检测乙型肝炎表面抗原的一步法试剂的钩状效应分析

卫生部下发的《血站管理办法 (暂行 )》中规定 ,对献血者血液乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)检测的质量标准是“ＨＢＶ表面抗原(ＨＢｓＡｇ)酶免疫吸附法 (ＥＬＩＳＡ) :阴性” ,但未要求用一步法还是二步法检测。目前 ,国内检测ＨＢｓＡｇ绝大多数采用ＥＬＩＳＡ中的双抗体夹心双位点一步法。用该方法检测ＨＢｓＡｇ ,当标本中的ＨＢｓＡｇ浓度过高时 ,会因钩状效应 (Ｈｏｏｋ)现象出现假阴性 ,而造成漏检 ,增加输血传播ＨＢＶ的风险度 ,严重威胁输血安全。ＨＢＶｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ)和ＨＢＶ核心抗体 (ＨＢｃＡｂ)两项阳性时 ,大多数ＨＢｓＡｇ都…     

ELISA一步法检测HBsAg的钩状效应

ＥＬＩＳＡ一步法检测ＨＢｓＡｇ的钩状效应上海市东方医院（２００１２０）吕红根，张淼发本文用ＥＬＩＳＡ一步法检测ＨＢＶ标志物时，发现２３例ＨＢｅＡｇ阳性而ＨＢｓＡｇ阴性。经用生理盐水对标本作１：１０，１：２０及１：１００稀释后再作ＨＢｓＡｇ测定，２１例...     

酶免疫竞争一步法检测抗乙型肝炎病毒核心抗体的影响因素探讨

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)ｅ抗体 (抗 ＨＢｅ)是观察乙型肝炎大三阳疗效和传染性强弱的指标之一。以往我们使用酶免疫竞争 (ＥＩＡ)二步法检测抗 ＨＢｅ[1] ,反应时间相对较长。而近几年普遍使用ＥＩＡ一步法检测抗 ＨＢｅ ,操作简便 ,反应时间仅需 30ｍｉｎ ,但易出现ＨＢＶｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ)、抗 ＨＢｅ同时阳性或同时阴性 ,对此我们进行了研究。一、材料和方法1.标本来源 :12 7份本院ＨＢＶ表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)阳性病人血清。其中 72份ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｅ同时阳性 ;35份ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｅ同时阴性 ;2 0份ＨＢｅＡｇ阴性 ,抗 …     

南京市饮服从业人员乙肝病毒及梅毒感染情况

我国是乙型肝炎病毒感染的高发区 ,而梅毒的发病率近年也呈上升趋势。本文介绍了 2 0 0 0年至今的南京市饮服从业人员乙型肝炎病毒及梅毒的发病情况。材料与方法1 调查对象 :南京市饮服从业人员 ,抽取静脉血待检。2 检测方法 :ＨＢｓＡｇ用反向间接血凝法 ,以 >1∶6 4为阳性 ,ＨＢｅＡｇ用ＥＬＩＳＡ法 ,试剂由上海科华有限公司提供 ,梅毒用ＲＰＲ法初筛 ,试剂由南京军事医学研究所提供 ,阳性用乳胶凝集试验确认 (ＴＰＰＡ由日本富士公司提供 )。结　　果1 不同年份ＨＢｓＡｇ阳性率 :2 0 0 0年共检测血清30 80 0份 ,ＨＢｓＡｇ阳性 5 77份…     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎表面抗体、E抗体及核心抗体阳性人群HBV-DNA临床意义

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染后 ,有复杂的乙型肝炎病毒标志 (ＨＢＶＭ)变化 ,其临床意义不同 ,我们用荧光定量聚合酶链反应 (ＦＱ ＰＣＲ) [1] 对普通人群中 12 8例乙型肝炎表面抗体(ＨＢｓＡｂ)、Ｅ抗体 (ＨＢｅＡｂ)、核心抗体 (ＨＢｃＡｂ)均阳性的血清 ,进行了乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸 (ＨＢＶ ＤＮＡ)定量检测 ,以进一步探讨其临床意义 ,现报告如下。1　资料与方法1.1　观察对象　观察组① 12 8例为 2 0 0 0年 12月至 2 0 0 1年7月 ,我院进行健康查体时发现ＨＢＶＭ呈ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ均阳性的普通人群 ,否认既往有…     

