糖基化终末产物和磷酸化肌球蛋白轻链在糖尿病结肠动力障碍中的作用

背景:结肠动力障碍是糖尿病(DM)的常见并发症。糖基化终末产物(AGEs)在DM患者体内显著升高,然而其在DM结肠动力障碍中的作用尚未完全明确。目的:探讨AGEs和磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)在DM结肠动力障碍中的作用。方法:将Sprague-Dawley大鼠随机分为DM组和正常对照组,以链脲菌素腹腔注射建立DM模型,8周后处死所有大鼠,取远端结肠组织。检测离体结肠肌条肌张力;以免疫组化染色检测结肠组织p-MLC表达;以蛋白质印迹法检测结肠组织p-MLC、总肌球蛋白轻链(t-MLC)表达。分离培养结肠平滑肌细胞(SMCs),以不同浓度、不同作用时间AGEs作用于SMCs,以蛋白质印迹法检测SMCs的p-MLC、t-MLC表达。结果:与正常对照组相比,DM组大鼠结肠平滑肌张力显著减弱[(0.89±0.09)g对(1.98±0.12)g,P0.05],DM组大鼠结肠组织pMLC/t-MLC/β-actin水平显著降低(0.98±0.10对1.61±0.12,P0.05)。SMCs经不同浓度、不同作用时间AGEs干预后,p-MLC/t-MLC/β-actin水平显著降低。结论:DM结肠动力障碍可能由AGEs抑制SMCs中MLC磷酸化所致。     

肌球蛋白轻链激酶对大鼠平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨肌球蛋白轻链激酶(MLCK)与大鼠平滑肌细胞增殖的关系及其可能机制。方法采用慢病毒转染方式上调或下调大鼠肺血管平滑肌细胞(PVSMC)表达MLCK水平,使用8肽胆囊收缩素(CCK-8)方法检测PVSMC增殖情况,同时检测内皮素受体(ETA-R)表达;使用Rho激酶抑制剂了解Rho激酶激活在MLCK导致PVSMC增殖中的作用。结果过表达MLCK可促进PVSMC增殖,同时上调ETA-R表达;干扰MLCK表达起相反作用。Rho激酶抑制剂可抑制MLCK导致的PVSMC增殖及ETA-R上调。结论 MLCK促进PVSMC增殖,可能是通过促进ETA-R实现。Rho激酶激活可能在MLCK促PVSMC增殖中起作用。     

糖基化终末产物在糖尿病胃肠动力中的作用及其机制

糖尿病(DM)几乎可影响消化道所有部位,约75%的DM患者伴有胃肠动力障碍。DM胃肠动力障碍的确切机制仍不清楚,其发生系由多因素所致,可能与自主神经病变、平滑肌病变、Cajal间质细胞病变等有关。糖基化终末产物(AGEs)是体内葡萄糖与蛋白质、脂质或核酸等经非酶促反应生成的化合物。DM时的高糖环境可促进AGEs形成,AGEs异常蓄积在DM并发症如DM肾病、DM血管病变的发生、发展中起重要作用,但其与DM胃肠动力障碍的相关性少见报道。本文对AGEs在DM胃肠动力中的作用及其可能机制作一综述。     

糖基化终末产物在糖尿病并发症中的作用

糖基化终末产物在糖尿病并发症中的作用［ＭｉｃｈａｅｌＢ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ，１９９４，４３：８３６］糖尿病是一组病因和发病机制尚未完全阐明的内分泌代谢疾病，而以高血糖为其共同标志。近几年来，人们在研究高血糖的基础上，已形成了一个具有说服力的理论，即慢性...     

糖基化终末产物促进大鼠血管平滑肌细胞钙化

目的 观察糖基化终末产物对体外培养的血管平滑肌细胞钙化的影响.方法 在含10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠培养液中加入不同浓度(0、50、100、200 mg/L和400 mg/L)的糖基化终末产物与大鼠血管平滑肌细胞孵育不同时间.采用磷酸苯二钠法检测碱性磷酸酶活性,甲-酚酞络合酮方法测定钙含量,实时定量逆转录聚合酶链反应检测成骨细胞特异性核心结合因子、碱性磷酸酶以及骨桥蛋白基因表达,蛋白免疫印迹检测成骨细胞特异性核心结合因子及骨桥蛋白蛋白表达.结果 与对照组相比,糖基化终末产物随作用时间延长和浓度增加,细胞钙含量增加(P<0.05),升高碱性磷酸酶活性和基因表达(P<0.05),促进成骨细胞特异性核心结合因子及骨桥蛋白基因及蛋白表达(P<0.01).结论 糖基化终末产物可促进体外培养的大鼠血管平滑肌细胞钙化.     

