医院军团菌污染状况及其防制对策

目的了解医院军团菌的污染状况,以找出相应防制对策。方法选取12家医院,分别对医院空调冷却塔水、二次供水和管网末梢水(出厂水)进行军团菌检测。结果48份冷却塔水样品中分离出22株军团菌,军团菌阳性检出率为45.83﹪,二次供水军团菌检出率为9.09﹪,管网末梢水未检出军团菌。结论医院空调冷却塔水军团菌污染状况较为严重,对其危险性应引起高度重视,二次供水的军团菌污染也不容忽视,应进行有效控制,以防止军团病的暴发流行。     

医院环境水中军团菌污染状况的初步调查及防范措施

目的 了解本地区10家医院环境水中军团菌污染状况.方法 应用分离培养法和聚合酶链反应技术对本地区10家医院的空调冷却水、二次供水和管网末梢水进行军团菌检测.结果 40份冷却水样中分离出17株军团菌、军团菌阳性检出率为42.5%;二次供水中军团菌检出率为5%;管网末梢水未检出军团菌.结论 医院空调冷却水中存在军团菌污染,需引起足够重视,采取必要措施以防止军团菌病发生.     

土壤中军团菌污染状况调查研究

目的 了解土壤中军团菌的污染状况和分离菌株的分子型别、对抗生素的敏感性和细胞内的生长能力。 方法 采集北京市公共场所土壤样本123份,采用军团菌GVPC选择性培养基培养法和荧光定量PCR检测法对土壤中军团菌进行检测分析。用小鼠巨噬细胞J774细胞对分离菌株进行菌株致病性研究;用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对分离菌株进行分型分析;用E-test试纸药敏实验法对分离菌株进行红霉素、阿奇霉素、利福平、左氧氟沙星、莫西沙星5种抗生素敏感性检测。 结果 荧光定量PCR检测法在花鸟市场和夏季水库样本中检出军团菌,检出阳性率分别为50.00%和24.24%,平板培养法仅在夏季水库样本中检出军团菌,阳性率为6.06%。 分离的2株军团菌TR1和TR2均为嗜肺军团菌,血清型分别为5型和8型。 2株嗜肺军团菌均具有较高的细胞内生长能力,PFGE分型显示2株菌为不同带型,药敏实验显示2株菌均对红霉素、阿奇霉素、利福平、左氧氟沙星、莫西沙星5种常用抗生素表现敏感性。 结论 公共场所土壤中可检出嗜肺军团菌,且分离株有较高的细胞内生长能力,提示具有致病性,存在导致军团菌病散发流行或暴发的危险,应加强对公共场所土壤中军团菌的监测。      

聚合酶链反应结合探针杂交检测军团菌

利用来源于嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强因子（ｍｉｐ）基因序列的引物，建立了快速检测军团菌的聚合酶链反应技术。扩增反应产物经与地高辛标记的特异寡核苷酸探针杂交证实。用本方法检测接种过军团菌的支气管肺泡灌洗液标本。可检出１００ＣＦＵ／ｍｌ细菌。研究表明它是军团病诊断的一种有效手段。     

以PCR为基础的指纹图谱技术对军团菌分型的研究进展

本文概述了ＲＡＰＤ、ＲＥＰ／ＥＲＩＣ－ＰＣＲ及ＡＦＬＰ等以ＰＣＲ为基础的基因指纹图谱技术对军团菌分型的研究,分析了它们的优缺点,并提出改进的方向。     

综合医院住院肺炎患者军团菌感染现况调查

摘要 目的 <\b> 了解住院肺炎病例军团菌感染状况及类型。方法 <\b>　调查供水系统受军团菌污染的某医院的90例住院肺炎病例,通过问卷调查、深部痰液军团菌培养和荧光定量PCR检测、军团菌尿抗原和血抗体检测,确定军团菌发病情况及类型。结果 <\b> 住院肺炎病例中军团菌肺炎阳性率15.6%,其中痰培养和PCR检测均为阳性1例,仅尿抗原阳性13例;社区获得性军团菌肺炎16.4%,医院获得性军团菌肺炎13.0%。结论 <\b> 该医院住院肺炎病例存在军团菌感染,社区获得性和医院获得性军团菌肺炎均有发病。     

