血栓调节蛋白在肺癌组织中的表达

我们应用免疫组织化学方法观察血栓调节蛋白 (Ｔｈｒｏｍ ｂｏｍｏｄｕｌｉｎ ,ＴＭ)在肺癌组织中的表达。现报告如下。一、材料与方法1.免疫组织化学染色 :采用ＳＰ法。抗ＴＭ单克隆抗体(ＤＡＫＯ公司 ) ( 1∶2 5 0 )由日本鹿儿岛大学医学部米泽杰先生惠赠 ,ＳＰ试剂盒购自福建迈新生物技术公司。每次染色均设阳性对照及阴性对照。2 .肺癌组织标本 :收集中国医科大学病理教研室存档肺癌蜡块 ,共 5 6例 ,其中肺鳞癌 35例 :高分化 2例 ,中分化 2 7例 ,低分化 6例 ;肺腺癌 18例 :高分化 3例 ,中分化 8例 ,低分化 7例 ;小细胞癌 3例。3 .ＴＭ阳…     

大肠癌不同部位粘膜细胞EGFR的表达

１　材料和方法收集活检并病理证实正常直肠粘膜１０例。根治手术切除的大肠癌３０例，取癌远旁（标本近端切缘，距肿瘤边缘５～１０ｃｍ）、癌近旁（距肿瘤边缘２ｃｍ，并经病理证实无癌浸润）和癌粘膜各１块。标本处理：标本用１０％中性福尔马林固定、石蜡包埋，６μｍ厚连续切片，分别做ＨＥ和ＥＧＦＲ染色。试剂：ＥＧＦＲ多克隆抗体为美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品，ＳＰ即用型试剂盒和ＤＡＢ显色试剂盒均为美国Ｚｙｍｅｄ公司产品。染色方法：过氧化酶标记的链霉卵白素染色（ＳＰ法），用ＰＢＳ代替一抗做阴性对照。结果判定：…     

细胞周期调控基因p21WAF1/CIP1在膀胱移行细胞癌中的表达

一、材料和方法1材料:选取1998～1999年南昌地区手术切除的膀胱移行细胞癌标本56例。其中男性42例,女性14例,平均年龄64岁,病理分级按照ＷＨＯ标准:Ⅰ级9例,Ⅱ级21例,Ⅲ级26例。浅表性肿瘤(Ｔｉｓ～Ｔ1)17例,浸润性肿瘤(Ｔ2～Ｔ4)39例。经膀胱腔内灌注化疗药物后复发16例,初发40例。同时选取10例正常的膀胱粘膜组织作对照。全部标本经4%甲醛液固定,石蜡包埋,连续切片3张,4μｍ厚。分别做原位分子杂交、免疫组织化学和ＨＥ染色观察。2原位分子杂交(ｃＤＮＡｍＲＮＡ):生物素标记的ｐ21ｃＤＮＡ探针及原位分子杂交试剂盒均为武汉博士德生物工…     

HER-2/neu基因在涎腺肿瘤中的扩增及表达

一、材料和方法1 材料　收集湖南医科大学 1 991年 1 2月～ 1 997年 4月存档蜡块中涎腺肿瘤 37例 ,其中粘液表皮样癌 2 0例、腺样囊性癌 1 1例、腺泡细胞癌 4例、恶性混合瘤 2例。从上述蜡块中随机选取粘液表皮样癌 5例、腺样囊性癌 4例、腺泡细胞癌 2例、恶性混合瘤 1例 ,以及癌旁正常组织 1例 ,以便行荧光原位杂交法 (ＦＩＳＨ)检测。2 方法　标本经 4%甲醛固定、石蜡包埋、切片。采用链霉素抗生物素蛋白 过氧化酶免疫组织化学染色方法检测ＨＥＲ 2 /ｎｅｕ蛋白的表达 ,ＤＡＢ显色。鼠抗人ＨＥＲ 2 /ｎｅｕＩｇＧ、生物素化兔抗鼠抗…     

