脊髓损伤后神经细胞凋亡

脊髓损伤一直是医学界关注的重点研究方向。1996Ｍａｒｃｉａ年在权威杂志Ｓｃｉｅｎｃｅ以“脊髓损伤新概念”为题评论了发现脊髓损伤后神经细胞凋亡的意义 ,认为美国神经科学年会上四个研究组报道“脊髓损伤后继发性细胞死亡不是直接由于损伤而是由于细胞凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)”这一新观点已将脊髓损伤研究大大推进一步[1] 。本文仅就细胞凋亡以及与脊髓损伤相关研究文献进行综述。细胞凋亡又叫细胞程序性死亡 (ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ ,ＰＣＤ)是正常细胞生理死亡的一个过程 ,主要清除有害或无用的自身细胞。近年来…     

Exendin-4 对大鼠脊髓损伤后氧化应激和神经细胞凋亡的影响

目的研究Exendin-4 对大鼠脊髓损伤后氧化应激和神经细胞凋亡的作用。方法成年雄性SD 大鼠36 只（体质量200~250 g）随机分为3 组（n=12）：假手术组（Sham 组）、单纯脊髓损伤组（SCI 组）、Exendin-4 组（Ex-4 组）。Sham 组只暴露脊髓,不打击;SCI 组和Ex-4 组均采用Allen′s 重物打击法制作脊髓损伤模型;Ex-4 组在脊髓损伤后立即腹腔内注射Exendin-4 溶液,剂量10 μg/只;SCI 组和Sham 组均注射等体积生理盐水。在24 h 后检测各组脊髓组织中丙二醛（MDA）含量和过氧化氢酶（CAT）活性,TUNEL 法检测神经细胞凋亡情况,Western blot 检测 caspase-9 和凋亡诱导因子（AIF）的表达情况。结果与Sham 组相比,SCI 组脊髓组织中的MDA 含量明显增加, caspase-9 和AIF 表达水平明显增加,神经细胞凋亡比例明显升高,CAT 活性明显降低（P < 0.01）。与SCI 组相比, Ex-4 组脊髓组织中MDA 含量明显降低,caspase-9 和AIF 表达水平明显降低,神经细胞凋亡比例明显降低,CAT 活性明显升高（P < 0.01）。结论大鼠脊髓损伤后,Exendin-4 可通过减轻氧化损伤抑制神经细胞凋亡。     

实验性分级大鼠脊髓损伤模型的建立

目的分级建立大鼠不同程度脊髓损伤模型。方法 140只大鼠均分为四组,采用自行研制的一种新型电控大鼠脊髓损伤打击器,以恒定的重物和打击时间,观察打击高度为1.5、2.5和6cm造成脊髓损伤后的后肢运动功能、电生理和病理变化。结果假手术组苏醒后能站立行走,CSEP-P波潜伏期恒定,脊髓结构正常。打击高度为1.5cm时(B组),动物出现轻度瘫换,28d后能站立行走,CSEP-P波延长,脊髓结构破坏较轻;打击高度为2.5cm时(C组),动物出现不全瘫,28d后不能站立行走,双后肢不能支持负重,CSEP-P波显著延长,脊髓结构破坏明显;打击高度为6.0cm时(D组),动物出现全瘫,28d后双后肢无运动,CSEP-P波始终呈直线,脊髓结构破坏严重。结论自行研制的脊髓损伤打击仪能够实现定时、定点、定高打击,可以分级、稳定的复制出轻、中、重度的脊髓损伤模型。     

金纳多对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞的影响

目的探讨银杏叶提取物(金纳多)对脊髓损伤大鼠损伤区凋亡细胞的作用。方法60只大鼠分正常组、损伤组和药物组,用Allen's改良法建立脊髓损伤模型,腹腔注射金纳多,损伤后1,3,7,14和21d取样,同时对大鼠损伤后双下肢功能作评估,对损伤区脊髓HE染色进行形态学观察,并用TUNEL法检测细胞凋亡。结果损伤组开始有片状出血,以后逐渐减少,7d全部消失。损伤组和药物组中均有凋亡细胞,损伤组凋亡率大于药物组。结论金纳多能抑制或保护大鼠脊髓损伤后神经细胞的凋亡,从而减轻脊髓损伤后的继发性损害。     

