τ蛋白、β淀粉样蛋白、视锥蛋白样蛋白-1与阿尔茨海默病病人认知功能障碍的相关性研究

目的 探讨τ蛋白、β淀粉样蛋白（β-AP）、视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)与阿尔茨海默病（AD）病人认知功能障碍的相关性。方法 选取2020年1—7月在河北中石油中心医院的老年AD病人100例（AD组）作为研究对象,其中有47例痴呆,53例轻度认知功能损害（MCI）病人;同时选取该院体检健康者50例作为对照组,检测血清τ蛋白、β-AP、VILIP-1水平并比较,Pearson相关性分析探索τ蛋白、β-AP、VILIP-1与简明精神状态量表（MMSE）评分关系。结果 AD组血清τ蛋白、β-AP、VILIP-1分别为（24.40±5.55）pg/L、（210.22±44.43）ng/L和（8.11±1.82）ng/L,高于对照组（19.01±5.03）pg/L、（130.32±32.15）ng/L和（3.02±0.95）ng/L(P<0.05);AD病人中有47例为AD痴呆;AD痴呆病人MMSE评分低于MCI病人（P<0.05）;AD痴呆病人血清τ蛋白、β-AP、VILIP-1分别为（27.82±3.82）pg/L、（240.38±37.32）ng/L和（10.01±1....     

氯化锂抑制β-淀粉样蛋白诱导细胞Tau蛋白磷酸化

目的探讨GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)在β-淀粉样蛋白25～35片断(Aβ25-35)诱导的细胞Tau蛋白磷酸化中的作用及机制。方法MTT法观察不同浓度的LiCl(1、5、10、20mmol.L-1)单独作用24h,对SH-SY5Y细胞存活率的影响;20μmol.L-1的凝聚态Aβ25-35作用于SH-SY5Y细胞不同时间点,蛋白免疫印迹法研究Tau蛋白磷酸化位点(Ser199、Ser396及Tau1)水平的变化;LiCl(20mmol.L-1)预处理细胞1h后,观察Aβ的作用有无变化及可能的作用机制。结果不同浓度的LiCl作用24h后,MTT法示细胞存活率无明显变化(P>0.05);20μmol.L-1Aβ25-35作用不同时间点后,Tau蛋白在Ser396、Ser199位点的磷酸化水平在3h逐渐增加,6h达到最高峰,12h后又逐渐下降,在这3个时间点的增加量均具有统计学意义(P<0.05),而对非磷酸化Tau1没有影响(P>0.05);LiCl预处理可抑制Aβ25-35的作用(P<0.05),并可诱导失活形式的GSK-3β在Ser9位点的磷酸化(p-GSK-3βSer9)表达增高。结论GSK-3β参与了Aβ25-35诱导细胞Tau蛋白磷酸化的作用,LiCl可通过诱导失活形式的p-GSK-3βSer9表达增高而抑制GSK-3β的活性,进而抑制Aβ诱导的细胞Tau蛋白磷酸化。该实验为研究AD的发病机制及探索有效治疗药物提供了重要的理论基础。     

甲硫哒嗪损伤大鼠学习记忆伴随脑β-淀粉样蛋白的升高

目的观察甲硫哒嗪损伤大鼠学习记忆是否伴随脑内β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)水平的升高,探讨甲硫哒嗪引起认知功能受损的机制。方法20只大鼠随机分为对照组和甲硫哒嗪组,连续2wk分别腹腔注射生理盐水和治疗剂量的甲硫哒嗪(10mg·kg-1)。用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,用放射免疫分析法测脑组织Aβ含量,用免疫组织化学染色检测β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)表达,用RT-PCR方法测定脑中3种APP、α及β-分泌酶mRNA表达。结果甲硫哒嗪组大鼠学习记忆能力下降,脑组织Aβ含量升高(P<0.05),是对照组的1.3倍;脑皮质和海马区APP蛋白表达增高(P<0.05);除APP695、α-分泌酶mRNA表达变化无统计学意义外,脑组织APP751和APP770 mRNA表达升高(P<0.05),相对表达量之和是对照组的2.5倍;β-分泌酶mRNA表达升高(P<0.05),是对照组的2.6倍。结论脑内Aβ水平的增加,可能是甲硫哒嗪引起认知功能损害的原因之一。     

