离子交换层析结合分子排阻色谱法测定注射用尿激酶中分子组分比

目的:建立测定注射用尿激酶分子组分比的离子交换层析样品前处理方法结合分子排阻色谱法的分析方法,以解决长期以来制剂标准中无法控制分子组分比的难题,并对国内6家企业的产品质量进行了考察。方法:根据尿激酶与人血白蛋白等电点的差异,通过离子交换层析去除样品中人血白蛋白辅料的干扰,采用分子排阻色谱法测定。采用TSKgel G2000SWXL色谱柱(300 mm×7.8 mm, 5μm),流动相为0.1 mol·L^-1磷酸二氢钠缓冲液(pH 3.0),流速为0.5 mL·min^-1,柱温为35℃,检测波长为280 nm,进样量为50μL。结果:尿激酶质量浓度在0.05～5.1 mg·mL^-1范围内,高分子量尿激酶与低分子量尿激酶线性关系均良好(r≥0.998 0);检测限分别为1.5μg·mL^-1与5.1μg·mL^-1,定量限分别为5.1μg·mL^-1与16.9μg·mL^-1;精密度、重复性、24 h稳定性试验的RSD均<4.0%;方法的回...     

高效毛细管电泳法测定育亨宾树皮中育亨宾的含量

目的建立高效毛细管电泳(HPCE)测定育亨宾树皮中育亨宾含量的方法。方法运用高效毛细管电泳方法,熔融石英毛细管(75μmID×50cm),缓冲液为20mmol·L-1磷酸盐缓冲液(PH=3.0),检测波长:270nm,分离电压:15kV,柱温25℃,用0.45μm微孔滤膜过滤后进样,压力进样:50mbar×5s。结果方法最低检测浓度为0.1μg·mL-1,线性范围1～200μg·mL-1,r=0.9991,线性关系良好。精密度RSD为1.3%,回收率为98.4%。结论本法简单、灵敏经济,可作为育亨宾树皮中育亨宾的含量的测定。     

高效分子排阻色谱法测定头孢克肟颗粒中聚合物的含量

目的建立高效分子排阻色谱法(HPSEC)测定头孢克肟颗粒中高分子聚合物的方法。方法采用HPLC,色谱柱为TSKgel G2000 SWXL(7.8 mm×300 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液-乙腈(95∶5)为流动相,流速为0.6 mL·min^-1,柱温为20℃,检测波长为254 nm,进样体积为20μL。结果高分子聚合物峰与头孢克肟峰能有效分离,辅料无干扰,头孢克肟主峰的线性范围为0.153~20.635μg·mL^-1(r=0.9999),检测限为0.05μg·mL^-1,定量限为0.15μg·mL^-1;方法中样品测定的重复性(RSD=0.5%)与精密度(RSD=1.4%)良好;供试品溶液和对照品溶液,25℃条件下24 h保持稳定。微调方法中的流速、柱温和流动相比例,对检测结果无影响。结论此方法简便,耐用性好,灵敏度高,重复性好,可用于头孢克肟颗粒中高分子聚合物的含量检测。     

注射用头孢孟多酯钠聚合物测定方法研究

目的：建立分子排阻色谱法测定注射用头孢孟多酯钠高分子聚合物。方法：色谱柱为SephadexG-10柱,内径1.2mm,柱长40cm,流动相A：磷酸盐缓冲液（pH值7.0）,流动相B：0.01%十二烷基硫酸钠,流速：1ml/min,检测波长：254nm,进样量：200μl。结果：头孢孟多酯钠在22.6～226.0μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9999）。结论：本测定方法简便,结果准确,重复性好,可有效测定注射用头孢孟多酯钠中头孢孟多聚合物的量。     

