慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合基因检测及其临床意义

目的:探讨BCR-ABL融合基因与慢性粒细胞白血病(CML)的相关性。方法:利用实时荧光定量PCR检测168例CML患者体内BCR-ABL含量,并与113例非CML患者作为对照组进行比对,分析BCR-ABL基因与CML的相关性。结果:168例CML患者BCR-ABL检测阳性156例(92.9%),阴性12例(7.1%)。对照组113例非MCL者BCR-ABL阳性3例(2.7%),BCRABL阴性110例(97.3%)。CML患者BCR-ABL阳性率明显高于正常对照组,差异有统计学意义。其中,BCR-ABL阳性组男性高于女性,差异有统计学意义;阳性组的平均年龄和白细胞平均数均高于阴性组,差异有统计学意义。结论:BCR-ABL是诊断CML重要辅助检查,与CML之间存在相关性。     

双色双融合荧光原位杂交技术在慢性粒细胞白血病诊断中的应用

目的:探讨双色双融合荧光原位杂交技术(dual-color and dual-fusion fluorescence in-situ hybridization,D-FISH)在慢性粒细胞白血病(CML)诊断中的应用价值。方法:同时应用常规细胞遗传学R显带(RHG)核型分析和双色双融合荧光原位杂交2种方法,对24例CML患者进行检测。结果:24例CML中,常规细胞遗传学检出Ph(+)21例(87.5%),D-FISH检测均为bcr/abl(+)(100%);3例Ph(-)者经D-FISH检测均为(+)。结论:与常规细胞遗传学方法相比,D-FISH检测bcr/abl融合基因具有简便、快速、灵敏、特异性强等优点,可以作为诊断CML的一种重要检测方法。     

实时定量PCR检测白血病融合基因的应用研究

目的探讨实时荧光定量RT-PCR(RQ-PCR)检测融合基因在慢性粒细胞性白血病(CML)及急性早幼粒细胞白血病(APL)诊疗中的应用价值。方法采用RQ-PCR方法,对15例拟诊CML和17例拟诊APL的患者,在诊断及治疗过程中分别进行融合基因BCR/ABL、PML/RARa的检测,并且观察CML经羟基脲+干扰素(Hu+IFNα)与伊马替尼(IM)不同药物治疗的疗效差别。结果 15例拟诊CML患者中12例经融合基因检测确定诊断;17例拟诊APL患者中15例经融合基因检测确定诊断。动态观察,两种疾病在治疗的6个月、12个月时融合基因表达量明显下降,与初诊比较差异有统计学意义(P<0.01),其中CML两种不同治疗方案间差别显著(P<0.05)。两种疾病在血液学进展或复发前可发现融合基因显著升高。结论融合基因检测对于CML、APL的诊断、疗效观察和微小残留病的监测有重要价值。     

BCR/ABL融合基因产物P~(210)在白血病诊断中的临床意义

目的:建立一种用抗ABL单克隆抗体,检测外周血P210BCR/ABL融合基因蛋白,为临床提供:特异、灵敏、快速诊断白血病的新方法。方法:采用WesternBloting印迹法检测68例符合FBA分型的白血病(CML)患者外周血细胞中P210蛋白。结果:CML患者外周血细胞中P210蛋白均为阳性。结论:外周血BCR/ABL融合基因蛋白检测法材料来源方便病人无痛苦,对提高CML患者的明确诊断和预后评估具有特异、可靠、准确、省时的临床应用价值。     

258例慢性粒细胞性白血病的临床和实验研究

目的运用细胞遗传学和分子遗传学方法,对本院258例慢性粒细胞性白血病（CML）患者进行分析,探讨CML中Ph染色体的有关特点及临床意义。方法采用骨髓直接法和短期培养法制备染色体,应用R显带技术对258例CML患者进行核型分析;对其中22例患者运用双色双融合探针（DC—DF—bcr／abl）进行FISH检测Ph易位信号特征。结果11例（4．26％）为Ph（-）;247例（95．74％）为Ph（＋）,其中15例（6．07％）为Ph染色体变异易位。结论染色体核型分析有助于慢粒的诊断和鉴别诊断、判断疗效;FISH检测能给予精确的分子诊断。CML变异性Ph易住广泛累及除9,22外多条染色体。     

