50例病人多次输注血小板后同种免疫的前瞻性研究

抗体检测情况:抗—HLA检出13例(26%),但其中4例在输血小板前即可检出,1例在输注期及输后均检出抗体,7例在输注后检出,最后1例在输后30天方检出抗体。其他37例在各个时期均未检出抗体。13例中,淋巴细胞毒性试验(标准LCT)检出者12例,血小板是液间接荧光免疫试验(PSIIFT)可检出11例,另2例因同时存在抗血小板自身抗体故不能肯定该法是否阳性,单克隆抗体固定血小板抗原试验(MAIPA)用于检测IgG抗—HLA,但在存在该抗体的7例中仅4例为阳性。抗球蛋白增强LCT对此13例均为阳性。13例抗体中,属IgG者6例,IgM者6例,兼有者1例。存在非补体依赖性抗—HLA的2例仅PSIIFT及抗球蛋白增强LCT可检出,其血小板输注后恢复不良。血小板特异性同种抗体仅检出2例,同时未检出抗—HLA。1例为MAIPA阳性,其相应抗原存在于血小板GpⅠa/Ⅱa复合物     

血小板输注无效患者中HLA抗原抗体表达的研究

目的 对血小板输注无效(PTR)的患者进行HLA-A、B抗原的基因分型研究,并对其血清进行HLA抗体特异性分析,以探讨血小板输注无效与血小板HLA、同种HLA抗体之间的相关性.方法 以48名有血小板输注史,并临床确诊为血小板输注无效的患者为对象,应用HLA抗体特异性检测试剂盒检测患者血清群体反应性抗体(PRA),PRA表达阳性的患者再进行HLA抗体特异性分析;运用PCR-SSP方法对患者进行HLA-A、B抗原基因分型.结果 48名患者中HLA抗体表达阳性的有32例(66.7％).32例HLA抗体阳性患者中:PRA＜ 20％占15.6％、PRA(20％～30％)占15.6％、PRA(31％～40％)占46.8％、PRA＞ 40％占22.4％.结果表明在血小板输注无效患者中,低水平的PRA(20％～40％)较多.HLA-A特异性抗体中,-A9抗体占全部抗体的40.60％,其次分别为-A2(21.90％),-A19(21.90％),HLA-B特异性抗体中,-B40抗体占46.85％,-B7 (21.90％).HLA抗原以HLA-A2、A11为主,频率分别为0.296和0.164;HLA-B13、B19、B40频率分别为0.081、0.066和0.232.结论 在血小板输注无效患者中,HLA抗体占主要原因,研究血小板输注无效与HLA-A、B抗原、抗体的相关性,对临床血小板的输注具有指导作用.     

血小板输注无效患者HLA及抗-HLA表达

目的研究血小板输注无效(PTR)患者抗-HLA的表达,并对其HLA-Ⅰ类抗原进行基因分型及频率分析,探讨血小板输注无效与HLA的相关性。方法选择144名临床确诊为血小板输注无效的患者作为研究对象,用PCR-SSO-HLA分型试剂盒对HLA-Ⅰ类抗原进行基因分型;用抗-HLA特异性检测试剂盒对PRA表达阳性的患者进行抗-HLA特异性分析。结果 144名患者中HLA-A抗原的基因频率较高的为A*02(0.318),A*11(0.259),A*24(0.096),A*33(0.073);HLA-B抗原基因频率表达较高的为B*46(0.161),B*13(0.081),B*38(0.073)。抗-HLA单独表达阳性的有96例(73.85%),抗-HLA特异性分析,HLA-A特异性抗体中,抗-A 9占46.2%,抗-A 2占29.4%,抗-A 19占29.4%,HLA-B特异性抗体中,抗-B 40占33.6%,抗-B 7占29.4%。结论在血小板输注无效中抗-HLA占主要地位,探讨PTR与HLA-A、B抗原及其抗体的相关性,对临床血小板输注具有指导意义。     

