转移抑制基因Kiss-1和KAI-1在胃癌组织中表达的原位杂交研究

目的研究胃癌及其癌旁组织Kiss-1和KAI-1转移抑制基因信使核糖核酸（Kiss-1mRNA和KAI-1 mRNA）的表达水平及其临床意义。方法将49例胃癌组织和20例癌旁组织常规制作石蜡包埋切片．用Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA染色方法作为原位杂交染色法。结果胃癌组织中Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA表达阳性率明显低于癌旁组织（P〈0．01）；正常至轻度不典型增生癌旁组织两者Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA表达阳性率及其评分明显高于中至重度不典型增生病例（P〈0．05，P〈0．01）。侵袭深度T1～T2、区域淋巴结无转移、第1站淋巴结转移及无远处转移的胃癌Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA表达阳性率及其评分明显高于侵袭深度T3～T4、区域淋巴结有转移、第2站或第3站淋巴结转移及有远处转移的病例（P〈0．05，P〈0．01）；但两者的表达与胃癌其他临床病理特征无明显关系。胃癌组织中Kiss-1 mRNA表达评分与KAI-1 mRNA表达评分呈密切正相关（r=0．53，P〈0．01）。结论Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA表达可能是反映胃癌侵袭和转移潜力及预后的重要生物学标记物，对胃良性病变者检测Kiss-1 mRNA和／或KAI-1 mRNA可能对早期发现及预防胃癌发生有重要临床意义。     

MTA1 m RNA与ki67蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的：观察MTA1 mRNA与ki67蛋白在乳腺癌组织中的表达,探讨二者与乳腺癌的相关性。方法：应用原位核酸分子杂交检测乳腺癌组织中MTA1 mRNA的水平,应用免疫组织化学技术检测乳腺癌组织中ki67蛋白的表达,分析二者与乳腺癌的相关性。结果：MTA1 mRNA、ki67蛋白在乳腺癌低分化组的表达明显高于高、中分化组（P〈0.01）,淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组（P〈0.01）。MTA1mR-NA、ki67蛋白在c-erbB2阳性组的表达水平高于c-erbB2阴性组（P〈0.01）,MTA1 mRNA、ki67蛋白在ER阳性组的表达水平低于ER阴性组（P〈0.05）。ki67蛋白与MTA1 mRNA的表达呈正相关,r=0.553。结论：MTA1 mRNA和ki67蛋白的表达与乳腺癌的发生、发展密切相关,可以作为判断乳腺癌预后的重要分子标志物。     

Kiss-1和KAI-1在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的:研究转移抑制基因Kiss-1和KAI-1在大肠癌组织中的表达水平及临床意义.方法:采用原位杂交技术检测61例大肠癌组织和20例癌旁正常组织中Kiss-1和KAI-1的表达情况.结果:大肠癌组织中Kiss-1和KAI-1的阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P<0.05),无淋巴结转移和高分化的大肠癌组织中Kiss-1和KAI-1的阳性表达率及评分显著高于有淋巴结转移和低分化病例.DukesA、B期的大肠癌组织中Kiss-1和KAI-1的阳性率显著高于DukesC、D期.二者表达与大肠癌其他病理特征无明显相关性.大肠癌组织中Kiss-1和KAI-1表达评分呈正相关(f=0.98,P<0.01).结论:Kiss-1和KAI-1可能在大肠癌的发生、发展和转移过程中起着重要作用,二者表达水平可作为反映大肠癌侵袭、转移及预后的重要生物学标志,同时可用于评价大肠癌侵袭、转移风险.     

乳腺癌中MTA1，ER的表达及其相关性研究

目的 观察MTA1,ER在乳腺癌中的表达,探讨两者与乳腺癌侵袭能力的相关性.方法 应用原位核酸分子杂交和免疫组织化学分别检测正常乳腺组织、癌前病变组织及乳腺癌组织中MTA1,ER的表达;并以Spearman等级相关分析它们的相关性.结果 在正常乳腺组织、癌前病变组织、乳腺癌组织中,原位杂交对MTA1,ER的阳性检出率高于免疫组化,原位杂交检测中MTA1 mRNA的表达率分别为12.2%,33.3%,81.1%;免疫组化检测中MTA1的表达率分别为11.1%,31.1%,72.2%;原位杂交检测中ER mRNA的表达率分别为83.3%.61.1%,37.8%,免疫组化检测中ER的表达率分别为70.9%,56.7%和35.6%.MTA1在ER阴性组中的阳性表达率为86.2%,高于阳性组中的46.9%.结论 原位杂交和免疫组化联合检测增加MTA1,ER基因的检出率;随疾病的进展和肿瘤分化程度的降低,MTA1表达逐渐增强,ER表达逐渐减弱,甚至丧失.MTA1与ER表达呈负相关(r=-0.466,P＜0.01).提示MTA1,ER可作为乳腺癌预后及治疗重要的分子标记物.     