环磷酰胺致SD大鼠胎仔脊髓神经细胞凋亡的研究

目的:观察脊髓凋亡细胞,明确环磷酰胺对SD大鼠胎仔脊髓神经细胞凋亡作用。方法:大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中,妊娠第10天给予尾静脉注射不同剂量环磷酰胺(7.2 mg/kg和9.0 mg/kg),于妊娠第20天解剖将胎仔脊髓制成病理切片,并行HE和免疫组化染色。结果:实验结果显示实验组脊髓神经出现大量凋亡细胞;与生理盐水组胎仔胸髓和腰髓前角细胞的Bax和Bcl-2表达比较,环磷酰胺低剂量组胎仔胸髓和腰髓前角细胞的Bax表达明显增强,Bcl-2蛋白表达减弱。结论:在大鼠孕第10天给予7.2 mg/kg环磷酰胺尾静脉注射,其对大鼠胎仔脊髓神经细胞凋亡有促进作用。     

大鼠慢性脊髓损伤模型的建立

目的探寻简便易行的慢性脊髓损伤模型建立方法 ,为探索脊髓型颈椎病的损伤机制、病理及进一步为治疗奠定基础。方法 56只成年wistar雌性大鼠,随机分为实验组和对照组,各28只。根据大鼠脊柱解剖结构特点自行设计一种大鼠脊髓压迫复合体,用以制作大鼠慢性压迫模型。运用行为学、病理组织观察等方法评价模型的可靠性。结果脊髓压迫后两组大鼠行为学评分(BBB)比较差异有统计学意义(P<0.05);观察两组病理切片,可见实验组明显出现尼氏体减少,细胞核崩解,神经元坏死、减少,泡沫细胞形成,神经纤维脱髓鞘。结论本方法提供了一种理想的制作鼠慢性脊髓压迫损伤方法。     

脊髓谷氨酸转运体1对大鼠坐骨神经慢性压迫损伤及吗啡耐受的影响

为了探讨脊髓谷氨酸转运体1 (GLT-1) 的表达量和活性状态与吗啡耐受和神经源性痛的关系,利用大鼠坐骨神经慢性压迫损伤 (CCI) 模型,以机械性缩足痛阈值 (MWT) 为评估指标,谷氨酸转运体激动剂β内酰胺类抗生素头孢曲松钠为工具药,观察对大鼠机械痛敏和吗啡耐受的影响;以实时定量PCR及Western blotting考察脊髓GLT-1表达水平的变化。结果表明,CCI大鼠在术后1周与对照组相比MWT值下降约80%;CCI大鼠单独使用吗啡产生快速耐受,给药第3天与CCI模型对照组大鼠比较MWT值已无明显差异,脊髓GLT-1表达也明显下调;单独使用头孢曲松钠对痛敏有改善作用,脊髓GLT-1表达明显上调;吗啡伴随头孢曲松钠给药组耐受速度明显减慢,给药6天后MWT值仍保持在较高水平,与CCI吗啡耐受组比较有显著性差异,GLT-1表达明显上调。因此,脊髓GLT-1活性变化与神经源性痛及吗啡耐受的形成密切相关,促进GLT-1功能可显著延缓吗啡耐受与痛敏形成。     

神经节苷脂在脊髓损伤后的抗神经细胞凋亡作用研究

目的 :探讨神经节苷脂 (GM1)对神经细胞的抗凋亡作用及其作用机制。方法 :复制大鼠中度脊髓损伤模型 ,随机分为对照组和GM1 治疗组 ,在蛛网膜下腔注射生理盐水或GM1,采用原位末端标记法、流式细胞仪AnnexinV/PI双标检测和测定Caspase3的活性来判断脊髓细胞凋亡情况。结果 :对照组和GM1 治疗组细胞凋亡均在治疗后3d达到高峰 ,但在治疗后1d～14d ,GM1 治疗组凋亡细胞显著低于对照组 (P<0 05～0 01) ,GM1 治疗组神经细胞的Caspase3活性明显低于对照组。结论 :GM1 可阻断神经细胞的凋亡 ,对脊髓损伤组织有明显保护作用     

