应用胎儿脐带血清或小牛血清加维生素 B_(12)的培基作小淋巴细胞转化试验的方法介绍(初步报告)

小淋巴细胞转化试验是检验细胞免疫的一种重要参考指标。为了寻求简易的培养方法来做此试验,我们试验以胎儿脐带血清或小牛血清加维生素 B_(12)作成培养基,用四川省出产的雪山豆提取的植物血凝素(PHA)作淋巴细胞转化的刺激物。进行微量血培养取得了较好的效果。     

碘海醇注射液的细菌内毒素检查

新型非离子型X -CT造影剂碘海醇注射液 ,由于其毒副作用小、造影图像清晰 ,国外临床广泛使用。我们在质量研究过程中 ,试用细菌内毒素检查法检查注射液 ,结果表明 ,方法较热原法灵敏、简便 ,结果可靠。1　试剂和材料鲎试剂 :厦门鲎试剂厂 (灵敏度分别为 0 .5Eu/ml、0 .1 2 5Eu/ml) ;细菌内毒素标准品 :中国药品生物制品检定所 (1 0 0 0 0Eu/支 ) ;细菌内毒素检查用水 :厦门鲎试剂厂 ;碘海醇注射液(2 4 0mgI/ml) :本所开发部提供。2　实验方法和结果2 .1　鲎试剂灵敏度的检测　按中国药典 (1 995年版 )检测 ,灵敏度均符合标示量的 5 0 %～…     

植物血球凝集素(PHA)与康力龙联合治疗小儿再生障碍性贫血疗效观察

植物血球凝集素(Phytohemaggtu tinin简称PHA)是从腰豆(phasolus Vulgaris)中提取的一种糖蛋白物质,具有非特异性免疫刺激作用。国内应用PHA配合化疗治疗恶性肿瘤患者过程中,发现PHA有防止白细胞减少和刺激骨髓造血     

血细胞分析仪的试剂配制方法

0　引言　现今血细胞分析仪在我国医疗单位几乎普遍采用 ,已成为临床检验的一个主要检查工具 .基于技术水平原因 ,所使用的血细胞分析仪绝大部分是国外产品 ,试剂也绝大部分为原装进口试剂 .每测定一份标本 ,仪器所使用的稀释剂最少要在 2 0 m L以上 ,另加几毫升的溶血剂、清洁剂 ,再加上1 0 %～ 2 0 %各种耗损 ,这样消耗在试剂上的资金就相对很大 .另外在试剂订购、运输、搬运、储存方面都给使用单位带来不小的麻烦 .因此我科专门对血细胞分析仪的试剂进行研制 ,经临床运用获得满意效果 .1　材料和方法1 .1　材料　血细胞分析仪、分光光度…     

庆大霉素提炼工艺优化研究

1　材料　　庆大霉素发酵液 (来自河南省医药工业研究所抗生素研究室 ) ;酸化用浓硫酸 (化学纯试剂 ) ;洗涤剂 (由盐酸和氯化铵组成 ,化学纯试剂 )。2　方法2 .1　庆大霉素发酵液酸化预处理ｐＨ值及最佳ｐＨ值范围的选定。将庆大霉素发酵液定量分成 6组 ,每组平行做 3份。分别用浓硫酸调节ｐＨ值为 1.2 ,1.4,1.6 ,1.8,2 .0 ,2 .2 ,并用酸度计准确测定。酸化 40ｍｉｎ后用新华 1号滤纸过滤 ,然后测滤液的生物效价 (生物鉴定菌为短小芽孢杆菌 6 32 0 2 ) ,求得平均生物效价后 ,将各组的效价进行比较 ,效价较高的组别酸化的ｐＨ值即为最佳ｐＨ…     

