心肌内控制释放碱性成纤维细胞生长因子促进血管再生的作用

背景：实验研究表明，生长因子能促进心肌血管再生，采用纤维蛋白胶心肌内控制释放碱性成纤维细胞生长因子的血管再生作用和机制尚不明确。 目的：评价纤维蛋白胶心肌内控制释放碱性成纤维细胞生长因子对急性心肌梗死犬局部相关血管生长因子表达与细胞增殖水平的影响，探讨心肌内控制释放碱性成纤维细胞生长因子对血管再生的治疗作用。 设计：完全随机分组设计，对照实验。 单位：首都医科大学附属北京安贞医院心内科、华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科和上海新兴血液制品研究所。 材料：实验于2001-06／2003-03先后在华中科技大学同济医学院附属协和医院外科动物实验室和解放军总医院医学实验动物中心完成。选用清洁级健康成年杂种犬12只，雌雄不拘。随机将犬分为2组：激光心肌血运重建组和碱性成纤维细胞生长因子组，每组6只。 方法：①将12只成年健康杂种犬于麻醉开胸后暴露心脏，结扎左前降支制作急性心肌梗死模型。动物随机分为2组：激光心肌血运重建组于急性心肌梗死30min后行透壁心肌打孔；碱性成纤维细胞生长因子组则于急性心肌梗死30min后行非透壁心肌打孔，并随后向孔道内注射含有碱性成纤维细胞生长因子的纤维蛋白胶。②术后第8周，采用免疫组织化学染色和HPIAS-2000型彩色病理图文分析系统免疫组织化学分析程序分析缺血心肌局部血管内皮生长因子、转化生长因子β1和增殖细胞核抗原表达水平的变化。③均数间比较采用非配对t检验或方差分析。主要观察指标：激光心肌血运重建组和碱性成纤维细胞生长因子组梗死区心肌血管内皮生长因子、转化生长因子β1和增殖细胞核抗原免疫组织化学染色的定量分析。 结果：激光心肌血运重建组和碱性成纤维细胞生长因子组分别有5只和6只犬进入结果分析，免疫组织化学定量分析发现，碱性成纤维细胞生长因子组梗死区心肌血管内皮生长因子、转化生长因子β1和增殖细胞核抗原染色的显色面积均高于激光心肌血运重建组（t=-7．505,-2．690与-6．895，P〈0．05）。碱性成纤维细胞生长因子组增殖细胞核抗原染色的平均吸光度也高于激光心肌血运重建组（t=15．271。P〈0．05）。 结论：心肌内控制释放碱性成纤维细胞生长因子能提高缺血心肌局部相关血管生长因子（如血管内皮生长因子、转化生长因子β1等）的表达水平，增强细胞增殖，从而促进血管再生。     

激光心肌打孔隧道埋植bFGF缓释胶对急性缺血心肌血管生成及血流灌注的影响

目的评价急性心肌缺血犬模型行激光打孔隧道埋植碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白胶对缺血心肌血管生成及血流灌注的影响.方法18只健康杂种犬随机分成三组,即单纯冠脉结扎组(AMI组)、冠脉结扎加激光打孔组(TMLR组)和冠脉结扎加激光心肌打孔隧道埋植碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白胶组(bFGF组).所有实验犬均结扎左前降支中段造成急性心肌缺血模型,TMLR组和bFGF组在冠脉结扎后30 min于缺血区心肌行激光打孔(TMLR),bFGF组并于激光打孔的心肌隧道内埋植碱性成纤维生长因子纤维蛋白胶(bFGF-FG).术后2个月用冠脉血流显像检测缺血区心外膜表面冠脉侧支及心肌内血流,用免疫组化Ⅷ因子相关抗原染色定量缺血心肌内微血管密度及Ⅷ因子表达.结果TMLR组及bFGF 组缺血打孔区冠脉侧支及心肌内血流的彩色信号面积及平均吸光度均大于AMI组,以bFGF组为显著(P均<0.01),且bFGF组的上述两项指标高于TMLR组(P均<0.05);TMLR组和bFGF组缺血打孔区心肌内微血管密度及Ⅷ因子相关抗原显色面积、平均吸光度均大于AMI组(P＜0.05或0.01),且bFGF 组三项指标高于TMLR组(P均<0.05).结论激光心肌打孔隧道内埋植碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白胶,能够进一步促进缺血心肌内新生血管的生成,加强改善缺血心肌的血流灌注.     

