高胆固醇血症对兔胆管括约肌细胞内Ca2+转运的影响

目的观察高胆固醇(cholesterol, Ch)血症对兔胆管括约肌(sphincter of Oddi, SO)细胞内Ca2+转运的影响, 以探讨SO功能紊乱的机制. 方法高Ch饲养兔8 wk(实验组), 制作高Ch血症模型, 与对照组SO细胞分别进行原代培养. Fluo-3/AM负载, 用激光共聚焦显微镜对照观测静息状态及3.6 mmol*L-1 MgSO4作用下SO胞内Ca2+浓度变化特征. 结果与对照组相比较, 静息状态下, 实验组SO细胞内Ca2+荧光强度明显增高[(21.07±0.82) vs (13.56±1.22), P＜0.05]; 3.6 mmol*L-1 MgSO4持续作用下, 实验组细胞内Ca2+荧光强度下降速率减慢[(0.87±0.14)*s-1 vs (1.38±0.22)*s-1, P＜0.05],下降幅度减少[(23.59±1.22)% vs (50.77±2.56)%, P＜0.05],下降后的最低值仍明显高于对照组最低值[(16.81±0.05) vs (6.40±0.16), P＜0.05], 恢复速率明显减慢[(0.01±0.00)*s-1 vs (0.41±0.04)*s-1, P＜0.05]. 结论高胆固醇血症兔SO细胞Ca2+ 跨膜转运障碍, [Ca2+]i呈超载状态,导致胞内钙滞留. 提示高Ch可影响细胞膜钙通道活性、胞内钙库释放和摄取Ca2+过程.     

肌浆网钙泵在心房颤动患者心房肌中的表达

目的研究肌浆网钙泵在调节心房颤动(AF)患者心房肌细胞内Ca2+稳态中的作用.方法慢性AF患者10例(AF组),对照组6例.采用三电极直流等离子体原子发射光电直读光谱法测定二级心房肌细胞内Ca2+含量,采用免疫组化和Western blot技术测定心房肌肌浆网(SR)钙泵(Ca2+-ATPase)蛋白质表达的变化.结果AF组心房肌细胞内Ca2+含量较对照组高4.4倍以上[(1329.63±796.57)μg/ml vs(301.67±30.89)μg/ml,P＜0.01];SR Ca2+-ATPase蛋白质的相对含量明显低于对照组(0.74±0.07 vs1.02±0.04,P＜0.05).结论慢性AF患者心房肌细胞内Ca2+超载,SR Ca2+-ATPase功能减低是细胞内Ca2+超负荷的重要因素.     

舒张性心力衰竭兔Ca2+调控蛋白相关基因表达的变化

目的探讨舒张性心力衰竭(DHF)时Ca2+调控蛋白相关基因表达的变化,以阐明DHF发生的分子机制.方法建立DHF兔模型,并设假手术为对照组,分别测定2组兔心肌细胞内Ca2+含量和肌浆网(SR)Ca2+-ATPase(钙泵)活性,并以定量RT-PCR和Westernblot技术检测Ca2+调控蛋白相关基因的转录和蛋白质表达水平.结果(1)DHF兔心肌细胞内Ca2+含量(μg/ml)显著高于对照组(1728±545vs633±168,P＜0.01);(2)DHF兔SR钙泵活性,细胞膜L型Ca2+通道和SR钙泵mRNA水平(μmol*mg-1*h-1)明显低于对照组(10.5±2.8vs21.1±5.7;0.75±0.11vs1.20±0.33;0.76±0.12vs1.24±0.38,P＜0.05～0.01);(3)DHF兔细胞膜L型Ca2+通道mRNA水平与左室舒张末压中度负相关(r=-0.74,P＜0.05),SR钙泵mRNA水平与左室舒张末压和左室松弛时间常数中度负相关(r分别为-0.81、-0.64,P＜0.05～0.01);DHF兔兰尼碱受体mRNA水平与左室松弛时间常数负相关(r=-0.71,P＜0.05);(4)DHF兔SR钙泵的蛋白质表达明显低于对照组(0.75±0.06vs1.02±0.09,P＜0.05).结论细胞膜L型Ca2+通道和SR钙泵mRNA和蛋白质表达减低是导致心肌细胞内Ca2+超负荷及DHF发生的重要因素.     