β淀粉样蛋白、白细胞介素-1β在脑梗死患者血清中的含量和临床意义

目的 探讨β淀粉样蛋白(Aβ)、白细胞介素-1β(IL-1β)在脑梗死发生、发展中的作用。方法 用放射免疫分析法检测30例脑梗死患发病后3～5d、10～14d和30例正常对照血清Aβ、IL-1β水平。结果 脑梗死组发病后3～5d血清Aβ、IL-1β水平明显高于10～14d,后明显高于对照;脑梗死组发病后3～5d血清Aβ与IL-1β水平呈正相关,两均与梗死灶体积、神经功能缺损程度呈正相关。结论 Aβ、IL-1β参与脑梗死发生、发展,干扰两产生和作用途径可减轻脑缺血损伤。     

β-淀粉样蛋白对大鼠学习记忆、病理及tau蛋白磷酸化的影响

目的研究大鼠海马区内注射β-淀粉样蛋白（Aβ）的神经毒性,建立阿尔茨海默病（AD）动物模型,探讨Aβ毒性机制。方法选取雌性成年SD大鼠24只,随机分为止常对照组、生理盐水组、AD组,每组8只。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,HE染色及B ielschowsk i染色法观察海马神经元形态,免疫组化法观察tau蛋白异常磷酸化变化。结果与正常对照组大鼠相比,AD组大鼠水迷富测试结果明显减退（P〈0.01）;海马CA1区神经元纤维形态紊乱,tau蛋白磷酸化阳性细胞数明显增多（P〈0.01）。结论大鼠海马内注射凝集态Aβ可产生神经毒性作用,能较好地模拟AD行为和病理表现,其神经毒性可能是通过tau蛋白的异常磷酸化起作用。     

血清β-淀粉样蛋白和血管紧张素转化酶联合检测对血管性认知功能障碍疾病的诊断价值探讨

目的:探讨血管性认知功能障碍疾病患者血清β-淀粉样蛋白和血管紧张素转化酶的含量变化及其临床意义.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定30例血管性认知功能障碍患者(观察组)、31例其它系统疾病患者(对照组)及28例健康人血清中β-淀粉样蛋白(β-Amyloid)和血管紧张素转化酶(ACE)含量.结果:血清...     

重组人β淀粉样蛋白1-42小规模发酵及小量纯化工艺的摸索

目的研究重组人β淀粉样蛋白1-42(rh Aβ1-42)在5 L摇瓶中的高密度发酵实验,以及小量纯化工艺的方法。方法分别从甲醇浓度、p H、诱导时间等方面对毕赤酵母重组菌株产生rh Aβ1-42的发酵过程进行了优化;通过硫酸铵沉淀目的蛋白、透析、脱盐和阴离子交换层析,对rh Aβ1-42小量精确的纯化方法进行了研究。结果确定rh Aβ1-42在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件为:在p H 6.0的条件下,以0.5%甲醇诱导72 h,经过硫酸铵沉淀目的蛋白、透析、脱盐和阴离子交换层析,rh Aβ1-42纯度可达94%以上。结论确定了rh Aβ1-42在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件,建立了小量纯化rh Aβ1-42的新方法。     

脑部转运体参与β-淀粉样蛋白脑内转运的研究进展

β-淀粉样蛋白(Aβ)的产生及清除异常会影响其脑内的动态平衡。研究表明,位于脑实质及血脑屏障上的转运体在Aβ的产生及清除过程中都发挥重要作用。因此,影响转运体在脑内的表达及活性可能改变Aβ在脑内累积量的变化,进而影响阿尔采末病的病理学过程。本文从ATP结合盒转运体、晚期糖基化终产物受体和低密度脂蛋白受体相关蛋白-1在脑内的分布及对Aβ的产生和清除的影响等方面进行综述。     

