人外周血细胞DNA快速提取

外周血采集方便,是核酸筛查时常规取样途径。提取外周血DNA经典方法常需分离白细胞并经表面活性剂和蛋白酶K(SDS-PK)处理,操作比较繁琐。Bowtell等报告以浓盐酸胍(GHCL)溶液作为蛋白变性剂用于染色体DNA的提取,原方法未经酚抽提而将细胞裂解液与乙醇混合后,采用末端为“U”型的玻璃棒将线状DNA挑出,在实验室试用后发现,在体外培养细胞或组织DNA取样量较多时才易将DNA分子绕在玻璃棒上,且操作时体积大于20ml。为了适用于数毫升全血DNA快速提取。辅     

血细胞基因组DNA的无机盐析法提取

血细胞基因组ＤＮＡ的无机盐析法提取吴有光匡渤海周洪龙飞（医学遗传室南昌３３０００６）基因分析及遗传病的基因诊断，多用血细胞作材料提取基因组ＤＮＡ，国内外学者一般用苯酚——氯仿等有机溶剂萃取经裂解的血细胞基因组ＤＮＡ［１］，笔者参照Ｐｒｏｍｅｇａ公司...     

两种提取血细胞DNA方法的比较

目的：为了配合高原人类基因研究，我们建立了两种提取脱氧核糖酸（ＤＮＡ）的方法；方法：一是由全血分离白细胞后提取ＤＮＡ，另一种是低渗法直接提ＤＮＡ；结果与结论：两种方法其紫外吸收光谱曲线、琼脂糖凝胶电泳检查表明，ＤＮＡ的提取均无降解和破坏，并无任何ＲＮＡ污染；Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交实验表明，这两种方法提取的ＤＮＡ可用于分子遗传学和分子生物学的研究。     

快速高效提取白色念珠菌DNA

建立两种简便的白色念珠菌ＤＮＡ提以方法，即纯ＤＮＡ提取法和快速ＤＮＡ提取法。     

快速高效提取白色念珠菌DNA

目的建立两种简便的白色念珠菌ＤＮＡ提取方法，即纯ＤＮＡ提取法和快速ＤＮＡ提取法。方法以原生质体提取法为基础进行改良，两种方法均用Ｌｙｔｉｃａｓｅ破壁。结果与结论纯ＮＤＡ提取法提取ＤＮＡ耗时６～７ｈ，产量较高，每１０~（１０）个菌细胞可提取４μｇＤＮＡ，且纯度高，ＯＤ_（２６０）ＯＤ_（２８０）＞１．７，对核酸限制性内切酶敏感，适用于各种分子生物学方面的研究。快速ＤＮＡ提取法全过程仅需３～４ｈ，每１０~（１０）个菌细胞提取１μｇＤＮＡ，ＯＤ_（２６０）：ＯＤ_（２８０）＝１．４，不能进行核酸限制性内切酶酶切，但可用于作ＰＣＲ扩增。     

外周血细胞DNA、RNA及血红蛋白同时提取法

采用淋巴细胞分离液分离外周血中的有核细胞。经细胞裂解液处理，上清提取RNA，沉淀提取DNA，用分离液分离所得红细胞沉淀制备血红蛋白溶液，经对抽提物质量进行评价，发现3种提取物质量均高，本法能从少量外周血中同时分离DNA、RNA及血红蛋白，高效易操作，值得推广。     

三种DNA抽提方法对新鲜血细胞及冻血细胞DNA抽提效能的比较

目的 比较3种血细胞DNA提取方法（进口试剂盒、国产试剂盒和改良苯酚抽提方法）对新鲜血细胞及冻血细胞DNA的提取效率及差异。 方法 收集20例胰腺癌患者5 mL外周血标本,经低速离心获得血细胞沉淀后分装,根据保存方式分为新鲜血细胞和冻血细胞。新鲜血细胞不经冻存,在12 h内迅速抽提DNA;冻血细胞在-40℃保存72 h后,室温解冻后抽提DNA。抽提方法分别采用进口试剂盒（Qiagen公司）、国产试剂盒（天根生化科技有限公司）和改良苯酚方法。琼脂糖电泳检测DNA片段的完整性,核酸蛋白检测仪测定DNA纯度和浓度,计算不同抽提方法的DNA得率。 结果 在获得的DNA完整性方面,改良苯酚方法抽提的基因组DNA断裂和降解较少,而进口和国产试剂盒抽提的DNA均有一定程度的降解小片段。在获得DNA的纯度方面,部分冻存血细胞无论应用进口试剂盒、国产试剂盒和改良苯酚方法,均表现出一定的污染杂峰。在DNA得率方面,无论新鲜血细胞和冻存血细胞,均是进口试剂盒得率最高,其次为国产试剂盒;冻血细胞的改良苯酚法DNA得率与国产试剂盒相当,新鲜血细胞的改良苯酚法DNA得率最低。在耗时和成本分析中,试剂盒较快但成本较高。 结论 改良苯酚抽提法可获得较进口和国产试剂盒片段更长、更完整的基因组DNA,虽然在得率和耗时方面稍逊色,但其成本较低,可推荐用于大规模、分批次、低成本冻存血细胞的基因组DNA抽提。     

一种高效快速的质粒DNA小规模提取新方法

在传统碱裂法抽的质粒ＤＮＡ的基础上，该文所提出了去掉了苯酚气仿抽提过程，缩短了碱作用时间，并对其他操作步骤加以适当改进，使从细菌中抽提质粒ＤＮＡ的过程变得简单，快速，高效。     