TGF—β胎盘定位及与妊高征发病关系

为确定胎盘ＴＧＦ－β的分布，探讨ＰＩＨ胎盘ＴＧＦ－β表达有无异常，用免疫组织化学染色观察了１０例早孕绒毛，１４例正常孕妇、４１例ＰＩＨ胎盘ＴＧＦ－β的分布。发现早孕绒毛滋养层细胞ＴＧＦ－β染色强阳性；晚孕期染色较早孕期显著减弱；绒毛外滋养层细胞ＴＧＦ－β阳性。ＰＩＨ患者绒毛滋养层细胞ＴＧＦ－β表达降低，且与病情程度相关。率先表明滋养层细胞存在ＴＧＦ－β的自然分泌与旁分泌，ＴＧＦ－β表达受抑可能与Ｐ     

EB病毒潜在膜蛋白在食管癌和癌旁粘膜中的表达

ＥＢ病毒潜在膜蛋白在食管癌和癌旁粘膜中的表达吴名耀梁英锐吴贤英一、材料和方法选取我院病理室１９９０年～１９９２年食管癌手术标本中带有癌及癌旁粘膜的存档蜡块８０例，石蜡切片厚５μｍ。分别行ＨＥ和Ｓ－Ｐ法免疫组化染色。第一抗体鼠抗ＥＢＶ潜在膜蛋白（ｌａｔ...     

口腔淋巴瘤的临床病理、免疫表型与分型的研究

一、材料和方法材料来源于我院病理科 1984～ 2 0 0 0年活检诊断为原发口腔淋巴瘤 2 6例 ,所有病例均详细观察临床症状、体征、局部病变。全部标本均 4 %甲醛固定 ,石蜡包理切片 ,ＨＥ染色 ,同时应用上皮膜抗原 (ＥＭＡ)、白细胞共同抗原 (ＬＣＡ)、ＣＤ2 0、ＣＤ4 5ＲＯ、ＣＤ3、ＣＤ5 6、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ、к与λ链抗体作ＳＰ法免疫组织化学染色。抗体来自美国ｍａｘｉｎ公司。以正常淋巴结和已知Ｂ、Ｔ细胞淋巴瘤切片作对照。全部病例重新按ＷＨＯ 1997淋巴瘤新分类进行诊断分型。二、结果1 临床特点 :2 6例中男 9例 ,女 17例。年…     

结直肠癌mdm2,p21和p53蛋白的表达

一、材料与方法1.标本 :89份石蜡组织取自 1991～ 1994年期间本院结直肠腺癌手术切除标本 ,术后随访 3～ 6年。其中高分化腺癌 30例 ,中分化腺癌 44例 ,低分化腺癌 15例。按Ｄｕｋｅｓ临床分期 ,无Ａ期病例 ,Ｂ期 42例 ,Ｃ期 37例 ,Ｄ期 10例。纤维结肠镜及病理检查未发现异常的结直肠粘膜活检标本 12例做对照。组织均常规甲醛溶液固定 ,石蜡包埋 ,连续切片 ,分别作常规ＨＥ染色 ,ｍｄｍ2、ｐ2 1、ｐ5 3蛋白免疫组化染色。2 .免疫组化染色 :采用ＳＰ法 ,鼠抗ｍｄｍ2 (ＳＭｐ14)、ｐ5 3(Ｄｏ 1)、ｐ2 1(187)为ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司试剂 ,Ｓ…     

Ki67抗原表达与膀胱癌生物学行为的关系

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤 ,严重威胁患者的生命。笔者应用免疫组化法探讨Ｋｉ6 7抗原在膀胱癌组织中的表达与其生物学行为的关系。1　材料与方法1 1　材料　实验组 :6 0例膀胱癌 ,均为移行上皮癌 ,男∶女3 75∶1,平均年龄 6 0 9± 10 7岁。淋巴结转移 2 1例 ;分析程度Ⅰ级 9例 ,Ⅱ级 2 4例 ;按浸润深度进行临床分期。对照组 :2 0例膀胱粘膜良性病变 ,10例正常膀胱粘膜。所有标本均取自福州协和医院泌尿外科 1988～ 1993年间手术切除及活检的膀胱组织 ,常规固定 ,石蜡包埋 ,4μｍ连续切片备染。1 2　方法　免疫组化Ｓ Ｐ法 ,一抗…     

