白血病患者RT—PCR检测MDR1和MRP的意义

0引言肿瘤细胞对药物产生多药耐药性（MDR）是导致化疗失败的重要原因卜，“，我们观察了白血病患者骨髓或外周血单个核细胞中mdr基因（mdrl）和MDR相关蛋白（MRP）的基因表达情况，并对临床检测结果作了分析．1方法1．l试剂AMV逆转录酶、TaqDNA聚合酶，原平生物技术公司购人．1．2标本制备白血病患者20例，其中急性淋巴细胞白血病9例，急性非淋巴细胞白血病8例，慢性粒细胞性白血病（CML）3例，取患者骨髓或静脉血3mL，加等体积生理盐水稀释后置等体积淋巴细胞分离液上3000r／min离心20min后吸取单个核细胞．l．3RNA提取IX10’单…     

喉癌患者多药耐药基因,多药耐药相关蛋白基因的表达及临床意义

应用逆转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了３５例喉癌患者ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ、ＭＲＰｍＲＮＡ基因的表达,同时,应用免疫组化ＳＡＢＣ法检测了６１例患者ＭＤＲ－１基因产物Ｐ－ｇｐ。喉癌组织中ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ及Ｐ－ｇｐ的阳性表达率分别为３７．１％（１３／３５）和３４．４％（２１／６１）;３５例ＲＴ－ＰＣＲ检测标本中,两项指标间有一定的相关性（Ｐ〈０．０１）。晚期患者（Ｔ３－４,１８／１０）,     

用原位RT—PCR技术检测大肠癌组织中相关新基因SNC66的表达

目的：探讨在肿瘤组织石蜡切片标本中原位检测内源性基因表达产物的灵敏方法，研究大肠癌相关新基因SNC66在大肠癌组织中的表达情况以及与大肠癌的相关性。方法：经原位逆转录后进行原位PCR扩增，在扩增过程中掺入地高辛标记的核苷酸（Dig-UTP)并加以检测。比较SNC66在大肠粘膜和大肠癌组织中的表达情况。结果：25个循环时，37例大肠癌组织标本有10例阴性不表达，27例强阳性表达。10个循环时，则14例呈阴性，18例弱阳性，5例强阳性。配对的37例大肠粘膜标本则都呈强阳性表达。结论：原位RT－PCR是一种检测内源性基因低拷贝转录产物mRNA的较灵敏的方法。SNC66基因在大肠癌组织中存在明显的表达降低或缺陷，可作为侯选的抑癌基因加以进一步研究。     

MDR1基因表达与原发性上皮性卵巢癌原代细胞体外抗药性关系的 …

探讨ＭＤＲ１基因表达与原代细胞体外抗药性的关系，为原发上皮性卵巢癌便理化疗提供合理化疗提供理论依据。方法应用半定量逆转录－聚合酶链反应技术和ＭＴＴ法体外药敏试验，检测了３７例原发上皮性卵巢癌原代细胞对临床常用抗癌药物的抗药性及其ＭＤＲ１基因表达情况。     

MDR_1基因表达与原发上皮性卵巢癌原代细胞体外抗药性关系的研究

目的　探讨 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因表达与原代细胞体外抗药性的关系,为原发上皮性卵巢癌合理化疗提供理论依据。方法　应用半定量逆转录———聚合酶链反应技术和 Ｍ Ｔ Ｔ 法体外药敏试验,检测了３７ 例原发上皮性卵巢癌原代细胞对临床常用抗癌药物的抗药性及其 Ｍ Ｄ Ｒ１基因表达情况。结果　原发上皮性卵巢癌 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因阳性表达率为３０ ％ 。 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因表达与 Ｍ Ｄ Ｒ 相关药物耐药有关,与非 Ｍ Ｄ Ｒ 相关药物耐药无关。结论　 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因表达是原发上皮性卵巢癌抗 Ｍ Ｄ Ｒ 相关药物的主要原因。     

RT—PCR检测食管鳞癌组织中GST—π基因的表达

为了解原发性食管癌组织中ＧＳＴ－π基因的表达情况，用ＲＴ－ＰＣＲ方法定量检测了食管癌组织及相对应的正常食管粘膜组织中ＧＳＴ－π基因的表达。结果：在癌组织中ＧＳＴ－π基因表达的阳性率为８０．０％，在癌旁正常粘膜组织中为８６．６％。但在癌组织中ＧＳＴ－π基因表达的强度大于正常粘膜组织。管癌组织分化越差，ＧＳＴ－π基因阳性表达率越低，Ｐ〈０．０５。结果提示：在原发性食管组织中ＧＳＴ－π基因存在较高频率的     