缓释降解支架复合碱性成纤维细胞生长因子诱导心肌血管再生的作用

背景:研究证实碱性成纤维细胞生长因子具有刺激血管再生及侧支重建的作用,但是,以往多通过外周静脉、左心房或冠脉介入途径给药,心肌局部难以达到有效治疗浓度.目的:基于高分子材料聚乳酸/乙醇酸的降解特性,复合碱性成纤维细胞生长因子,保证蛋白生长因子在局部组织中靶向释放,观察其诱导心肌血管再生效果.方法:以聚乳酸、乙醇酸为原料,二氯甲烷溶解后加入重组人碱性成纤维细胞生长因子,通过模具塑形,制成外径,内径分别为3.0,2.8 mm、壁厚0.1 mm、长度10 mm的圆柱形中空管状支架备用.于小型猪冠脉前降支中、远端1/3交界处阻断,局部心肌颜色变为暗紫色,超声观察前壁心尖局部室壁运动异常证实模型制作成功,随机分至空白支架对照组和碱性成纤维细胞生长因子支架组,支架通过自主设计的机械打孔装置植入.6周后,免疫组织化学染色量化分析血管重建的增殖细胞数量,并结合Image Pro Plus软件量化各组新生血管密度,SPECT结合软件Emory Cardiac Toolbox分析灌注缺损区域质量百分率的变化.结果与结论:6周后碱性成纤维细胞生长因子支架组增殖细胞数量、新生血管密度较空白支架组显著增加(P<0.001),心肌核素显像显示灌注质量缺损百分率较空白支架组显著减少(P<0.001). 结果证实,复合碱性成纤维细胞生长因子的聚乳酸,乙醇酸支架能够显著增加新生血管密度,进而改善缺血部位心肌血流灌注.     

脐血血管内皮祖细胞移植对心肌梗死血管形成的影响

背景:人体内存在一种能以血管发生方式形成新生血管的内皮祖细胞,更新了传统意义上的出生后血管生成、血管损伤修复的理论.目的:观察犬脐血血管内皮祖细胞移植对梗死心肌血管形成的影响.设计、时间及地点:细胞学体内实验,于2006-05/2007一03在新华医院实验中心完成.材料:接近足月的妊娠杂种犬1只,用于制备脐血血管内皮祖细胞;成年犬36只,随机分为细胞移植组、模型对照组,18只,组.方法:2组犬均于冠状动脉前降支第1对角支分出后结扎建立急性心肌梗死模型.细胞移植组向冠状动脉内注射含5×106个血管内皮祖细胞(经BrdU标记)的生理盐水2 mL,模型对照组同法注射单纯等量生理盐水.移植后1,4,8周处死取材.主要观察指标:心肌标本苏木精-伊红染色确认梗死模型,BrdU免疫组化染色观察心肌血管新生情况,vW因子染色观察梗死心肌血管数.结果:心肌梗死区可见大量的瘢痕组织、成纤维细胞以及小血管形成.细胞移植组梗死心肌区小血管上可见部分细胞核内有棕黄色颗粒,BrdU呈阳性表达;模型对照组无明显新生血管.细胞移植组在心肌缺血区和梗死区血管内皮细胞的胞浆内有棕黄色颗粒,vW因子呈阳性表达;模型对照组不表达vW因子.心肌梗死后第1,4,8周,细胞移植组和模型对照组的心肌缺血区、梗死区的血管数均无明显差异(P>0.05).结论:犬脐血血管内皮祖细胞移植至梗死心肌后可参与血管形成,但尚小能够促进心肌的血管再生.     