四种检测方法用于上海市口岸管道水军团菌存在状况调查的研究

目的比较传统的平板培养法、普通聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,real-time PCR)和荧光染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide,EMA)结合荧光定量PCR的方法(EMA-荧光定量PCR)对管道水中军团菌的检测效果。方法于2010年对上海市2个口岸管道水进行采样,共采集132份。分别采用传统的平板培养法、普通PCR、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR对水样中军团菌进行定性和/或定量分析。结果对132份管道水标本进行军团菌定性检测,平板培养法、普通PCR、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR检出军团菌污染率分别为18.9%、20.5%、24.2%和24.2%。3种定量方法(平板培养法、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR)对阳性标本中军团菌定量数值分别为50~1320菌落形成单位/升(cfu/L)、20~13 085基因单位/升(GU/L)和10~4480 GU/L。对于132份水样,3种方法对军团菌含量分析的定量数值大小差异有统计学意义(χ2=193.6,P0.01),其中荧光定量PCR的定量数值最高,EMA-荧光定量PCR的数值次之,平板培养的数值最低。结论上海市口岸管道水中军团菌污染率和含菌量高。荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR方法检测管道水中军团菌的灵敏度优于传统的培养方法,EMA-荧光定量PCR方法适合用于环境水体中军团菌活菌监测。     

医院中央空调通风系统污染状况调查

目的了解医院中央空调在各个使用终端送风口和冷凝水污染情况,以便加强卫生管理。方法采用收集冷凝水和棉拭采样方法,对处于病区及相关科室的送风口进行了监测。结果共检测80份样,检出真菌阳性45份,阳性率为56.25%;检出溶血性链球菌5份,阳性率为6.25%。处于病区的送风口和冷凝水检出真菌阳性率为61.76%,溶血性链球菌阳性率为7.35%。结论该医院病区中央空调污染严重,主要存在真菌污染。     

青海省西宁市医院内环境污染状况调查

目的了解西宁市医院内环境消毒卫生状况,为加强医院卫生管理提供依据。方法采用现场采样和检测方法,对医院室内空气、物体表面及医务人员手卫生质量进行了调查。结果西宁市25所医院室内空气平均总合格率仅28.7%。医院病房内空气质量平均合格率为43.1%,门诊大厅内空气质量合格率仅为14.6%,住院部室内空气合格率为21.7%。物体表面达到卫生标准的平均总合格率为69.9%,医务人员手合格率为85.7%。结论西宁市25所省市属医院室内空气污染严重,物体表面和医务人员手卫生合格率均比较低,需要加强卫生消毒工作管理。     

嗜肺军团菌毒力岛基因聚合酶链反应分型鉴定

目的建立嗜肺军团菌毒力岛基因分型鉴定方法，探讨其致病特性和分布状况。方法根据GenBank公布的嗜肺军团菌核苷酸序列设计和合成嗜肺军团菌种和毒力岛基因鉴定引物，采用PCR法对25株军团菌属标准参考株，3株国内和20株广东分离嗜肺军团菌，53份临床标本和57份水样、进行嗜肺军团菌种和毒力岛基因分型鉴定。结果5株嗜肺军团菌标准株只有嗜肺军团菌1型（Philadelphia-1 ATCC 33152）12个毒力岛基因全阳性，其他4株只检出11个毒力岛基因。20株军团菌属中其他菌株，分别检出2—11个毒力岛基因；3株国内嗜肺军团菌检出11个毒力岛基因；广东地区分离的20株嗜肺军团菌，7株检出12个毒力岛基因，12株检出11个毒力岛基因，1株未检到毒力岛基因。53例病源不明性肺炎患者支气管洗液和痰液，PCR检测嗜肺军团菌DNA阳性5例（9．4％）。结论广东地区嗜肺军团菌广泛存在水源环境中，而且是医院感染性肺炎的重要病源之一。不同血清型嗜肺军团菌所含毒力岛基因不同，毒力岛基因与致病性相关。     

