Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎发病过程中氨基脲敏感性胺氧化酶的活性变化

目的 探讨氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性在类风湿性关节炎发病过程中的变化.方法 取25只Wistar大鼠,尾根部多点注射Ⅱ型胶原制作类风湿性关节炎大鼠模型,以造模当天为0 d,在造模第3、7、14和21天,分别处死5只大鼠,取血浆和踝关节组织,分别检测SSAO活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平.另取5只大鼠作为空白对照组.结果 造模后第12天大鼠开始发病;关节组织SSAO活性于造模第3天开始升高,第7天升高到最高,之后开始降低;血浆SSAO活性变化不明显.血浆和组织中TNF-α及ICAM-1水平均随关节炎发病过程出现显著变化.结论 Ⅱ型胶原大鼠关节炎发病过程中伴随有SSAO活性的变化.     

Ⅱ型胶原自身抗体与类风湿性关节炎的关系

我们用改良的酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）,分别用牛、人天然Ⅱ型胶原和用溴化氰裂解的人Ⅱ型胶原作为包被抗原,检测了１１２例类风湿性关节炎患者和１５４例健康对照血清中抗Ⅱ型胶原的ＩｇＧ型和ＩｇＡ型抗体。抗天然牛Ⅱ型胶原自身抗体ＩｇＧ型和ＩｇＡ型阳性率ＲＡ患者组分别为１９．６％和１２．５％,而健康对照组为０．７％和２．０％,抗天然人Ⅱ型胶原自身抗体ＩｇＧ型和ＩｇＡ型阳性率ＲＡ患者分别为１２．５％和１６．３％,而健康对照为０％和２．５％,两类抗体的阳性率均为ＲＡ患者组显著高于对照组。用牛和人的Ⅱ型胶原作为包被抗原,其阳性率无显著性差异。这也说明了Ⅱ型胶原蛋白在种属间的抗原决定簇相似。用溴化氰裂解的人Ⅱ型胶原作为包被抗原,ＲＡ患者和健康对照组在ＩｇＧ型有显著性差异,而在ＩｇＡ型无统计学差异,其原因有待进一步探讨。本文根据     

Ⅱ型胶原自身抗体与类风湿性关节炎的关系

我们用改良的酶联免疫吸附法(ELISA),分别用牛、人天然Ⅱ型胶原和用溴化氰裂解的人Ⅱ型胶原作为包被抗原,检测了112例类风湿性关节炎患者和154例健康对照血清中抗Ⅱ型胶原的IgG型和IgA型抗体。抗天然牛Ⅱ型胶原自身抗体IgG型和IgA型阳性率RA患者组分别为19.6％和12.5％,而健康对照组为0.7％和2.0％,抗天然人Ⅱ型胶原自身抗体IgG型和IgA型阳性率RA患者分别为12.5％和16.3％,而健康对照为0％和2.5％,两类抗体的阳性率均为RA患者组显著高于对照组。用牛和人的Ⅱ型胶原作为包被抗原,其阳性率无显著性差异。这也说明了Ⅱ型胶原蛋白在种属间的抗原决定簇相似。用溴化氰裂解的人Ⅱ型胶原作为包被抗原,RA患者和健康对照组在IgG型有显著性差异,而在IgA型无统计学差异,其原因有待进一步探讨。本文根据这些结果讨论了Ⅱ型胶原自身抗体在RA发病中的意义。     

ELISA测定血清Ⅱ型胶原抗体对类风湿性关节炎的诊断意义

应用ＥＬＩＳＡ测定了５４例类风湿性关节炎患者、９９例非类风湿性关节炎患者以及１００例正常人的血清Ⅱ型胶原抗体，结果阳性率分别为９０．７％、０、０。５４例类风湿性关节炎患者中有７例血清类风湿因子为阴性而Ⅱ型胶原抗体为阳性，且病程均在半年之内。结果表明：Ⅱ型胶原抗体的检测对类风湿性关节炎具有特异性诊断和早期诊断的临床意义。     