LCT配合血小板的输注对HLA抗体的影响

目的 了解随机血小板输注无效患者输注淋巴细胞毒实验(Lymphocyte cytotoxicity test,LCT)配合血小板后,其人类组织相容性抗原(Human leukocyte antigen,HLA)抗体的变化,探讨HLA抗体阳性患者的血小板有效输注方式.方法 选取5例由于HLA抗体阳性引起的随机血小板输注无效,需长期输注LCT配合血小板的患者,以每输注LCT配合血小板5个治疗量为一间隔期,动态检测患者的HLA抗体强度和特异性.结果 随着输入血小板数量的增加,5例患者的HLA抗体强度逐渐减弱,2例患者的HLA抗体特异性发生改变.结论 LCT能够解决由于HLA抗体阳性引起的随机血小板输注无效,但随着输入抗原的改变HLA抗体的特异性亦会发生改变,产生新特异性的HLA抗体,建立HLA相合血小板供者库是最有效的解决方法.     

血小板输注无效患者血小板同种抗体及血小板特异性糖蛋白抗体表达的研究

目的 探讨血小板输注无效与血小板同种抗原或血小板特异性抗原的相关性.方法 选择65例临床确诊血小板输注无效患者作为研究对象,应用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测血清、血小板洗脱液中血小板特异性抗体;应用HLA抗体特异性检测试剂盒,对组合反应性抗体(PRA)阳性的患者进行HLA抗体特异性分析;用HPA分型试剂盒检测8个血小板同种抗原系统HPA-1、2、3、4、5、6、9、15;用HLA分型试剂盒对HLA-A/B抗原进行基因分型.结果 65例患者HLA-A/B抗原,HPA-1、2、4、5、6、9、15抗原的基因频率分布与健康献血员比较差异无统计学意义.HPA-3a、3b抗原频率分别为0.65、0.35,与健康献血员比较差异有统计学意义(P＜0.05).65例患者中HLA抗体单独阳性24例(36.9%),HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体共同阳性14例(21.5%);HLA抗体和血小板洗脱液特异性糖蛋白抗体共同阳性6例(9.2%),血小板洗脱液特异性糖蛋白抗体阳性13例(20%),HLA抗体、血小板特异性糖蛋白抗体及血小板洗脱液特异性糖蛋白抗体共同阳性4例(6.2%);HLA-A/B特异性抗体中,HLA-A*9抗体占全部抗体的46.2%,HLA-B*40抗体占33.6%.血清血小板特异性抗体以GPⅡb/Ⅲa为主(26.2%),其次为GP Ⅰa/Ⅱa(21.5%),血小板洗脱液中,血小板特异性抗体以GPⅡb/Ⅲa和GP Ⅰb/Ⅸ为主(41.5%).对2例患者进行了遗传学调查,发现产生的血小板特异性糖蛋白抗体和HLA抗体与父母血小板抗原及HLA抗原不相合呈密切相关.结论 血小板输注无效患者中,HLA抗体占主要地位,其次为血小板特异性糖蛋白抗体.     

乙型肝炎病毒标志物阳性与丙氨酸转氨酶变化分析

目的观察乙型肝炎病毒(HBV)前S2抗原和乙肝血清学标志物:乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(抗-HBe)、乙肝核心抗体(抗-HBc)不同阳性类型患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的变化。方法用酶联免疫吸附实验(ELISA)和酶速率法检测951例患者乙肝血清标志物和ALT,根据HBV标志物不同阳性情况分为3组:A组363例,HBsAg、HBeAg、抗-HBc、pre-S2阳性;B组486例,HBsAg、抗-HBc、pre-S2阳性,抗-HBe阳性或阴性;C组102例,HBsAg、抗-HBc阳性,pre-S2阴性,HBeAg和抗-HBe阳性或阴性。结果各组ALT50U/L例数及百分率分别为A组363例(46.3%),B组486例(23.5%),C组9例(8.8%),其中A组与B组ALT异常率,B组与C组ALT异常率,A组与C组异常率比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论乙肝患者中大三阳合并前S2抗原人群的ALT异常率明显高于前S2抗原阴性和其他乙肝模式的患者。     

