大鼠海马CA1区锥体神经元树突分支的生后发育

目的 研究大鼠海马CA1区锥体神经元树突分支的生后发育。方法 应用biocytin细胞内染色方法。结果 CA1锥体神经元的树突在生后第2～3周发育最快。顶树突的分支和长度在生后21d发育成熟;而基树突要到生后56～70d才发育成熟。基树突的发育较顶树突慢。结论 细胞内染色技术可更完整地显示神经元的形态。海马CA1区锥体神经元在出生后继续发育,且基树突的发育较顶树突慢。     

海马促肾上腺皮质激素释放因子与神经元树突发育

神经元树突发育受遗传和环境因素的共同影响.环境因素,如慢性应激(chronic stress)可以影响海马神经元树突的发育,改变正常的神经元突触环路联系,并导致成年时海马结构和功能的永久性损害.慢性应激也是许多神经精神疾病,如抑郁症、焦虑症、精神分裂症的一个重要发病原因.这些神经精神疾病的一个典型病理特征是海马神经元树突丢失,树突棘减少[1-2].越来越多的研究结果表明,这些神经精神疾病与边缘结构包括海马的异常发育关系密切[2-3].     

Nbn基因对小鼠小脑神经元发育的影响

目的:通过观察神经特异性Nbn基因敲除(Nbn-CNS-del)和对照(Nbn-CNS-Ctr)小鼠小脑神经元发育的形态学变化,探讨DNA损伤修复基因Nbn在小鼠小脑发育过程中的作用.方法:应用免疫组织化学技术和体视学方法对生后(P) 7、 14、 21d的Nbn-CNS-del和Nbn-CNS-Ctr小鼠小脑进行系统观察和定量分析.结果:与Nbn-CNS-ctr小鼠相比,Nbn-CNS-del小鼠生后各时间相点小脑发育迟缓,皮质各层界限不清,细胞排列紊乱,至21d未形成正常小脑皮质的3层结构;NeuN阳性表达的颗粒细胞面数密度和体密度值明显减小;D-28K阳性表达的浦肯野细胞面数密度和体密度值增加.结论:DNA损伤修复基因Nbn可能是小脑发育过程中的重要基因,影响小鼠小脑神经元的发育和成熟.     

长寿老人SIRT6基因的罕见及常见变异研究

目的 SIRT6基因属于Sirtuin家族的一员,是长寿候选基因.本文旨在长寿老人中探索SIRT6基因的罕见及常见变异分布情况.方法 从如皋长寿及衰老队列的长寿组中随机抽取102例长寿老人(≥95岁),对SIRT6基因的启动子及外显子区域进行PCR扩增和直接测序,识别罕见及常见变异,并与千人基因组中汉族人群数据进行频率比对.结果 总共完成约10 kb的测序,覆盖了SIRT6基因的8个外显子和1.5kb的启动子区域.在发现的20个已报道变异位点中,6个分布在启动子区,1个分布在外显子上,2个分布在3'UTR区域,11个分布在内含子区.共有12个已报道变异位点的最小等位基因频率(minor allele frequencies,MAFs)超过0.05;其中,rs352493(MAF=0.245)为非同义突变.在剩下8个MAF低于0.05的已报道位点中,rs117541451 (MAF=0.010)和rs146420357(MAF=0.029)与千人基因组中汉族人相应频率差异具有统计学意义(P=0.021).观察到5个新发位点,其MAF均为0.005.这5个位点中,有1个分布在外显子上,1个分布在启动子区,1个分布在3'UTR区域,2个则分布在内含子区.结论 在如皋长寿人群SIRT6基因上首次观察到20个已报道变异位点(12个为常见位点)及5个新发位点(均为罕见位点).这为长寿的遗传学探索及功能研究提供了新的重要候选位点,进一步强调了罕见变异在长寿中的重要作用.     