分子排阻色谱法测定水解蛋白注射液中高分子物质

目的:采用分子排阻色谱法测定水解蛋白注射液中小分子肽的分子量。方法:采用TSK-GEL G2000SWXL色谱柱(7.8mm×300 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液(pH 6.8)(含0.1 mol.L-1Na2SO4与0.05%NaN3)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长280 nm。结果:水解蛋白注射液中分子量大于胰岛素的高分子物质含量均在5%以下。结论:该方法简单,重现性好,可以作为控制水解蛋白注射液中高分子物质的方法。     

胶束电动毛细管色谱法测定头孢克肟的含量

目的建立测定头孢克肟含量的胶束电动毛细管色谱方法。方法采用非涂渍石英毛细管51cm×75μm;运行缓冲液为含100mmol·L^-1十二烷基硫酸钠的磷酸盐缓冲液（70mmol·L^-1,pH7.0）;压力进样5s,分离电压15kV,柱温25℃,检测波长254nm,选择乙酰苯胺为内标。结果头孢克肟在6.08～777.98μg·mL^-1内,线性关系良好（r=0.9993）。头孢克肟的最低检测限为1.03μg·mL^-1,最低定量限为3.43μg·mL^-1;含量测定结果与HPLC所得结果没有显著性差异。结论胶束电动毛细管色谱法分析头孢克肟的含量,方法准确、简便、灵敏,与HPLC具有互补性。     

高效分子排阻色谱法同时测定白及多糖分子量和含量

目的:建立同时测定白及多糖分子量和含量的高效分子排阻色谱分析方法。方法:采用TSK-gel G4000 PWXL色谱柱(10μm,7.8 mm×300 mm),流动相为纯水,流速0.6 mL·min-1,柱温30℃,示差折光检测器检测。结果:白及多糖重均分子量的线性范围为24.17～178.0 k(R2=0.9943),含量测定线性范围为8.22～20.55.mg·mL-1(R2=0.9992),分子量、含量精密度试验RSD分别为0.11%和0.96%(n=6),重复性RSD为0.28%和1.1%(n=5)。结论:该方法简便快速,结果准确,重复性好,可作为白及多糖分子量和含量测定的有效方法。     

低分子肝素分子量测定方法介绍

低分子肝素（LMWH）的分子量测定有多种方法，每种方法都有其优点和缺点。简要综述了LMWH分子星测定方法，主要介绍粘度法、高效排阻色谱法和梯度聚丙烯醉胺凝胶电泳法。     

分子排阻色谱法测定头孢地尼胶囊中的高分子杂质

目的:建立测定头孢地尼胶囊中高分子杂质的方法。方法:采用分子排阻色谱法。色谱柱为依利特SephadexG-10,以0.025mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH7.0)为流动相A(供试品测定),以水为流动相B(对照品测定),流速为1.5mL·min-1,检测波长为254nm。结果:头孢地尼与高分子杂质分离度良好,头孢地尼检测浓度线性范围为3.95～11.85μg·mL-1(r=0.9995),精密度试验RSD=1.67%,检测限为9.9ng。结论:该方法简单、快速、准确、重复性好,可用于头孢地尼胶囊中高分子杂质的检测。     

胶束毛细管电泳法测定天山花楸果实中苦杏仁苷的含量

目的建立了一种简单、快速分析天山花楸果实中苦杏仁苷含量测定的胶束毛细管电泳法(MEKC)。方法采用熔融石英毛细管(58.5 cm×75μm,有效长度为48.5 cm),缓冲体系为70 mmol.L-1的硼砂-200 mmol.L-1的十二烷基硫酸钠(pH 9.50);分离电压10 kV(+)→(-);电泳时间40 min;电泳温度25℃;压力进样0.5 psi×10 s;柱上检测UV 215 nm(二极管阵列检测器)。结果苦杏仁苷在20 min内得到较好分离,在25~225μg.mL-1范围内与峰面积线性关系良好,线性方程为:Y=776.66X-6 637.9(r=0.999 7),样品平均回收率为100.8%,RSD值为2.8%。结论该方法简单、快速,结果准确可靠,可用于天山花楸中氰苷类成分测定及质量控制。     

ICP-MS法同时测定葡萄糖酸钙锌口服溶液中钙离子和锌离子含量

目的:建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定葡萄糖酸钙锌口服溶液中钙离子和锌离子含量.方法:用微波消解对样品前处理,以45 Sc,73 Ge作为内标,采用ICP-MS方法测定,流量模式为碰撞池模式(KED),辅助气流速:0.8 L·min-1,载气流速:1.08 L·min-1,碰撞气流速:4.95 mL·...     