自体骨髓动员对急性缺血心肌血管再生的影响

背景:动物实验表明,应用干细胞移植有可能取代受损心肌细胞并建立新的血管来改善血液供应.目的:观察应用集落刺激因子骨髓动员急件心肌梗死模型猪心功能及新生血管的作用.方法:健康太湖梅山猪10头,建立猪心肌梗死模型后,随机分为2组.对照组4周后经冠状动脉注射DMEM:实验组心肌梗死后3 h 并连续5 d注射粒细胞集落刺激因子.心肌梗死后第8周行超声心动检测心功能,检测不同时间点血清血管内皮生长因子和转化生长因β值,梗死区标本苏木精-伊红染色观察病理变化及Ⅷ因子免疫组织化学染色检测毛细血管密度.结果与结论:骨髓动员后实验组血清血管内皮生长因子,转化生长因子β水平上升明显,标本Ⅷ闪了免疫组织化学染色法血管密度有明显上升.结果提示集落刺激因子诱导的白体骨髓下细胞动员对急性缺血心肌血管再生有很明显的促进作用.     

激光对炎症牙髓中碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

背景：激光应用于口腔临床主要用于龋齿的早期诊断、龋坏组织的清除、活髓切断术牙髓止血、牙本质过敏治疗、感染的根管消毒、牙周炎治疗。目的：观察炎症牙髓使用激光处理后碱性成纤维细胞生长因子的变化。方法：5只成年健康beagle犬,每只随机选择6颗牙齿,分为3组,每组10颗,分别使用激光、生理盐水、庆大霉素处理,于术后第1,2,3天用纸尖收集牙髓分泌物检测碱性成纤维细胞生长因子的含量,并进行牙髓苏木精-伊红染色和免疫组织化学检查。结果与结论：生理盐水处理组、庆大霉素处理组及激光处理组第3天碱性成纤维细胞生长因子表达量均明显多于第1天和第2天,第1天和第2天比较差异无显著性意义,3种处理方法之间比较差异无显著性意义。牙髓苏木精-伊红染色和免疫组织学检查显示,髓腔血管状况良好,牙髓排列紧密良好。结果表明,激光治疗对炎症牙髓中碱性成纤维细胞生长因子的释放没有影响。提示激光在口腔临床上的应用是安全、方便、有效的,不会对炎症牙髓组织造成损伤。     

骨髓单个核细胞移植后心肌梗死区的血管生成及细胞因子分泌

背景：干细胞移植为治疗心肌梗死带来新的希望,但研究结果不一致,存在争议。细胞移植能否长期持久地改善心脏功能、改善缺血心功能的机制这些问题均不明确。目的：观察经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植对急性心肌梗死犬心功能、血管生成和细胞因子分泌的影响。方法：杂种犬分为骨髓单个核细胞组（n=10）和生理盐水组（n=6）,前上嵴或髂后上棘穿刺分离得到骨髓单个核细胞,结扎冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型,于心肌梗死后2h分别经冠状动脉内移植骨髓单个核细胞和生理盐水,心肌梗死后2h及6周时分别测定超声心动图指标,骨髓单个核细胞移植后6周vWF免疫组化染色检测心肌组织的毛细血管密度,RT-PCR检测血管内皮生长因子（血管内皮生长因子188、血管内皮生长因子164）、碱性成纤维细胞生长因子、基质金属蛋白酶9mRNA的表达。结果与结论：经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植后6周,超声心动图显示,骨髓单个核细胞组射血分数和每搏输出量比生理盐水组显著升高;梗死边缘区新生血管数量明显高于生理盐水组。骨髓单个核细胞组梗死区血管内皮生长因子188、血管内皮生长因子164和碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达水平显著高于生理盐水组。骨髓单个核细胞组梗死区基质金属蛋白酶9mRNA表达水平显著低于生理盐水组。结果说明自体骨髓单个核细胞经冠状动脉内注射移植,改善急性心肌梗死后心功能,促进梗死边缘区血管生成,提高促血管生长因子血管内皮生长因子188、血管内皮生长因子164和碱性成纤维细胞生长因子的mRNA表达水平,减少基质金属蛋白酶9mRNA表达水平。     