大鼠肝纤维化时TGFα在Ito细胞中的表达

采用大鼠肝Ｉｔｏ细胞体外分离的方法,并用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ ＰＣＲ）方法观察ＴＧＦα在Ｉｔｏ细胞中表达的情况。结果显示：正常大鼠（６例）肝Ｉｔｏ细胞ＴＧＦα∶β ａｃｔｉｎ＝０８９∶１００＝０８９,肝纤维化大鼠（６例）肝Ｉｔｏ细胞ＴＧＦα∶β ａｃｔｉｎ＝３７２∶１００＝３７２,Ｐ＜００５。结果表明肝纤维化时Ｉｔｏ细胞中ＴＧＦα表达显著增加,提示ＴＧＦα在肝纤维化激活及调控中具有重要作用。     

转化生长因子α，β在人结、直肠癌、癌旁及正常肠粘膜组织中mRNA表达及其基因变化的分析

转化生长因子α，β（ＴＧＦ－α，β）分别作为正负自分泌生长调控因子，其在结、直肠癌的发生和发展过程中具有重要作用。本研究采用Ｄｏｔ，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交等分子生物学方法，探讨了１２例人结、直肠癌组织、癌旁及正常肠粘膜组织中ＴＧＦ－α，βｍＲＮＡ表达程度及其基因变化。研究发现，ＴＧＦ－αｍＲＮＡ的表达由高到低依次为癌、癌旁及正常肠粘膜组织，但癌组织及癌旁肠粘膜组织间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。另外，发现１例病人的癌旁组织ＴＧＦ－αｍＲＮＡ的表达明显升高，且高于其相应的癌组织。ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达由高到低的顺序与ＴＧＦ－αｍＲＮＡ相反，为正常肠粘膜组织、癌旁肠粘膜组织和癌组织，前两者间无显著差异（Ｐ＞０．０５），而其与癌组织间均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。其中有２例病人的癌旁组织中，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达高于其相应的正常组织。研究还发现，ＴＧＦ－αｍＲＮＡ表达可能与其基因扩增有关，而引起ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达变化的机制尚不清楚。上述研究结果初步表明：人结、直肠癌组织中ＴＧＦ－αｍＲＮＡ表达的增加和ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达的降低，可能通过自分泌和旁分泌生长调控作用同结、直肠癌的发生和进展有密切     

前列腺癌的神经内分泌分化及其意义

采用免疫组织化学法ＳＰ法 ,用 4种神经内分泌抗体对前列腺癌组织中神经内分泌细胞表达及与癌组织分级 ,与雄激素受体 (ＡＲ)表达的关系进行初步探讨。一、材料和方法1 材料 :选择 1985～ 1999年我院及广州市第一医院手术全切和经尿道切除前列腺癌标本 43例 ,每例均经复查ＨＥ切片 ,参照Ｇｌｅａｓｏｎ分级方法进行记分 ,并选择有代表性蜡块重新切片备用。2 方法 :采用免疫组织化学ＳＰ法 ,4种神经内分泌抗体分别为神经元特异性烯醇化酶 (ＮＳＥ)、嗜铬粒素Ａ(ＣｇＡ)为作者单位 :5 10 0 80广州铁路中心医院病理科 (Ｅｍａｉｌ:ｈｕｌｕｌ…     