ELISA测定血清Ⅱ型胶原抗体对类风湿性关节炎的诊断意义

应用ELISA测定了54例类风湿性关节炎患者、99例非类风湿性关节炎患者以及100例正常人的血清Ⅱ型胶原抗体,结果阳性率分别为90.7%、0、0.54例类风湿性关节炎患者中有7例血清类风湿因子为阴性而Ⅱ型胶原抗体为阳性,且病程均在半年之内。结果表明:Ⅱ型胶原抗体的检测对类风湿性关节炎具有特异性诊断和早期诊断的临床意义。     

抗Ⅱ型胶原抗体对类风湿性关节炎诊断价值的Meta分析

目的评价抗Ⅱ型胶原抗体对类风湿性关节炎（RA）诊断的准确性。方法计算机检索PubMed、EMBASE、CochraneLibrary、CBMWeb、CSJD、CJFD等数据库,全面收集抗Ⅱ型胶原抗体对RA诊断试验的文献,依据QUADAS质量评价标准评价纳入诊断试验的质量,对结果进行Meta分析。结果最终纳入文献5篇,包括1293个受试者。Meta分析结果显示,抗Ⅱ型胶原抗体对RA诊断的合并敏感度为0．43（0．40,0．47）,合并特异度为0．89（0．87,0．91）,合并阳性似然比为6．70（3．21,13．97）,合并阴性似然比为0．62（0．49,0．78）,合并诊断比值比为12．75（4．66,34．86）,受试者工作特性曲线下面积0．7974,Q=0．7336。结论抗Ⅱ型胶原抗体对RA诊断的敏感度较低,特异度较高,结合临床不推荐抗Ⅱ型胶原抗体用于RA的初筛及常规检查,可用于确诊高度疑似病例或症状体征不明显,经金标准无法诊断的患者。     

新型鸡Ⅱ型胶原基因疫苗治疗胶原诱导的大鼠类风湿性关节炎的疗效观察

目的系统观察含编码鸡Ⅱ型胶原基因（CCOL2A1）疫苗pcDNA-CCOL2A1对大鼠胶原诱导的关节炎（CIA）的治疗作用。方法以鸡Ⅱ型胶原（CCⅡ）诱导的Wistar大鼠为类风湿关节炎（RA）模型即CIA,系统观察一次性尾部静脉注射20μg/kg、200μg/kg、400μg/kg3个不同剂量pcDNA-CCOL2A1基因疫苗和pcDNA3．1空载体对CIA的治疗效果。通过评估治疗前后CIA鼠关节肿胀指数的改善,结合放射影像学和组织病理学方法,系统分析pcDNA-CCOL2A1基因疫苗对CIA关节炎的治疗作用。结果CIA大鼠在注射pcDNA-CCOL2A1基因疫苗后的第5天,在200μg/kg剂量组就可观察到CIA大鼠四肢关节肿胀程度明显减轻;放射影像学和组织病理学检查显示,经过200μg/kg治疗后,使关节软骨及其下面的骨小梁结构与正常组接近,关节软骨及其下面的骨质结构得到保护,可使炎症分数下降为对照组的50％,仅关节滑膜略有增生,与空载体组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;而20μg/kg和400μg/kg两剂量组与空载体组比较则无任何治疗效果（P〉0．05）。结论pcDNA-CCOL2A1基因疫苗对CIA大鼠关节炎有显著的治疗作用。     

类风湿性关节炎患者抗Ⅱ型胶原抗体及血清可溶性CD137的水平

近年来有报道抗天然Ⅱ型胶原 (抗NaⅡ )与类风湿性关节炎 (RA)发病有关。也发现可溶性CD13 7(sCD13 7)在RA患者血清中水平升高。本文检测抗NaⅡ与sCD13 7水平 ,旨在初步了解其与RA的发病关系及其相关性。1　资料与方法1 1　检测对象 :临床确诊的RA活动期患者 5 0例 ,男 15例 ,女 3 5例 ,平均年龄 3 9 5岁 ;RA缓解患者 3 5例 ,男 16例 ,女 2 9例 ,平均年龄 42岁。健康成人 40例为正常对照组 ,男 10例 ,女 3 0例 ,平均年龄 40 2岁。1 2　方法 :采用ELISA检测抗NaⅡ抗体和sCD13 7,试剂均购自贝克曼公司。酶标仪为宝特公司产品。所…     

