苍术酮对肥胖斑马鱼的降脂作用

目的 探究苍术酮对肥胖斑马鱼的降脂作用。方法 斑马鱼幼鱼随机分为正常组、模型组和苍术酮低、中、高浓度组(0.2、0.4、0.8μg/mL),蛋黄液干预72 h后给药24 h。记录幼鱼体质量,试剂盒检测TC、TG、HDL-C水平,HE染色和油红O染色观察肝脏形态学变化,转录组测序和PCR技术分析相关信号通路及基因表达情况,Pearson相关性分析对相关差异基因与各脂质指标进行相关性分析。结果 与模型组比较,苍术酮高浓度组体质量和TC、TG水平均降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平均升高(P<0.01),苍术酮各浓度组均可改善斑马鱼肝脏脂质累积状态。苍术酮可上调PPAR信号通路中apoa1a mRNA表达(P<0.01),下调fabp2 mRNA表达(P<0.01)。TC及TG水平、肝脏脂肪变性率、肝脏脂质沉积面积比与apoa1a基因呈负相关(P<0.05,P<0.01),与fabp2基因呈正相关(P<0.05,P<0.01);HDL水平与apoa1a基因呈正相关(P<0.01),与fabp2基因呈负相关(P<...     

基于Notch信号通路探究葛根素对肺动脉高压小鼠治疗作用机制研究

目的 观察葛根素(puerarin, Pur)对肺动脉高压小鼠的治疗作用并探究其作用机制。方法 40只SPF级C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和Pur组(200 mg/kg)和Pur+DATP(Notch信号通路抑制剂)组,模型组、Pur组和Pur+DATP组小鼠建立缺氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension, HPH)模型,对照组小鼠在常规环境饲养,每周称量体质量。末次给药后2 h检测小鼠心功能和肺动脉血流变化,计算右心室肥厚指数(RVHI), HE染色观察肺血管重构情况,Masson染色观察肺血管纤维化情况,试剂盒检测肺组织SOD、MDA、GSH-Px、CAT和T-AOC水平,Western blot法检测肺组织Jagged-1、Notch-3、Hes-5蛋白表达水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠状态较差,肺动脉血流速度降低,右心室功能减弱,RVHI值升高,肺小动脉重构和胶原纤维沉积明显,肺组织SOD、GSH-Px、CAT和T-AOC水平降低,MDA水平升高,Jagged-1、Notch-3、Hes-5蛋白表达水平升高。与模型组比较,...     

针刺经筋点对膝关节骨性关节炎Notch信号通路调控机制及Notch1、Notch2、Jagged1、Jagged2蛋白表达的实验研究

目的 通过针刺经筋点对家兔膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)的干预治疗,观察家兔治疗前后血清中缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、膝关节软骨细胞中Notch1、Notch2、以及Jagge1、Jagged2蛋白的表达情况,以探讨在经筋理论指导下的针刺方法对膝关节炎家兔的Notch信号通路的调控机制。方法 选取30只清洁级日本大耳白兔,雌雄各半,随机数字表法抽取8只正常饲养做为空白组,余下兔均按左后肢伸直位石膏固定制动法(Vidman法)制造兔膝关节炎模型。制动满6周时,拆除固定,随机选取空白组和造模家兔各2只,应用量角器检测膝关节关节活动度,并处死取关节软骨作病理观察。将造模后的家兔随机分为模型组、经筋组、西药组,6只/组,并分别于干预4周后处死取样。用量角器和改良Lequesne MG评分标准分别测量和观察治疗前后兔膝关节的关节活动度(ROM)和行为学指标,取关节软骨标本并观测其形态学改变,ELISA法检测血清中HIF-2α含量,并采用Western Blot法检测Notch1、Notch2、以及Jagged1、Jagged2蛋白表达量。结果 治疗后,...     

扶正补血食疗方含药血清干预Notch通路调控骨髓造血干细胞化疗后损伤的机制研究

目的:通过扶正补血食疗方含药血清干预5-FU损伤小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)和造血干细胞(HSCs)体外共培养模型,探讨补血食疗方对化疗后模拟"造血龛"中小鼠HSCs增殖、凋亡以及Notch信号通路的影响.方法:建立小鼠BMSCs和HSCs的共培养模型.共培养细胞随机分为空白组、5-FU组和扶正补血食疗方含药血清...     

