离子交换层析结合分子排阻色谱法测定注射用尿激酶中分子组分比

目的:建立测定注射用尿激酶分子组分比的离子交换层析样品前处理方法结合分子排阻色谱法的分析方法,以解决长期以来制剂标准中无法控制分子组分比的难题,并对国内6家企业的产品质量进行了考察。方法:根据尿激酶与人血白蛋白等电点的差异,通过离子交换层析去除样品中人血白蛋白辅料的干扰,采用分子排阻色谱法测定。采用TSKgel G2000SWXL色谱柱(300 mm×7.8 mm, 5μm),流动相为0.1 mol·L^-1磷酸二氢钠缓冲液(pH 3.0),流速为0.5 mL·min^-1,柱温为35℃,检测波长为280 nm,进样量为50μL。结果:尿激酶质量浓度在0.05～5.1 mg·mL^-1范围内,高分子量尿激酶与低分子量尿激酶线性关系均良好(r≥0.998 0);检测限分别为1.5μg·mL^-1与5.1μg·mL^-1,定量限分别为5.1μg·mL^-1与16.9μg·mL^-1;精密度、重复性、24 h稳定性试验的RSD均<4.0%;方法的回...     

脑静脉窦血栓应用尿激酶和低分子肝素治疗的临床研究

目的：探讨脑静脉窦血栓应用尿激酶和低分子肝素治疗的临床疗效。方法随机将2009年1月-2013年1月本科收治的脑静脉窦血栓患者32例分成对照组和观察组各16例,对照组采用低分子肝素治疗,观察组采用低分子肝素和尿激酶联合治疗,对两组治疗有效率及脑脊液压力恢复率进行比较。结果对照组治疗有效率为68.75%,观察组治疗有效率为87.50%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;对照组脑脊液压力恢复率为62.50%,观察组脑脊液压力恢复率为81.25%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论脑静脉窦血栓利用尿激酶介入治疗效果显著、是一种安全有效的治疗方式,能够有效的降低患者的死亡率和致残率,可推广使用。     

3种方法测定玻璃酸钠的分子量比较

摘 要 目的： 比较3种方法测定玻璃酸钠注射液中玻璃酸钠分子量的结果。方法: 采用黏度法测定玻璃酸钠注射液中玻璃酸钠的分子量,并采用体积排阻色谱法（SEC）及多角度激光光散射仪与体积排阻色谱法联用（MALLS SEC）对其分子量及分子量分布（Mw/Mn）进行测定。结果: MALLS-SEC法与黏度法的测定结果较为接近,且同时可测定样品的Mw/Mn。3批样品分子量 4次测定的平均值分别为991 962,1 007 438,990 232;RSD分别为6.5%,4.6%,2.2%（n=4）。分子量分布4次测定的平均值为1.6,1.6,1.6;RSD为7.2%,3.2%,3.2%（n=4）。 结论: MALLS SEC法测定准确度及精密度较好,可用于玻璃酸钠样品的质量控制。     

联合低分子右旋糖酐和尿激酶抗血小板聚集的初步研究

目的探讨低分子右旋糖酐与尿激酶在抗血小板聚集上的协同作用。方法将低分子右旋糖酐＋尿激酶的无菌注射液,经静脉注入脑缺血模型大鼠体内,并用生理盐水和尿激酶作为对照组,分别于6h后采血制备PRP与PPP,以ADP为诱导剂,用比浊法测定血小板聚集率。结果低分子右旋糖酐＋尿激酶和单用尿激酶均能降低血小板聚集率,延长血小板最大聚集率发生时间（P〈0.01）;但低分子右旋糖酐＋尿激酶组的抗血小板聚集作用明显强于尿激酶组（P〈0.01）。结论低分子右旋糖酐与尿激酶联合应用在抗血小板聚集和抗血栓形成上具有一定的协同作用。     