睾丸切除术对血清β-淀粉样蛋白的影响

目的　探讨睾丸切除术对血清 β 淀粉样蛋白 (Aβ)的影响。 方法　选择 45只 3年老龄健康雄性兔 ,实验组 3 0只切除双侧睾丸 ,对照组 15只行开腹、关腹术。分时间段对实验组、对照组取外周静脉血 ,用放射免疫方法监测Aβ水平的变化。 结果　术前Aβ为 (2 2 5± 1 2 )ng/ml,实验组术后Aβ上升明显 ,术后 5周达最高峰(76 1± 2 8)ng/ml,以后逐渐下降 ,术后半年仍明显高于术前水平 (5 0 2± 2 7)ng/ml;对照组假手术对Aβ几乎无影响。结论　雄激素对Aβ生成或降解有影响 ,可能是通过向雌激素转化减少而起作用     

痴呆鼠脑中β-淀粉样前体蛋白的表达

为揭示 β -淀粉样前体蛋白 ( β -APP)、生长抑素 (SS)在铝盐所致大鼠行为学改变机制中的作用 ,采用免疫组织化学方法检测 β -APP、SS在大鼠脑内海马区的表达 ,并采用HE染色法分组观察大鼠海马区锥体细胞层神经元形态结构。结果 ,模型组大鼠学习成绩为 ( 67.9± 7.2 )次 ,显著低于制模前 ( 2 1 .90± 3.70 )次和两对照组 ( 2 2 .9± 4 .7)与 ( 2 5.8± 5.6)次 ( P <0 .0 1 ) ;记忆成绩为 ( 0 .53± 0 .0 9)次 ,亦显著低于制模前 ( 0 .82± 0 .0 9)次和两对照组 ( 0 .84± 0 .0 8)与 ( 0 .81± 0 .1 2 )次 (P <0 .0 1 )。模型组海马区 β -APP表达呈中度阳性 2只 ,强阳性 8只 ,比对照组明显增加 ( P <0 .0 1 ) ,SS免疫反应性神经元数为 ( 9.3± 1 .9)个 ,比对照组 ( 2 2 .9± 2 .8)个和 ( 2 1 .3± 2 .2 )个显著减少 (P <0 .0 1 ) ,且 β -APP阳性程度与SS等级呈负相关 (r =-0 .70 59,P <0 .0 5)。提示铝盐致学习记忆障碍的大鼠模型脑内 β-APP表达增强、而SS表达降低。     

CCR3的缺失导致阿尔茨海默病小鼠模型中β-淀粉样蛋白和过度磷酸化tau蛋白的减少

目的慢性神经炎症可能参与阿尔茨海默病(AD),其特征在于,神经胶质细胞活化和促炎性细胞因子和趋化因子的分泌。趋化因子CCL11已被证明是衰老过程中认知衰退的致病因素,但它是否参与AD的发病却很少被我们所知。在本研究中,我们拟在小鼠模型中回答CCL11及其受体CCR3是否参与AD发病过程的问题。方法我们采用了免疫组化、蛋白印迹和体视学细胞计数等方法来回答上述问题。结果 CCL11特异性受体CCR3的缺失使APP/PS1双转基因小鼠脑内tau蛋白磷酸化,Aβ沉积以及小胶质细胞及星形胶质细胞增生显著降低。结论 CCL11的增加可能是AD的危险因素,并且拮抗CCR3可能给AD带来治疗益处。     