羟基脲干扰素-α阿糖胞苷联合治疗慢性粒细胞白血病细胞遗传学疗效观察

目的:研究慢性粒细胞白血病(CML)在初诊、应用羟基脲(Hu)+干扰素-α(α-IFN)+小剂量阿糖胞苷(LD-Ara-C)治疗后染色体的情况。方法:16例患者采用Hu+IFN+LD-Ara-C联合治疗6个月及12个月后均行骨髓细胞形态学及染色体分析。结果:16例初诊CML均检测到100%Ph染色体,均为标准易位t(9;22)(q34;q11)。接受治疗6个月后复查细胞遗传学,4例细胞遗传学缓解;接受治疗12个月复查细胞遗传学,8例细胞遗传学缓解。结论:普通染色体分析在CML诊断、疗效观察中有重要意义。     

PTTG、c-myc基因在慢性粒细胞白血病中的表达

目的:检测垂体瘤转化基因(PTTG)在慢性粒细胞白血病(CML)患者中不同临床阶段的基因表达,为阐明CML演变的可能机制提供依据。方法:采用RT-PCR方法检测34例CML患者(慢性期16例,加速期11例,急变期7例)及10例对照者骨髓单个核细胞(BMMNC)中PTTG和c-myc基因的表达。结果:10例对照者中未检测到PTTG和c-myc基因的表达,34例CML患者中PTTG和c-myc基因在慢性期、加速期、急性变期的表达明显高于对照者(P<0.05),PTTG在加速期和急变期的表达升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。c-myc基因在急变期的表达明显升高(P<0.05)。结论:PTTG和c-myc基因的过度表达可能和CML的发生发展有关。     

bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病中的表达及临床意义

目的 探讨bcr/abl融合基因的表达在慢性粒细胞白血病(CML)中的诊断、疗效及预后观察中的意义.方法 采用荧光定量逆转录多聚酶链反应(FQ -PCR)技术,对8例复治CML患者和作为对照组的2例急性非淋巴细胞性白血病患者的骨髓或外周血进行bcr/abl融合基因检测;同时比较患者的血象、骨髓象等相关实验室指标.结果 CML中7例慢性期(CP)和1例急变期(BC)患者,均不同程度地表达了bcr/abl融合基因,而对照组该融合基因的表达为阴性.结论 bcr/abl基因是CML发病的分子基础,定量检测bcr/abl融合基因对于CML的诊断、临床分型、疗效观察及预后判断有重要意义.     

类高雪氏细胞在慢性粒细胞白血病中的意义

目的：探讨慢性粒细胞白血病（CML）骨髓中出现类高雪氏细胞的意义。方法：利用形态学及细胞化学染色检查94例CML患者和63例类白血病反应患者的骨髓涂片;检测49例CML患者骨髓的Ph染色体;分析94例CML患者出现急变期或加速期的情况。结果：94例CML患者的骨髓涂片中有29例找到类高雪氏细胞,而类白血病反应患者的骨髓涂片中未找到类高雪氏细胞;CML患者Ph染色体的阳性率为91．8％（45／49）;65例无类高雪氏细胞的CML有21例处于急变期或加速期（急性期17例,加速期4例）,而9例有类高雪氏细胞的CML有2例发生急变,两组间有显著差异（P＜0．01）。结论：类高雪氏细胞的出现对CML的诊断及预后有重要价值。     

慢性粒细胞白血病染色体分析(附13例报告)

目的 :研究CML在初治、常规化疗、干扰素治疗、Allo -BMT后染色体的改变。方法 :对 13例初治CML ,其中 7例接受Hu化疗 6～ 12月 ,4例联用干扰素治疗 6～ 12月 ,3例行Allo -BMT ,后 30天～ 18月进行染色体G显带分析 (共 45例次 ) ,4例同时检测bcr abl融合基因。结果 :13例初治CML检测到 10 0 %Ph1 染色体 ,均为标准易位t(9;2 2 )。其中 7例接受Hu化疗 6～ 12月复查仍检测到 80 %～ 10 0 %Ph1 染色体 ,有 2例多倍体和附加染色体异常。4例干扰素治疗 6～ 12月 ,仅 1例达细胞遗传学缓解。 3例行Allo-BMT仅 1例BMT后后 30天～ 6 0天检测到10 %Ph1 染色体 ,随后复查均未检测到。余 2例移植后即为供者核型。 3例分别在Allo -BMT 4月、 9月、 12月检测bcr abl融合基因均阳性 ,至今无临床、血液学、细胞遗传学复发 ,分别已存活 7月、 18月、 2 0月。结论 :普通染色体分析为CML诊断、观察疗效的可靠指标     