纳洛酮对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的：研究纳洛酮在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的保护机制。方法：腔内线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。16只雄性Wistar大鼠随机分为缺血组及纳洛酮治疗组，采用TUNEL法检测各组大鼠脑组织于缺血再灌注各2．5h后神经细胞凋亡情况。结果：大鼠脑缺血再灌注2．5h后凋亡的神经细胞主要分布在梗死灶边缘，纳洛酮治疗组细胞凋亡数量低于缺血组(P＜0．05)。结论：纳洛酮具有减少大鼠脑组织缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的作用。纳洛酮具有抗脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

七叶皂苷钠对大鼠脑缺血损伤中神经细胞凋亡的影响

目的观测七叶皂苷钠对大鼠大脑中动脉闭塞缺血半球梗死面积及凋亡细胞数月的影响.方法选用健康雄性SI)大鼠.以头端烫圆的40)尼龙线由左侧颈总动脉插入,阻塞左侧大脑中动脉.建立缺血2 h再灌注22 h动物模型.再灌注即刻腹腔内注射七叶皂苷钠(5 mg/kg)为治疗组.注射生理盐水(10ul/g)为对照组.对视交叉部冠状脑组织块行TTC染色,测定其吻端梗死面积百分比对邻近脑组织块行原位末端转移酶标记(TUNEL).计数缺血半球凋亡细胞数目.结果治疗组和对照组大鼠脑梗死面积分别为(8.1 5士5.0)%和(22.1 4±7.7)%(P＜0.01);细胞凋亡数目分别为70±23和225±78(P＜0.01).结论再灌注即刻腹腔内注射七叶皂苷钠对大鼠短暂性、局灶性脑缺血具有保护作用;这种神经保护作用在一定程度上与抑制神经细胞凋亡有关系.     

脊髓损伤与细胞凋亡

在八月版的《自然医学》(NatureMedicine)期刊上,美国肯塔基大学神经解剖学家Joe Springer博士的研究小组报告,他们发现了在脊髓受伤后,导致少突神经蚀质细胞凋亡的分子信号。通过这一研究新发现,     

依达拉奉抗大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡的机制初探

摘要： 目的 探讨依达拉奉 （EDA） 对大鼠脊髓损伤 （SCI） 后内质网应激 （ERS） 介导的细胞凋亡的影响。方法 36 只 SD 大鼠随机分为假手术(sham)组、 SCI 组、 EDA 组, 每组 12 只。采用 Allen’ s 法建立 SCI 模型, sham 组仅行椎板切除术。术后 Sham 组和 SCI 组给予与 EDA 组等体积等频次生理盐水处理; EDA 组在 SCI 模型建成以后予以 EDA(10 mg/kg), 每 12 h 腹腔注射给药 1 次。于术后 3 d 取脊髓, 应用 Western blot 检测 C/EBP 同源蛋白 （CHOP）、 Cleaved caspase-12 和 Cleaved caspase-3 的表达水平, 免疫荧光技术检测脊髓组织中 caspase-12、 CHOP 阳性细胞的比率, TUNEL 法检测脊髓细胞凋亡水平。结果 SCI 组较 sham 组 CHOP、 Cleaved caspase-12、 Cleaved caspase-3 的表达升高, Cleaved caspase-12、 CHOP 阳性细胞比率增加, 脊髓组织细胞凋亡比率增加 （均 P < 0.01）。EDA 组较 SCI 组 CHOP、 Cleaved caspase-12 和 Cleaved caspase-3 的表达降低, Cleaved caspase-12、 CHOP 阳性细胞比率减少, 脊髓组织细胞凋亡比率减少 （均 P < 0.01）。结论 EDA 对脊髓损伤有保护作用, 机制可能与其抑制 SCI 后脊髓细胞的 ERS 和脊髓细胞的凋亡有关。     