植物血凝素(PHA)治疗迁延性肝炎慢性肝炎50例临床分析

植物血凝素(Phytohemagglutinin简称PHA)是从红肾豆中提取的一种糖蛋白。本世纪初发现PHA对人和动物的红细胞有凝集作用。1960年Nowen报导PHA加入营养的淋巴细胞液中,能促使淋巴细胞分裂。1964年Robbins报告在PHA的作用下,营养的小淋巴细胞可以转化为淋巴母细胞以后进行细胞分裂。国内浙江医科大学1972年首先报告应用于临床。1973年广东省医药工业研究所从广东菜豆中提取一种糖蛋白为低聚糖和蛋白质的复合大分子物质(即PHA)并于1975年将广东省医药工业研究所生产的PHA凉干注射剂应用于临床。PHA配合药物治疗血液系统疾病,PHA配合其他疗法治疗实体瘤,以及在传染科中应用治疗流行性出血热,病毒性肝炎,麻风等皆取得了不同程度的效果。我们采用PHA治疗迁延性肝炎、慢性肝炎50例收到满意效果,现报告如下:     

网状纤维染色中脱片的解决方法

网状纤维染色技术是一项特殊的病理染色技术。在网状纤维染色过程中 ,脱片现象经常出现 ,过去采用的封固防脱方法烦琐 ,操作过多 ,切片不洁 ,很不方便。我们经过长期的观察、实践、改进 ,用一种简单易行的方法在防脱片方面取得很好的效果 ,染色的选择性也相应有所提高。现将具体方法介绍如下。1　材料和方法1 .1　材料 :配好 Gomori氏银氨液 [1 ] ,0 .5 %酸性高锰酸钾、1 %草酸、 2 .5 %铁明矾、1 0 %甲醛、0 .2 %氯化金、0 .0 2 %伊红 ,另需 6 0℃烤箱或电吹风。1 .2　方法 :1切片经二甲苯→酒精→自来水→蒸馏水洗数次。 2滴 0 .5 %酸性…     

鸿茅健酒中多糖的含量测定

鸿茅健酒具有增强体质 ,提高人体免疫力等作用 ,主要是由于含有枸杞多糖的缘故。我们测定了鸿茅健酒中总多糖的含量。为鸿茅健酒的质量标准的制定提供了实验依据。1　材料与方法1 .1　样品鸿茅健酒 (酒精度为 38% )由内蒙古鸿茅集团提供。1 .2　实验试剂仪器仪器 :分析天平 ,72 1分光光度计 ,搅拌仪 ,真空泵 ,玻璃仪器。试剂 :葡萄糖 ( AR级 ) ,枸杞多糖 (自制 ) ,苯酚 ,浓硫酸 ,乙醇 ,三氯甲烷 ,正丁醇均为分析纯。1 .3　多糖的提取与精制[1～ 3 ]量取 2 0 0 m L鸿茅健酒 ,置 5 0 0 m L的烧杯中 ,浓缩至 5 0 m L,加入无水乙醇使含醇量达…     

石蜡切片用于TUNEL法标记细胞凋亡的体会

TUNEL法检测细胞凋亡是目前国内外学者所广泛采用的一种先进方法 [1,2 ] 。我们在应用这一方法过程中有一些体会 ,现报告如下。1　材料与方法1 .1　试剂　 TUNEL药盒 :由北京中山生物技术公司提供。1 .2　标本　生后 7天小鼠肾脏石蜡标本。1 .3　方法　标本经石蜡切片后脱蜡 ,经各级酒精逐渐入双蒸水 ,PBS洗 2次 ,后续过程均在湿盒内进行。加蛋白酶 K,室温孵育 1 5～ 3 0分钟 ,入 PBS洗 2次 ,每次 5分钟 ;入阻断液 (3 %过氧化氢 )阻断内源性过氧化物酶 3 0分钟 ,经 PBS洗 2次 ,每次 5分钟 ;入通透液常温下孵育 1 0分钟后入 TUNEL …     

A-O组合染色法显示神经尼氏小体、髓鞘和红细胞成分的应用

在实验动物和人体的神经组织染色中 ,神经尼氏小体和髓鞘染色应用较广。为了能够在组织中同时显示这些成分 ,我们选用天青 A和橘黄 G进行组合染色 (简称 A- O组合染色 ) ,染色效果满意 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料及试剂　狗神经脊髓组织 5 0例由本校实验动物中心提供 ,经 15 %中性甲醛固定液 [1 ] 及时固定 ,常规组织脱水、透明、浸蜡、包埋和切片。天青 A乙醇原液 :天青 A (上海试剂三厂 ) 0 .5 g,2 0 %乙醇 10 0 m l;天青 A乙醇应用液 ,天青A乙醇原液 10 ml,2 0 %乙醇 90 m l,使用临时配制。橘黄 G染色液 :橘黄 G(上海试剂…     