祖师麻片对牛Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎的药效学研究

目的探究祖师麻片对牛Ⅱ型胶原诱发大鼠关节炎的药效学作用。方法采用牛Ⅱ型胶原诱导的关节炎(collagen-induced anhritis,CIA)动物模型,来观察祖师麻片对CIA模型大鼠的关节炎指数(arthritis index,AI),血清中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、风湿因子(rheumatoid factor,RF)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,Ig G)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、前列腺素-2(prostaglandin E-2,PGE-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-a,TNF-α)的含量,膝关节番红O-固绿染色,镜下观察关节软骨的一般形态,并对膝关节软骨进行Mankin’ s评分。结果与模型组比较,祖师麻片剂量组大鼠AI评分显著降低(P 0.01);血清中CTGF、Ig G、RF、COX-2、IL-6、PGE-2、TNF-α含量显著降低(P 0.05或P 0.01);软骨细胞数量稍有减少,染色丢失较少,潮线基本完整,Mankin’ s评分评分显著降低(P 0.01)。结论祖师麻片对Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎有显著改善作用,其机制可能与抗炎、免疫调节作用有关。     

三叶青对小鼠Ⅱ型胶原关节炎的影响

目的观察三叶青对Ⅱ型胶原所致关节炎小鼠的影响;方法通过皮内注射Ⅱ型胶原造成小鼠关节炎模型,观察三叶青对模型动物关节肿胀度、关节评分、关节病理组织学变化等指标的影响。结果三叶青可抑制造模小鼠关节肿胀、降低关节肿胀度评分,改善关节病理组织学。结论三叶青对实验性关节炎小鼠有一定的治疗作用。      

口服Ⅱ型胶原对佐剂性关节炎大鼠干扰素-γ的影响

目的探讨口服Ⅱ型胶原蛋白(typeⅡcollagen,CⅡ)诱导免疫耐受抑制佐剂性关节炎(adjuvantarthritis,AA)的过程中,外周淋巴器官中干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响。方法采用免疫组化PowerVi-sionTM(PV)二步法测定对口服和未口服CⅡ的AA大鼠的外周淋巴器官中IFN-γ水平。结果口服CⅡ诱导免疫耐受的AA大鼠的IFN-γ表达低于未口服CⅡ的大鼠。结论CⅡ能使AA大鼠外周淋巴器官中IFN-γ水平降低,CⅡ可通过纠正Th1和Th2细胞功能失衡治疗佐剂性关节炎。     

青藤碱对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠滑膜炎症的抑制作用及其机理探讨

[目的]研究青藤碱对于胶原诱导型关节炎（CLA）大鼠滑膜及表达IL－6mRNA的影响。[方法]采用CIA大鼠动物模型，HE常规病理切片，观察青藤碱对滑膜的炎性浸润、巨噬A型细胞增生、纤维组织增生及原代培养滑膜细胞表达IL－6mRNA的影响。[结果]青藤碱可明显减轻滑膜的炎性浸润、巨噬A细胞和纤维组织增生，减少滑膜细胞IL－6mRNA的表达。[结论]青藤碱可以通过抑制滑膜细胞恶性增殖及IL－6基因的表达来阻断滑膜炎的进程。     

Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型的制备及评价

目的提取纯化Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)并制备胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型。方法采用胃蛋白酶消化法从鸡胸骨剑突上提取CⅡ,通过DEAE-52纤维树脂处理、NaC l的反复盐析纯化并采用SDS-PAGE鉴定和吸收光谱分析。所提CⅡ加以完全弗氏佐剂采用皮内注射的方法建立大鼠C IA模型。容积法检测大鼠足爪肿胀度并进行评分;HE染色法对关节组织作病理检查;ELISA法检测体内抗CⅡ抗体的含量;放免法检测血清细胞因子IL-1β、TNFα-含量。结果自提的CⅡ与标准品分子量一致,最大吸收峰为226 nm。CIA大鼠足爪的炎症反应强烈,关节肿胀明显;病理检查关节组织可见其组织纤维化,伴有大量炎性细胞浸润;血清中抗CⅡ抗体水平和IL-1β、TNFα-显著升高。结论该方法提纯CⅡ简单、高效,用以制备大鼠CIA模型成功。     