高效分子排阻法测定注射用头孢唑肟钠聚合物的方法学研究

目的 建立高效分子排阻法测定头孢唑肟钠聚合物的检测方法。方法 采用东曹TSKgelG2000SWXL亲水硅胶色谱柱（分子量范围1000～10 000）,流动相pH 7.0的磷酸盐缓冲液[0.075 mol/L磷酸二氢钠-0.075mol/L磷酸氢二钠（39∶61）-乙腈（90∶10）],柱温：30℃,检测波长：254 nm。结果 经四种破坏处理后,头孢唑肟的降解产物均能与主峰有效分离,方法专属性良好。头孢唑肟主峰的线性范围为0.5～20 mg/ml,检测限为0.25μg/ml,定量限为0.75μg/ml,精密度良好。结论 该方法准确、灵敏,简便易行,且分析时间较短,可用于头孢唑肟钠聚合物的测定。     

低分子肝素钙与小剂量尿激酶治疗进展性脑卒中的疗效比较

目的 比较低分子肝素钙与小剂量尿激酶治疗进展性脑卒中的疗效.方法 分析60例进展性脑卒中患者的临床资料,依据治疗方式不同分为观察组(低分子肝素钙治疗组)30例和对照组(小剂量尿激酶治疗组)30例,比较两组临床疗效.结果 观察组治疗总有效率100％,高于对照组的80％(x2=22.22,P＜0.05).结论 低分子肝素钙治疗进展性脑卒中疗效明显,预后良好,值得临床借鉴应用.     

基于三种原理分离技术的多肽类药物比伐芦定杂质分析

摘要：目的 建立不同分离原理的高效液相色谱法,对7家企业的比伐芦定原料药中相关杂质进行分析,为全面控制比伐芦定有关物质提供依据。方法 采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）对11个杂质进行分离分析;采用亲水色谱法（HILIC-HPLC）对4个工艺杂质进行控制;采用分子排阻色谱法（SEC-HPLC）对聚合物进行测定。结果 建立的RP-HPLC方法可将主成分及11个杂质有效分离,11个杂质的校正因子均在0.8～1.2之间,比伐芦定检出浓度为0.1μg·ml-1,检测限为0.004%;建立的HILIC-HPLC方法可对主成分及4个工艺杂质有效分离,比伐芦定检出浓度为0.3μg·mL-1,检测限为0.01%;在SEC-HPLC条件下聚合物和比伐芦定依次出峰,两者分离度为2.9,比伐芦定检出浓度为6ng·mL-1,检测限为0.0006%。采用主成分自身对照法计算7家企业15批样品中15种已知杂质及聚合物,不同企业的产品杂质含量与其生产工艺存在一定的相关性。结论 三种不同原理的方法均专属性良好,灵敏度高,耐用性好,结果可靠,可用于比伐芦定有关物质的质量控制。     

低分子肝素钙与小剂量尿激酶治疗进展性脑卒中的比较分析

目的探讨低分子肝素钙与小剂量尿激酶治疗进展性脑卒中的疗效。方法对医院收治的进展性脑卒中患者的临床资料进行分析汇总,依据治疗方式不同分为观察组(低分子肝素钙治疗组)30例和对照组(小剂量尿激酶治疗组)30例。结果观察组临床治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低分子肝素钙治疗进展性脑卒中患者疗效明显,预后良好,值得临床借鉴应用。     

尿激酶早期溶栓联合低分子肝素治疗急性心肌梗死的疗效研究

目的探讨尿激酶早期溶栓联合低分子肝素治疗急性心肌梗死的临床疗效。方法对我院收治的270例急性心肌梗死进行分析,随机分为观察组136例采用溶栓治疗,对照组134例采用常规治疗。结果观察组再通率为88.2%,对照组再通率为61.9%,两组有差异显著性(P<0.05),观察组6h内再通率明显优于对照组(P<0.05)。观察组不良反应发生率高于对照组,有统计学差异(P<0.05)。结论尿激酶联合低分子肝素是治疗急性心肌梗死的有效药物,疗效显著,能明显改善患者的预后,值得在临床使用。     