颅内注射淀粉样β蛋白片段1-42和thiorphan对恒河猴脑内淀粉样β蛋白表达的影响

目的探讨颅内注射淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)和thiorphan对恒河猴脑内Aβ表达的影响。方法将恒河猴随机分为模型组(n=3)和正常对照组(n=1),模型组开颅后于大脑皮质和基底神经节先注射thiorphan以消耗已存在的脑啡肽酶,然后缓慢注射纤丝状Aβ1-42,再植入含有thiorphan的微渗透泵到基底神经节,持续28d;正常对照组仅注射生理盐水。至50d时处死恒河猴,开颅取大脑,免疫组织化学法观察海马、基底神经节和大脑皮质等部位Aβ1-42的表达。结果正常对照组恒河猴海马、基底神经节和大脑皮质Aβ1-42免疫反应阳性,30个高倍视野(×400)的积分吸光度(IA)分别为0.22±0.06,0.20±0.04和0.19±0.07。模型组3只恒河猴海马、基底神经节和大脑皮质Aβ1-42免疫反应均明显增强,海马IA分别为0.57±0.05,0.60±0.05和0.61±0.05;基底神经节IA分别为0.62±0.06,0.63±0.05和0.65±0.05;大脑皮质IA分别为0.67±0.06,0.68±0.05和0.65±0.07。结论颅内联合注射Aβ1-42和thiorphan可增加脑内Aβ1-42的表达。     

LRP1对脑内β淀粉样蛋白水平的调节作用

β淀粉样蛋白（Aβ）分子量约为4kDa,是由39～42个氨基酸残基组成的蛋白质,其被认为是阿尔兹海默病（Alzheimer’sdisease,AD）发病的核心蛋白。脑内Aβ由淀粉样前体蛋白（amyloid precursorprotein,APP）水解产生,主要通过跨血脑屏障外向转运清除。正常生理条件下,脑内Aβ的产生和清除保持动态平衡。若失衡（清除小于产生）,则导致Aβ水平异常升高,继而聚集、沉淀,形成老年斑,引发一系列的病理反应,如突出功能异常、神经元凋亡、记忆损害等,继而引发AD。低密度脂蛋白受体相关蛋白1（low-density-lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1）为600 kDa的Ⅰ型跨膜糖蛋白,属于低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein receptor,LDLR）家族成员之一。     

阿尔茨海默病中β-淀粉样蛋白毒性作用的研究现状

阿尔茨海默病(alzheimer's disease,AD)是老年期痴呆症中最常见的一种进行性神经变性疾病,在65岁以上老年人中的发病率为7%-10%,80岁以上老年人中发病率大约为40%[1].     

阿尔茨海默病中β-淀粉样蛋白毒性作用的研究现状

阿尔茨海默病(alzheimer's disease,AD)是老年期痴呆症中最常见的一种进行性神经变性疾病,在65岁以上老年人中的发病率为7%-10%,80岁以上老年人中发病率大约为40%[1].     

阿尔茨海默病患者血清β-淀粉样蛋白和空腹血糖表达水平的临床研究

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清β-淀粉样蛋白(Aβ)和空腹血糖(FPG)表达水平。方法随机选取40例AD患者和50名健康人分别作为试验组和对照组,检验其血清Aβ1-40、Aβ1-42和FPG水平。结果与对照组比较,随着AD病情严重程度增加,血清Aβ1-40水平逐渐升高,Aβ1-42水平先升高后降低(P<0.05),FPG表达水平逐渐升高(P<0.05)。结论 AD患者血清β-淀粉样蛋白和空腹血糖表达水平的改变,与AD的严重程度有关。     