糖基化终末产物在阿尔茨海默病发病中的作用

糖基化终末产物作为蛋白质非酶糖基化的最终产物,可经外源性途径摄取(如饮食及吸烟),也可直接在体内生成．近年研究提示．糖基化终末产物可经受体及非受体途径参与阿尔茨海默病的发病过程。抗糖基化终末产物治疗成为治疗阿尔茨海默病的有效途径。     

肌球蛋白轻链激酶在大鼠高甘油三酯血症相关性急性胰腺炎中的作用

目的:本实验的目的在于探讨肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)在高甘油三酯血症相关性急性胰腺炎(hypertrigly ceridemia-associated acute pancreatitis,HTGP)中的作用.方法:应用48只♂SD大鼠随机平均分为A组(高脂饲料饲养)、B组(普通饲料饲养),均饲养4 wk.满4 wk时行眶后静脉丛取血,检测血清甘油三酯(triglyceride,TG)含量.A组随机分为3个亚组:HTG、HTG+AP及H T G+A P+M L-7组;B组随机分为生理盐水组、AP、AP+ML-7 3个亚组.在雨蛙肽末次注射24 h后处理大鼠,利用HE染色观察胰腺形态学的变化及电镜观察胰腺的超微结构及紧密连接(tight junction,TJ)的改变;用底物酶法检测血清淀粉酶(amylase,AMY)含量;利用免疫组织化学技术检测胰腺组织MLCK、p-JNK蛋白的定位及表达.结果:与B组相比,经高脂饮食后A组TG水平显著升高(P0.01);与AP组相比,HTG+AP组的胰腺病理评分、血AMY水平显著升高(P0.05);HTG+AP、AP组超微结构破坏,TJ显著增宽,其中以HTG+AP组增宽最显著;与AP组相比,HTG+AP组中MLCK、p-JNK蛋白含量显著升高(P0.05),且MLCK、p-J N K分别与胰腺病理评分呈正相关:r1=0.795,r2=0.789(均P0.01);利用MLCK抑制剂ML-7干预可改善胰腺损伤程度及使血淀粉酶显著下降(P0.01),且在HTG+AP组中抑制效果更明显;ML-7干预后还使TJ增宽改善及抑制p-JNK的表达(P0.05).结论:MLCK可能与HTGP的严重程度有关,且他可能通过改变细胞间的TJ及调控JNK通路从而参与HTGP的形成.     

晚期糖基化终末产物受体在急性坏死性胰腺炎大鼠中的表达

目的 观察急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠发病过程中胰腺组织及血清中晚期糖基化终末产物受体(the receptor for advanced glycation end products,RAGE)含量变化的规律.方法 64只雄性SD大鼠按完全随机法分为对照组,ANP 6、18、24、36、48、72、96 h组,每组8只.采用腹腔注射20％L-精氨酸250 mg/100 g体重2次、间隔1h方法制备ANP模型.对照组大鼠腹腔注射等容积生理盐水.胰腺组织行病理学检查并评分.检测腹水量、血清淀粉酶及RAGE浓度,实时PCR法检测胰腺组织RAGE mRNA表达.结果 ANP组胰腺病理损伤随时间延长逐渐加重;腹水量从6h的(1.98±0.64)ml增加到96h的(8.69 ±0.62) ml;血清淀粉酶浓度从造模后6h开始升高,18h达(5069.88±603.25)U/L,36 h时恢复正常.对照组大鼠血清RAGE浓度及胰腺组织RAGE mRNA表达量分别为(18.33±2.99) ng/ml和0.41 ±0.13.ANP组6h时两者开始升高,分别为(30.31±5.03)ng/ml和1.57±0.19,较对照组显著升高(P＜0.05);24 h组达峰值,分别为(105.41±21.31)ng/ml和4.23±0.73,较ANP其他时间点显著升高(P值均＜0.05);96 h下降至最低点,分别为(33.54±6.96) ng/ml和1.19±0.19,但仍高于对照组(P＜0.05).结论 血清RAGE浓度及胰腺组织RAGE mRNA表达量在ANP发生36 h内逐渐增加,随后下降,但始终高于正常值.     