Ⅱ型胶原变构肽对胶原性关节炎软骨破坏的影响

目的研究连续替换Ⅱ型胶原(CⅡ)268-270位T细胞受体(TCR)结合氨基酸的CⅡ变构肽sub268-270对胶原性关节炎(CIA)关节软骨损伤的抑制作用。方法使用牛CⅡ在Lewis大鼠诱发CIA。将CIA大鼠分为30μg组、5μg组、1μg组和空白对照组,每组8只,每次分别接受CⅡ变构肽sub268-27030μg、5μg、1μg及磷酸盐缓冲液静脉注射,每周2次。从关节炎症积分、病理学滑膜炎症积分、血管翳评分、关节软骨损伤评分和骨破坏积分评价变构肽疗效,用血清软骨寡聚基质蛋白(COMP)水平和关节组织切片中软骨番红花红含量来评价变构肽对关节软骨损伤的抑制作用。结果30μgCⅡ变构肽组关节炎症积分为5·6±2·63,显著低于5μg组为(9·67±5·61)、1μg组为(10·02±5·06)及空白对照组为(11·8±5·34)(P<0·01)。与5μg变构肽、1μg变构肽和PBS相比,30μg变构肽可以显著降低CIA大鼠滑膜炎积分(P<0·01)、血管翳积分(P<0·01)、软骨损伤积分(P<0·01)和骨破坏积分(P<0·01)。30μg变构肽组血清COMP水平(μg/ml)为2·21±0·76,5μg变构肽组为5·63±1·73,1μg变构肽组为6·04±1·76,空白对照组为7·00±1·46,30μg治疗组与空白对照组比P<0·01。关节组织切片中软骨蛋白聚糖含量(A值)30μg组为2·35±0·76,5μg组为1·57±0·63,1μg组为1·37±0·53,空白对照组为1·00±0·41,30μg组与空白对照组比P<0·01。结论30μgCⅡ变构肽sub268-270可以有效缓解CIA,显著抑制CIA中的关节软骨破坏。     

性别差异对牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎模型的影响

目的 构建雌性及雄性牛Ⅱ胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)模型,比较性别差异对CIA模型关节及关节外表现的影响。方法 选用雌性及雄性SD大鼠并注射牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂诱导CIA模型,评估各组大鼠的一般情况、关节炎指数、足肿胀度、血清炎症因子及纤溶酶原激活物抑制剂水平、脾指数、膝关节及踝关节病理、右后足爪骨破坏情况、肺间质病变情况。结果 雌性CIA大鼠的关节炎指数在初次免疫后第21天较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),但两组足肿胀度在观察的任一时间点均无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠血清肿瘤坏死因子α、白介素1β和脾指数均较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05,P<0.001),纤溶酶原激活物抑制剂水平无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠膝关节和踝关节病理的炎症细胞浸润及滑膜增生评分较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),雌性CIA大鼠膝关节软骨损伤及右后足爪骨破坏程度均较雄性显著升高(P<0.05);雌性和雄性CIA大鼠均出现了肺间质炎症细胞浸润及轻度纤维化,但雌性比雄...     

T淋巴细胞与胶原诱导性关节炎

胶原诱导性关节炎是应用较广泛的人类风湿性关节炎动物模型 ,二者在发病机制及病理学改变上极为相似。近年来研究证实激活的某些T细胞在胶原诱导性关节炎的发病过程中起着重要作用 ,尤其在疾病的起始阶段 ,提示胶原诱导性关节炎可能是以T淋巴细胞介导为主的自身免疫性疾病     

鸡Ⅱ型胶原对伴有肠道损伤大鼠佐剂性关节炎的影响

目的 观察非甾体抗炎药所致肠道损伤时口服及喷雾给予鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)对大鼠佐剂性关节炎(AA)的治疗作用，并比较鸡CⅡ2种制剂疗效的差异。方法 在建立大鼠AA模型的基础上，以15mg／kg的美洛昔康诱导AA大鼠肠炎，给予不同剂型鸡CⅡ(20μg／kg)，连续7d。结果 致炎后20d，鸡CⅡ喷雾组对AA大鼠的继发性炎症有明显的抑制作用。致炎后第24天，鸡CⅡ灌胃(ig)组作用出现，至第28天时鸡CⅡig组作用消失，鸡CⅡ喷雾组仍对AA大鼠的继发性炎症有抑制作用。粪便隐血(OB)检验结果和髓过氧化物酶(MPO)水平均高于正常组，表明模型复制成功。鸡CⅡ能显著逆转肠道损伤，降低升高的MPO和OB检验结果。结论鸡CⅡ对伴有肠道损伤的AA大鼠具有明显的治疗作用，且喷雾鸡CⅡ的治疗效果比口服鸡CⅡ好。     

