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z302.1→172.8(替加色罗)和m/z466→183.8(内标,西沙必利)。结果:血浆中替加色罗检测方法的线性范围为0.1~50 ng.mL-1,最低定量限为0.1 ng.mL-1。血浆中替加色罗的绝对回收率为99.4%~104.2%,日内及日间精密度分别低于5%和6%,符合生物样品分析要求。结论:本法灵敏,准确,可用于替加色罗的药动学及生物等效性的研究。