295份HBsAg阳性者HBeAg血清流行病学调查

为了解招远市食品、公共场所从业人员ＨＢｓＡｇ阳性者携带ＨＢｅＡｇ的关系 ,我站于1 997年 7月至 1 999年 7月对从业人员健康体检中 2 95份ＨＢｓＡｇ阳性血清ＨＢｅＡｇ进行检测和分析 ,现将ＨＢｅＡｇ检测结果报告如下。材料与方法1 血清来源于本市食品、公共场所从业人员体检中ＨＢｓＡｇ阳性血清 2 95份 ,其中男性 1 0 4份 ,女性 1 91份。2 ＨＢｓＡｇ采用ＲＰＨＡ法 ,从滴度 1∶8以上判定为阳性 ,诊断血球由上海科华生物技术有限公司生产 ;ＨＢｅＡｇ采用ＥＬＩＳＡ法 ,试剂盒由洛阳华美生物工程公司生产 ,操作及结果判定均按说明…     

答读者问

河南省滑县的郑好武、山西省陵川县的赵春红和广东省茂名市的梁功材等读者来信询问 :1 肝功能化验正常的“大三阳”或“小三阳”者应如何治疗、保健 ?通常所说的“大三阳”是指ＨＢｓＡｇ(+ )、ＨＢｅＡｇ(+ )及抗 -ＨＢｃ(+ )者 ,提示病毒复制活跃 ,此类患者传染性强 ;“小三阳”是指ＨＢｓＡｇ(+ )、抗 -ＨＢｅ(+ )及抗 -ＨＢｃ(+ )者。若为“小三阳”且所查ＨＢ ＶＤＮＡ为阴性 ,则提示病毒复制不活跃 ;若为“小三阳”但所查ＨＢＶＤＮＡ为阳性 ,可能发生在前Ｃ区 ,体内仍有病毒活跃复制。对于乙型肝炎病毒标记阳性(如上述提问中的“大三…     

一次性采血器对HBVM检测的影响

我们以一次性采血器 (求精塑料医械厂生产 ,带试管 )抽血 30份 ,分别静置 30ｍｉｎ和 6 0ｍｉｎ后 ,30 0 0ｒ/ｍｉｎ离心5ｍｉｎ分离血清。用市售ＥＩＡ试剂盒对其进行ＨＢＶＭ检测 ,结果静置 30ｍｉｎ分离的血清 ,ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ均为阴性 ,抗 ＨＢｃ 2 5份阳性 ,抗 ＨＢｅ 2 7份阳性。而静置 6 0ｍｉｎ后分离的血清 ,ＨＢｓＡｇ 6份阳性 ,抗 ＨＢｓ 2份阳性 ,ＨＢｅＡｇ5份阳性 ,抗 ＨＢｃ 5份阳性 ,抗 ＨＢｅ 3份阳性 ;同时 ,我们对静置 6 0ｍｉｎ后分离的血清标本再进行了一次检测两次结果相同。一次性采血器塑料…     

HBsAg阳性患者配偶感染状况的调查分析

编委点评我国是乙型病毒性肝炎高发的国家,澄清乙型肝炎病毒的传播途径,对预防和控制乙型病毒性肝炎有重要意义。本文提出ＨＢｓＡｇ阳性（主要为ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性）患者其配偶ＨＢＶ感染率并不比普通人群高,但不同的外因条件如ＨＢｅＡｇ阳性或ＨＢＶＤＮＡ阳性患者的配偶感染率如何？此外,具有怎样的内因才能抵御肝炎病毒的侵袭？可广泛发表意见。（白求恩医科大学第一临床学院宋国培）乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的传播机制尚未完全阐明。文献报道,ＨＢＶ可通过密切接触和性传播传染~［１,２］,世界卫生组织也…     