阿片类物质对神经元生长、发育及其可塑性的影响

阿片类物质及其受体可能通过一些复杂的机制调控着神经系统神经元的发育，使其按一定的数量和一定的时程分化、生长和成熟。而且，阿片类物质对哺乳动物中枢神经系统可塑性变化有一定的促进作用。本文可为进一步探讨阿片类物质在神经系统发育及可塑性方面所起的作用提供一些有用的线索。     

衰老时海马神经元树突的可塑性增生

用形态计量的方法对老年(30个月)和成年(17个月)大鼠脑(Golgi染色标本)的海马CA3区锥体细胞的树突分支进行分级计数和测量了终末支的长度。结果是CA3神经元基树突和顶树突共有9级分支,衰老时第4级和第9级分支有显著的增多(P<0.02,P<0.03)。基树突终末支的长度衰老时无明显改变,顶树突终末支长度较成年组增加(P<0.05)。提示衰老时海马神经元的树突仍具有一定的增生和分化能力。这可能是对神经元退变的一种代偿机制。     

NMDA受体在培养海马神经元树突树上的表面表达及定位

目的　研究NMDA受体在不同发育阶段的培养大鼠海马神经元的表面表达以及在树突结构上的定位。　方法　构建绿荧光蛋白 (GFP)标记的NMDA受体NR1a亚单位的表达载体 (GFP NR1a) ,转染原代培养 5d的大鼠海马神经元 ,用抗GFP抗体和Cy3交联的二抗染色活细胞表面的受体簇。结合青荧光蛋白 (CFP)的共表达突出神经元的结构细节 ,观察表面NMDA受体簇的分布。　结果　GFP NR1a转染的神经元能表达点状、且分布于全细胞的绿荧光NMDA受体簇 ,在成熟神经元的树突上多为表面受体簇。培养 7d和培养 17d的转染神经元树突表面的NMDA受体簇密度并无显著差异。另外 ,培养 7d的海马神经元 ,表面NMDA受体簇几乎都位于树突干上 ,而树突丝上则罕见 ;培养 2周后 ,约一半的NMDA受体簇分布于树突棘。　结论　表面NMDA受体簇的分布具有树突结构相关的特异性 ,尤其是发现在发育早期NMDA受体簇罕见于树突丝 ,却已广泛分布于树突干上 ,且密度相当于成熟神经元。提示在突触形成过程中NMDA受体可能是以预先表达于树突干表面的受体簇形式被新形成的突触所征募     

孤独症谱系障碍镜像神经元功能的研究现状

镜像神经元假说被认为是一种较全面地解释孤独症谱系障碍的临床症状和神经生物学异常的神经-认知理论。本文综述了国内外近年来在孤独症谱系障碍中镜像神经元功能的研究,分别探讨了神经电生理、神经影像学,神经心理学等方面研究结果,提示这些患者存在部分的镜像神经元功能损害,这些损害与孤独症谱系障碍患者其他的神经认知和社会认知功能损害有着密切关系。     

一个孤独症谱系障碍核心家系 KIF1A基因错义变异及其蛋白表达和结构分析

目的:报告1个携带 KIF1A基因错义变异的孤独症谱系障碍核心家系,并分析 KIF1A基因的致病变异及其表达蛋白结构。 方法:提取患儿及其双亲外周血DNA,利用全外显子组测序(whole exome sequencing,WES)技术进行测序,并应用Sanger测序法进行验证。对可疑变...     

Spastin促进海马神经元树突野的形成

目的　探讨微管切割蛋白Spastin对海马神经元树突野形成的作用。 方法　把目的基因转染入原代海马神经元,用免疫荧光显示树突α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（AMPA）受体,全细胞膜片钳检测微小兴奋性突触后电流（mEPSCs）。 结果　过表达Spastin促进树突生长以及分支形成,敲减Spastin抑制树突的生长和新的分支形成,与对照细胞差异有统计学意义（P<0.05）;Sholl分析结果显示Spastin提高树突野的复杂性（P<0.05）;免疫荧光结果显示,过表达Spastin促进AMPA受体GluA2亚基在树突的表达,与对照组差异有统计学意义（P<0.05）;而敲减Spastin则抑制树突GluA2的表达（P<0.05）;全细胞膜片钳检测显示,过表达Spastin神经元的mEPSCs振幅和频率均增加,敲减Spastin则使mEPSC的幅度和频率降低（P<0.05）。 结论　Spastin促进神经元树突野的形成,而且形成的树突是功能性树突。     