重楼皂苷Ⅰ激活IGFBP1信号通路抑制肝癌细胞生长和增殖的作用机制

目的:探讨中药单体重楼皂苷Ⅰ抑制肝癌细胞生长和增殖的分子作用机制.方法:采用MTT和EDU法检测肝癌Bel-7402细胞的生长和增殖情况;Western Blot法检测Bel-7402细胞中肿瘤相关特异蛋白1(Sp1)和胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)的表达水平;采用细胞瞬间转染技术将Sp1过表达质粒或IGF...     

Notch信号通路在T-ALL细胞中的作用及其机制研究

T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)属于一种能够对人体血液系统健康造成严重威胁的恶性疾病,其临床上常见于儿童及成年人.目前临床上以药物联合化疗的方法对该疾病进行治疗,虽然具备一定治疗效果,但是患者远期生存率仍较低.同时T-ALL发病时的分子机制具有复杂性.Notch信号与肿瘤具有一定关系,其最早见于急性T淋巴细胞白血...     

五子衍宗丸对化疗性肠黏膜炎小鼠的保护作用及其机制研究

目的 观察五子衍宗丸(WYP)对5-氟尿嘧啶(5-FU)引起的肠道炎的保护作用并探讨其作用机制.方法 将小鼠随机分为正常组、对照组、雷莫司琼(RAM)组、五子衍宗丸高剂量(HWYP)组、五子衍宗丸中剂量(MWYP)组、五子衍宗丸低剂量(LWYP)组,对照组、WYP组和RAM组使用5-FU造模.观测小鼠腹泻和体质量情况;...     

白花蛇舌草提取物逆转结肠癌细胞5-Fu耐药的作用

目的 探讨白花蛇舌草提取物逆转结肠癌细胞5-Fu耐药的作用及其可能作用机制. 方法 白花蛇舌草提取物对结肠癌5-Fu耐药细胞HCT-8/5-Fu进行药物干预,用MTT法检测结肠癌5-Fu耐药细胞的活力;采用Transwell细胞迁移和细胞黏附实验,在倒置显微镜下观察药物对细胞迁移和黏附的影响;RT-PCR法检测耐药相关基因ABCG2的mRNA表达. 结果 白花蛇舌草提取物能显著抑制HCT-8/5-Fu细胞的活力及细胞迁移、黏附的作用,呈现明显的剂量和时间依赖;同时白花蛇舌草提取物能明显抑制ABCG2的mRNA表达. 结论 白花蛇舌草具有抗大肠癌5-Fu耐药的作用,下调耐药基因ABCG2的mRNA表达是白花蛇舌草逆转耐药的重要作用机制之一.     

基于网络药理学与实验验证探讨茯苓对化疗性肠黏膜炎小鼠的作用及机制

目的 观察茯苓对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导的化疗性肠黏膜炎(chemotherapeutics-induced intestinal mucositis,CIM)模型小鼠的治疗作用,并结合网络药理学探讨其作用机制。方法 通过TCMSP数据库获得茯苓的潜在成分与核心靶点;通过GeneCards数据库收集CIM相关基因靶点;使用Metascape数据库进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析。小鼠连续5 d腹腔注射5-FU诱导CIM模型;小鼠给予茯苓预防治疗5 d,边造模边给药治疗5 d,造模结束后治疗3 d,记录动物基本体征指标;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察回肠黏膜组织病理损伤情况;免疫荧光染色观察回肠组织肠黏膜核因子(nuclear factor,NF)-κB p65、环氧化酶(cyclooxygenase,COX)-2与闭合蛋白(Occludin)的阳性表达情况。结果...     