外周血细胞DNA、RNA及血红蛋白同时提取法

采用淋巴细胞分离液分离外周血中的有核细胞,经细胞裂解液处理,上清提取RNA,沉淀提取DNA,用分离液分离所得红细胞沉淀制备血红蛋白溶液。经对抽提物质量进行评价,发现3种提取物质量均高。本法能从少量外周血中同时分离DNA、RNA及血红蛋白,高效易操作,值得推广。     

外周血DNA简易提取法

从人血液中或组织中提取ＤＮＡ是现代分子生物学研究获得大分子ＤＮＡ的普遍方法，我们对经典［１～４］的ＤＮＡ提取法进行了一些改进和简化，获得了较好的效果，现介绍如下。１方法与结果取ＡＣＤ抗凝血２ｍｌ，加入等量质量浓度为３％明胶生理盐水（含０．５％ＥＤＴＡ...     

一种快速高效提取全血基因组DNA的实验方法

目的 建立一种快速的从少量全血中高效提取基因组DNA的实验方法 .方法 首先低渗处理红细胞,收集白细胞,然后裂解白细胞释放核蛋白,在去污剂及乙酸钾的作用下使核酸与蛋白分离,最后沉淀、纯化DNA.扩增管家基因(β-globin)观察提取效果.结果 该法收集的DNA纯度(OD360/OD280)为(1.82±0.4);每毫升外用血可得DNA19.0～37.0μg,片段大小10～13kb;β-giobin基因扩增电泳带清晰.结论 该法提取DNA简便、高效和经济,易于各级分子生物学实验室使用.     

人外周血细胞线粒体DNA中存在特大片段缺失突变

了解线粒体ＤＮＡ大片段缺失突变及其意义。方法采用６种方法提取人外周血细胞ＤＮＡ,,其中１种方法先分离线粒体,再抽提线粒体ＤＮＡ。以得到的人外周血细胞ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增,其产生经琼脂糖凝胶回收后与ｐＧＥＭ－Ｔ载体连接、转化、测序。结果６种方法抽提ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增后,产物电泳行为相同,发现人血细胞线粒体ＤＮＡ存在１３１６２ｂｐ特大片段缺失突变。结论此缺失首首发现的,经测序证明为人线粒体ＤＮ     

1800MHz电磁波辐射对大鼠外周血细胞DNA的损伤作用

目的探测1800MHz电磁波照射大鼠后对其外周血细胞DNA的损伤效应．方法72只Wistar大鼠随机分为4组（2个实验组和各自的对照组）．实验组大鼠在功率密度分别为0．5mW／cm^2（实验Ⅰ组）和1．0mW／cm：（实验Ⅱ组）的1800MHz连续电磁场条件下照射，对照组进行虚拟暴露，每天12h，连续21d后，用单细胞凝胶电泳试验检测大鼠外周血细胞DNA的损伤情况．结果照射后，两个实验组大鼠外周血细胞拖尾面积均高于对照组（P〈0．05）．结论大鼠经模拟手机辐射强度1800MHz辐射后，大鼠外周血细胞DNA有一定的损伤．     

从血液中提取DNA方法探讨

目的:研究从血液中提取DNA的方法以应用。方法:静脉抽取血样,分别抗凝或不加抗凝处理后,提取DNA,通过电泳和PCR进行检测。结果:凝血和抗凝血的DNA产量和纯度分别是(40.2±8.86)mgDNA/L血液和(1.87±0.11)mgDNA/L,(39.1±10.2)mgDNA/L血液和(1.92±0.12)mgDNA/L。所有样本的DNA分子量都很高,从两者的DNA样本中能很容易地扩增出t-PA基因的第8内含子区Alu等位基因二态性,因此所提取的DNA是完整可靠的。结论:该方法能快速、简单、有效、无毒地从新鲜血液和凝血中提取DNA,适合于临床检测和分子生物学研究。     

细菌DNA提取方法比较

目的：比较细菌DNA4种提取方法的优缺点。方法：采用水煮法、传统法、Genmiction DNA Kit法、E．ZNA法分别制备18种细菌DNA，比较4种方法提取DNA纯度及量的差异。结果：4种方法制备的DNA均可成功应用于PCR扩增，水煮法与E．ZNA法提取DNA量都较大，但前者纯度低于后者；Genmiction DNA Kit法提取DNA纯度高，但量较低；传统法提取的DNA量及纯度均较低，但经济、可靠。结论：4种方法各具特点，应根据实验目的选用。     

痰中结核杆菌DNA提取方法比较

痰中结核杆菌ＤＮＡ提取方法比较陈秀珍内江市二医院为了快速提取ＤＮＡ，缩短ＰＣＲ技术检测时间，提高阳性率，减少标本污染，我室比较了三种提取痰标本中结核杆菌ＤＮＡ的方法，现介绍如下。１材料和方法１．１结核组２４份痰标本，系本院传染科根据临床表现，胸片及细...     

λ噬菌体DNA的快速提取法

从ｃＤＮＡ文库中筛选目的片段是获得新基因的常用和可靠手段。由于具有能扩增和长期保存不失活的优点，目前一般用λ噬菌体ＤＮＡ来作为ｃＤＮＡ文库载体。因此提取λ噬菌体ＤＮＡ便成为鉴定ｃＤＮＡ文库重组效率和获得目的片段的必由之路。通常提取λ噬菌体ＤＮＡ采用２...