MTA1和MTA3与ER在乳腺癌组织中的表达及相关性研究

目的:观察转移相关基因蛋白(MTA1、MTA3)与雌激素受体(ER)在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测正常乳腺组织、癌前病变组织及乳腺癌组织中MTA1、MTA3和ER的表达,分析三者与乳腺癌的相关性.结果:正常乳腺组织、癌前病变组织、乳腺癌组织中MTA1的表达率分别为11.1%(10/90)、31.1%(28/90)和72.2%(65/90);MTA3的表达率分别为78.9%(71/90)、66.7%(60/90)和51.1%(46/90);ER的表达率分别为78.9%(71/90),56.7%(51/90)和35.6%(32/90).MTA1在ER阴性组中的阳性表达率为86.2%(50/58),高于阳性组中的46.9%(15/32);MTA3在ER阳性组中的阳性表达率为93.8%(18/19),高于阴性组中的22.5%(16/71).MTA1与ER表达呈负相关,相关系数为-0.466;MTA3与ER表达呈正相关,相关系数为0.547.结论:随着肿瘤分化程度的降低,MTA1表达逐渐增强,MTA3和ER表达逐渐减弱,甚至丧失.MTA1和MTA3及ER可能成为指导乳腺癌治疗和评价预后的重要分子标志物.     

乳腺癌组织中雌激素受体亚型βmRNA和血管内皮细胞生长因子mRNA的表达及其意义

目的探讨雌激素受体亚型β(ERβ)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其表达的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测35例乳腺癌、12例癌旁乳腺组织和10例乳腺纤维腺瘤组织中ERβmRNA和VEGFmRNA表达,分析其表达之间的关系。结果ERβmRNA在乳腺癌中的表达水平(0.274±0.124)明显低于癌旁乳腺组织(0.538±0.124)和乳腺纤维腺瘤组织(0.459±0.13)(t=6.37、4.09,P均<0.01)。VEGF121、165mRNA在乳腺癌中的表达水平(0.530±0.142、0.336±0.114)明显高于癌旁乳腺组织(0.184±0.098、0.137±0.059)和乳腺纤维腺瘤组织(0.280±0.078、0.187±0.090)的表达(t=6.87和4.69、5.73和3.89,P均<0.01)。VEGF121、165mRNA在有淋巴结转移的乳腺癌组织中表达水平明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。ERβmRNA表达水平与VEGF121、165mRNA的表达水平呈正相关(r=0.785和0.641,P均<0.01)。结论乳腺癌组织中ERβmRNA表达下调,而VEGFmRNA表达上调。VEGFmRNA的表达水平高者可能有利于淋巴结转移。乳腺肿瘤血管生成可能受ERβ的影响。     

乳腺癌组织中ERβmRNA和VEGFmRNA的表达及两者的关系

目的：探讨雌激素受体亚型β（ERβ）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）在乳腺癌组织中的表达及两者之间的关系。方法：采用半定量逆转录聚合酶链式反应（RT PCR）检测35例乳腺癌组织中ERβmRNA和VEGFmRNA的表达，分析两者表达的相关性及其与肿瘤病理参数的关系。结果：ERβmRNA表达水平与VEGF121和VEGF165mRNA的表达水平呈正相关（r=0.785和0.641，均P=0.000）。VEGF121和VEGF 165mRNA在有淋巴结转移的乳腺癌组织中表达水平明显高于无淋巴结转移者（P=0.033，0.004）。结论：乳腺肿瘤血管生成可能受ERβ的影响，而乳腺癌组织中VEGFmRNA的表达水平高者可能易于发生淋巴结转移。     