双价痢疾疫苗滴鼻免疫小鼠诱导持续性粘膜与系统免疫反应

用双价痢疾疫苗 (ＦＳＭ 2 117)滴鼻免疫小鼠后 7、30和 90ｄ ,分别观测粘膜和系统免疫反应的变化。疫苗经鼻内免疫后 7ｄ ,诱发鼻咽、肺、胃肠道和生殖道等不同粘膜部位及血清中特异性抗福氏、宋内ＬＰＳＩｇＡ、ＩｇＧ水平显著增高 (Ｐ <0 .0 1) ,而特异性抗体水平在免疫后 30、90ｄ明显下降 ,尤其是胃肠道和鼻咽部粘膜 ,但仍明显高于ＰＢＳ对照组水平 ;疫苗滴鼻免疫后 7ｄ ,小鼠ＮＡＬＴ、ＮＰ和ＰＰ淋巴细胞中ＣＤ3+ Ｔ细胞显著增加 ,其中以ＣＤ4 + Ｔ细胞增加为主 ,脾细胞中Ｂ2 2 + 细胞显著增加 ;4次免疫后 30ｄ ,ＮＡＬＴ、ＮＰ和脾…     

消化系统肿瘤患者血清TGF-α、IGF-Ⅱ检测及临床意义

为了探讨消化系统肿瘤患者血清转化生长因子 α (ＴＧＦ α)和胰岛素样生长因子 Ⅱ (ＩＧＦ Ⅱ )的水平 ,我们对 42例消化系统肿瘤患者进行了检测 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1 1　研究对象　 42例消化系统肿瘤患者 ,中位年龄 49岁。胃癌 17例 ,大肠癌 14例 ,肝癌 11例。正常对照 2 0例 ,中位年龄 5 1岁。1 2　实验材料与方法　受检者于空腹取静脉血 ,分离血清置 2 0℃待测。ＴＧＦ α、ＩＧＦ Ⅱ放免试剂盒购自北京东亚免疫技术研究所。严格按药盒说明书操作。2　结果表 1显示患者血清ＴＧＦ α水平明显升高 (Ｐ <0 0 1) ,尤以肝癌…     

Src对细胞的肿瘤性转化和PDGF诱导的有丝分裂需要STAT3介导的Myc基因的表达

细胞因子和生长因子包括ＰＤＧＦ(血小板生长因子 )诱导激活的信号通路中 ,ＳＴＡＴ(转录因子 )蛋白有重要作用。另外 ,正常细胞中Ｓｒｃ激酶家族是ＰＤＧＦ诱导有丝分裂的必须成分 ,并可激活ＳＴＡＴ3信号通路。ＳＴＡＴｓ家族成员ＳＴＡＴ3,在Ｓｒｃ原癌基因蛋白对细胞的肿瘤性转化中 ,作用至关重要。然而 ,ＳＴＡＴ3信号通路在其中的作用机制还未完全阐明。本文在ＮＩＨ3Ｔ3成纤维细胞中 ,利用显性负性突变体ＳＴＡＴ3β蛋白破坏信号通路进行研究。结果表明 :显性负性突变体ＳＴＡＴ3β蛋白可遏制ｃ ｍｙｃ基因的表达 ,ｃ ｍｙｃ基因表达…     

PAI—1在TGF—β1基因和反义TGF—β1基因转染人肝癌？…

目的：通过对人肝癌细胞株（ＳＭＭＣ－７７２１）转染ＴＧＦ－β１基因及反义ＴＧＦ－β１基因,观察该细胞ＰＡＩ－１表达的变化。方法：采用电穿孔法进行基因转染,并用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法另以鉴定后,分别应用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ观察该细胞表达ＰＡＩ－１ｍＲＮＡ的变化。结果：过表达的ＴＧＦ－β１细胞克隆ＰＡＩ－１ｍＲＮＡ表达均高于对照组,而低表达ＴＧＦ     

