羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞生物学行为的影响

目的 探讨羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌（NSCLC）NCI-H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 将体外培养的NCI-H1299细胞分为正常对照（NC）组（未处理）、低剂量组（12.5μmol/L羽扇豆醇）、中剂量组（25μmol/L羽扇豆醇）、高剂量组（50μmol/L羽扇豆醇）、miR-NC组（转染miR-NC）、miR-100-5p组（转染miR-100-5p）、anti-miR-NC+高剂量组（转染anti-miR-NC后用50μmol/L羽扇豆醇处理）、anti-miR-100-5p+高剂量组（转染anti-miR-100-5p后用50μmol/L羽扇豆醇处理）。CCK-8和克隆形成实验检测NCI-H1299细胞增殖;Transwell法检测NCI-H1299细胞迁移和侵袭。荧光定量PCR(q PCR)检测miR-100-5p表达;Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP9蛋白的表达。结果 与NC组比较,低、中、高剂量组NCI-H1299细胞活力、细胞克隆数、迁移数、侵袭数、CyclinD1、...     

藁本内酯通过调控miR-133b-5p表达对脂多糖所致心肌损伤的保护作用

目的： 探讨藁本内酯（LIG）对脂多糖（LPS）所致心肌损伤的影响及分子机制。方法： 用质量浓度为10 mg·L^-1的LPS处理心肌细胞,记为LPS组,正常培养的细胞为对照（Con）组;用浓度分别为10,20,40 μmol·L^-1的藁本内酯处理心肌细胞后再用10 mg·L^-1的LPS处理,作为藁本内酯低、中、高浓度组;将miR-NC、miR-133b-5p转染至心肌细胞中再用10 mg·L^-1的LPS处理,记为LPS+miR-NC组、LPS+miR-133b-5p组;将anti-miR-NC、anti-miR-133b-5p转染至心肌细胞中再用40 μmol·L^-1的藁本内酯、10 mg·L^-1的LPS处理,记为LPS+LIG+anti-miR-NC组、LPS+LIG+anti-miR-133b-5p组。酶联免疫吸附法（ELISA）法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹（Western blot）法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达;实时荧光定量PCR （RT-qPCR）检测miR-133b-5p表达水平。结果： 藁本内酯低、中、高浓度处理后,LPS诱导的心肌细胞中TNF-α、IL-6水平显著降低,细胞凋亡率显著降低,Bcl-2表达水平显著升高,Bax表达水平显著降低,miR-133b-5p表达水平显著升高,且呈浓度依赖性（P<0.05）。miR-133b-5p过表达可抑制LPS诱导的心肌细胞中TNF-α、IL-6水平和细胞凋亡。抑制miR-133b-5p表达逆转了藁本内酯对LPS所致的心肌细胞损伤的保护作用。结论： 藁本内酯通过上调miR-133b-5p表达可抑制LPS诱导的心肌细胞凋亡和炎症反应,对LPS诱导的心肌损伤具有保护作用。     

多西他赛通过miR-144-3p对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究多西他赛通过miR-144-3p对卵巢癌细胞增殖、凋亡以及血清肿瘤标志物糖类抗原125(CA125)、附睾分泌蛋白4(HE4)水平的影响。方法 将BALB/c雌性裸小鼠随机分为对照组(腹腔注射生理盐水)、模型组(皮下接种SKOV3细胞建立裸鼠移植瘤模型)、多西他赛组(建立裸鼠移植瘤模型后腹腔注射2.5 mg·kg^-1多西他赛)。分离培养各组小鼠卵巢癌细胞。将模型组小鼠卵巢癌细胞进行转染处理,分别转染miR-NC、miR-144-3p并记为miR-NC组、miR-144-3p组;分别转染anti-miR-NC、anti-miR-144-3p后,均用多西他赛(50μmol·L^-1)处理并记为anti-miR-NC+多西他赛组、anti-miR-144-3p+多西他赛组。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测CA125、HE4水平;用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞miR-144-3p表达水平。结果 对照组、模型组、多西他赛组、miR-NC组、miR-14...     