上皮性卵巢癌多药耐经基因的表达及其临床意义

目的 探讨上皮性卵巢癌多药耐药（ＭＤＲ）基因的表达及其临床意义。方法 利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３３例初治上皮性卵巢癌病人肿瘤组织ＭＤＲ１基因表达情况，同时用ＭＴＴ比色法检测肿瘤细胞对抗癌药的敏感性。结果 １０例（３０．３％）卵巢癌病人ＭＤＲ１基因表达阳性。体外试验表明，ＭＤＲ１基因表达阳性卵巢癌细胞对多种抗癌药耐药，ＭＤＲ１基因的表达与卵巢癌细胞分化程度有关，但与病人的年龄、组织     

MDR基因在食管癌中的表达及其临床意义

临床上对肿瘤患者进行化疗失败的重要原因是瘤细胞对化疗药物产生耐受性,多药耐药（MDR）就是耐药的一个主要类型,其实质是MDR基因mdr-1表达升高,导致细胞内药物积聚减少。我们选择食管癌患者手术切除的标本组织,采用RT－PCR方法检测其表达水平,探讨MDR与食管癌组织学分级之间的关系,及其在临床上的应用价值,为临床化疗和克服MDR提供理论依据。     

RT—PCR检测HCV—RNA及基因分型的研究

目的研究HCV基因分型的临床意义。方法应用RT－PCR方法检测HCV－RNA。结果150例献血员中抗-HCV6例阳性占40％，应用RT－PCR方法检测HCV－RNA10例阳性占6．6％，对其进行基因分型，其中HCV－Ⅱ型占89％，HCV-Ⅲ型占11％。结论说明我国人群HCV感染以Ⅱ型为主。12例抗-HCV阳性母亲及新生儿的HCV基因分型同属Ⅱ型，证明HCV母婴垂直传播存在。基因分型诊断为选择药物治疗提供科学依据。     

卵巢上皮性癌组织中PTEN mRNA的表达

①目的　探讨卵巢上皮性癌组织中PTEN基因的表达及其临床意义。②方法　应用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,分别检测 4 9例卵巢上皮性癌组织和 2 0例正常卵巢组织中PTEN基因外显子 5 8和 1 8mRNA的表达 ,同时结合临床病理资料进行分析。③结果　 4 9例卵巢上皮性癌组织中PTENmRNA相对表达水平外显子 5 8为 0 .83± 0 .17,外显子 1 8为 0 .78± 0 .14 ;2 0例正常卵巢组织中PTENmRNA相对表达水平外显子5 8为 1.4 2± 0 .2 9,外显子 1 8为 1.37± 0 .2 4 ,两者比较差异有显著性 (t=10 .93、12 .73,P <0 .0 5 )。卵巢上皮性癌组织中PTENmRNA表达水平的降低与卵巢上皮性癌的组织类型、淋巴结有无转移无关 (t =1.32、1.14 ,F =1.14、1.0 4 ,P >0 .0 5 ) ;但随临床分期和组织学分级的增高其表达水平明显降低 (t=2 .5 3～ 2 .99,P <0 .0 5 )。④结论　PTEN基因转录水平的异常在卵巢上皮性癌的发生发展中具有一定的作用。     

上皮性卵巢癌多药耐药基因的表达及其临床意义

目的探讨上皮性卵巢癌多药耐药（ＭＤＲ１）基因的表达及其临床意义。②方法利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３３例初治上皮性卵巢癌病人肿瘤组织ＭＤＲ１基因表达情况，同时用ＭＴＴ比色法检测肿瘤细胞对抗癌药的敏感性。③结果１０例（３０．３％）卵巢癌病人ＭＤＲ１基因表达阳性。体外试验表明，ＭＤＲ１基因表达阳性卵巢癌细胞对多种抗癌药耐药，ＭＤＲ１基因的表达与卵巢癌细胞分化程度有关，但与病人的年龄、组织学类型及分期无关。④结论ＭＤＲ１基因的表达可作为判断卵巢癌病人预后的一个指标     

黑色素瘤抗原-1基因在胃癌组织中的表达

①目的检测黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)基因在胃癌组织中的表达，为应用MAGE-1基因产物对胃癌病人进行特异性抗肿瘤免疫治疗提供理论依据。②方法用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例胃癌组织及相应癌旁组织中MAGE-1基因的表达，并对1例RT-PCR阳性扩增产物进行DNA序列测定。③结果30例胃癌组织标本中有14例(46．7％)表达MAGE-1基因，而相应的癌旁组织均不表达MAGE-1，两组比较差异有显著性(P=0．001)；DNA序列测定证实1例RT-PCR扩增产物中的目的基因片段为MAGE-1 cDNA序列。④结论MAGE-1基因在胃癌组织中有较高表达，这使得以该基因编码蛋白作为疫苗用于胃癌的免疫治疗成为可能。     