死胎心脏组织中HBV DNA表达的初步研究

乙型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓｖｉｒｕｓＢ ,ＨＢＶ)的垂直传播是导致新生儿发育不良和死亡的重要因素 ,也是形成人群中众多慢性无症状携带者的重要原因[1] 。ＨＢＶＤＮＡ已被证明是ＨＢＶ复制的标志[2 ,3 ] 。为了解胎儿心脏组织中是否有ＨＢＶＤＮＡ存在 ,我们进行了以下工作。1　材料和方法1 1　产妇分娩前静脉血ＨＢＶ标志物检测　全部乙型或非乙型肝炎产妇分娩前均测静脉血ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ ,采用ＥＬＩＳＡ ,试剂盒由深圳华元医学生物工程公司提供。1 2　死胎心组织中ＨＢＶＤＮＡ检测　采…     

40例HBsAg阴性HBeAg阳性乙型肝炎病人血清学调查与分析

４０例ＨＢｓＡｇ阴性ＨＢｅＡｇ阳性乙型肝炎病人血清学调查与分析耿全林（南京市第二医院检验科，南京２１０００３）关键词乙型肝炎病毒乙型肝炎表面抗原乙型肝炎Ｅ抗原我们在对３４５６０例病人血清标本进行乙型肝炎标志物（ＨＢＶＭ）检测时，发现其中有４０例ＨＢｓ...     

酶免法检测HBeAg假阳性原因分析

我们在应用酶免法检测乙型肝炎病毒血清学标志物时 ,发现有时会出现单项ＨＢｅＡｇ ( )或ＨＢｅＡｇ ( )、抗 ＨＢｓ( )等罕见模式。为慎重起见再将标本离心后复检ＨＢｅＡｇ ,结果为阴性。为此我们特做如下实验。取 10份ＨＢｅＡｇ阴性的献血员的不抗凝血液 ,每份分两管 ,     

乙型肝炎血源疫苗阻断乙型肝炎病毒母婴传播效果观察

乙型肝炎血源疫苗阻断乙型肝炎病毒母婴传播效果观察中山医科大学附属第三医院传染科陈雪娟，刘淑芳，杨绍基乙型肝炎血源疫苗阻断母亲乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）传播效果与母亲是否乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及乙肝ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性有关。我们对２５８名出生于ＨＢ...     

成人与儿童HBV感染的检测报告

为了解ＨＢＶ感染的成人与儿童血清标志物的分布有何不同 ,笔者对 1 996～ 1 998年间门诊感染病人中成人 2 5 37例 ,儿童 1 0 2 0例 ,共计 35 5 7例的血清中ＨＢｓＡｇ ,抗ＨＢｓ ,ＨＢｅＡｇ ,抗ＨＢｅ ,抗ＨＢｃ用上海实业科华生物技术有限公司提供的ＥＬＩＳＡ法试剂盒检测 ,严格按说明书要求操作 ,并设立阴性 ,阳性质控血清 ,用意大利ＤＶ99ＯＢＶ4酶标仪读取ＯＤ值 ,其结果见附表。附表　ＨＢＶ五项标志物的阳性数和阳性率 (% )人群ＨＢｓＡｇ抗ＨＢｓＨＢｅＡｇ抗ＨＢｅ抗ＨＢｃ成人 185 9(73 2 8) 4 83(19 0 4) 5 36 (2 1 13) 1381(5…     