β-淀粉样蛋白定向靶点结合制剂的功能性分析

β-淀粉样蛋白(Aβ_(42))以其特有的一级结构使其易发生聚集和沉积,这也是阿尔茨海默病(AD)典型的及基本的病理学特征之一。这些Aβ_(42)的聚集体对神经细胞的毒性很大,其中Aβ_(42)寡聚体(Aβ_(42)O)为主要神经毒形式,最终引起神经细胞凋亡。近年来,靶向Aβ_(42)O的制剂,不论是抗体制剂,还是化合物制剂,或来自天然药物组分,已有许多报道,均在一定程度上抑制了Aβ_(42)O的进一步沉积(被认为是Aβ_(42)O的储存库),以及Aβ_(42)O的细胞毒性。然而,不同的制剂在结合Aβ_(42)O或Aβ_(42)时结合的靶部位不同,引起的效应或细胞保护作用也是不同的。由于Aβ_(42)O存在构象多样性,这是否会导致毒性效应的差异是个值得探索的问题。本研究利用不同的靶向Aβ_(42)O的抗体或药物制剂,研究了它们对Aβ_(42)O的定向靶向性和相应的功效,发现这些制剂的功效与它们靶向Aβ_(42)分子的位点之间有着复杂但统一的相关性。这些结果对抗Aβ_(42)O药物的定向设计或许有一定的指导意义。     

艾塞那肽-4改善β淀粉样蛋白诱导的小鼠昼夜节律紊乱及时钟蛋白CLOCK蛋白的异常表达

目的探讨艾塞那肽(exendin)-4对β淀粉样蛋白(Aβ)引起的C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱的影响,观察exendin-4对Aβ引起的海马时钟蛋白CLOCK蛋白异常表达的影响。方法海马内注射15 nmol Aβ31-35、50 pmol Exendin-4,对照组海马内注射等体积的高压三蒸水,利用Vital View跑轮分析软件观察各实验组小鼠昼夜节律的变化。蛋白质印迹法检测各组小鼠海马区CLOCK蛋白在不同时间的表达变化。结果 Aβ处理组小鼠出现明显昼夜节律紊乱,其自由运转周期为(23.67±0.05)h,鲁棒值为(22.5±4.3)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),Exendin-4预处理组小鼠昼夜节律部分恢复正常,其自由运转周期为(23.53±0.05)h,鲁棒值为(47.0±4.0)%,与Aβ处理组比较差异有统计学意义(P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示,对照组CLOCK蛋白在CT8和CT20表达高,在CT2和CT14时表达低,Aβ处理组CLOCK蛋白表达缺乏节律性,Exendin-4预处理组CLOCK蛋白部分恢复节律表达。结论 Exendin-4可部分恢复Aβ31-35导致的C57BL/6小鼠的昼夜节律紊乱,并部分纠正Aβ31-35引起的海马区CLOCK蛋白的异常表达。     

人参皂苷Rg1对Aβ_(25-35)诱导大鼠海马神经元tau蛋白异常磷酸化的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对Aβ2535所致大鼠海马神经tau蛋白异常磷酸化的抑制作用及其可能机制。方法应用脑立体定向技术向成年大鼠海马背侧注射凝聚态Aβ25355nmol制备AD样大鼠模型,术后分别给予腹腔内注射不同浓度的人参皂苷Rg1(625、125、25μmol·kg-1)处理,14d后处死,采用镀银染色方法观察海马组织神经元病理改变;免疫组织化学染色方法和免疫蛋白印迹技术显示大鼠脑内[pS396]tau、[pSpS199/202]tau、[pT231]tau的表达水平情况,以及总tau蛋白的水平(tau5);免疫蛋白印迹技术检测海马组织中GSK3β和磷酸化GSK3β的水平变化。结果凝聚态Aβ2535注射组神经元纤维走行紊乱,增粗、肿胀密集成宽带状,轴突深染;而人参皂苷Rg1对神经元具有明显的保护作用,脑内总tau的水平下降,[pS396]tau、[pSpS199/202]tau、[pT231]tau的表达明显低于Aβ2535注射组(P<001),以25μmol·kg-1保护作用最明显;GSK3β和磷酸化GSK3β的水平亦明显低于Aβ2535注射组,与正常和假注射组差异无显著性(P>005),以25μmol·kg-1作用最明显。结论人参皂苷Rg1对Aβ2535诱导的AD样大鼠海马神经元具有保护作用,其机制可能是通过阻断GSK3β的活性而降低磷酸化tau蛋白的表达而实现的。