HLA与妊娠高血压综合征疾病相关研究

目的 :探讨妊高征与组织相容性抗原HLA A、B、C抗原位点的相关性。方法 :采用HLA A、B、C标准血清 ,对 2 5例正常孕妇和 3 9例重度妊高征病人进行HLA A、B、C抗原的测定。对 10对妊高征夫妇及 2 0对正常妊娠夫妇对照组进行淋巴细胞毒抗体检测。结果 :妊高征病人与正常孕妇在HLA A、B、C抗原方面差异没有显著性。妊高征组有 3例患者抗体阳性 (3 0 % ) ;对照组则全部为阴性。两组间差异有显著性 (P >0 0 1)。结论 :妊高征的家族倾向不是由HLA A、B、C抗原引起。妊高征患者HLA抗体浓度高于正常妊娠孕妇。     

汇集浓缩血小板储存期内血小板不吸附HLA类分子

血小板上HLA I类分子的起源尚在争论之中,特殊试验条件下HLA分子吸附血小板已有报道。本研究调查在常规条件下,随机汇集浓缩血小板(PRPC)保存期间血小板是否对具有明显洗脱和吸附HLA类分子的作用。用HLA-A2阳性和HLA-A2阴性献血者全血制备浓缩血小板(PCs),在常规条件下汇集和保存。另外,HLA-A2阴性献血者血小板浓集后,与HLA-A2阳性献血者无细胞血浆再悬浮。同时将HLA-A2阳性PCs(阳性对照),HLA-A2阴性PCs(阴性对照),HLA-A2阴性献血者血浆HLA-A2悬浮阴性血小板进行保存。在保存的第5天期,以流式细胞计数测定FITC共轭单…     

45例再次肾移植患者HLA、PRA与移植肾功能关系的研究

目的研究再次肾移植患者的人类白细胞抗原（HLA）、群体反应性抗体（PRA）与肾移植术后移植肾功能的关系。方法追踪2000年3月～2010年10月收治的再次肾移植患者45例,于近期再次检测PRA及血肌酐、尿素氮浓度。PRA检测采用酶联免疫吸附法,血肌酐和尿素氮检测数据由检验科提供。结果（1）移植肾存活5年以上组患者13例,HLA—A、B、DR和DQ抗原错配2个抗原4例,肾功能正常,PRA阴性。错配3个抗原的1例,肾功能丧失,PRA阳性;错配4个抗原的8例,PRA阴性,肾功能正常。（2）移植肾存活5年以下组患者32例：HLA—A、B、DR和DQ抗原错配1～2个抗原10例,其中8例PRA阴性,肾功能正常;2例PRA阳性,肾功能下降。HLA—A、B、DR和DQ抗原错配3个抗原患者3例,其中2例PRA阴性,肾功能正常;1例患者PRA阳性,肾功能下降。HLA—A、B、DR和DQ抗原错配4个抗原患者9例,肾功能正常5例,PRA阴性;4例患者肾功能异常,其中2例PRA阳性。HLA—A、B、DR和DQ抗原错配5个抗原7例,4例患者肾功能正常,PRA阴性;1例患者目前肾功能下降,PRA阳性。HLA—A、B、DR和DQ抗原错配6个抗原患者3例,目前肾功能正常2例,1例已丧失肾功能。结论HLA配型是维系移植肾长期存活的重要因素,但抗-HLA对移植肾长期存活和移植肾功能的影响更重要。     

用Rh(D)阳性红细胞吸收制备抗-D试剂血清

目的　解决人源Rh试剂血清制备困难 ,节约Rh阴性红细胞。方法　①将A、B型含有抗 D的 2种血浆混合 ,经过稀释中和后的血浆完全抗体效价下降到只有 2 ;②采用D抗原位点结合被完全封闭的相应ABO血型Rh(D)阳性红细胞 ,吸收中和后的抗 A、抗 B。结果　既吸收了抗 A、抗 B ,又未使抗 D效价降低 ,检测效价及特异性符合Rh抗 D试剂血清要求。结论　采用中和后再吸收的方法 ,解决了人源Rh试剂血清制备困难 ,可节约大量Rh阴性红细胞。     