大蒜素对5-氟尿嘧啶治疗肝癌的增效作用及机制

目的研究大蒜素增强肝癌细胞SMMC-7721对5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性作用及机制。方法用不同浓度的大蒜素和亚叶酸钙(CF)同时联合5-FU处理肝癌细胞株SMMC-7721。将对数生长的SMMC-7721细胞株随机分为空白对照组、5-FU(100 mg/L)组、低浓度大蒜素(25 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组、中浓度大蒜素(50 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组、高浓度大蒜素(100 mg/L)+5-FU (100 mg/L)组、低浓度CF(5 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组、中浓度CF(10 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组、高浓度CF(20 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组。采用CCK-8检测细胞增殖抑制率,选择同类药物中抑制率最高的组完成后续实验。采用流式细胞术检测细胞周期。用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡。采用Western Blot法检测与耐药相关的P糖蛋白(Pgp)和多药耐药相关蛋白-1(MRP-1)表达。结果与5-FU组比较,低、中、高浓度大蒜素均可协同5-FU抑制SMMC-7721生长,而高浓度大蒜素+5-FU组的增殖抑制作用最明显(P<0.05);选择效果较好的高浓度大蒜素+5-FU组和中浓度CF+5-FU组继续完成后续实验。各给药组均能将细胞阻断在S期,高浓度大蒜素+5-FU组的S期阻滞作用较其他组更为明显,并且还具有明显的G2/M期细胞阻滞作用(P<0.05)。高浓度大蒜素+5-FU组能更明显地诱导肝癌细胞凋亡,降低Pgp和MRP-1蛋白表达水平(P<0.05)。结论大蒜素能够增强5-FU的抗肿瘤效果。其机制可能与大蒜素降低肝癌细胞内Pgp和MRP-1的表达,逆转耐药有关。大蒜素具有G2/M期细胞阻滞作用,可能与5-FU发生协同作用。     

苍术酮对结直肠癌细胞HT29凋亡的机制

目的探讨苍术酮对结直肠癌细胞HT29细胞的凋亡作用及其可能的相关机制。方法应用细胞计数-8(cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒法观察1、3、10、30、100 mmol/L苍术酮对结直肠癌细胞HT29的抑制作用,并应用流式细胞术AV-PI法检测苍术酮介导细胞的凋亡作用;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测苍术酮作用HT29细胞后卷曲螺旋结构域12(CCDC12)基因和蛋白表达,RT-q PCR和蛋白印迹(Western blot)检测苍术酮作用HT29细胞后磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3 K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)基因和蛋白表达变化。结果苍术酮能抑制HT29细胞的增殖作用,并呈现剂量依赖性。苍术酮介导的凋亡率与对照组相比显著增加。苍术酮作用后HT29细胞的CCDC12基因表达下降,而PI3K、p-AKT和m TOR基因和蛋白表达下降(P0.05)。结论苍术酮抑制结直肠癌HT29细胞的增殖,并能介导凋亡,其机制可能通过降低CCDC12和PI3K、p-AKT和m TOR表达来介导的。     

羟基红花黄色素A通过Akt/mTOR-自噬通路抑制结直肠癌细胞增殖迁移和化疗耐药

近年来结直肠癌(colorectal cancer, CRC)的临床治疗已取得很大进展,但化疗耐药仍是降低结直肠癌患者生存率的主要原因之一,因此改善化疗耐药是目前亟待解决的问题。该研究旨在探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)在结直肠癌细胞增殖、迁移及5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)化疗耐药中的调控作用及相关分子机制。以结直肠癌细胞HCT116和HT-29为研究对象,首先通过MTT实验和克隆形成实验检测分析HSYA对结直肠癌细胞增殖的影响;其次,通过细胞周期实验检测分析HSYA对结直肠癌细胞细胞周期的影响;再者,通过划痕实验、Transwell实验检测分析HSYA对结直肠癌细胞迁移的影响。在此基础上探究分析HSYA对结直肠癌细胞5-FU化疗耐药性的影响及相关分子机制。结果显示,HSYA可显著抑制结直肠癌细胞增殖和迁移,并使CRC细胞周期阻滞于G₀/G₁期;同时,HSYA可显著改善结直肠癌细胞的5-FU化疗耐药性。吖啶橙染色实验与Western blot结果均表明,HSYA与5-...     