防己饮片中生物碱成分的含量测定方法研究

目的:建立高效液相色谱法同时测定防己中木兰花碱、汉防己丙素、防己诺林碱和粉防己碱含量的方法.方法:采用Diamonsil Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.3％磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长282 nm,柱温30.0℃.结果:木兰花碱、汉防己丙素...     

液相色谱串联质谱法测定人血浆中替考拉宁的血药浓度

目的:建立测定人血浆中替考拉宁浓度的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定方法。方法:选用Welch Ultimate XB-C₁₈(2.1 mm×50 mm,5.0 μm)色谱柱,以达托霉素为内标,以含0.1%甲酸的水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱温为40 ℃。利用乙腈进行沉淀蛋白样品前处理,采用电喷雾离子化多反应监测正离子模式,测定替考拉宁A_2-1、A_2-2、A_2-3、A_2-4和A_2-5 5种主要成分的总浓度。结果:替考拉宁的总浓度线性范围为1~60 μg·mL^-1,定量下限为1 μg·mL^-1,日内和日间精密度RSD均小于15%,提取回收率80.04%~96.02%,内标归一化基质效应为90.12%~104.04%。研究测定了16例给予替考拉宁后患者的血药谷浓度,浓度范围从定量下限至31.2 μg·mL^-1,达标率56.25%,患者个体差异大且初始达标率低。结论:该研究建立了一种快速、简便、稳定的LC-MS/MS测定人血浆中替考拉宁血药浓度的方法,具有较高准确度、精密度和回收率,为临床给药方案的优化奠定基础。     

骨化三醇前体对照品的制备及其在软胶囊中检查方法的研究

目的:制备骨化三醇前体对照品,进行方法研究,并建立高效液相色谱法测定骨化三醇软胶囊中骨化三醇前体的含量.方法:采用C8色谱柱,以乙腈-Tris缓冲液(配制1 g·L-1的3-羟甲基氨基甲烷溶液,用磷酸调节pH为7.0～7.5)为流动相,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长265 nm,柱温40℃,进样体积20μ...     

GC-MS/MS法测定苯甲酸阿格列汀中基因毒杂质2-氰基氯苄和邻二溴甲基苯腈的含量

目的:建立气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)同时测定苯甲酸阿格列汀中基因毒杂质邻二溴甲基苯腈和2-氰基氯苄的含量.方法:采用6％氰丙基苯-94％二甲基硅氧烷(Agilent DB-624,30 m×0.32 mm,1.8μm)色谱柱,程序升温;进样口温度:260℃,进样体积1μL,线速度,5:1分流比进样.质谱条...     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中地佐辛和罗哌卡因的浓度

目的建立一种人血浆中地佐辛和罗哌卡因浓度测定的UPLC-MS/MS法。方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白后提取处理,以利多卡因为内标。色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse Plus C₁₈;流动相:0.1%甲酸铵溶液-甲醇(75∶25,用甲酸调节pH至4.5),流速:0.2 mL·min^-1,柱温:35℃,进样量:2μL。在正离子模式下,以多反应监测方式进行定量测定。对30例住院患者的血浆进行血药浓度测定结果进行分析。结果血浆中地佐辛与罗哌卡因分别在0.23~90.48 ng·mL^-1和1.23~490.34 ng·mL^-1内,线性关系良好,定量下限分别为0.23和1.23 ng·mL^-1,提取回收率分别为90.11%~94.58%和94.81%~101.33%;日内和日间精密度的RSD均小于15%。30例患者的地佐辛血药浓度为0.57~3.79 ng·mL^-1,罗哌卡因血药浓度为2.30~14.03 ng·mL^-1。结论本检测方法准确可靠,简便快速且重复性好、灵敏度高,适用于人血浆中地佐辛和罗哌卡因浓度的测定。     