用抗A、抗B单克隆抗体检定血型2719例报告

我们用杂交瘤技术研制了抗-A,抗-B单克隆抗体(MAb),对2719例成人血细胞和脐带血细胞进行了血型检定,并和市售试剂血清检测结果进行比较,获得了满意的结果。现报告如下。材料和方法 1.试剂:抗-A(2G_(12)),抗-B(B_2C_2)由辽宁省基础医学研究所研制,效价均为1024。试剂血清由上海生物制品研究所生产,效价抗-A为128,抗-B为64。 2.标本:成人及脐带血5％红细胞悬液。 3.方法:①测定ABO血型用盐水凝集试验平板法。②吸收试验:抗-A,抗-B MAb修正液效价为16;抗-A、抗-B试剂血清修正液为16和8。成人A、B、O型,A_1B和A_2B亚型压积红细胞,用倍比稀释后各管加等     

鲎法检查氯化钠注射液热原的一点改进

鲎法 (简称ＬＴ法 )系用鲎试剂与细菌内毒素产生凝聚反应的机理 ,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。用鲎法检查氯化钠注射液的热原《中国药典》1 995年版已正式收载[1 ] 。但因检查时采用的是 0 .1ｍｌ+0 .1ｍｌ的方法 (即在 0 .1ｍｌ/支规格的鲎试剂安瓿中加 0 .1ｍｌ的供试品和 0 .1ｍｌ的鲎试剂溶解水 )操作过程比较繁琐。我们采用直接加入 0 .2ｍｌ内毒素溶液或供试品0 .2ｍｌ。该方法既方便工作 ,又节约时间 ,而且灵敏准确快速 ,同时与药典法有很好的一致性 ,现介绍如下。材料与方法1　试验材料　电热恒温水浴箱…     

反复冻融对血型定型试剂的影响

0　引言　正确鉴定血型是确保输血安全的重要措施,目前在使用人源定型血清进行ABO血型定型的同时,已部分使用单克隆抗体(mAb)血型定型试剂.实验观察发现在-20℃冰冻保存的血型定型试剂稳定性较好[1],为了解反复冻融对人源定型血清及mAb血型定型试剂质量的影响,我们对上述两种血型定型试剂进行了实验比较.1　材料和方法1.1　材料　人源抗-A、抗-B血型定型血清由本室制备,mAb血型定型试剂和分别购自两个厂家.1.2　方法　将特异性合格的人源定型血清及mAb血型定型试剂分别测定基础效价、积分和亲和力后,置-20℃低温冰箱冻存,取出置37℃水浴…     

血常规检出的血液病与EB病毒携带者16例

随着医学科学的不断发展 ,检验仪器设备不断更新 ,血液分析仪已在基层普遍使用 ,特别是“三分类”血液分析仪 ,为此 ,把好检验质量关 ,减少血液病与一些病毒感染性疾病的漏诊 ,已成为临检工作中最值得重视的问题。加强血涂片镜检 ,制定复核标准 ,是我科制定的相应措施。从 2 0 0 3年 1月份至 2 0 0 4年 7月份门诊、住院病人的血常规检验中 ,我们发现了 1 5例血液病与 1例EB病毒携带者 ,检出率 0 .0 8%,现报告如下。1　材料与方法1 .1　仪器与试剂　SysmexAC - 90 0型血液分析仪 ,溶血素、稀释液、清洗液均为原装配套试剂。1 .2　标本测定…     

注射用尿激酶的细菌内毒素检查法

注射用尿激酶现收载于《中国药典》2 0 0 0年版二部 ,规定的检查项目是用家兔法进行热原检查。根据细菌内毒素检查法具有快速、灵敏、简便等优点 ,本文通过实验 ,探讨以细菌内毒素检查法取代热原检查法检测注射用尿激酶的可行性。1　实验材料鲎试剂 ,湛江安度斯生物有限公司 ,标示灵敏度0 5Ｅｕ .ｍｌ-1,批号 :0 0 0 92 3,0 10 330 4 ,0 10 5 2 4 1。细菌内毒素工作标准品 ,湛江安度斯生物有限公司 ,效价0 5Ｅｕ .支-1,批号 :0 10 12 1Ｄ ,0 0 12 0 4 0 ;浙江中美生物有限公司 ,效价 0 5Ｅｕ .支 -1,批号 :990 2 2 0。注射用尿激酶 ,北京…     