大鼠主动脉内膜损伤后新生内膜各种生长因子表达与表没食子儿茶素没食子酸酯的干预

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3 gallate,EGCG)对大鼠主动脉内膜损伤后再狭窄的影响,探讨其对新生内膜各种生长因子表达的干预效应。方法:实验于2006-03/10在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成。实验分组:选用清洁级雄性健康SD大鼠72只,体质量(300±35)g,随机数字表法分为对照组、模型组、EGCG低剂量组和EGCG高剂量组,每组18只。实验方法:以球囊损伤方法建立大鼠主动脉内膜损伤模型。①对照组:结扎左颈总动脉,不插入球囊导管,不给药。②模型组:结扎左颈总动脉并球囊拉伤主动脉内膜,不给药。③EGCG低剂量组:拉伤主动脉内膜,给予20mg/(kg.d)EGCG灌胃。④EGCG高剂量组:拉伤主动脉内膜,给予50mg/(kg.d)EGCG灌胃,药物组术前3d给药。对照组及模型组予生理盐水灌胃,直至实验结束。实验评估:每组于术后14,28d分别随机选取9只大鼠,取其主动脉进行苏木精-伊红染色并作血管形态学检测;同时进行免疫组织化学染色检测增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子BB、碱性成纤维细胞生长因子、生长转化因子β1的表达水平。结果:纳入大鼠72只,其中模型组28d时1只鼠死于腹主动脉血栓;14d时1只鼠右后肢出现血栓性跛行;EGCG低剂量组14d时1只死于手术急性呼吸窘迫综合征,1只死于术后21d胸水形成,无血栓形成现象;EGCG高剂量组14,28d各有1只分别因感染、误灌入气管死亡,无血栓形成现象;对照组动物生长状况良好;最后67只大鼠进入结果分析。①模型组新生内膜显著增厚,新生内膜平均厚度、面积自胸主动脉到腹主动脉上段及下段逐渐增加、狭窄逐渐明显。②EGCG低剂量组新生内膜平均厚度及面积于术后14d下降,与模型组比较,无显著差异[(45.89±9.54),(60.75±17.70)μm;(1.10±0.29),(1.55±0.61)mm2;P>0.05],但两者于术后28d则显著降低(P<0.05);EGCG高剂量组术后14,28d的新生内膜平均厚度、面积均显著下降[14d:(20.21±5.55),(60.75±17.70)μm;(0.48±0.22),(1.55±0.61)mm2;28d:(35.08±12.39),(80.75±22.27)μm;(0.82±0.50),(2.35±1.03)mm2;P<0.01]。③模型组动脉增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子BB、碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1表达显著增加;低剂量EGCG对内膜损伤后增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子、碱性成纤维细胞生长因子表达无明显抑制作用;而高剂量在术后14,28d均显著抑制增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子、碱性成纤维细胞生长因子表达。EGCG对转化生长因子β1表达无影响。结论:EGCG剂量依赖性地抑制动脉内膜损伤后再狭窄,其作用与抑制血小板源性生长因子、碱性成纤维细胞生长因子表达有关。     