卡托普利对慢性房颤实验犬心房肌Ca2+调控蛋白基因表达的影响

目的探讨卡托普利对慢性房颤(atrial fibrillation,AF)实验犬心房肌Ca2+调控蛋白基因表达的影响.方法随机将26只健康杂种犬分为3组对照组(6只)饲养8周,未作其他处置;起搏组(11只)及治疗组(9只)安置埋藏式高频率心脏起搏器(400 bpm),快速起搏犬右心耳8周,治疗组于起搏前3 d至起搏8周,每日给予卡托普利50 mg 2次/d.然后从右心房取材,测定心房肌细胞内Ca2+浓度,RT-PCR方法检测细胞膜L型Ca2+通道及肌浆网钙泵(SR Ca2+-ATPase)mRNA表达.结果8周后,对照组、起搏组、治疗组心房肌细胞内Ca2+浓度(μg·ml-1)分别为24.06±3.51、35.32±4.88、25.44±4.19,起搏组细胞内Ca2+浓度明显增加(P＜0.01);三组细胞膜L型Ca2+通道mRNA表达量分别为0.27±0.03、0.20±0.03、0.33±0.04,起搏组mRNA表达量减少,而治疗组mRNA表达量明显增高,与对照组及起搏组比较P＜0.05～0.001;三组SR Ca2+-ATPase mRNA表达量分别为0.21±0.01、0.24±0.07、041±0.08,治疗组mRNA表达明显上调(P＜0.001).结论实验犬快速起搏8周后,心房肌细胞内Ca2+超负荷,细胞膜L型Ca2+通道mRNA表达明显下调,SR Ca2+-ATPase mRNA表达无明显变化;卡托普利干预治疗可使细胞膜L型Ca2+通道及SR Ca2+-ATPase mRNA表达明显上调,从而抑制细胞内Ca2+超载.     

细胞凋亡在慢性心肌冬眠中的发生和作用

目的探讨细胞凋亡在慢性心肌冬眠发生机制中的作用.方法将22只犬冠状动脉左前降支内径缩窄约50%,继续喂养1个月,利用免疫组化法原位检测凋亡细胞,并利用琼脂凝胶电泳检测凋亡细胞的DNA片段.结果①成功地建立了慢性心肌冬眠的动物模型;②10只犬存活(45.2±9.59)d,左前降支内径缩窄平均48%,其中4只犬的缺血标本中发现凋亡细胞及特征性DNA片段,且发现凋亡细胞在冬眠心肌中呈灶性分布.结论慢性冬眠心肌中存在细胞凋亡现象,但发生率较低.     

颅脑损伤早期血清Mg2+含量的变化及临床意义

目的研究急性中、重型颅脑损伤早期患者血清Mg2+含量的变化及临床意义.方法用MTB比色法对53例急性中、重型颅脑损伤早期患者(重型颅脑损伤36例,中型颅脑损伤17例),26例非颅脑损伤患者及21例健康人的血清Mg2+含量进行检测.结果颅脑损伤组血清Mg2+含量[(0.64±0.11)mmol/L]显著低于非颅脑损伤组[(0.73±0.88)mmol/L](P＜0.05),并显著低于健康人组[(0.86±0.05)mmol/L](P＜0.01).重型颅脑损伤组血清Mg2+含量[(0.63±0.11)mmol/L]明显低于中型颅脑损伤组[(0.72±0.09)mmol/L](P＜0.05).硬膜下血肿、脑挫裂伤、脑干损伤组Mg2+含量[(0.61±0.11)mmol/L]明显低于单纯颅骨骨折、硬膜外血肿组[(0.68±0.11)mmol/L](P＜0.05).结论Mg2+可能参与了继发性颅脑损伤的病理生理过程,病情越重,伤后早期血镁下降越低.早期血清Mg2+水平可作为观察急性颅脑损伤严重程度及判断预后的指标.     

犬冬眠心肌超微结构观察

目的 :明确冬眠心肌细胞的超微结构改变。方法 :利用 2 2只犬 ,使冠状动脉左前降支内径缩窄约 4 8% ,造成节段性室壁运动异常 ,继续喂养 ( 4 5 2± 9 6)d ,建立慢性心肌缺血而无坏死的动物模型 ,并进行光镜及电镜检查 ,观察慢性冬眠心肌细胞结构的改变。结果 :10只犬完成了所有实验步骤 ,成功地建立了慢性心肌冬眠的动物模型 ,10只犬均出现了不同程度的心肌细胞形态学改变。结论 :慢性冬眠心肌细胞存在着心肌纤维、线粒体、细胞间质和细胞核不同程度的结构损害。     

芪丹通脉片对大鼠急性心肌缺血损伤的影响

目的 :观测芪丹通脉片 (QDTMT)急性心肌缺血损伤的影响 .方法 :用SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素 (Iso,5mg·kg-1)诱导心肌缺血模型 ,观测心肌线粒体 (Mit)三磷酸腺苷酶(ATPase)活力、Ca2 + 含量 ;在电镜下 ,观察心肌线粒体超微结构的变化 .结果 :QDTMT组Ca2 + ATPase ,Mg2 + ATPase及Ca2 + Mg2 + ATPase活性显著高于模型组 [(4 0 .9± 8.1)vs(2 3.1± 5 .7) ,(4 0 .4± 4 .4 )vs(2 1.7± 6 .6 ) ,(94 .7± 8.6 )vs (6 3.5± 9.5 )mmol·g-1,P <0 .0 5 ];QDTMT组与模型组相比Ca2 + 显著降低 [(7.6± 1.6 )vs(12 .9± 1.3) ,(37.3± 5 .3)vs(73.2± 8.9)mmol·mg-1,P <0 .0 1].同时 ,与对照组相比 ,心肌超微结构的损害明显减轻 .结论 :QDTMT减轻钙超载和保护心肌细胞超微结构的作用 ,可能是其改善心肌缺血的作用机制之一 .     