临床免疫学和免疫学检验练习题

一、单选题(A1/A2型题)1.最早将抗原抗体反应原理及方法应用于临床血清学诊断的学者是()A.WidalB.LandsteinerC.KǒhlerD.ManciniE.Coons2.下列各项用于反映B细胞功能的试验是()A.淋巴细胞转化B.血清免疫球蛋白检测C.迟发型超敏反应皮肤试验D.移动抑制试验E.CD3检测3.对流免疫电泳的沉淀线出现在抗原抗体之间且靠近抗原孔可说明()A.抗原强阳性B.抗原弱阳性C.抗原阴性D.抗体弱阳性E.抗体阴性4.下列何种抗原是触发移植排斥反应的首要抗原()A.HLA-A、B、CB.HLA-DPC.HLA-DQD.HLA-DRE.HLA-D5.人类MHC基因位于第几对染色…     

治疗同种免疫性血小板减少症患者时血小板交叉配合及HLA配型的成本

难治性同种免疫性血小板减少症患者常需要输注血小板,但随机输注血小板会导致发热,败血症,脾大,消耗性凝血和活动性出血,因此需输配型相合的血小板,即:1)交叉配合相容的随机供者的混合血小板;2)交叉配合相容的单个供者血小板;3)HLA相合的单个供者血小板;4)交叉配合相容及HLA相合的单个供者的血小板。为了权衡临床实践中血小板交叉配合及HLA配型的利弊,作者采用经济指标比较了几种血小板交叉配合及HLA配型的成本及效果。交叉配合法包括:依赖补体的淋巴细胞毒试验(LCT),抗生物素蛋白-生物素酶联免疫实验(ELISA),血小板悬浮免     

抗Bak~a和抗plA~2引起输血后紫癜

作者报告1例患镰状红细胞/β-地中海贫血的16岁黑人女孩。入院时检查未发现血小板抗体。入院后输注了3个单位血液,8天后发生了紫癜及鼻衄,血小板计数下降,血红蛋白从7.8g/dl降到5.6g/dl。经检查病人血小板为Pl~(A1)纯合子,Baka阴性。供者1为Pl~(A1)/Pl~(A2),Baka阳性;供者2为Pl~(A1)-阳性(Pl~(A2)未测),Baka阳性,供者3未测。经鉴定发现患者血清中存在两种血小板抗体,分别为抗Baka     

血小板输注无效与抗HLA抗体相关性

目的 研究抗HLA抗体与血小板输注无效的关系.方法 用流式细胞术检测患者抗HLA抗体,并通过检测输注血小板前后的血小板数量计算出血小板增加校正值(CCI)来分析抗HLA抗体与血小板输注无效的关系.结果 25名患者中抗HLA抗体阳性16例,占64%;血小板输注无效16例中,抗HLA抗体阳性15例,阴性1例.抗HLA抗体阳性患者血小板输注无效率显著高于抗HLA抗体阴性患者.结论多次输血患者体内易产生抗血小板抗体,导致血小板榆注无效,其中抗HLA抗体是引起血小板输注无效的重要原因之一.     

0903种第三代抗HCV ELISAS的敏感性和特异性

[英]/VrielinkH…／／VoxSang.－1995,69.──14～17本文作者报道了3种第三代抗HCVELISA的特异性和敏感性。材料和方法：标本组别(A)血清标本来自献血员(n=403)，所有血清在各血库用第一代或第二代抗HCVELISA测定结果阳性。RIBA──2或RIBA──3反应均阳性或可疑；(B)血清标本为临床非甲非乙型肝炎病人(n=212)；(C)血清标本为多次献血病人(n=253)；(D)HCV阳性(RIBA──2和PCR确证)供血员血浆稀释参照品(n=24)，用人AB血浆2倍连续稀释，HBsAg、抗HB、抗HIV──1／2、HCV、HTLV──I／Ⅱ和密螺旋体抗原均阴性；(E)血…     

用二磷酸氯奎选择性地洗脱血小板膜上的HLA抗原和β_2-微球蛋白

为了确定氯奎是否能特异地洗脱血小板表面的HLA抗原和B_2-微球蛋白(β_2-M),作者用4个容积20%(重量/容积)的二磷酸氯奎与1个容积的洗涤血小板(3×10~9/ml)混合,25 C孵育60分钟。再用血小板表面抗原的定量免疫荧光流动细胞计数法和抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体检测氯奎处理的血小板,发现70%的HLA抗原和β_2-M从血小板上被洗脱,膜糖蛋白Ⅱb和Ⅲa不受影响。经电泳~(125)I标记的血小板放射自显影,发现除β_2-M外,其它~(125)I标记的膜蛋白不被洗脱。虽然~(125)I不易标记HLA抗原而不能用放射自显影检测,但经抗-HLA单克隆抗体和免疫印迹技术在洗脱液中检测到HLA抗原。经透射电镜检查,氯奎处理的血小板的膜是完整的。这些氯奎处理过的血小板再同血浆孵育,HLA抗原和β_2 M可重     