高级糖基化终末产物受体在阿尔茨海默病中的作用

<正>高级糖基化终末产物受体(RAGE)是免疫球蛋白超家族中的多配体受体之一,可以与多种配体相结合,包括高级糖基化终末产物(AGEs)、β-淀粉样肽(Aβ),S100钙家族及高迁移率组蛋白(HMGB)1等。近年来研究发现,在一些炎症相关的疾病如阿尔茨海默病(AD)中,RAGE发挥着重要作用。本文对RAGE在AD中的作用及其临床研究进展作一综述。1 RAGE编码RAGE的基因位于6号染色体的主要组织相容性复     

糖基化终末产物在心血管病变中的作用机制

晚期糖基化终末产物（Advanced glycation end products, AGEs）是一组随着衰老、糖尿病以及肾功能衰竭逐渐积累于循环组织中的性质各异的分子。AGEs形成于还原糖的羰基和靶蛋白活性氨基的聚合，这种毒性分子与特异性受体相互作用可诱导体内多种病理过程。越来越多的证据表明AGEs参与了心血管病的发病过程。弄清AGEs在心血管疾病中的作用机制并在此基础上进行有效的干预，将对心血管疾病的防治起到重要作用。     

终末糖基化产物在糖尿病勃起功能研究中的进展

<正>勃起功能障碍(ED)是指在有性交意愿的情况下阴茎持续至少3个月不能达到和(或)维持充分的勃起状态而获得满意的性生活~([1])。DM中ED患者为正常人群的3倍,且ED发生较正常人群早10~15年~([2~4])。DM阴茎组织中终末糖基化产物(AGEs)含量较正常人明显增多~([5]),应用AGEs抑制剂能改善DM大鼠勃起功能~([6])。本文对AGEs在DMED的发生、发展中     

后期糖基化终末产物在糖尿病合并心血管、肾脏病变中的作用

问：有关糖尿病引起心血管、肾脏病变的机制最近研究的动向是什么？ 答：近年来特别注意肾素一血管紧张素系统对糖尿病器官并发症的研究。糖尿病最主要的生理紊乱应当说是慢性高血糖血症。高血糖血症通过什么途径引起靶器官损伤是近年来又一研究动向。近20年来，发现后期糖基化终末产物Advanced Glycation End Products（AGE），可能起作用。     

后期糖基化终末产物在糖尿病合并心血管、肾脏病变中的作用

问:有关糖尿病引起心血管、肾脏病变的机制最近研究的动向是什么? 答:近年来特别注意肾素-血管紧张素系统对糖尿病器官并发症的研究.糖尿病最主要的生理紊乱应当说是慢性高血糖血症.高血糖血症通过什么途径引起靶器官损伤是近年来又一研究动向.近20年来,发现后期糖基化终末产物Advanced Glycation End Products(AGE),可能起作用.     

Cariporide对糖基化终末产物所致血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察cariporide对糖基化终末产物所致大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。方法采用组织贴块法原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞。用体外制备的外源性糖基化终末产物和平滑肌细胞共孵育24h,加入不同浓度的cariporide(0.1、1.0和10μmol/L)处理。用噻唑蓝比色法所测得的细胞吸光度值及考马斯亮蓝法测得的细胞总蛋白含量来反映细胞增殖情况,利用2,7-二羧乙基-5,6羧基荧光素及钙荧光探针通过荧光分光光度计分别检测细胞内的pH值及Ca2 浓度。结果糖基化终末产物(10mg/L)与平滑肌细胞共孵24h,与正常对照组比较,细胞吸光度值(0.554±0.032比0.155±0.018)和细胞内总蛋白浓度均显著增加(193.3±10.7μmol/L比127.8±8.2μmol/L,P<0.01);cariporide0.1、1.0和10μmol/L使细胞吸光度值从0.554±0.032分别降至0.402±0.028、0.298±0.020、0.174±0.019;细胞内总蛋白浓度也从(193.3±10.7)μmol/L分别降至(180.9±9.8)μmol/L,(156.4±9.4)μmol/L,(130.6±8.8)μmol/L,同时cariporide也明显降低了糖基化终末产物处理后的平滑肌细胞内pH值及Ca2 水平。结论外源性糖基化终末产物能显著刺激平滑肌细胞的增殖;cariporide对糖基化终末产物诱导的平滑肌细胞增殖具有显著抑制作用,其机制可能与cariporide抑制细胞内糖基化终末产物诱导的pH值及Ca2 水平升高有关。     

晚期糖化终末产物在糖尿病大鼠骨质疏松发病中的作用

目的：探讨晚期糖化终末产物（ＡＧＥ）在糖尿病骨质疏松发病中的作用。方法用链脲佐菌素制做糖尿病大鼠模型,３个月后测定大鼠腰椎骨密度及骨胶原中ＡＧＥ的含量及观察血、尿生化指标的变化。结果糖尿病大鼠骨胶原中ＡＧＥ的含量与正常对照组相比明显升高（Ｐ〈０．００１）,而骨密度明显降低（Ｐ〈０．０２）。２４ｈ尿钙增加,血钙降低。结论糖尿病大鼠骨胶原中ＡＧＥ含量的增加所导致的成骨作用降低,可能是糖尿病骨质疏松发病     