基于Notch信号通路的中药对心肌缺血影响研究进展

心肌缺血属心血管系统常见并发症,发病迅速,具有高发病率、高死亡率特点,目前西医治疗以药物及介入为主,但存在一些不易克服的不良反应。在中医理论指导下,中药凭借整体观念、辨证论治、扶正祛邪及调和阴阳优势,防治心肌缺血疗效显著,其作用机制与调控Notch信号通路的相关蛋白、促进血管新生及抗炎、抑制氧化应激等有关。本文通过对近年来相关文献进行系统整理,以期为中医药防治心肌缺血提供参考。     

姜黄素对阿霉素肾病大鼠Notch信号通路相关蛋白的影响

目的:探讨姜黄素通过调控Notch信号通路相关蛋白表达延缓阿霉素肾病大鼠肾小球硬化进程的机制。方法:将60只SD雄性大鼠按随机数字表法分为六组,分别为空白组、模型组、对照组和姜黄素低、中、高剂量组。除空白组外,其余各组尾静脉注射阿霉素制备阿霉素肾病大鼠模型,造模成功后对照组以10 mg/kg盐酸贝那普利灌胃; 姜黄素低、中、高剂量组分别予50、100、200 mg/kg姜黄素灌胃; 空白组和模型组分别予等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃,各组均灌胃6周。检测各组大鼠24 h尿蛋白定量、血生化指标,电镜观察大鼠肾脏病理结构改变,RT-PCR检测神经源性基因Notch同源蛋白1(Notch1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达水平,免疫组化法检测Notch1、TGF-β1、MCP-1蛋白表达水平。结果:姜黄素可有效降低阿霉素肾病大鼠24 h尿蛋白定量、血肌酐和血尿素氮水平,改善肾脏病理结构,下调Notch1、TGF-β1、MCP-1 mRNA及蛋白在肾脏组织的表达,且呈剂量依赖性。结论:姜黄素可通过下调Notch信号通路相关蛋白的表达,抑制肾小球基底膜增厚和细胞外基质过度沉积,进而延缓肾小球硬化进程。     

Notch信号通路对变应性鼻炎的免疫调控机制及中药干预作用的研究进展

变应性鼻炎( allergic rhinitis,AR)是特应性个体接触变应原后,主要由IgE介导的组胺等介质释放,并且有多种免疫活性细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜非感染性炎症.AR是免疫系统疾病中最常见的类型,属于Ⅰ型变态反应性疾病,易合并哮喘的发生,与哮喘同属气道不同部位的变态反应性疾病,有同一气道,同一疾病之说...     

半枝莲提取物对黄曲霉素B1所诱发肝癌Notch1的影响

目的:探讨半枝莲提取物(ESB)对黄曲霉素B1所诱发的肝癌大鼠Notch1的影响。方法:选取60只Wistar大鼠,随机分为空白组、模型组、半枝莲提取物低、高剂量组,每组15只。建立用黄曲霉素B1所诱发的肝癌大鼠的动物模型。其中空白组与模型组给予蒸馏水灌胃,半枝莲提取物低、高剂量组给予不同浓度的ESB灌胃治疗。灌胃1次/d,连续治疗1个月。治疗结束后将所有大鼠处死,观察各组大鼠的体质量、肝表面的结节数,并取肝组织采用免疫组化法检测肝组织中Notch1的表达情况。结果:与空白组比较,模型组和ESB低、高剂量组大鼠的体质量明显降低(P<0.05),肝表面的结节数明显增多(P<0.05),Notch1阳性细胞数明显升高(P<0.05);与模型组比较,ESB低、高剂量组大鼠的体重升高(P<0.05),肝表面的结节数及Notch1阳性细胞数明显降低(P<0.05)。结论:低、高剂量的半枝莲提取物能够有效的抑制肝癌的恶化,其机制可能与下调肝组织中Notch1有关。     

二陈汤加味通过Jagged1/Notch1/Hes1信号通路对慢性阻塞性肺疾病的抗炎机制

目的：观测二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠肺组织中Jagged1/Notch1/Hes1信号通路中关键分子表达的影响,探讨二陈汤加味通过Jagged1/Notch1/Hes1信号通路对COPD抗炎的作用及分子机制。方法：将60只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量（5、10、20·kg-1）和γ-分泌酶抑制剂（DAPT）组,每组10只。以烟熏联合气管滴注脂多糖（LPS）的方法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味各干预组灌胃（ig）给药;DAPT组ig DAPT(0.02 g·kg-1);正常组及模型组ig等体积生理盐水。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定各组血清中Notch1、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、白细胞活化黏附分子（ALCAM）和可溶性血管黏附分子-1(sVCAM-1)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肺组织中Jagged1、Notch1和Hes1 mRNA表达,免疫组织化学（IHC）法检测大鼠肺组织中Jagged1、Notch1、Notch1胞内段（NICD1）和Hes1蛋白表达。...     