尿激酶、低分子肝素和华法林的不同联合方案治疗肺栓塞的临床研究

目的观察分别联合使用低分子肝素、尿激酶或华法林治疗肺栓塞（PE）的临床疗效和安全性。方法 63例患者随机分为A组、B组和C组各21例,A组联合使用尿激酶、低分子肝素和华法林,B组仅联合使用尿激酶和华法林,C组仅联合使用低分子肝素和华法林。观察3组临床疗效。结果 A组总有效率为90.48%分别高于B组和C组的71.43%和66.67%,差异有统计学意义（P〈0.05）。胸腔内注药24h后3组红细胞计数、血小板计数、纤维蛋白原、凝血酶原时间和凝血酶时间比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。3组患者均对肝素和尿激酶治疗耐受良好,无胸痛和畏寒发热发生,均未增加胸腔内出血的发生率。结论联合使用尿激酶、低分子肝素和华法林治疗PE疗效显著,安全性好,值得临床推广应用。     

低分子肝素相对分子质量测定方法

相对分子质量是低分子肝素的重要质量控制指标,本文对5种常用的LMWH相对分子质量测定方法(高效分子排阻色谱法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、光散射法、质谱法、核磁共振法)进行综述。5种方法特点各异,可以根据实验室条件和对相对分子质量测量的要求选择。     

注射用头孢美唑钠高分子聚合物检查方法的建立与验证

目的：建立注射用头孢美唑钠中高分子聚合物分离分析的质量控制方法。方法：采用分子排阻色谱法,色谱柱为Sephadex G-10（300mm×10mm,40—120μm）,流动相A为0．075mol／L磷酸盐缓冲液（pH7．0）,流动相B为水;流速为1．5ml／min,检测波长为280nm,进样量为100μl,采用自身对照外标法定量。结果：在2．897～144．9μg／ml范围内样品浓度与聚合物峰面积呈良好线性关系（r=1．0000）,检出限29ng。结论：该方法快速、简便、准确、重复性好,适用于注射头孢美唑钠中高分子聚合物的分析。     

治疗性单克隆抗体类药物分析技术及其应用

治疗性单克隆抗体(单抗)类药物是高度均一的生物大分子,抗原表位、理化性质和生物活性等方面的均一性程度高,能够通过特异性地与靶标分子结合发挥治疗作用.单抗类药物治疗过程中不良反应发生率低、患者耐受性高.单抗类药物是生物药物领域的热点和焦点,已成为现代生物制药行业中占比最大、增长最快的细分领域.根据生产技术和工艺的不同,单...     

分子排阻色谱法测定注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠中的高分子聚合物

目的建立注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠中高分子聚合物的测定方法。方法采用Sephadex G-10凝胶色谱柱(15.0mm×300mm),以pH 7.0的0.05mol.L 1磷酸盐缓冲液[0.05mol.L-1磷酸氢二钠溶液-0.05mol.L-1磷酸二氢钠溶液(61∶39)]为流动相A,以水为流动相B,流速为1.2 mL.min 1,检测波长为254 nm。结果头孢哌酮高分子聚合物与头孢哌酮药物单体能较好分离,头孢哌酮自身对照的线性范围为5.01～250.71μg.mL-1(r=0.9999);在10.13～30.24 mg.mL 1内,供试品溶液浓度与聚合物峰面积呈良好线性关系(r=0.9999);定量限为0.14μg;方法精密度良好(RSD=0.50%,n=5);样品测定重复性与重现性好(RSD=0.82%,n=5;RSD=3.4%,n=3)。结论所建方法操作简便、结果可靠,可用于注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠中高分子聚合物的检测。     

东莨菪碱及其制剂含量测定方法的研究进展

东莨菪碱作为一种托品烷类生物碱,在临床上可用作麻醉前给药、晕动症的治疗。目前市场上的剂型有片剂、注射剂、贴剂、胶囊剂等,针对不同剂型对其含量测定也有不同方法。本文阐述了几种东莨菪碱不同剂型的含量测定方法并加以比较,其中HPLC法分离效率高,专属性好,灵敏度高,是目前最为常用的一种方法。     