BRMS1mRNA在乳腺癌组织中的表达及其意义

摘要：目的 探讨乳腺癌转移抑制基因BRMS1mRNA在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 用逆转录聚合酶链反应（RT PCR）技术检测71例乳腺癌、71例癌旁组织及12例乳腺良性肿瘤、12例正常乳腺组织中BRMS1mRNA的表达，半定量分析RT PCR产物电泳条带密度。结果 在71例乳腺癌及其相应癌旁组织中BRMS1mRNA表达水平分别为0.378±0.046和 0.918±0.044；12例乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织表达水平分别为0.908±0.047和 0.934±0.028；乳腺癌组织BRMS1mRNA的表达水平明显低于癌旁组织、乳腺良性肿瘤和正常乳腺组织(P<0.01)。BRMS1mRNA的表达水平与患者年龄、肿瘤大小、ER和 PR无关 (P>0.05)，而腋淋巴结有转移及临床分期III，IV期者其表达水平低于无淋巴结转移和临床分期I，II期者(P<0.05)。结论 BRMS1mRNA在乳腺癌组织中表达水平下降；其表达与乳腺癌腋淋巴结转移、临床分期有关，可能成为乳腺癌转移和预后的指标之一。     

胃癌患者腹液中CK20 mRNA检测的临床意义

目的 探讨胃癌患者腹液中CK20 mRNA检测的临床意义.方法 用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测49例胃癌患者腹水或腹腔冲洗液CK20 mRNA的表达情况并以同期10例行非肿瘤手术患者作为对照,结合临床病理资料及随访结果进行分析.结果 腹水CK20 mRNA阳性率50.00%,腹腔冲洗液CK20 mRNA阳性率35.90%,两者差异无统计学意义(P＞0.05).胃癌组CK20 mRNA表达总阳性率38.78%,对照组均无阳性表达(P＜0.05).胃癌组CK20 mRNA检测阳性率显著高于病理细胞学检查阳性率(10.20%)(P＜0.05);CK20mRNA表达与有无淋巴结转移及肿瘤浸润深度相关(均P＜0.05),与组织分化程度无关(P＞0.05).CK20 mRNA阳性表达者的平均生存时间较阴性者显著缩短(20.95个月vs.33.24个月)(P＜0.01).结论 胃癌患者腹水或腹腔冲洗液中CK20 mRNA检测,可早期诊断腹腔微转移,有助于判断预后,指导治疗.     

乳腺癌组织中PSAmRNA的表达及其与ER亚型表达的关系

目的 探讨前列腺特异抗原（PSA）mRNA和雌激素受体（ER）β亚型在乳腺癌组织中的表达及其与不同雌激素受体亚型表达之间的关系.方法 检测35例乳腺癌和12例癌旁乳腺组织及10例乳腺纤维腺瘤组织中的PSA mRNA和ERβ mRNA表达;35例乳腺癌组织ERα和PR蛋白的表达,并分析乳腺癌组织PSA mRNA表达与雌激素受体亚型和PR表达之间的关系.结果 PSA mRNA在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤组织（P均=0.00）.ERβ mRNA在乳腺癌中的表达水平明显低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织（P均=0.00）.PSA mRNA表达阳性者ERβ mRNA表达水平明显低于PSA mRNA表达阴性者,差异有显著性（P=0.038）.ERα和PR阳性表达的乳腺癌组织中PSA mRNA表达高于ER和PR阴性者,差异有显著性（P=0.001,0.004）.结论 PSA和ERβ基因在乳腺癌中的表达下调.PSA可能是反映乳腺癌组织中功能性甾体类激素受体的一个重要指标.     

Quantitative detection of metastasis-associated1mRNA and protein expression in breast cancer

Objective Understanding the mechanism of breast cancer metastasis will benefit those patients in need of aggressive treatment and avoid side effects caused by chemotherapy over treatment.Recently,a potential metastasis-associated gene and its product,the metastasis-associated 1 (MTA1),were identified; this gene has been found to be overexpressed in a variety of cancers.Methods In the present study,therefore,the level of expression of MTA1 mRNA has been assessed by LightCycler quantitative real-time RT-PCR in 160 cases of invasive carcinoma of the breast.MTA1 protein expression level was also detected by immunohistochemistry from available paired tissues of 154 cases.Associations between MTA1 mRNA and protein expression and clinicopathological factors were analyzed.Results It was found that MTA1 mRNA was expressed at significantly higher levels in patients with negative lymph node status,with ER and PgR positive and HER2 negative tumor.No difference was found between patient age,tumor size and histological grade groups.Patients with high levels of expression of MTA1 mRNA had a better prognosis than those with low expression.However,no difference was found between the protein level and clinicopathological factors.Univariate and multivariate prognostic analysis did not demonstrate that MTA1 mRNA was an independent prognostic factor for breast cancer.Conclusion In breast cancer,inconsistent with other tumor types,MTA1 gene expression is correlated with non-invasive clinicopathological factors and longer survival,which might suggest MTA1 gene is a tumor type specific metastasis associated gene.     