长链非编码 RNA脑源性神经营养因子反义 RNA靶向微小 RNA-495-3p调控脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡和炎症反应

目的探讨长链非编码 RNA(lncRNA)脑源性神经营养因子反义 RNA(BDNF-AS)对脂多糖( LPS)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法该研究起止时间为 2018年 12月至 2019年 12月。用 1 mg/L的 LPS处理大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383细胞作为 LPS组;正常培养的细胞作为 Con组。将 BDNF-AS小分子干扰 RNA(si-BDNF-AS)及其阴性对照( si-NC)、微小 RNA(miR)-495-3p及其阴性对照( miR-NC)转染至 NR8383细胞中再用 1 mg/L的 LPS处理,记为 LPS+siBDNF-AS组、 LPS+si-NC组、 LPS+miR-495-3p组、 LPS+miR-NC组;将 si-BDNF-AS分别与 anti-miR-NC、anti-miR-495-3p共转染至 NR8383细胞中再用 1 mg/L的 LPS处理,记为 LPS+si-BDNF-AS+anti-miR-NC组、 LPS+si-BDNF-AS+anti-miR-495-3p组。实时荧光定量 PCR检测 lncRNA BDNF-AS和 miR-495-3p的表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素 -1β(IL-1β)肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X蛋白( Bax)表、达;荧光素酶报告实验检测 BDNF-AS对 miR-495-3p的靶向关系。结果 LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞中 BDNF-AS高表达［( 1.00±0.06)比( 3.41±0.31)］,miR-495-3p低表达［( 1.02±0.07)比( 0.47±0.04)］IL-1β［( 22.14±2.25)ng/L比( 513.20±41.22)ng/ L］、 TNF-α［(184.33±18.65)ng/L比(1 125.65±110.36)ng/L］水平升高,细胞凋亡率［(,8.11±0.81)%比( 36.22±3.21)%］升高, Bax表达水平升高, Bcl-2表达水平降低( P<0.05)。抑制 BDNF-AS表达或过表达 miR-495-3p后, IL-1β［( 526.14±46.87)ng/L比     

人参皂苷通过调控miR-654对脂多糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 探讨人参皂苷对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡、氧化应激的影响,及其对miR-654的调控作用。方法 用LPS诱导肾小管上皮细胞(HK-2细胞)建立脓毒症所致急性肾损伤模型。实验分组：空白组(正常培养的细胞)、模型组(5μg·mL^-1 LPS干预24 h)和低、中、高剂量实验组(1,2和3μg·mL^-1人参皂苷+5μg·mL^-1 LPS共同干预24 h)、miR-NC组(转染miR-NC后,用5μg·mL^-1 LPS干预24 h)、miR-654组(转染miR-654 mimics后,用5μg·mL^-1 LPS干预24 h)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC后,用2μg·mL^-1人参皂苷+5μg·mL^-1 LPS共同干预24 h)、anti-miR-654组(转染anti-miR-654后,用2μg·mL^-1人参皂苷+5μg·mL^-1 LPS共同干预2...     

山楂多糖提取物上调 miR-146a-5p抑制 Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌细胞增殖和凋亡

目的 探讨山楂多糖提取物对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法 用浓度分别为200、400、800μg/mL的山楂多糖提取物处理AGS细胞,作为不同浓度山楂多糖提取物组;正常培养的细胞作为对照(NC)组;用800μg/mL的甘露醇处理作等渗对照,记为800μg/mL甘露醇组.将miR-NC、miR-146a-5p转染至AGS细胞中记为miR-NC组、miR-146a-5p组;将anti-miR-NC、anti-miR-146a-5p转染至AGS细胞中再用浓度为800μg/mL的山楂多糖提取物处理,记为anti-miR-NC+山楂多糖提取物组、anti-miR-146a-5p+山楂多糖提取物组.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-146a-5p表达水平.结果 与对照组(100.10±10.02)％相比,200、400、800μg/mL山楂多糖提取物组胃癌细胞AGS的增殖率(85.12±8.51)％、(68.22±6.82)％和(42.11±4.21)％降低(F=31.314,P<0.05).不同浓度山楂多糖提取物处理的胃癌细胞AGS中细胞增殖率降低,细胞凋亡率升高,miR-146a-5p表达水平升高(P<0.05).高表达miR-146a-5p,细胞增殖率降低,细胞凋亡率升高(P<0.05).低表达miR-146a-5p部分逆转了山楂多糖提取物对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响.山楂多糖提取物处理的胃癌细胞AGS中β-catenin表达水平降低,低表达miR-146a-5p逆转了山楂多糖提取物对β-catenin表达的抑制作用.结论 山楂多糖提取物可抑制胃癌细胞AGS增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与miR-146a-5p和Wnt/β-catenin信号通路有关.     