抑癌基因p16在卵巢肿瘤中的表达

目的探讨卵巢癌中抑癌基因p16的表达情况及其与卵巢癌分级分期转移预后的关系.方法用免疫组化ABC法检测30例正常卵巢(NO)、32例卵巢良性肿瘤(BOT)、8例交界性卵巢肿瘤(BLT)和103例卵巢癌(OC)组织中的抑癌基因p16蛋白表达情况.分析p16蛋白表达与卵巢癌分级分期、转移预后的关系.结果①p16蛋白表达在恶性、交界性、良性肿瘤组及止常卵巢中的表达率分别为58.3%、81.3%和26.7%.肿瘤组明显高于正常对照组(P<0.05)、恶性组明显低于良性组(P<O.05)又明显高于正常组(p<0.01).交界性组也明显低于良性组(p<0.01).②p16蛋白表达与卵巢癌的组织学类型、残余灶大小、淋巴结转移及治疗情况无明显关系.③分化较差、期别较晚及预后不佳的卵巢癌患者的p16蛋白表达均明显降低.结论p16基因在卵巢肿瘤的发生发展中起重要的作用.并影响卵巢癌的分化程度、病程进展及临床预后.     

PTEN基因在原发性肝细胞癌中的表达

目的 探讨PTEN基因变异在原发性肝细胞癌（HCC）发生发展中的作用。方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术,对30例肝癌组织、30例癌旁组织和16例正常肝组织细胞中PTEN基因的表达情况进行了检测和分析。结果 肝癌组织中PTEN基因表达水平明显低于癌旁组织和正常肝组织（F=6．785,q=4．269、4．549,P〈0．05）。低分化肝癌组织中PTEN基因表达水平显著低于高、中分化肝癌组织（t=3．266,P〈0．01）。结论 PTEN基因失活与肝癌发生密切相关;PTEN基因表达水平与HCC恶性程度有明显相关性,提示萁蛮异可以作为病人预后判断的指标．     

喉癌多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因的表达

（１）目的 探讨喉癌组织中多药耐药基因（ＭＤＲ１）和多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达及其意义,（２）方法 利用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,检测４１例喉癌及１０例喉乳头状瘤组织ＭＤＲ１和ＭＲＰ基因的表达。（３）结果 ４１例喉癌和１０例喉乳头状瘤组织均有ＭＤＲ１和ＭＲＰ基因的表达,两种基因在两种组织中表达水平无显著性差异（ｔ＝０．２９,２．３５,Ｐ〉０．０５）。１０例喉癌ＭＲＰ基因呈     

MAL基因在原发食管癌组织表达及临床意义

目的 探讨MAL基因表达下调与食管癌病理分期、组织学分级的相关性.方法 采用RT-PCR和半定量RT-PCR方法检测45例食管癌组织和癌旁食管黏膜组织中MAL基因的表达.结果 40例食管癌组织中MAL mRNA表达明显低于相应的癌旁食管黏膜组织(χ2=30.59,P<0.01);Ⅰ～Ⅱ期病人的MAL基因表达水平显著高于Ⅲ期病人(t=5.952,P<0.001),淋巴结转移阳性病人MAL mRNA表达水平显著低于淋巴结转移阴性病人(t=6.743,P<0.001).结论 MAL mRNA在食管癌组织中的表达与临床分期、组织学分级等临床病理因素有一定相关性,可作为判断食管癌恶性程度、转移潜能及预后的实验室指标.     

基质金属蛋白酶组织抑制物-1 mRNA在胃癌组织中的表达

①目的　检测基质金属蛋白酶组织抑制物 1(TIMP 1)基因在胃癌及其癌旁组织中的表达 ,以探讨TIMP 1在胃癌发生发展中的作用。②方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测胃癌及相应癌旁组织中TIMP 1基因的表达。③结果　 30例胃癌组织中有 16例表达TIMP 1基因 ,阳性率为 5 3.3% ,30例癌旁组织中有14例表达TIMP 1基因 ,阳性率为 4 6 .7% ,TIMP 1基因在胃癌和癌旁组织中的表达无显著性差异 (χ2 =0 .2 6 7,P >0 .0 5 )。④结论　TIMP 1是一种肿瘤生长、侵袭、转移双向调节因子。     

用逆转录多聚酶链反应法检测多药耐药基因（mdr1）的表达

以长春新碱诱导的耐药细胞Ｋ５６２／ＶＣＲ和阿霉素诱导的耐药细胞Ｋ５６２／ＤＯＸ及敏感细胞Ｋ５６２作为检测对象，采用逆转录多聚酶链反应法，并且以β２－微球蛋白（β２ｍ）基因作为内参照，检测和比较了上述细胞的多药耐药基因ｍｄｒ１表达。经过３０个循环扩增，耐药细胞检测出ｍｄｒ１和β２ｍ基因的扩增产物，而敏感细胞无ｍｄｒ１扩增产物。结果提示，本方法可用以区分耐药和敏感细胞，有希望成为临床个体化疗敏感性预测的重要指标之一。