苯甲酸钠通过抑制线粒体凋亡保护大鼠脊髓损伤的研究

目的 探索苯甲酸钠(NaB)对大鼠脊髓损伤(SCI)的保护作用及相关机制.方法 用Allen法制作SCI模型,并随机分为模型组和实验组,每组12只;另取12只正常SD大鼠只进行椎板切除,作为对照组.对照组和模型组均灌胃给予等量0.9％NaCl,qd,连续3 d;实验组给予0.2 g·kg-1 NaB,qd,连续3 d....     

坐骨神经慢性压迫损伤性疼痛与脊髓背角P物质关系研究

目的观察大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）后脊髓背角P物质表达的变化,探讨P物质在疼痛发生机制中的作用。方法SD雄性大鼠60只,随机分为：A组：CCI组（30只）;B组：对照组（30只）。术前及术后3、7、14、28 d分别测定大鼠热痛阈值、机械痛阈值和行为学评分。术后3、7、14、28d每组取4只,麻醉后用4%多聚甲醛灌注固定,取L4-6段脊髓,以备免疫组化,测定SP的变化。结果所有CCI动物从术后第3天起,出现明显的疼痛行为学改变和热痛阈值、机械痛阈值的降低,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。免疫组织化学结果表明,A组术后术侧明显高于B组（P〈0.05或P〈0.01）;A组术侧明显高于健侧（P〈0.05或P〈0.01）;而B组仅在第4天术侧高于健侧（P〈0.05）。结论慢性坐骨神经损伤后,脊髓背角SP的表达增加,而且表达增加与CCI大鼠的痛觉过敏、行为变化在时相上基本一致,说明CCI大鼠痛觉过敏与脊髓背角SP的表达增加有关。     

脊髓损伤后神经细胞继发坏死机制研究进展

脊髓损伤包括创伤及继发损伤，创伤为器质性不可逆损伤，难以人为把握。目前关于脊髓损伤保护的研究多集中于神经细胞继发损伤，脊髓损伤后经历组织水肿、炎症反应、毒性反应等一系列病变过程，而导致细胞坏死及凋亡。其中坏死为继发损伤的终末环节之一，其机制研究广受关注。     

苏郁胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响

OBJECTIVE This study examine the possible mechanism of Suyu capsule for antidepressive action.METHODS 96 male SD rats were separated randomly into 6 groups including the control group,the model group,Anafranil group and three other groups under the treatm     

苏郁胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的探究苏郁胶囊抗抑郁的作用机制。方法将96只Open-F ield评分相近的成年SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、苏郁胶囊高、中、低剂量组(22.8g/kg、11.4g/kg、5.7g/kg)及氯米帕明组(0.02g/kg)。采用长期不可预见中等强度应激结合孤养造成大鼠抑郁模型。Open-F ield法和糖水消耗实验测定各组大鼠的行为变化;用TUNEL试剂盒检测海马CA3区神经细胞凋亡情况,免疫组化法检测Bc l-xl蛋白的表达;应用钙离子荧光指示剂Fura-2/AM测定海马突触体内游离Ca2 浓度。结果与正常组比较,模型组大鼠出现明显的行为异常,糖水消耗明显减少;海马CA3区TUNEL阳性细胞数增加明显,Bc l-xl蛋白表达减少明显;海马突触体内游离Ca2 浓度明显升高。苏郁胶囊高中治疗组能明显增加抑郁大鼠的糖水消耗量,改善其行为异常;苏郁胶囊高中低治疗组能明显减少海马CA3区TUNEL阳性细胞数,上调海马CA3区Bc l-xl蛋白表达,减少海马突触体内游离Ca2 浓度,并具有一定的量效关系。结论苏郁胶囊能改善大鼠的抑郁样行为;抑制抑郁大鼠海马神经细胞凋亡。其可能与苏郁胶囊抑制海马神经细胞外Ca2 大量内流,阻止Ca2 超载,上调海马Bc l-xl蛋白表达相关。     