注射用头孢唑肟钠的高分子聚合物检查方法的建立与验证

目的建立对头孢唑肟钠中高分子聚合物进行分离分析的质量控制方法,并对其进行验证。方法采用凝胶色谱法,色谱柱为SephadexG10,流动相A为0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0),流动相B为水;流速为每分钟0.8ml;检测波长为254nm,进样量为200μl,自身对照外标法定量。结果验证了头孢唑肟钠高分子聚合物检测方法,采用该方法对3批样品中高聚物含量的进行检测的结果均小于0.1%。结论该方法能够较好的分离头孢唑肟钠和高聚物,可用于注射用头孢唑肟钠中高分子聚合物的检验。     

测定低分子量透明质酸相对分子质量的3种方法比较

目的比较3种测定低分子量透明质酸(LMWHA)相对分子质量(Mr)方法。方法分别采用特性黏度法、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法及多角度激光散射仪结合凝胶渗透色谱(GPC/MALLS)法测定LMWHA的Mr,并对所得结果进行对比分析。结果对于Mr介于10 000~100 000范围内的LMWHA,特性黏度法测得的Mr值与GPC/MALLS法测得的Mr值基本相同,而HPGPC法由于所用标准Mr对照品结构上的差异,测得的Mr与其它两种方法测得的值差异较大。结论在一定Mr范围内,特性黏度法和GPC/MALLS法均可用于测定LMWHA的Mr。     

毛细管电泳法对肝素钠注射液中杂质的测定

目的:在2008年国家食品药品监督管理局颁布的毛细管电泳法分析肝素钠杂质的补充检验方法的基础上优化毛细管电泳色谱条件,对全国评价性抽验肝素钠注射液样品进行测定。方法:采用毛细管电泳法,缓冲液为pH 3.0的400 mmol.L-1三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液;分离电压为-25 kV;检测波长为200 nm;进样压力3.447 kPa,进样时间为4 s;毛细管温度:25℃。结果:肝素主峰与多硫酸软骨素峰峰之间分离度为1.0,与硫酸皮肤素之间分离度为2.0,10批供试品的杂质含量结果与离子色谱法结果基本一致。结论:优化后的色谱条件使肝素与硫酸皮肤素、多硫酸软骨素的分离度增加,该方法使肝素钠样品中的杂质定性、定量更为准确。     

Sweeping under controlled electroosmotic flow and micellar electrokinetic chromatography for on-line concentration and determination of trace phlorizin and quercitrin in urine samples

A novel sweeping under controlled electroosmotic flow scheme was developed for preconcentration and determination of neutral compounds by micellar electrokinetic chromatography (MEKC). An anionic surfactant, sodium dodecyl sulfate (SDS), was added into the buffer for sweeping and separation. By controlled electroosmotic flow (EOF) equal to the counter electrophoretic flow, the surfactants were at an immobile state in capillary. The neutral analytes with sample solution was injected electroosmotically into capillary and swept by SDS micelle for essentially an unlimited volume. The injected sample plug lengths for phlorizin and quercitrin under 18 kV for 70 min were experimentally estimated as 1532 cm, corresponding to 51-fold the effective capillary length. The sweeping under controlled EOF scheme resulted in increased detection factors for phlorizin and quercitrin of 2.3 × 10⁴ and 2.1 × 10⁴ using 70 min injection relative to a traditional pressure injection. The proposed method has been adopted to analyze trace phlorizin and quercitrin in urine samples successfully.     

胸腺肽高分子量物质检测方法的优化

目的优化现行胸腺肽质量标准中控制高分子量(Mw)物质的检测方法,解决该方法存在的对照品Mw大小与洗脱时间矛盾的问题。方法采用高效液相凝胶过滤色谱法(HPGFC),改变流动相的组成,建立高Mw物质的分析方法,并进行方法学验证。结果确定三氟乙酸-乙腈-水(0.05∶45∶55)作为流动相的HPGFC分析方法,在该洗脱条件下,对照品的洗脱顺序符合Mw变化的规律,经过方法学验证,改进后的方法更适于检测高Mw物质的含量。结论优化后的高Mw物质检测方法可用于胸腺肽制剂的质量控制,并为其他生化制剂高Mw蛋白检测提供了方法学参考。