血小板输注前检测人类白细胞抗原抗体的必要性探讨

目的 探讨血小板输注前检测人类白细胞抗原(HLA)抗体的必要性.方法 对106例血小板输注无效患者检测其人类白细胞抗原抗体,以同样多次输血而再次输注血小板有效者作为对照. 结果实验组中HLA 同种抗体阳性52例(49.05%),对照组阳性13例(10.66%),两组比较差异有统计学意义(χ2= 6.689,P<0.01).结论 对于输血患者,特别是多次输血患者,开展HLA抗体筛查是非常必要的,另外,对于血小板输注无效的患者,还应开展血小板配型.     

HLA表位分析及避免重型再生不良性贫血(SAA)患者抵抗血小板

SAA对血小板的抵抗会增加费用,危及生命,是致死的主要原因。作者研究了是否表位分析可以确定对血小板抵抗的免疫显性表位。血清样本取自7个欧洲中心的90例病人(输血后3天至20年),用流式细胞仪(FC)和淋巴细胞毒(LCT)实验筛选HLAⅠ类抗体。61例(68％)抗体阳性,其中27例(30％)FC LCT-,表明存在HLAⅡ类抗体、非补体固定抗体或弱的HLAⅠ类抗体。24例(27％)FC LCT ,其中包括18例有IgM抗体(二硫苏糖醇敏感)和10例有IgG抗体。所有患者都接受过     

同种异基因骨髓移植中血清HLAⅠ类抗原水平:一项可检测急性GVHD的指标

作者测定了骨髓移植(BMT)后患者血清中HLAⅠ类抗原水平,分析了它与急性GVHD发作和感染或不明原因发热之间的关系。 方法 患者47例,男25例,女22例,年龄11～47岁,均为接受HLA-A、-B相同和MLR阴性同胞骨髓的同种异基因BMT(Allo-BMT)。BMT后每间隔1周采1次血清标本,随访时间5～14周。患者分为5组:A组8例,仅有Ⅰ级GVHD;B组3例有Ⅰ级GVHD和不明原因的发热;C组12例,Ⅰ级GVHD合并感染;D组10例,有Ⅱ～Ⅳ级GVHD;E组14例有Ⅱ～Ⅳ级GVHD和感染。正常对照为60例健康志愿者,用Comuzio等的双决定簇免疫分析法(DDIA)测定血清HLAⅠ类抗原水平。     

中华(江苏)骨髓库人群HLA-Ⅰ类抗原的PCR-SSP分型

目的分析中华(江苏)骨髓库HLAⅠ类抗原的分布特点。方法采用序列特异性引物(PCR SSP)基因分型技术,对中华(江苏)骨髓库初期的骨髓捐献志愿者的HLA A、B位点上的等位基因作低分辨基因分型,计算HLA A、B的基因频率、由基因分型结果指定的抗原特异性频率(以下简称抗原频率)、HLA A、B位点单倍型频率和连锁不平衡参数,获取中华(江苏)骨髓库HLAⅠ类抗原多态性分布的初步资料。结果中华(江苏)骨髓库志愿者中,A位点抗原频率较高的是A2、A11和A24,分别为0.5087,0.3505和0.3056;而A74的频率最低(0.0009);B位点抗原频率较高的是B13、B46和B60,分别为0.2372,0.1772和0.1603,频率较低的是B78(0.0002)。连锁不平衡参数>0的单倍型有80余种,最常见的单倍型有A33B58、A2B62、A2B13、A33B44、A30B13等。结论了解中华(江苏)骨髓库志愿者HLA遗传学分布特点,为器官或干细胞移植配型和疾病相关性分析提供了有价值的基础性资料。