同种异体骨髓间充质干细胞穴位移植:急性心肌梗死后血管新生及相关细胞因子的变化

背景:骨髓间充质干细胞移植途径主要包括外周静脉注射移植、冠状动脉移植以及心肌内注射移植,但存在迁移缺少靶向性,价格高昂等局限性.目的:观察同种异体骨髓间充质干细胞穴位移植兔急性心肌梗死后梗死区血管新生及相关细胞因子的变化.方法:提取兔骨髓进行骨髓间充质干细胞的分离、培养、纯化、扩增、鉴定,并标记.将55只兔随机分为正常组与手术组.手术组急性心肌梗死后1周,再随机分为3组:穴位注射干细胞组、模型对照组、穴位注射生理盐水组.5周后,取心肌组织进行免疫组织化学BrdU染色、心肌特异性肌钙蛋白T免疫组织化学染色检测;免疫组织化学法检测梗死心肌组织血小板内皮细胞黏附因子1水平;免疫组织化学法,夹心酶联免疫法、RT-PCR法、Western-Blot法检测血管内皮细胞生长因子及免疫组织化学法榆测碱性成纤维细胞生长因子.结果与结论:穴位注射的骨髓间充质干细胞可迁移至梗死区,并可以在梗死区分化为心肌样细胞.与模型对照组及穴位注射生理盐水组比较,穴位注射骨髓间充质干细胞可使梗死区及周围组织血小板内皮细胞黏附因子1表达上调,诱导梗死区及周围组织血管新生,其机制是刺激心肌组织中碱性成纤维细胞生长因子表达上调.穴位注射骨髓间充质干细胞组梗死心肌组织中和血清中血管内皮细胞生长因子表达均无上调趋势,因此推测,血管新生由碱性成纤维细胞生长因子及未知因素诱导.     

生骨注射液对骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子表达的影响

背景:在促进骨折修复研究中,应用外源性生长因子极不稳定,且造价高不适宜广泛推广,如何有效地促进内源性生长因子的表达将是值得深入研究的课题.目的:观察生骨注射液对骨折愈合过程中内源性碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子表达的影响.设计、时间及地点:完全随机分组设计,对照实验,于2007-07/2008-08在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室完成.材料:清洁级3月龄雄性SD大鼠60只.生骨注射液由当归、土鳖虫、淫羊藿等药物组成,由湖北省中医院提供,质量浓度为1 g/L.方法:建立SD大鼠胫骨干骨折愈合模型,分成实验组和对照组各30只,分别在骨折断端等量注射生骨注射液和生理盐水,每两日1次,0.2mL/次.两组分别于术后第1,2,3,4,5,6周时各处死5只大鼠,取材.主要观察指标:采用免疫组织化学方法,检测两组大鼠骨折愈合过程中不同阶段骨痂组织中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子蛋白的表达及差异情况.结果:免疫组织化学染色显示,各时间点实验组骨痂组织中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子表达量及阳性定位均明显强于对照组.结论:生骨注射液能够增加骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子在骨痂组织中的表达,这可能是生骨注射液促进骨折愈合的机制之一.     

纤维蛋白胶控制bFGF在激光心肌隧道内释放对急性缺血心肌重构的影响

目的　评价纤维蛋白胶 (FG)控制bFGF在激光心肌打孔隧道内释放对犬急性缺血心肌重构的影响。方法　 18只健康杂种犬结扎左前降支中段造成急性缺血心肌模型 ,随机分成三组 ,即单纯冠脉结扎组 (AMI组 )、冠脉结扎加激光心肌打孔组 (TMLR组 )和冠脉结扎加激光心肌打孔隧道注入碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白胶组 (bFGF组 )。术后 2个月用超声和显微病理技术观察缺血心肌形态及结构的变化。结果　左房室腔内径三个实验组之间无统计学差异 (P >0 .0 5 )。AMI组有 2只犬、TMLR组有 1只犬存在心尖部室壁瘤 ,bFGF组无室壁瘤现象。左室前壁及前室间隔厚度 (TL VAW、TAIVS)在bFGF组、TMLR组和AMI组依次减小 ,其中bFGF组TLVAW与AMI和TMLR组之间的差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。AMI组缺血区存在大量的坏死心肌细胞 ,TMLR组部分心肌细胞变性坏死、部分结构正常 ,bFGF组大部分心肌细胞结构正常 ,小部分变性坏死。结论　用FG控制bFGF在激光心肌打孔隧道内释放 ,能够减轻或阻止心肌缺血性损害以及缺血心肌的重构。     