黄芪虫藤饮对Ⅱ型胶原性关节炎大鼠抗炎作用及ESR、RF的影响

目的：观察黄芪虫藤饮对Ⅱ型胶原性关节炎（collagen-induced arthritis, CIA）大鼠的抗炎作用及对大鼠血清血沉（ESR）、类风湿因子（RF）的影响,进一步探讨该药的作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为空白组10只,其余建立大鼠CIA模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、甲氨喋呤组、正清风痛宁组、黄芪虫藤饮高、中、低剂量组（下简称高、中、低剂量组）各组10只,分别给药,观察各组大鼠关节炎指数（Arthrits, AI）积分,踝关节病理切片变化,取大鼠血清检测ESR、RF含量。结果 AI积分在给药2、3、4周后,各给药组大鼠与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,其中各时间点中、低剂量组与高剂量组比较,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;给药2、3周后高剂量组与正清风痛宁组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。各给药组与模型组比较,ESR、RF的含量均降低,差异有统计学意义（P〈0.01）,中、低剂量组与高剂量组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;高剂量组RF含量下降比甲氨喋呤组、正清风痛宁组明显,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论黄芪虫藤饮可降低CIA大鼠关节症状评分,抑制血清ESR、RF升高,对CIA大鼠具有较好的抗炎、免疫调节作用。     

Ⅱ型胶原变构肽鼻黏膜给药治疗胶原诱导性关节炎的实验研究

目的:研究以丙氨酸替换Ⅱ型胶原(collagen Ⅱ,CⅡ)263-272序列中的267、270、271位氨基酸的变构肽鼻黏膜给药对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)的抑制作用及其作用机制.方法:以牛CⅡ免疫Lewis大鼠诱发CIA.于发病的当天开始给予CⅡ变构肽和原型肽鼻滴入治疗,连续每天给药,5 d后,改为隔天给药,空白对照组给予磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution,PBS).观察关节肿胀情况,记录关节炎评分以及体重的改变.治疗结束后处死大鼠,行后踝关节病理切片,观察关节病理改变.ELISA方法检测血清巾抗C Ⅱ抗体亚型以及细胞因子的变化,流式细胞仪检测外周血 CD4+CD25+T细胞的变化,荧光定量PCR检测脾和淋巴结中Foxp3和TGF-β mRNA的表达水平.结果:(1)CⅡ变构肽可以抑制CIA的发展.实验结束时CⅡ变构肽、原型肽以及PBS组大鼠关节炎评分分别为2.50±2.43、4.50±2.23和6.33±2.73(变构肽治疗组与PBS对照组比较,P<0.05),各组大鼠后踝关节病理学评分分别为1.33±1.07、2.17±0.94和2.83±0.58,与PBS对照组相比,CⅡ变构肽可以明显抑制CIA关节病变的发展(P<0.05).(2)与PBS对照组相比,CⅡ变构肽可以降低CIA大鼠体内抗CⅡ抗体IgG2a亚型的滴度(0.56±0.19和0.95±0.29,P<0.05).C Ⅱ变构肽、原型肽及PBS对照组大鼠血清中γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平分别为(185.33±29.77)、(231.62±41.82)和(220.64±83.61)ng/L,与原型肽组相比,CⅡ变构肽可以降低大鼠血清中IFN-γ水平.(3)CⅡ变构肽治疗对调节性T细胞的影响:3组大鼠外周血CIM+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例差异无统计学意义,CⅡ变构肽治疗组大鼠脾和淋巴结中Foxp3和转化生长因子B(transforming growth factors β,TGF-β)mRNA的表达水平较对照组有升高趋势,但差异无统计学意义.结论:C Ⅱ变构肽鼻黏膜给药治疗可以抑制CIA的发展,CⅡ变构肽可能主要通过抑制CIA大鼠体内IgG2a型抗CⅡ抗体的产生,并降低血清中IFN-Ⅱ,从而抑制Th1型免疫反应而发挥治疗作用.