气相色谱法同时测定苯酰甲硝唑原料药中乙醇甲苯和吡啶残留量

目的建立苯酰甲硝唑原料药中乙醇、甲苯、吡啶残留量的测定方法。方法采用直接进样法,分析柱为InertCap FFAP毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm);程序升温:起始温度为60℃,维持1 min,以4℃·min^-1升温至100℃,维持1 min,再以10℃·min^-1升温至200℃;采用氢火焰离子化检测器。以外标法计算苯酰甲硝唑中各残留溶剂的量。结果混合对照品溶液和供试品溶液在室温放置8 h稳定性良好;乙醇、甲苯、吡啶的检测限相当于样品浓度分别为7.42,2.54,5.52μg·g^-1,定量限相当于样品浓度分别为24.74,8.46,18.39μg·g^-1;当乙醇浓度在50.33~1006.60μg·mL^-1范围内,甲苯浓度在8.34~166.88μg·mL^-1范围内,吡啶浓度在2.25~45.00μg·mL^-1范围内时,乙醇、甲苯、吡啶的浓度与峰面积线性关系良好;乙醇、甲苯、吡啶的回收率分别在92.45%~99.67%,91.92%~99.23%,92.22%~97.61%范围内。结论该方法专属性好、灵敏度高,能有效控制苯酰甲硝唑中乙醇、甲苯、吡啶的残留量。     

Q-Orbitrap高分辨质谱测定盐酸法舒地尔中的基因毒性杂质5-异喹啉磺酸甲酯和5-异喹啉磺酸乙酯

目的:建立HPLC-Q-Orbitrap方法测定盐酸法舒地尔中的基因毒性杂质5-异喹啉磺酸甲酯和5-异喹啉磺酸乙酯。方法:采用Thermo Scientific Hypersil GOLD C8色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.9 mL·min-1,柱温30℃;以Q-Orbitrap高分辨质谱检测,采用ESI离子源,正离子模式,Full MS-SIM模式扫描,扫描范围m/z 223～239。采用提取离子流色谱定量,分别选择m/z224.037 59(质量偏差<5×10-6)和m/z 238.053 24(质量偏差<5×10-6)作为5-异喹啉磺酸甲酯和5-异喹啉磺酸乙酯的定量离子。结果:5-异喹啉磺酸甲酯和5-异喹啉磺酸乙酯质量浓度在1.0～30 ng·m L-1范围内线性关系良好(r分别为0.998 3、0.999 0);检测下限分别为0.66、0.30μg·g-1,定量下限分别为2.0、1.0μg·g-1;加样回收率(n=6)分别为95.4%、97.1%,RSD分别为2.1%、1.9%。6批样...     

伏立康唑血药浓度监测及其在血液系统肿瘤患者用药指导中的应用

目的:建立一种快速、灵敏、准确、稳定的测定人血清中伏立康唑药物浓度的方法,用于伏立康唑的治疗药物监测.方法:采用RP-HPLC法,色谱柱为Inertsil ODS-3,流动相为乙腈:冰醋酸-三乙胺缓冲液(pH=6,45:55,v/v),流速为1 mL·min-1,检测波长255 nm.结果:伏立康唑在0.097～23....     

肉苁蓉与沙苁蓉中6种苯乙醇苷类成分的UPLC含量测定及化学计量学评价

目的:建立肉苁蓉、管花肉苁蓉及沙苁蓉中松果菊苷、管花苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、金石蚕苷和2'-乙酰金石蚕苷的UPLC含量测定方法,并比较其含量的异同.方法:采用Waters HSST3(100 mmx 2.1 mm,1.8 μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1％甲酸水,梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,检测波...