miR-125b-5p对过氧化氢诱导的视网膜神经节细胞损伤的影响及其机制研究

目的研究miR-125b-5p对H₂O₂诱导的小鼠视网膜神经节细胞(RGCs)损伤的影响及潜在的机制。方法将RGC-5分为12组:对照组(细胞未处理组)、H₂O₂组(200μmol·L^-1H₂O₂处理12 h建立氧化损伤模型)、miRNC组、miR-125-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-125-5p组、H₂O₂+miR-NC组、H₂O₂+miR-125b-5p组、H₂O₂+si-NC组、H₂O₂+si-LCN2组、H₂O₂+miR-125b-5p+pcD NA组和H₂O₂+miR-125b-5p+pcD NA-LCN2组。H₂O     

舒芬太尼通过miR-365-3p/AKT1抑制胃癌细胞迁移、侵袭的研究

摘要：目的:探讨舒芬太尼对微小RNA-365-3p（miR-365-3p）/蛋白激酶B-α（AKT1）表达及其对胃癌细胞迁移、侵袭的影响。方法:采用不同浓度的舒芬太尼(终浓度0.5,5,50,500 nmol·L-1)分别处理胃癌细胞48 h,Transwell实验检测胃癌细胞迁移及侵袭能力,实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测胃癌细胞中miR-365-3p的表达。分别将miR-NC（miR-NC组）、miR-365-3p mimics（miR-365-3p组）、anti-miR-NC（anti-miR-NC组）、anti-miR-365-3p（anti-miR-365-3p组）转染至胃癌细胞,检测胃癌细胞迁移及侵袭能力变化。靶基因网站预测miR-365-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因验证miR-365-3p与AKT1的靶基因关系。将anti-miR-365-3p、pcDNA-AKT1及其阴性对照分别转染至胃癌细胞12 h后用舒芬太尼处理48 h,分别为舒芬太尼+anti-miR-NC组、舒芬太尼+anti-miR-365-3p组、舒芬太尼+pcDNA3.1组、舒芬太尼+pcDNA-AKT1组,检测各组胃癌细胞迁移及侵袭能力变化,蛋白免疫印迹（Western Blot）检测细胞中钙黏附蛋白E（E-cadherin）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、p-AKT1蛋白表达。结果:舒芬太尼可抑制胃癌细胞迁移、侵袭及MMP-2表达,促进miR-365-3p、E-cadherin表达;miR-365-3p过表达可通过上调E-cadherin表达及下调MMP-2的表达进而抑制胃癌细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验证明AKT1是miR-365-3p的靶基因,miR-365-3p可负性调控靶基因AKT1的表达;抑制miR-365-3p表达或AKT1过表达可逆转舒芬太尼对胃癌细胞迁移、侵袭的抑制作用。结论:舒芬太尼可通过上调miR-365-3p表达而抑制AKT1表达进而抑制胃癌细胞迁移及侵袭。     

miR-130a-3p下调STAT3对恶性黑素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的探讨miR-130a-3p对黑素瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤细胞A2058、WM239和正常人黑色素细胞HEMn中miR-130a-3p和STAT3 mRNA的表达水平;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-130a-3p组(转染miR-130a-3p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-130a-3p组(转染anti-miR-130a-3p)、miR-130a-3p+pcDNA3.1组(共转染miR-130a-3p和pcDNA3.1)、miR-130a-3p+pcDNA3.1-STAT3组(共转染miR-130a-3p和pcDNA3.1-STAT3)、miR-NC+WT-STAT3组(共转染miR-NC和WT-STAT3)、miR-NC+MUT-STAT3组(共转染miR-NC和MUT-STAT3)、miR-130a-3p+WT-STAT3组(共转染miR-130a-3p和WT-STAT3)、miR-130a-3p+MUT-STAT...     