中成药消癌平联合化疗及热疗对胃癌细胞株SGC-7901抑制的实验研究

目的从细胞学水平观察中成药消癌平联合热疗及化疗对胃癌细胞株SGC-7901的抑制效果。方法以体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901,用MTT法进行中成药消癌平、热疗、化疗药5-Fu三者联合作用的细胞实验(热疗法为41.0℃,30 min),观察中成药消癌平、热疗、化疗联合应用对人胃癌细胞株生长的影响。结果消癌平、5-Fu、热疗三者对胃癌细胞株的联合抑制率为85.44%,较其他两两联合或单药、单纯热疗抑制率高(P均<0.01)。结论中成药消癌平联合化疗及热疗能显著提高对胃癌细胞株的抑制率。     

基于Notch信号通路探讨针刺曲池、足三里对MCAO大鼠的神经保护机制

目的:观察针刺曲池穴及足三里穴对MCAO大鼠的行为学干预效应,同时评价其对Notch信号通路标志性蛋白的影响。方法:将36只SD大鼠随机分成空白组、模型组及针刺组,各12只。模型组及针刺组大鼠均接受改良线栓法建立左侧大脑中动脉局灶性缺血(MCAO)再灌注模型,空白组大鼠仅进行血管分离术,术后空白组及模型组大鼠每日接受模拟捉拿1次,针刺组大鼠予针刺曲池穴及足三里穴,连续干预14 d,用神经行为学评分评估大鼠行动能力,TTC染色法观察脑梗死体积变化,HE染色法观察大鼠脑组织细胞形态和结构,Western blotting法检测各组大鼠脑组织Notch1、Hes1蛋白表达变化。结果:1)与模型组比较,针刺组大鼠神经行为学评分明显提高,并缩小了脑梗死体积;2)针刺可明显改善MCAO术大鼠脑组织细胞形态和结构;3)Western blot结果显示针刺可明显上调大鼠脑组织Notch1、Hes1的蛋白水平。结论:电针曲池穴及足三里穴可改善MCAO大鼠行为能力,其作用机制可能与介导Notch通路有关。     

基于Notch1/Jagged1/RBP-Jκ/Hes1信号通路调控巨噬细胞极化探讨复方雷公藤制剂改善关节炎症的机制

目的 基于Notch1/Jagged1/RBP-Jκ/Hes1信号通路调控巨噬细胞极化探讨复方雷公藤制剂对佐剂关节炎大鼠关节炎症的影响。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、复方雷公藤组、甲氨蝶呤组、Notch1抑制剂组,每组6只,除正常组外,其余组大鼠构建佐剂关节炎模型。致炎后第19天开始,复方雷公藤组给予340 mg/L复方雷公藤制剂混悬液灌胃,每天1次;甲氨蝶呤组给予0.95 mg/L甲氨蝶呤混悬液灌胃,每周1次;Notch1抑制剂组给予0.56 mg/L Notch1抑制剂混悬液尾静脉注射,隔天1次;正常组及模型组给予生理盐水灌胃,每天1次。各组均连续干预30 d。检测各组大鼠足趾肿胀度、关节炎指数;末次灌胃结束后,HE染色观察关节滑膜组织病理学形态,ELISA法检测血清IL-1β、IL-4、IL-10、IL-13、TNF-α水平,流式细胞术检测外周血炎症极化标志物CD86、CD206表达情况,免疫组化及免疫印迹法检测关节滑膜组织中Notch1、Jagged1、RBP-Jκ、Hes1蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠足趾肿胀度、关节炎指数、外周血CD86表...