BCR/ABL融合基因表达检测技术建立及其初步应用

目的建立BCR/ABL融合基因表达定量分析的双色荧光定量PCR技术;探讨所建立的双色荧光定量PCR技术在CML早期诊断中的临床应用特点。方法据BCR/ABL融合基因序列,设计合成BCR/ABL融合基因及ABL基因特异的引物TaqM an探针。提取患者骨髓细胞标本总RNA,逆转录成cNDA;在同一PCR反应管中同时进行两种基因的双色荧光定量PCR反应,分别定量测BCR/ABL融合基因和ABL基因的表达量,并计算两种基因表达的比值。检测标本中两种基因的表达量,计算检测的阳性率,所得结果与临床诊断结果对比,以判断该技术在CML检测诊断中的价值。结果成功地建立了BCR/ABL融合基因检测的双色荧光定量PCR技术方法;在35例临床CML患者中,33例检出融合基因阳性,检测阳性率94.3%;12例正常人cDNA均未检出融合基因阳性。结论所建立的BCR/ABL融合基因检测的双色荧光定量PCR是一种快速、准确、高通量而费用又较为低廉的基因检测技术,该技术检测CML具有临床可行性。     

双标记原位杂交法检测间期细胞BCR/ABL融合基因

目的 :应用双标记原位杂交方法检测 BCR/ ABL融合基因。方法 :BCR基因探针用地高辛标记 ,碱性磷酸酶显色 ;ABL基因用3 H- d ATP标记 ,核子乳胶放射自显影。结果 :检测 9例初治的慢性粒细胞白血病 ( CML)病人均为阳性 ,阳性细胞比例为 93% ;检测 CML来源的 K5 62细胞株阳性细胞占 98.8% ;正常人假阳性率为 0 .75 %。结论 :该方法简便、快速 ,适用于 CML微小残留病的检测     

慢性髓细胞白血病骨髓活检的意义

目的 :评估骨髓活检在慢性髓细胞白血病诊断、分型中的价值。方法 :分析 68例CML患者骨髓片观察结果。结果 :CML患者骨髓片中粒系、巨核系、间质均有明显的病理改变。结论 :骨髓活检对CML诊断、分型及预后有重要意义     

X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1在慢性粒细胞白血病中的表达研究

目的 观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值.方法 选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变期11例).应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者骨髓细胞XIAP及XAF1 mRNA表达水平.对照组为非恶性血液病患者21例(非恶性血液病组)及急性白血病(AL)患者28例(AL组).结果 CML进展期组患者骨髓中XIAP mRNA表达水平高于CML慢性期组(P＜0.01)和非恶性血液病组(P＜0.01);而CML进展期患者骨髓中XAF1 mRNA表达水平低于CML慢性期(P＜0.05)和非恶性血液病组(P＜0.01);化疗后获得骨髓缓解的CML患者骨髓中XIAP mRNA的表达水平显著低于化疗前,而XAF1 mRNA的表达水平显著高于化疗前;XIAP mRNA及XAF1 mRNA表达水平之间呈负相关.结论 CML患者进展期XIAP及XAF1的联合检测及动态观察可作为CML临床辅助诊断、分期及预后判断的指标之一.     

晚期糖基化终产物在老年心房颤动患者血清中的表达及意义

目的:探讨老年持续性心房颤动患者血清晚期糖基化终产物羧甲基赖氨酸(CML)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平变化,并探讨其临床意义.方法:选择老年心房颤动患者50例(年龄≥65岁),对照组为同期住院的年龄≥65岁非心房颤动患者30例.用ELISA法检测血CML、SOD、TNF-α的水平.彩...     

三联化疗药物治疗慢性粒细胞白血病急变疗效观察

尽管目前对慢性粒细胞白血病 (CML)的治疗有了明显进步 ,药物品种增多 ,疗效提高 ,但是大部分CML几年后仍会出现急变。以前对CML急变治疗的信心不足 ,认为这是CML的终末期 ,没有更好的方法控制病情 ,家属也往往放弃治疗。但随着一些新的抗白血病药物的应用及治疗方法的改变 ,CML急变的疗效有了明显提高 ,我们应用三联药物化疗治疗CML急变取得了满意效果 ,报告如下。1　资料与方法1.1　一般资料　本组 7例 ,男性 4例 ,女性 3例 ,年龄2 9～ 71岁 ,平均 4 6 .4岁。按“血液病诊断与疗效标准”[1] ,本组病例均符合诊断为CML急变 ,均为…     