miR-502增强肺癌对替莫唑胺化疗敏感性的机制研究

摘要：目的:探讨miR-502对替莫唑胺化疗敏感性的影响及其作用机制。方法:用200μmol·L-1的替莫唑胺处理细胞A549作为替莫唑胺组,不作任何处理的细胞作为对照（Con）组;将miR-NC、miR-502、anti-miR-NC、anti-miR-502质粒分别转染至A549细胞中,分别记为miR-NC组、miR-502组、anti-miR-NC组、anti-miR-502组; miR-502转染至A549细胞后再用200μmol·L-1的替莫唑胺处理作为替莫唑胺+miR-502组;将miR-502质粒分别与pcDNA 3.1、pcDNA 3.1-ERCC1共转染至A549细胞中再用200μmol·L-1的替莫唑胺处理,分别记为替莫唑胺+miR-502+pcDNA 3.1组、替莫唑胺+miR-502+pcDNA3.1-ERCC1组;转染均采用脂质体法。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-502表达水平;蛋白质印迹（Western Blot）法检测p21、细胞周期素D1（Cyclin D1）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、切除修复交叉互补基因1（ERCC1）表达;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测miR-502和ERCC1的靶向关系。结果:与人胚肺成纤维细胞MRC5相比,肺癌细胞A549中miR-502表达水平显著降低。过表达miR-502、替莫唑胺处理以及替莫唑胺处理同时过表达miR-502,肺癌细胞A549中p21、Bax表达水平均显著升高,Cyclin D1、Bcl-2表达水平均显著降低,细胞活性均显著降低,细胞凋亡率均显著升高（P<0.05）。结论:过表达miR-502和替莫唑胺均可抑制细胞A549增殖,促进细胞凋亡,过表达miR-502可增强替莫唑胺对细胞A549增殖抑制和凋亡促进作用,其机制可能与ERCC1有关,将可为提高肺癌化疗效果提供新途径。     

综合治疗不射精症临床探讨

目的探讨不射精症的诊断和治疗方法,提高不射精症的诊治水平。方法回顾分析不射精症85例,并结合文献对其发病原因、诊断和治疗进行讨论。结果对85例不射精症患者根据病因不同分别选择心理疏导,药物和物理治疗,治愈42例(49.5%),好转28例(32.9%),总有效率82.4%。结论对不射精症应根据不同病因选择不同的治疗方法,绝大多数特别是功能性不射精症是可以治愈的。     

通络滴丸的质量控制研究

目的:建立通络滴丸的质量控制方法.方法:采用薄层色谱法(TLC)鉴别成方制剂中石斛、金银花、牛膝,以高效液相色谱(HPLC)法测定毛兰素和绿原酸的含量.结果:TLC法可明显鉴别石斛、金银花、牛膝.毛兰素在4.4~66.0 μg·ml^-1内线性关系良好,r=0.999 9,加样平均回收率为93.89%,RSD为2.37%;绿原酸在36.0~540.0 μg·ml^-1内线性关系良好,r=0.999 7,加样平均回收率为94.17%,RSD为1.99%.结论:该方法操作简便,结果准确,重复性好,可用于该制剂的质量控制.     

氨基葡萄糖治疗骨关节炎的现状

骨关节炎 (OA)是临床上最常见的一种关节炎 ,目前尚无根治疗法 ,治疗主要是通过各种措施减轻疼痛和改善关节功能 ,尚不能延缓或阻断病情进展。新近临床试验结果显示硫酸氨基葡萄糖对OA不仅具有肯定的症状改善作用 ,而且能延缓OA的关节结构改变 ,可望成为第一个治疗OA的病情改善药。其总体安全性较好 ,主要是胃肠道及皮肤的不良反应 ,对血糖和动脉粥样硬化的影响尚待进一步观察。     