脊髓Ⅱ板层NOS、BDNF、GDNF阳性神经膨体的组织化学双标研究

目的 :我们前面的研究已发现 ,脊髓Ⅱ板层有大量ＮＯＳ、ＢＤＮＦ及少量ＧＤＮＦ阳性神经膨体。为观察这些神经膨体是否同时含有ＮＯＳ和ＢＤＮＦ或ＢＤＮＦ和ＧＤＮＦ ,以间接了解背根节 (ＤＲＧ)小细胞是否同时含有这些物质 (因Ⅱ板层的膨体主要源于ＤＲＧ小细胞 )。方法 :用成年猫Ｌ3脊髓制作 2 0 μｍ厚冰冻切片并分两组 ,一组先行ＮＯＳ酶组化染色 ,ＮＢＴ兰色反应显色 ,而后用ＢＤＮＦ抗血清 ( 1∶50 0 ,ＳａｎｔａＣｒｕｚ)以免疫组化ＡＢＣ法行双标染色 ,ＤＡＢ棕色反应显色。另一组则先用ＢＤＮＦ抗血清以免疫组化ＡＢＣ法染片 ,Ｄ…     

结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的制备

ＣＦＰ10和ＥＳＡＴ6都是结核分枝杆菌(Ｍ .ｔｂ)特有的、有良好抗原性的分泌性蛋白 ,将其编码基因 1ｈｐ和ｅｓａｔ6用ＧｅｎｅＳＯＥｉｎｇ法通过Ｌｉｎｋｅｒ (Ｇｌｙ4 Ｓｅｒ) 3构建成融合基因 ,并克隆入ｐＱＥ30质粒 ,表达、纯化、鉴定ｒＣＦＰ10 ＥＳＡＴ6 ,为其应用于Ｍ .ｔｂ感染的诊断和预防奠定基础。1 1ｈｐ ｅｓａｔ6基因的构建 :以已构建的ｐＱＥ30 ＣＦＰ10质粒为模板 ,用引物(Ｐ1) 5′ ＣＣＧＧＡＴＣＣＡＴＧＧＣＡＧＡＧＡＴＧＡＡＧＡＣ 3′和 (Ｐ2 ) 5′ ＧＣＴＧＣＣＧＣＣＡＣＣＧＣＣＧＣＴＴＣＣＧＣＣＡＣＣＧＣ…     

肾细胞癌c—erbB—2癌基因蛋白的表达与预后

一、材料与方法对例肾细胞癌取自解放军总医院病理科1960～1985年存档的福马林固定、石蜡包理组织标本，其中透明细胞癌20例，颗粒细胞癌5例，混合细胞癌6例；组织学分级标准有三级癌18例、11级癌10例、III级癌3例；按临床分期有1期癌16例，II期癌7例，III期癌5例，IV期癌3例；病例均获随访。切片脱蜡至水，3％过氧化氢10分钟，经微波炉抗原修复法处理后，兔抗人c-rbB－2癌基因蛋白抗体（Zymed公司产品）1：50，4℃，过夜，继后免疫组化染色按Zymed公司SP试剂盒及方法进行。分别以PBS、正常兔血清代替一抗作为空白对照和替代对照，…     

转化生长因子-α、表皮生长因子受体与胃癌发生的关系及其与增殖细胞核抗原的相关性分析

目的研究在胃癌发生的不同阶段转化生长因子－α（ＴＧＦ－α）、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达情况及与增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的关系。方法应用免疫组化ＬＳＡＢ法。结果（１）ＴＧＦ－α在癌周正常粘膜、肠化生组织中的表达明显高于非癌正常粘膜及肠化生（Ｐ＜０．０１）。（２）ＥＧＦＲ在肠化生、不典型增生粘膜表达较正常、癌组织明显升高（Ｐ＜０．０１）。（３）ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ共同表达常伴不典型增生。（４）ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ表达与ＰＣＮＡ表达有明显的相关性。（５）ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ、ＰＣＮＡ表达与肿瘤外侵、淋巴结转移无关。结论ＥＧＦＲ／ＴＧＦ－α是胃癌前病变的一项有意义的标志，结合ＰＣ－ＮＡ监测高危人群可能有助于发现早期胃癌。