大鼠胰腺癌和非癌胰腺组织中EZH 2和PTEN的表达及其意义

目的探讨大鼠胰腺癌和非癌胰腺组织中EZH2和PTEN的表达水平及其在胰腺癌发生中所起的作用。方法将二甲基苯荓蒽(DMBA)直接置入胰腺实质内制备胰腺癌模型(A,B组),B组成模1周后每周腹腔注射曲古霉素A(TSA)1μg,A,B组3~5个月内处死,对照组(C组)于第5个月处死;肉眼检查和镜下观察胰腺癌发生情况。EnVisionTM免疫组化法检测3组EZH2和PTEN的表达。结果(1)A组3~5个月癌发生率为48.7%(18/37),17例为胰腺导管腺癌,1例为纤维肉瘤;B组3~5个月癌发生率为33.3%(12/36),11例为胰腺导管腺癌,1例为纤维肉瘤;A组胰腺癌最大径均值大于B组(P0.05);C组胰腺和A,B,2组胰腺外主要脏器均未见明显病理改变。(2)A,B组胰腺导管腺癌EZH2表达阳性率明显高于相应非癌胰腺组织(P0.01);A组+B组胰腺导管癌PTEN表达阳性率明显低于A组+B组非癌胰腺组织(P0.05),但A组和B组胰腺导管癌PTEN表达阳性率与A组或B组非癌胰腺组织间差异无统计学意义(P0.05);EZH2阳性表达和/或PTEN阴性表达的非癌胰腺组织导管上皮均呈轻至重度不典型增生;胰腺导管癌中EZH2与PTEN表达呈明显不一致性(P=0.045);C组正常胰腺EZH2表达均阴性而PTEN表达均阳性。2例纤维肉瘤EZH2和PTEN表达均阴性。结论较大剂量DMBA置入胰实质内可获得较高胰腺癌发生率,TSA能抑制胰腺癌的发生和生长;EZH2基因的激活及PTEN基因的失活在大鼠胰腺癌发生中可能起关键作用。     

乳腺癌组织中EG-1 mRNA的表达与临床病理特征及预后的关系

目的 探讨EG-1基因在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床特征、预后的相关性.方法 采用RT-PCR技术,检测EG-1基因在72例乳腺癌及18例良性乳腺组织中的表达,分析其表达与临床特征及预后的相关性.结果 71%(51/72)患者的乳腺癌石蜡标本中EG-1mRNA阳性,而良性乳腺组织中的表达率为24%(4/18).EG-1基因在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移、VEGF蛋白有关(P＜0.05),与年龄、月经状况、肿瘤大小、组织学分级、Her-2蛋白、p53蛋白、激素受体状况无关,EG-1mRNA阳性患者远处转移率和复发率高于阴性患者.多因素回归分析发现EG-1mRNA阳性是乳腺癌的独立预后因素之一. 结论 EG-1基因在乳腺癌组织中异常高表达,且与淋巴结转移及VEGF蛋白相关,是乳腺癌潜在的预后标记物.     

乳腺癌端粒酶逆转录酶mRNA和BRCA1蛋白表达及其相互关系

目的探讨人乳腺癌组织中端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA和BRCA1蛋白的表达及其二者间的关系。方法采用RT—PCR和免疫组化方法分别检测43例乳腺癌组织和40例乳腺癌癌旁组织中的hTERT mRNA和BRCA1蛋白的表达。结果乳腺癌组织中hTERT mRNA和BRCA1蛋白表达阳性率分别为72．1％（31／43）和34．9％（15／43），hTERT mRNA和BRCA1蛋白在乳腺癌组织及其癌旁组织中表达[5．0％（2／40），77．5％（31／40）]的差异有统计学意义（P〈0．05）；在乳腺癌组织中，hTERT mRNA和BRCA1蛋白的表达呈负相关（r=-0．995，P〈0．01）。结论BRCA1蛋白弱表达与乳腺癌hTERT转录密切相关，可能参与了乳腺癌发生机理。     