血红素氧合酶与 Cajal 间质细胞在糖尿病大鼠结肠动力障碍中的作用

背景: 血红素氧合酶(HO)催化生成的内源性CO为抑制性神经递质,HO与Cajal间质细胞(ICC)间的相互作用在糖尿病(DM)胃肠动力障碍的研究中备受关注。目的: 探讨HO和ICC在DM大鼠结肠动力障碍中的作用以及其间的关系。方法: 建立DM大鼠结肠慢传输型动力障碍模型,6周后随机分为不予干预的DM组、DM+氯化高铁血红素(Hemin,HO诱导剂)组和DM+锌原卟啉(ZnPP,HO阻滞剂)组,每组8只。9周末测定胃肠推进指数,以蛋白质印迹法检测结肠HO-1、HO-2、c-kit表达情况,间接双重免疫荧光法检测c-kit与HO-1、HO-2共表达情况。结果: DM+Hemin组胃肠推进指数较DM组显著降低,DM+ZnPP组则较DM组显著增高(P均0.05)。正常对照组与DM组近、远端结肠HO-1表达无明显差异,DM+Hemin组较该两组显著增高(P0.05),DM+ZnPP组基本不表达HO-1。DM组、DM+Hemin组和DM+ZnPP组间近端结肠HO-2表达无明显差异,均显著低于正常对照组(P0.05),四组间远端结肠HO-2表达无明显差异。DM组近、远端结肠c-kit表达较正常对照组显著降低(P0.05),DM+Hemin组略低于DM组,DM+ZnPP组较DM组显著增高(P0.05)。除DM+ZnPP组基本不存在c-kit与HO-1共表达外,四组均存在c-kit与HO-1、HO-2共表达,以肌间神经丛区域为著。结论: 结肠ICC减少伴HO表达变化可能是DM大鼠结肠慢传输型动力障碍的机制之一。     

晚期糖基化终末产物对糖尿病大鼠主动脉结构和功能的影响

目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对主动脉血管结构和功能影响及氨基胍的保护作用。方法将80只雄性SD大鼠随机分为4组:空白对照组(A组),糖尿病组(B组),糖尿病氨基胍干预组(C组)和空白氨基胍干预组(D组),每组20只。药物应用12周观察主动脉功能和结构变化。结果与A组和D组比较,B组、C组主动脉环对去甲肾上腺素引起的收缩反应明显增强,对乙酰胆碱引起的舒张反应则均明显减弱,C组反应强度较B组明显减轻(P0.05,P0.01)。主动脉壁均有AGEs沉积,B组、C组较明显,C组较B组明显减轻(P0.01);超微结构观察显示,A组、D组主动脉内膜大致正常,B组、C组内膜破坏明显,与动脉环结果呈一致性趋势。结论糖尿病大鼠主动脉AGEs含量增多,损伤了主动脉的结构和功能,氨基胍能够减少AGEs的沉积,并对主动脉结构和功能有保护作用。     

晚期糖基化终末产物裂解剂对糖尿病大鼠心血管系统的保护作用

目的分析晚期糖基化终末产物(AGEs)裂解剂C36对糖尿病(DM)大鼠心血管系统的保护作用。方法雄性Wistar大鼠60只,分为正常组、模型组和C36各剂量组(C1组、C2组、C3组和C4组)6组,对大鼠心功能指标进行比较。结果 C4组舒张压明显低于正常组和模型组(P<0.05);模型组和各剂量组心率、心输出量明显低正常组(P<0.05);模型组、C1组、C3组和C4组心指数明显低于正常组(P<0.05);C1组、C3组和C4组心指数明显高于模型组(P<0.05);模型组总外周阻力明显低于其他各组(P<0.05);正常组总外周阻力指数明显低于其他各组(P<0.05);各剂量组总外周阻力指数明显低模型组(P<0.05);模型组、C2组、C3组和C4组系统动脉顺应性低于正常组(P<0.05);各剂量组系统动脉顺应性高于模型组(P<0.05);模型组心脏脏体系数明显高于正常组(P<0.05);C3组心脏脏体系数明显低于模型组(P<0.05);模型组和各剂量组心室、左心室及两侧肾脏脏体系数明显高于正常组(P<0.05)。结论 AGEs裂解剂对DM大鼠心血管系统有良好的保护作用。     

晚期糖基化终末产物对糖尿病心肌病影响的研究进展

糖尿病心肌病是糖尿病患者严重的心血管并发症之一.已证实代谢紊乱、炎症反应、氧化应激和微血管病变等都参与糖尿病心肌病的发生和发展.近年研究表明,晚期糖基化终末产物可能与糖尿病心肌病的发生和发展密切相关,可能是糖尿病心肌病治疗的潜在靶点.本文主要综述晚期糖基化终末产物对糖尿病心肌病影响的研究进展.