注射狂犬疫苗饮酒引起过敏反应一例报告

本文建立了一个用于检测军团菌的多聚酶链反应方法。扩增参考菌株的染色体DNA(L.pneumophital-14、L.micdadei、L.dumoffii Llongbeachae、L.Jordanis、L.bozemanii)，均可检出375bp的16SrRNA基因片段。对于已经监定的5株国内分离菌株染色体DNA进行扩增，获得了相同的结果，地高辛标记16SrRNA基因探针与扩增产物杂交，结果为阳性。而扩增14株非军团菌均为阴性。采用煮沸法制备细菌染色体DNA,PCR法检测环境水军团菌敏感性为280cfu/ml水，检查临床标本军团菌为560cfu/ml支气管灌洗液。上述结果表明该法敏感、快速、简便，具有较好的特异性。     

基于16S rRNA的聚合酶链反应技术用于肺部感染患者痰标本中军团菌的检测

目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法,检测肺部感染患者痰液中军团菌属特异性16S rRNA基因。方法利用军团菌属特异性16S rRNA基因保守序列设计引物和探针,优化反应条件和反应体系,对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及其他病原菌标准菌株进行检测,验证该方法的特异性和敏感性。对150例肺部感染患者痰液标本进行检测,阳性者对基因扩增产物测序作验证试验。结果该方法检测军团菌属所有标准菌株均出现阳性信号,其他非军团菌属检测结果均为阴性,灵敏度为10 cfu/ml。150例肺部感染患者的痰液标本,经荧光定量PCR法检出军团菌阳性27例,阳性率为18.0%(27/150),经16S rRNA基因测序验证,阳性率为15.0%(22/150),经χ2检验二者差异无统计学意义(χ2=3.2,P﹥0.05),表明其较好的符合性和等效性。结论 realtime PCR法检测患者痰液标本中军团菌,具有快速、敏感、特异等特点,适用于临床军团菌感染调查及快速检测。     

多重耐药铜绿假单胞菌在医院内感染中的同源性分析

目的了解重症监护病区(ICU)和神经内科在院内感染中检出的多重耐药铜绿假单胞菌之间是否存在同源性。方法检测铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性,同时用随机扩增多态性DNA(RAPD)方法对多重耐药的铜绿假单胞菌进行基因分型。结果两病区之间有19株铜绿假单胞菌对6种抗生素具有高耐药性。多重耐药菌株经聚合酶链反应(PCR)分析,两病区间铜绿假单胞菌无同源性表现。结论铜绿假单胞菌在院内感染中无交叉感染的现象。     

A case of nosocomial Legionella pneumonia associated with a contaminated hospital cooling tower

We report the epidemiological investigation of a nosocomial pneumonia case due to Legionella pneumophila linked to a contaminated hospital cooling tower in an immune-compromised patient. A 73-year-old female patient was diagnosed with nosocomial Legionella pneumonia proven by a culture of L. pneumophila serogroup 1 from bronchoalveolar lavage fluid. Two strains isolated from the patient and two strains isolated from two cooling towers were found to be identical using repetitive-sequence-based-PCR with a 95% probability. This Legionella pneumonia case might be caused by aerosol from cooling towers on the roof of the hospital building which was contaminated by L. pneumophila. We increased up the temperature of hot water supply appropriately for prevention of Legionella breeding in an environment of patients' living. On the other hand, as the maintenance of cooling tower, we increased the frequency of Legionella culture tests from twice a year to three times a year. In addition, we introduced an automated disinfectants insertion machine and added one antiseptic reagent (BALSTER ST-40 N, Tohzai Chemical Industry Co., Ltd., Kawasaki, Japan) after this Legionella disease, and thereafter, we have no additional cases of Legionella disease or detection of Legionella spp. from the cooling tower or hot water supply.This case demonstrates the importance of detecting the infection source and carrying out environmental maintenance in cooperation with the infection control team.     