bcr／ab1融合基因在慢性粒细胞白血病中的表达及临床意义

目的探讨bcr／ab1融合基因的表达在慢性粒细胞白血病（CML）中的诊断、疗效及预后观察中的意义。方法采用荧光定量逆转录多聚酶链反应（FQ-PCR）技术，对8例复治CML患者和作为对照组的2例急性非淋巴细胞性白血病患者的骨髓或外周血进行bcr／ab1融合基因检测；同时比较患者的血象、骨髓象等相关实验室指标。结果CML中7例慢性期（CP）和1例急变期（BC）患者，均不同程度地表达了bcr／ab1融合基因，而对照组该融合基因的表达为阴性。结论bcr／ab1基因是CML发病的分子基础，定量检测bcr／ab1融合基因对于CML的诊断、临床分型、疗效观察及预后判断有重要意义。     

染色体核型和bcr/abl融合基因表达与慢性髓细胞白血病急变的关系

目的 探讨慢性髓细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)的细胞遗传学特性及其与病程发展的关系.方法 短期培养法直接法G显带检测CML的骨髓染色体核型,双色荧光原位杂交检测CML的bcr/abl融合基因,统计学方法采用t 检验.结果 264例CML患者的骨髓染色体检测,检测出Ph染色体阴性14例,阴性率5.3 %,其余为Ph染色体阳性,阳性率为94.7%.在观察到CML急变的43例患者中,标准Ph染色体22例,Ph染色体阴性9例,双Ph染色体2例,变异Ph染色体3例,标准Ph染色体伴其它染色体易位3例,Ph染色体阴性伴其它染色体易位1例,Ph染色体阴性伴倒位2例,Ph染色体阳性伴倒位1例.43例患者中24例患者急变时发生了染色体核型及融合基因改变,19例患者染色体核型及融合基因没有发生变化;[t(9;22)(q11;34)]的CML患者与[Ph-,变异Ph,复杂染色体]的CML患者急变时间(月)差异有统计学意义(P＜0.05).结论(1)慢性髓细胞性白血病加速/急变期发生克隆演化;(2)[Ph-,变异Ph,复杂染色体]的CML患者急变时间(月)明显短于[t(9;22)(q11;34)]的CML患者;(3) 染色体核型和bcr/abl融合基因表达可为诊断提供可靠、可循的依据,对预后判断有重要意义.     

慢性粒细胞白血病不同病期形态学和免疫学诊断分型

目的 :探讨慢性粒细胞性白血病 ( CML )不同病期患者的形态学和免疫学表型联合诊断分型。方法 :应用间接免疫荧光法对 80例 CML 患者不同病期骨髓单个核细胞 ( MNC)进行形态学和免疫表型检测。 结果:CML慢性期、加速期、急变期 CD34 及 HL A- DR抗原表达阳性率分别为 3.6 %和 31% ,36 %和 73% ,6 2 %和 10 0 % ,慢性期与急变期相比差异有统计学意义 ( P <0 .0 5 ) ;CD1 5随疾病进展趋于递减 ,尤其在急变期明显低于慢性期和加速期( P均 <0 .0 5 ) ;急变期 13例中 11例表达 CD9+;部分急变期患者原始细胞无特征 ,既有淋系又有髓系特点 ;其免疫表型和形态学诊断符合率为 77%。结论:在急变类型和不同病期进展中显示出膜标记有决定性意义 ,而形态学和细胞化学方法也有免疫表型不可替代的作用。形态学、细胞化学 +免疫表型联合诊断可达到互补。     

慢性髓性白血病cyclin E基因蛋白表达及临床意义

目的探讨CML患者Cyclin E基因蛋白表达特点。方法利用免疫组织化学实验方法检测34例CML患者Cyclin E基因蛋白。结果 CML患者Cyclin E基因蛋白表达明显高于对照组,有极显著性差异(P<0.001)。CML患者治疗前与治疗后Cyclin E阳性表达率也存在着明显差异(P<0.05),同时还观察了急变期/加速期、慢性期、缓解期Cyclin E基因蛋白表达,在急变期/加速期、慢性期时呈高表达状态与缓解期比较有显著性差异(P<0.05)。结论 Cyclin E基因蛋白表达与CML患者病情进展程度密切相关,该研究工作揭示CML的分子发病机制,同时对CML的诊断和疗效监测具有十分重要的临床应用价值。