胃良恶性病变组织中VHL和HIF-1α及其mRNA表达与MV计数的关系

目的：研究胃良恶性病变组织中VHL和HIF-1α及其mRNA表达水平和MV计数及其临床病理意义。方法：取49例胃癌,20例癌旁组织,36例淋巴结转移灶和80例不同类型胃良性病变手术切除或胃镜活检标本常规制作石蜡包埋切片,用EnVisionTM免疫组化法检测VHL和HIF-1α表达和MV计数,用原位杂交法检测VHL和HIF-1αmRNA表达。结果：胃癌组织VHL及其mRNA表达阳性率明显低于癌旁组织及各类型胃良性病变（P<0.05或P<0.01）,胃癌组织HIF-1α及其mRNA表达阳性率明显高于癌旁组织及各类型胃良性病变（P<0.05或P<0.01）,胃癌组织MV计数明显高于癌旁组织和各种类型胃良性病变（P<0.01）, VHL及其mRNA阴性表达和（或）HIF-1α及其mRNA阳性表达的癌旁组织及胃良性病变黏膜上皮均呈轻至重度不典型增生;胃癌原发灶与相应淋巴结转移灶比较VHL和HIF-1α及其mRNA表达阳性率及MV计数间,差异无统计学意义（P>0.05）。胃癌组织学分级Ⅱ级、浸润深度T1+T2、无淋巴结转移及无远处转移病例HIF-1α及其mRNA表达阳性率及MV计数明显低于组织学分级Ⅲ+Ⅳ级、浸润深度T3+T4、区域淋巴结转移及远处器官转移者（P<0.05或P<0.01）,但VHL及其mRNA表达阳性率则与HIF-1α相反（P<0.05或P<0.01）;N1站淋巴结转移者VHL及其mRNA表达阳性率明显高于N2+N3站淋巴结转移病例（P<0.05）;VHL和HIF-1α及其mRNA在胃癌组织中表达呈高度不一致性（χVHL=14.66,P<0.01;χ VHLmRNA=6.74,P<0.05）;VHL及其mRNA阳性者或HIF-1α及其mRNA阴性者MV计数明显低于VHL及其mRNA阴性或HIF-1α及其mRNA阳性者（P<0.01）。结论：VHL和HIF-1α及其mRNA表达水平可能是反映胃癌发生、进展、临床生物学行为及预后的重要标记物,VHL和HIF-1α及其mRNA在胃癌组织中表达可能存在负性调节作用;VHL及其mRNA可能抑制胃癌组织中微血管生成,HIF-1α及其mRNA可能促进微血管生成。     

乳腺癌乳腺珠蛋白mRNA表达及临床意义的研究

目的　探讨乳腺珠蛋白 (hMAM )mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达及临床意义。方法　采用逆转录 聚合酶链方法检测 5 6例乳腺癌、8例乳腺增生和 8例正常乳腺者外周血中hMAMmRNA的表达 ,并比较了hMAMmRNA表达与乳腺癌生物学特性的关系 ,术后早期化疗对hMAMmRNA表达的影响。　结果　 5 6例乳腺癌患者外周血中hMAMmRNA表达阳性率为 30 4 % (17/ 5 6 ) ,8例慢性乳腺增生者和 8例正常乳腺者hMAMmRNA表达均为阴性 ,2组hMAMmRNA表达差异有非常显著性意义 (χ2 =19 76 6 ,P <0 0 1)。hMAMmRNA的表达与患者年龄、原发癌灶大小 ,临床分期差异无显著性意义 (χ2 =1 2 5 6 ,P >0 0 5 )。 17例hMAMmRNA表达阳性者经术后早期短程化疗后 ,转阴率为4 1 2 % (7/ 17) ,手术前hMAMmRNA表达阴性者无一例表达阳性。　结论　hMAMmRNA特异表达于乳腺癌患者外周血 ,有可能成为诊断乳腺癌和判断预后的一个独立指标。     

Bmi-1 及Mel-18在乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的：探讨Bmi-1和Mel-18在乳腺癌组织中的表达和临床意义。方法：采用RT-PCR和免疫组织化学染色法检测Bmi-1和Mel-18基因与蛋白在40例乳腺癌组织和20例乳腺良性肿瘤组织及20例正常乳腺组织中的表达。分析两者在乳腺癌组织中的表达情况和相关性,以及两者表达与临床病理因素的关系。结果：Bmi-1 mRNA的表达和蛋白阳性率在正常乳腺组织、乳腺良性组织、乳腺癌组织均呈明显依次递增（均P<0.05）,而Mel-18则基本呈反向趋势（正常乳腺组织与乳腺良性组织间差异不明显）;乳腺癌组织中Bmi-1与Mel-18 mRNA及蛋白表达之间均明显呈负相关（r=-0.317,P=0.023;r=-0.413,P=0.008）;两者基因表达和蛋白阳性率水平与淋巴结转移及临床分期密切相关（均P<0.05）,而与患者的年龄、绝经状况、肿瘤大小、组织学分级无关（均P>0.05）。结论：Bmi-1过表达与Mel-18低表达可能是乳腺组织恶性转变以及乳腺癌发生浸润转移的重要生物学标志。