某医院集中式纯水供应系统微生物污染情况和消毒效果调查

摘要 目的 了解医院纯水系统的细菌污染情况及消毒方法的效果。 方法 通过现场采样和细菌定量检测方法,对江苏省某医院纯水系统细菌污染状况及其消毒措施的效果进行评价。 结果 该医院纯水系统系由过滤除菌组件与紫外线消毒组件组合而成。该医院纯水系统采集的水中存在细菌总数超标情况,并检出多种条件致病菌。经采用浓度为3 000 mg/L的过氧乙酸浸泡过滤膜和纯水箱内部30 min后,细菌总数明显降低,未检出致病菌。 结论 该纯水系统处理的水中日常存在细菌污染现象,原因是系统中过滤器更换不及时,定期消毒维护不够造成污染,因此需要对纯水系统及管路定期监测和消毒。     

运用医院感染实时监控系统进行医院感染现患率的调查与分析

目的 运用医院信息化系统平台对医院感染进行横断面调查,了解医院感染的分布状况,病原菌检出和耐药情况以及抗菌药物使用情况等,为制定有效的预防和控制医院感染措施,降低医院感染发生率提供科学依据。方法 以湖北省中西医结合医院2016年10月27日当日所有住院患者为研究对象,通过医院感染实时监控系统查阅病历和病床旁调查相结合的方式进行医院感染现患率调查,并利用该系统进行统计学分析。结果 本次调查应查患者951例,实查患者951例,实查率100.00%。其中发生医院感染36例、42例次,医院感染现患率为3.79%、例次感染率为4.42%;医院感染现患率居前5位的科室依次为重症医学科、老年病科、呼吸内科、神经外科和神经内科;医院感染发生部位以下呼吸道为主,占47.62%;共检出医院感染病原菌31株,居前3位的病原菌依次为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌;抗菌药物使用率为44.90%,抗菌药物治疗前病原学送检率为40.07%。结论 随着医院信息化建设的快速发展,本次现患率调查使用了医院感染实时监控系统,与传统的手工调查方式相比,提高了医院感染监测的效率和准确性,为有效开展医院感染目标性监测提供依据。     

Rapid analysis of Clostridium difficile strains recovered from hospitalized patients by using the slpA sequence typing system

Clostridium difficile is a nosocomial pathogen that is transmissible between patients via hospital staff and via contaminated environmental surfaces. Recently, a typing system based on the slpA sequence for C. difficile was developed. To elucidate the validity and efficacy of the system in the setting of a local hospital, we carried out typing of C. difficile from patients in our hospital using the system. Twenty-eight stool samples obtained from 17 patients with C. difficile-associated diarrhea were investigated. Twenty-two of the 28 samples were positive for C. difficile by stool culture, and they were able to be classified by slpA sequence typing. The smz-1 and smz-2 strains were revealed to be the predominant types in our hospital, accounting for 73% of all strains. The yok-1, yok-2, t25-1, hr-1, and hj2-2 strains were identified in 1 patient each. The smz-1 strain was identified in all wards except for ward D, while smz-2 was identified in 3 of 4 patients in ward D and was restricted to this ward. Nosocomial infection of smz-1 and smz-2 in our hospital was demonstrated. Distinguishing smz-1 from smz-2 by slpA sequence typing clarified the transmission of C. difficile among patients. In conclusion, slpA sequence typing was useful in the setting of a local hospital and may be a powerful tool for the epidemiological study of C. difficile infection.