Regional white matter development in children with autism spectrum disorders

In this pilot study the severity of autism spectrum disorders (ASD) was associated with alterations in white matter development. Children with ASD and without ASD were assessed by magnetic resonance imaging (MRI) for their myelination development on a regional basis. Measures were obtained in medial frontal cortex, temporal poles, and temporo‐parietal junction in both left and right hemispheres. Children with ASD showed myelination that was greater than expected for their age in both left and right medial frontal cortex and showed myelination that was less than expected in left temporo‐parietal junction. The severity of ASD symptoms, as assessed by the Autism Diagnostic Observation Schedule—Generic, was associated more with left hemisphere alterations than right hemisphere. © 2010 Wiley Periodicals, Inc. Dev Psychobiol 52: 755–763, 2010.     

Detection of copy-number variation in AUTS2 gene by targeted exonic array CGH in patients with developmental delay and autistic spectrum disorders

Small genomic rearrangements and copy-number variations (CNVs) involving a single gene have been associated recently with many neurocognitive phenotypes, including intellectual disability (ID), behavioral abnormalities, and autistic spectrum disorders (ASDs). Such small CNVs in the Autism susceptibility candidate 2 (AUTS2) gene have been shown to be associated with seizures, ID, and ASDs. We report four patients with small CNVs ranging in size between 133–319 kb that disrupt AUTS2. Two patients have duplications involving single exons, whereas two have deletions that removed multiple exons. All patients had developmental delay, whereas two patients had a diagnosis of ASDs. The CNVs were detected by an exon-targeted array CGH with dense oligonucleotide coverage in exons of genes known or hypothesized to be causative of multiple human phenotypes. Our report further shows that disruption of AUTS2 results in a variety of neurobehavioral phenotypes. More importantly, it demonstrates the utility of targeted exon array as a highly sensitive clinical diagnostic tool for the detection of small genomic rearrangements in the clinically relevant regions of the human genome.     

酸敏感离子通道对海马神经元树突发育的影响

目的 探讨酸敏感离子通道（ASICs）在海马神经元树突发育中的作用。方法 在体外培养第5天的原代海马神经元中转染定位于膜上的绿色荧光蛋白（F-GFP）,随后在神经元培养液中加入ASICs拮抗剂Amiloride和ASIC1a 选择性拮抗剂Psalmotoxin 1（PcTX1）抑制ASICs的功能,观察体外培养8d和14d这两个时间点海马神经元的树突生长、分支复杂程度。结果Amiloride（10-5mol/L）和PcTX1（1∶20 000稀释）处理3d对海马神经元树突分支总长度、树突分支总数均无显著影响,表明在海马神经元发育早期短时间抑制ASICs功能不影响树突发育。Amiloride（10-5mol/L）处理9d可以显著降低树突分支总长度和树突分支总数; PcTX1（1∶20 000稀释）处理9d也可以显著降低树突分支总长度,但对树突分支总数无显著影响。实验结果表明,长时间抑制ASICs功能会影响树突发育。结论 ASICs参与调节树突的发育。     

Copy number variations in a Brazilian cohort with autism spectrum disorders highlight the contribution of cell adhesion genes

Prediction of pathogenicity of rare copy number variations (CNVs), a genomic alteration known to contribute to the etiology of autism spectrum disorder (ASD), represents a serious limitation to interpreting genetic tests, particularly for genetic counseling purposes. Chromosomal microarray analysis (CMA) was conducted in a unique collection of 144 Brazilian individuals with ASD of strong European and African ancestries. Rare CNVs were detected in 39 patients: 41 of unknown significance (VUS), four pathogenic and one likely pathogenic CNVs (clinical yield of 4.1%; 5/122). Based on gene content and recurrence in three large cohorts [a Brazilian neurodevelopmental disorder cohort, the autism MSSNG cohort, and the Canadian-based Centre for Applied Genomics microarray database], this work strengthened the pathogenicity of 14 genes (FAT1, CAMK4, BIRC6, DPP6, CSMD1, CTNNA3, CDH8/CDH11, CDH13, OR1C1, CNTN6, CNTNAP4, FGF2 and PTPRN2) within 14 CNVs. Notably, enrichment of cell adhesion proteins to ASD etiology was identified (p < 0.05), highlighting the importance of these gene families in the etiology of ASD.