双龙丸对大鼠实验性心肌梗死血管新生的影响与分子学机制

目的 探讨双龙丸对缺血心肌血管新生的影响和分子学机制。方法 63只Wistar大鼠参照Drexler法结扎冠状动脉左前降支，制成急性心肌梗死(AMI)模型。随机分为双龙丸大剂量组(6．72g／kg)、双龙丸小剂量组(3．36g/kg)、AMI对照组(生理盐水灌胃)，另取11只大鼠为正常对照组(生理盐水灌胃)，各组治疗观察半数至2w、半数至4w结束。应用免疫组化两步法检测AMI大鼠缺血心肌新生血管数量、免疫组化SP法检测缺血心肌血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bPGF)的表达、逆转录多聚酶链反应(RT—PCR)法检测缺血心肌VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达。结果 双龙丸大、小剂量组各期的缺血心肌新生血管数均比AMI对照组增多，且第4w比第2w更显著；第2w时，大剂量组VEGF较AMI对照组、bFGF较小剂量组和AMI对照组均增高，大剂量组4w时VEGF较2w降低；大、小剂量组各期VEGF mRNA的表达均比AMI对照组增高，其第4w均较第2w为低；而bFGF mRNA的表达则仅见大剂量组第2w时高于其他组；以上各组比较均具有显著性差异(P＜0．05—0．01)。结论 双龙丸能够促进缺血心肌血管新生；大剂量应用对VEGF、bFGF及其mRNA均有明显的上调作用。     

碱性成纤维细胞生长因子缓释支架联合骨髓间质干细胞治疗猪心肌梗死的心肌SPECT显像

目的 评价心肌SPECT显像对碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)缓释支架联合骨髓间质干细胞(BM-MSCs)移植治疗中国实验用小型猪急性心肌梗死的价值.方法 中国实验用小型猪18头,按完全随机法分为3组:机械打孔+空白支架(对照组)、机械打孔+b-FGF支架(单纯治疗组)、机械打孔+b-FGF支架+BM-MSCs(联合治疗组).所有猪左前降支均被结扎制作心肌梗死模型.3组均在梗死区及周边区机械打孔并分别埋入空白支架、b-FGF支架、b-FGF支架+BM-MSCs;术后行心肌SPECT显像检测心肌血流的改变,同时还进行超声心动图、免疫组化检查.结果 术后6周,治疗组梗死心肌质量差值、短轴缩短率、新生血管密度均高于对照组(P<0.05),且联合治疗组高于单纯治疗组(P<0.05).结论 b-FGF缓释支架联合BM-MSCs能够改善心肌梗死区域血流、促进血管生长、提高心功能;心肌SPECT显像是评估碱性成纤维细胞生长因子缓释支架联合骨髓间质干细胞治疗急性心肌梗死效果有价值的方法.     

定量组织多普勒评价急性心肌梗死自体骨髓干细胞移植联合激光血运重建术的实验研究

目的应用定量组织多普勒观察自体骨髓间充质干细胞（MSC）移植联合激光血运重建术（TMLR）治疗急性心肌缺血效果。方法建立32只新西兰大白兔急性心肌梗死模型，分为对照组、MSC移植组、TMLR组及联合治疗组，于心肌梗死前、心肌梗死后及治疗后测定射血分数（EF）、室间隔基底段及心尖段的位移（D）和应变（S）。治疗后4周处死动物行双重免疫组化染色检查及测量毛细血管密度。结果心肌梗死后EF、梗死部位D及S值显著下降。治疗后，MSC移植组及联合治疗组EF、梗死部位D及S值治疗后显著改善，病理学检查可见双染阳性细胞；其余两组未见双染阳性细胞，治疗后心功能无改善。联合治疗组毛细血管密度高于其他各组。结论MSC移植能够改善急性心肌梗死后心肌收缩功能，TMLR未增强MSC移植疗效，定量组织多普勒能够敏感评价心肌功能变化。     