苏郁胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的探究苏郁胶囊抗抑郁的作用机制。方法将96只Open-Field评分相近的成年SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、苏郁胶囊高、中、低剂量组(22.8g/kg、11.4g/kg、5.7g/kg)及氯米帕明组(0.02g/kg)。采用长期不可预见中等强度应激结合孤养造成大鼠抑郁模型。Open-Field法和糖水消耗实验测定各组大鼠的行为变化;用TUNEL试剂盒检测海马CA3区神经细胞凋亡情况,免疫组化法检测Bc l-xl蛋白的表达;应用钙离子荧光指示剂Fura-2/AM测定海马突触体内游离Ca²⁺浓度。结果与正常组比较,模型组大鼠出现明显的行为异常,糖水消耗明显减少;海马CA3区TUNEL阳性细胞数增加明显,Bc l-xl蛋白表达减少明显;海马突触体内游离Ca²⁺浓度明显升高。苏郁胶囊高中治疗组能明显增加抑郁大鼠的糖水消耗量,改善其行为异常;苏郁胶囊高中低治疗组能明显减少海马CA3区TUNEL阳性细胞数,上调海马CA3区Bc l-xl蛋白表达,减少海马突触体内游离Ca²⁺浓度,并具有一定的量效关系。结论苏郁胶囊能改善大鼠的抑郁样行为;抑制抑郁大鼠海马神经细胞凋亡。其可能与苏郁胶囊抑制海马神经细胞外Ca²⁺大量内流,阻止Ca²⁺超载,上调海马Bcl-xl蛋白表达相关。     

神经生长因子对大鼠脑损伤神经细胞凋亡的影响

目的 探讨神经生长因子(NGF)对LPS致大鼠脑损伤神经细胞凋亡的影响.方法 采用颈内动脉注射LPS造成大鼠脑损伤模型.大鼠30只随机分为5组:生理盐水组(A)、LPS致脑损伤组(B)、NGF处理组C,各组分别于6、12、24、48h处死取脑标本,TUNEL 法观察大鼠脑损伤神经细胞凋亡的变化.结果 与生理盐水组相比,LPS组大鼠脑皮层神经细胞凋亡数目显著增多(P<0.05);与LPS组相比,NGF处理组大鼠脑皮层神经细胞凋亡数目显著减少(P<0.05).结论 NGF能明显减轻LPS致大鼠脑损伤神经细胞凋亡,具有明显脑保护作用.     

大鼠脊髓损伤早期Survivivn表达规律与细胞凋亡的关系

目的:探讨大鼠脊髓损伤早期不同时间段内脊髓组织中生存素(Survivin)表达变化规律和细胞凋亡的关系。方法:56只Wistar大鼠随机分两组:①假损伤组(对照组,n=8)与②损伤组(实验组,48只);假损伤组仅打开T10及部分T9、T11椎板,实验组均采用改良Allens法建立大鼠T10脊髓损伤模型,分别于伤后不同时间点(12h、24h、3d、5d、7d、10d)随机处死8只取材;分别用HE染色观察组织病理变化、免疫组织化学法观察脊髓组织中Survivin表达并对其进行定性定量分析和脱氧核糖末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)测定细胞凋亡指数,并进行相关性分析。结果:对照组大鼠在损伤及周边脊髓灰、白质中偶有Survivin蛋白表达、实验组12h有极少表达、3d时可见较多Survivin蛋白表达,然后开始下降;10d时与对照组比较仍有统计意义(P<0.05)。在脊髓损伤后对照组有少量细胞凋亡;而试验组12h就出现大量凋亡细胞,3d达高峰,5d和7d明显减少,10d仍有少量表达;实验组24h、3d、5d、7d、10d细胞凋亡和对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:脊髓损伤后Survivin表达呈上升趋势并有一定的规律性,与细胞凋亡成正相关,脊髓损伤后Survivin的表达升高参与了抑制神经细胞的凋亡,从而起到减轻脊髓损伤的作用。