抗HBe阳性慢性乙型肝炎96例分析

随着对乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)分子生物学认识加深 ,慢性乙型肝炎可进一步分成不同的类型。一类是典型的慢性乙型肝炎患者 (Ｃｌａｓｓｉｃａｌｔｙｐｅ) ,病变活动期血清ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ ＤＮＡ阳性 ,当血清ＨＢｅＡｇ转换为抗ＨＢｅ时通常伴随疾病缓解。另一类非典型患者 (ａｔｙｐｉｃａｌｔｙｐｅ)。尽管血清ＨＢｅＡｇ( -)抗ＨＢｅ( ) ,但ＨＢＶ ＤＮＡ( ) ,疾病仍持续活动 ,这类慢性肝炎患者多见于地中海国家和远东地区 ,如西班牙、意大利、希腊及亚洲地区 ,少见于西欧国家 ,如法国和美国 ,我国也十分常见。现将我院近 7年来收治 …     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的 建立一种简易快速，自测式胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记乙型肝炎病毒表面抗体（抗ＨＢｓ）制成免疫层析检测试条，血清中ＨＢｓＡｇ与测试条件上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果 ＧＩＣＡ试条只有ＨＢｓＡｇ有特异性反应，与乙型肝炎病毒核心抗原，ｅ抗原等无交     

钩状效对乙肝“两对半”模式的影响

探讨钩效在ＥＬＩＳＡ“一步法”中乙肝“两对半”模式的影响。方法：运用ＥＬＩＳＡ“二步法”以及将标本稀释或浓缩后的“一步法”重复检测“一步法”检测乙肝“两对半”出现的５种阳性模式（１）ＨＢｅＡｇＴ ＣａＢ；（２）ＨＢｅＡｂ和ＨＢｅＡｇ；（４）ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｂ；（５）ＨＢｓＡｇ和ＣａＢ。）中有可能出现假阴性的荐ＭＧＭＷＮＨＣＢＥ ＮＴＧ Ｒ ＡＤＨＨ     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体（抗ＨＢｓ），制成免疫层析检测试条。血清中ＨＢｓＡｇ与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果ＧＩＣＡ试条只与ＨＢｓＡｇ有特异性反应，与乙型肝炎病毒核心抗原、ｅ抗原等无交叉反应。检测中国药品生物制品检定所ＨＢｓＡｇ标准品，灵敏度可达１ｎｇ／ｍｌ。用ＧＩＣＡ与酶免疫法比较检测了３９５份不同血清标本中ＨＢｓＡｇ，两法符合率为９９．０％。结论ＧＩＣＡ检测血清中的ＨＢｓＡｇ特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。     

从无偿献血者中检出2例抗-HIV阳性报告

为了解本地食品从业人群中乙肝二对半的模式构成 ,以便制订有效的乙肝防制措施 ,我们对 5 0 0例体检初筛ＨＢｓＡｇ阳性患者进行了乙肝二对半模式构成分析。5 0 0例检测对象均为食品从业人员ＨＢ ｓＡｇ初筛阳性患者。ＤＧ - 30 2 2酶标仪由华东电子管厂生产 ,洗板机由美国生产。ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗 -ＨＢｅ、抗 -ＨＢｃ、ＥＬＩＳＡ试剂盒由珠海亚利生物工程公司生产 ,效期内使用。ＨＢＶＤＮＡ -ＰＣＲ试剂由浙医大传染病研究所提供。结果判定按试剂说明书进行。5 0 0例ＨＢｓＡｇ初筛阳性经乙肝二对半检测出现 1 8种…     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

目的用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的数量和免疫指标,以指导临床。方法设计合成了ＨＢＶＦＱＰＣＲ诊断试剂盒,以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量ＰＣＲ方法,检测了５３２份临床血清标本。结果经ＦＱＰＣＲ检测,１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原、ｅ抗原、ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本,其血清标本ＨＢＶＤＮＡ也全部阳性,平均ＨＢＶＤＮＡ拷贝数为１．１×１０８／ｍｌ;９８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性的标本,其阳性率为７３％（７１例）,平均拷贝数为８．６×１０５／ｍｌ,而常规ＰＣＲ只有３３％的阳性率;６７例ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性标本的平均拷贝数为２．３×１０５／ｍｌ。结论能够避免ＰＣＲ后处理导致的假阳性污染,并实现准确定量。ＦＱＰＣＲ可以检测ＨＢＶ的真实感染和复制情况,对于乙型肝炎的临床诊断,治疗方案的选择和疗效考察有较大的指导意义。