纤维蛋白胶外支架转染PCNA基因反义寡核苷酸预防移植静脉再狭窄

背景：前期研究成果,纤维蛋白胶不仅是一种良好的非限制性、生物可降解血管外支架,能够预防移植静脉内膜和中膜增生,而且是一种良好的药物缓释系统,能够提高血管外膜基因转染效率。目的：验证应用纤维蛋白胶外支架转染PCNA基因反义寡核苷酸预防移植静脉再狭窄的作用。方法：建立兔颈外静脉颈总动脉旁路移植模型,随机分为模型组、纤维蛋白胶支架组、纤维蛋白胶联合反义PNCA组。后两组分别给予纤维蛋白胶和纤维蛋白胶与携带PCNA反义寡核苷酸腺病毒的混合物于静脉桥外周均匀喷洒。结果与结论：移植后第28天模型组静脉移植物内膜和中膜增生明显,纤维蛋白胶外支架组静脉移植血管内膜和中膜增生程度明显减少（P〈0.01）,纤维蛋白胶联合反义PNCA组内膜和中膜增生程度明显少于纤维蛋白胶外支架组（P〈0.05）。纤维蛋白胶联合反义PNCA组PCNA基因mRNA及蛋白表达明显减少纤维蛋白胶外支架组（P〈0.05）,纤维蛋白胶外支架组表达明显弱于模型组（P〈0.05）。提示血管外膜反义PCNA转染可进一步抑制移植静脉管壁PCNA表达,纤维蛋白胶外支架联合反义PCNA对移植静脉内膜和中膜增生有协同抑制作用。     

Transmyocardial revascularization: peril and potential

Transmyocardial laser revascularization is a technique for the treatment of patients with chronic angina pectoris that is refractory to medical therapy and who are not eligible for surgical intervention. Percutaneous myocardial revascularization is a less-invasive catheter-based procedure that has been adapted from transmyocardial laser revascularization. Six prospective randomized clinical trials have been performed with transmyocardial laser revascularization and 5 have been performed using percutaneous myocardial revascularization. All of the transmyocardial laser revascularization and 4 of the percutaneous myocardial revascularization studies showed a significant improvement in angina class; however, results for improved survival, increased exercise tolerance, improved ejection fraction, and improved myocardial perfusion were less definitive. Transmyocardial laser revascularization has significant potential for morbidity and mortality. This article summarizes the results of the randomized trials, explains the current theories for the mechanism of transmyocardial laser revascularization, and discusses its current role in treatment for patients, considering the evidence that currently exists.     

Reduction of infarct size in the rat heart by LPS preconditioning is associated with expression of angiogenic growth factors and increased capillary density.

Inflammation induces the expression of angiogenic growth factors in tissues, which leads to microvascular growth. Bacterial lipopolysaccharide (LPS) provokes a transient inflammatory response in the heart and induces delayed cardiac resistance to post-ischemic contractile dysfunction. In this study, we examined: 1) the effects of LPS on myocardial expression of basic fibroblast growth factor (bFGF) and vascular endothelial growth factor (VEGF), 2) whether an increase in the density of myocardial microvessels follows the expression of angiogenic growth factors, and 3) the effect of LPS on myocardial resistance to infarction and its relationship with microvascular growth. Rats were treated with LPS (from Salmonella typhimurium, 0.5 mg/kg i.p.). The expression of bFGF and VEGF in the myocardium was examined at 6 and 12 h after LPS treatment by immunofluorescent staining. Myocardial capillary and arteriole densities were determined 3 days after LPS treatment by morphometry, using immunofluorescent staining of von Willebrand factor (a marker protein of endothelial cells) and alpha-smooth muscle actin (a marker protein of smooth muscle cells). To examine cardiac resistance to infarction, hearts were subjected to 40 min of regional ischemia and 2 h of reperfusion by reversible occlusion of left coronary artery at 3 days after LPS treatment. LPS induced cardiac bFGF and VEGF at 6 and 12 h after treatment. The expression of these growth factors was followed by an increase in myocardial capillary density (2032 +/- 78/mm2 vs. 1617 +/- 47/mm2 in saline control, P < 0.05), but not arteriole density, at 3 days. Meanwhile, infarct size was significantly reduced by LPS preconditioning (infarct/left ventricle 12.3 +/- 1.04% vs. 21.7 +/- 1.65% in saline control, 43% reduction, P < 0.05). These results suggest that LPS preconditioning induces cardiac bFGF and VEGF, and an increase in myocardial capillary density. This increased myocardial capillary density is associated with a reduced infarct size after in vivo regional ischemia-reperfusion.     