用培养成色的细菌抗原做肥达-外斐试验

传统的肥达和外斐试验所用的细菌抗原 ,是天然的透明菌体 ,它形成的凝集现象结果判断时有一定的困难 ,较易导致抗体效价判定出现误差。曾有资料报道用菌液染色后做试验[1] ,但试用后发现 ,因上清液颜色较深 ,其效果也不甚理想。我们改用培养而成色的细菌抗原做试验 ,收到了较好的效果 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　培养基制备　营养琼脂lOOml中加入碱性复红酒精饱和液 2 0 μl(0 .4g碱性复红于 95 %乙醇 10ml中研磨溶解 ) ,混匀制成斜面培养基。1.1.2　菌种　伤寒沙门氏菌 ,甲型副伤寒沙门氏菌 ,乙型副伤寒沙门氏菌 ,变形杆…     

PHA对小鼠淋巴细胞的遗传学效应

植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)具有刺激淋巴细胞转化的作用,目前已被广泛应用于各类动物和人的末梢血淋巴细胞体外培养的细胞学和细胞遗传学研究,但在实际应用中效果还极不稳定。目前对小型哺乳动物细胞遗传学的研究,多半采用骨髓细胞直接制备染色体。我们采用小鼠活体注射PHA,刺激淋巴细胞转化,同时研究了PHA对活体小鼠淋巴细胞的遗传毒理学效应。在取材上既取骨髓,也取血淋巴细胞,并将血、骨髓观察数据进行了分析比较。材料和方法1.材料实验动物选用“上生白”小鼠(由安徽省医学科学研究所动物室提供)。体重20克左右,均为雄性。试剂为植物血凝素(上海生物制品研究所产)和     

过氧乙酸氧化胆红素比色法的实验研究

0　引　　言　　从数十种氧化剂和氧化环境中优选了过氧乙酸等试剂 ,它能在很短的时间内将胆红素氧化成无色的化合物 ,而血清中存在的其他色素 (如维生素 B2 、黄连素、参麦注射液、刺五加注射液、茵栀黄、胡萝卜素等 )不发生改变。该试剂比色液长时间稳定 ,不产生浊度。用吸光度降低法求标本中胆红质浓度。该法简单、稳定、快速及干扰因素少 ,与改良 J- G法有很好的相关性。1　材料与方法1 .1　试剂　 1试剂 R1 :取 0 .2 0 g Brij- 35(进口Pure)和冰醋酸 ( AR) 2 0 ml加蒸馏水至 1 L;2试剂R2 :过氧乙酸 ( AR:2 0 % ) ;3Beckman质控血…     

86株非发酵菌的病原菌种类及耐药性分析

非发酵菌是一类分解发酵葡萄糖的细菌 ,多为条件致病菌 ,它的致病占到细菌感染总数的 1 5%左右。近年来 ,随着抗生素的更新和临床的不合理用药 ,其感染率成上升趋势。为了有效降低该类病原菌的感染和防止其耐药性变迁 ,指导临床 ,我们将 2 0 0 0 -2 0 0 2年所有标本中检出的非发酵菌 ,进行病原菌种类及耐药性分析 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 .1　菌株来源取自本所检验科细菌室 2 0 0 0年 1月至2 0 0 2年 1 2月各种送检标本 1 91 0例 ,其中检出致病性非发酵菌 86株。1 .2　细菌分离鉴定使用手工配制及购买浙江天和生物公司的试剂按全…     

中效价乙型肝炎免疫球蛋白阻断乙型肝炎母婴传播的2年效果观察

母婴传播是乙型肝炎(乙肝)传播的重要途径之一,据估计乙肝母婴传播率为40～50％。目前高效价免疫球蛋白(抗 HBs 的 PHA 滴度1:10,000以上)阻断乙肝母婴传播效果约71％。本文报道用中效价免疫球蛋白,阻断乙肝母婴传播的2年效果达72％.