关于药品委托生产的思考

目的:推动药品委托生产的良性发展。方法:应用供应链委托生产理论,分析目前药品委托生产中存在的种种误区,思考并提出建议。结果与结论:药品委托生产需要前提条件,那就是委托方(制药企业)必须具有药品生产批准文号,并建立自己的核心竞争能力,才可以委托生产,其他任何非生产企业如科研机构、商业企业都不能委托生产。     

可乐定治疗原发性顽固性高血压的疗效观察

目的 观察可乐定治疗原发性顽固性高血压的疗效及安全性.方法 选择原发性顽固性高血压患者为研究对象,入选患者加服可乐定片(75 μg/次,1次/8 h,1周后未达标,改为150 μg/次,1次/8 h),观察治疗前及治疗后每周诊室坐位血压、心率,检测治疗前后动态血压(ABPM)、血常规、肝肾功能、电解质、血脂及尿常规.结果 治疗后4周,诊室血压、ABPM的收缩压和舒张压均显著低于治疗前,差异有统计学意义(P＜0.01);根据诊室坐位血压,总有效率89.4％;根据ABPM,总有效率为80.8％.治疗后可出现心率下降、口干、乏力、嗜睡、便秘等不良反应,但无需停药.结论 可乐定对原发性顽固性高血压降压疗效确切,副反应可接受.同时不影响代谢,安全性好.     

托伐普坦治疗低钠血症的药物经济学评价研究进展

目的:通过文献研究,系统总结托伐普坦治疗低钠血症的药物经济学相关研究结果,为临床应用和政府相关部门提供决策依据。方法:系统检索中国知网、万方、维普、MEDLINE、Web of Science数据库,纳入2009—2016年托伐普坦药物经济学评价相关的中英文文献,并依照Cochrane协作网推荐的评价框架进行文献质量评估。结果:纳入的6篇药物经济学文献中,其中5篇为随机双盲研究,4篇为前瞻性研究,主要研究内容涉及使用托伐普坦治疗与住院时间、节约潜在成本的关系,以及相比安慰剂的临床疗效和成本-效果分析。结论:托伐普坦治疗低钠血症的心衰患者及抗利尿激素分泌异常综合征患者,相较于传统治疗,其临床疗效好并且具有较好的成本-效果优势,且对于严重低钠血症患者,该优势更为显著。     

新生儿氨茶碱药动学研究

本文采用荧光偏振免疫分析法测定１２例新生儿血中茶碱浓度，氨茶碱剂量按５ｍｇ／ｋｇ恒速静脉滴注。经时采样，测得数据，经分析药时曲线拟合呈一室模型，平均清除速度常数０．０３７±０．００８ｈ￣（－１），平均消除半衰期１９±４ｈ，平均表观分布容积０．８２±０．１４Ｌ／ｋｇ，平均清除率３０±５ｍｌ／（ｈ·ｋｇ）。消除半衰期最大相差２．１倍，显示明显个体差异。     

阿朴菲类生物碱的药代动力学研究进展

阿朴菲类生物碱属于异喹啉类生物碱,是一类自然界中广泛存在的天然产物。现代药理学研究发现阿朴菲类生物碱具有抗氧化、抗肿瘤、抗风湿等多种药理活性,因此,阿朴菲类生物碱药代动力学的研究对其临床用药及新药物制剂开发有着重要的指导意义。简介几种常见的阿朴菲类生物碱的药代动力学研究进展,以期为阿朴菲类生物碱的深入研究提供参考。     

临床药物治疗学教学效果调查和探讨

目的：评估由临床药师承担授课任务的本科临床药物治疗学教学效果,探讨高校与医院合作进行本科临床药物治疗学授课的教学方法。方法：临床药师组成教学团队,对华中科技大学同济医学院药学院2012级本科留学生进行临床药物治疗学全英文授课。采用问卷调查和文献研究方法,对教学内容和效果进行调研分析。结果：现阶段临床药物治疗学课程设置存在章节多、课时少的问题,学生自主学习和实践应用能力有待提高。结论：临床药师应结合医院临床药学工作,引入多元化的授课形式和考核方式,着重培养学生药学实践服务能力,提高临床药物治疗学教学质量。