心肌再血管化机制的对比实验研究

目的观察研究钬激光和True-cut活检针心肌再血管化近、远期的机制和效果。方法利用经静脉注射造影剂对犬缺血心肌模型进行心肌超声微泡造影。结果部分结扎犬的冠状动脉前降支,建立缺血模型后,缺血区超声微泡密度明显降低,分别用2种方法再血管化后,2组犬缺血区超声微泡密度较缺血时均明显增加,接近其缺血前的微泡密度;再血管化区超声微泡较其他部位提前显影。远期超声微泡检查显示心肌灌注较急性缺血时也有一定改善。结合组织学方法发现,远期心肌灌注的改善得益于隧道周围新生循环结构如心肌窦和新生血管的增加。结论钬激光和True-cut活检针隧道均可即刻使缺血心肌灌注改善,并逐渐闭塞,新生循环结构使缺血区得到有限的灌注。应用新一代经静脉注射造影剂超声心肌微泡造影结合组织学方法可作为研究心肌再血管化机制的可靠手段。     

急性心肌梗死猝死患者心肌热休克蛋白70和血红素氧合酶1的改变及其意义

目的 探讨急性心肌梗死(AMI)猝死者梗死区心肌热休克蛋白70(HSP70)、血红素氧合酶1(HO-1)的mRNA和蛋白表达改变与临床意义.方法 收集18例AMI猝死者的尸体解剖梗死区心肌为研究组,17例因交通事故快速死亡者的尸体解剖正常心肌为对照组.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法检测两组心肌组织HSP70、HO-1的mRNA和蛋白表达,并观察心肌组织病理变化.结果 研究组梗死区心肌HSP70 mRNA(0.841±0.058)、HO-1 mRNA(0.918±0.161)和HSP70蛋白(3 556.68±574.19)、HO-1蛋白(4 336.68±865.30)表达均显著高于对照组(0.105±0.034、0.086±0.053、289.21±68.51、1 556.78±506.26,均P＜0.01).研究组梗死区心肌细胞内HSP70、HO-1蛋白呈阳性或弱阳性表达;对照组心肌细胞内HSP70表达阴性,而HO-1蛋白有弱阳性表达.研究组梗死区心肌HSP70与HO-1的mRNA及蛋白表达均呈显著正相关(r1=0.865,r2=0.816,均P＜0.01).结论 HSP70、HO-1可能共同参与了AMI的病理生理过程;HO-1在心肌细胞内表达可能具有普遍性,但在梗死区心肌表达更明显.     

In vitro analysis of the interactions between preadipocytes and endothelial cells in a 3D fibrin matrix.

The volume-persistent survival of transplanted adipose tissue in vivo relies on early vascularization, due to an otherwise early induction of apoptosis of the centrally located cells. Thus, one way to enable the early formation of a capillary network resulting in a sufficient perfusion of the transplanted construct might be the co-transplantation of autologous preadipocytes with endothelial cells. To investigate preadipocyte-endothelial cell interaction, three-dimensional proliferation- and angiogenesis assays were performed in vitro. Proliferation rates of co-cultured endothelial cells and preadipocytes suspended in a fibrin matrix were elucidated by Alamarblue assays. The spheroid angiogenesis model was applied for analyzing the effects of vascular endothelial cell growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) (produced by preadipocytes) as well as the impact of cell-cell interaction between preadipocytes and endothelial cells and fibrin matrix on endothelial cell migration. Preadipocytes proliferated in fibrin glue, whereas endothelial cells underwent apoptosis. By co-culturing, both cell types demonstrated an increased proliferation rate. Preadipocytes provoked migration of endothelial cells. Blocking bFGF and/or VEGF led to a significant decrease of migration. Changes in fibrin structure were followed by migration of single cells instead of sprouting. An appropriate fibrin matrix as well as already differentiated endothelial cells are necessary for preadipocytes to develop their angiogenic activity via bFGF and VEGF.