慢性心肌冬眠动物模型的建立

目的建立慢性心肌冬眠动物模型.方法随机选择健康杂种犬22只,使冠状动脉左前降支缩窄50%,继续喂养1个月以上,行第二次手术,暴露犬左心室和左前降支狭窄处,进行①多巴酚丁胺超声心动图负荷试验;②潘生丁负荷试验;③心肌声学造影;④氯化三苯基四氮唑(TTC)染色;⑤病理学检查.结果共10只犬完成了所有实验步骤,存活时间25～55d,平均(45.2±9.59)d.①结扎后与结扎前冠脉内径比为0.44～0.54,平均0.48±0.04;②10只犬均出现并保持了节段性室壁运动异常;③多巴酚丁胺负荷试验中,所有犬均出现室壁运动改善及"双相反应";④潘生丁负荷试验表明冠脉血流储备明显降低;⑤运动异常节段声学造影后的灰阶强度较正常节段明显减低;⑥术后TTC染色及光镜和电镜证实3只犬出现小灶性透壁性心肌坏死,1只犬出现小灶性心内膜下心肌坏死,余6只犬均无心肌坏死发现.结论在动物实验中,建立慢性(＞1 mo)心肌冬眠的动物模型是可行的.     

C57BL/6哮喘小鼠肾组织瞬时感受器电位M6离子通道mRNA表达

 【目的】 观察C57BL/6哮喘小鼠肾组织瞬时感受器电位M6离子通道(TRPM6) mRNA的表达,探讨哮喘低镁血症的可能原因。【方法】 健康4 ~ 6周龄清洁级雌性C57BL/6小鼠48只,体质量(12 ± 2)g,随机数字表法分为哮喘组和对照组,每组各24只。哮喘组应用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。第1天(1 d)。21 d。34 d天每组分别随机抽取8只检测血浆Mg2+。红细胞内Mg2+。肾组织TRPM6 mRNA的表达。【结果】 1 d血浆Mg2+。红细胞内Mg2+。肾组织TRPM6 mRNA表达水平哮喘组与对照组之间差异无显著性:[(0.85 ± 0.07 vs. 0.89 ± 0.12) mmol/L。(2.48 ± 0.14 vs. 2.49 ± 0.07) mmol/L。0.51 ± 0.08 vs. 0.49±0.06, P均 > 0.05];21 d 哮喘组血浆Mg2+。红细胞内Mg2+。肾组织TRPM6 mRNA表达水平均显著低于对照组:[(0.84 ± 0.09 vs. 0.95 ± 0.07) mmol/L。(2.39 ± 0.14 vs. 2.44 ± 0.09) mmol/L。0.32 ± 0.06 vs. 0.52 ± 0.05,P均 < 0.05]; 34 d哮喘组血浆Mg2+。红细胞内Mg2+。肾组织TRPM6 mRNA表达水平亦显著低于对照组: [(0.67 ± 0.10 vs. 0.94 ± 0.10) mmol/L。(2.17 ± 0.08 vs. 2.43 ± 0.08) mmol/L。0.24 ± 0.05 vs. 0.53 ± 0.06,P均 < 0.05]。肾组织TRPM6 mRNA表达水平与血浆Mg2+浓度呈正相关(r = 0.630, P < 0.001);肾组织TRPM6 mRNA表达水平与红细胞内Mg2+浓度呈正相关(r = 0.715, P < 0.001)。 【结论】 肾组织TRPM6 mRNA的低表达可能是导致 C57BL/6哮喘小鼠低镁血症的原因。     

Ca~(2+)和PKc在巨噬细胞激活过程中作用的初步研究

①目的探讨Ｃａ２＋和蛋白激酶Ｃ（ＰＫｃ）在巨噬细胞激活过程中的作用。②方法在不同试验条件下，用同位素标记的方法，检测巨噬细胞介导的细胞毒作用及ＰＫｃ的活性。③结果胞外Ｃａ２＋络合剂不影响巨噬细胞活化因子（ＭＡＦ）的作用，而钙离子通道剂Ａ２３１８７激活巨噬细胞的作用完全丧失；胞内Ｃａ２＋拮抗剂能够抑制ＭＡＦ或Ａ２３１８７激活巨噬细胞的作用，并且有剂量依赖关系；巨噬细胞激活剂能使胞质中ＰＫｃ活性大大降低，而使膜结合ＰＫｃ活性明显升高。④结论Ｃａ２＋和ＰＫｃ在巨噬细胞激活的信号传递中起重要作用     

转铁蛋白逆转血浆脂蛋白体外氧化修饰的研究

目的 :观察转铁蛋白 (Tf)对体外已受到Cu2 、Fe2 修饰的人血浆高密度脂蛋白 (HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白 (VLDL)氧化修饰的影响。方法 :采用一次性密度梯度超离心法分离正常人血浆HDL、LDL和VLDL ,在 37℃分别与CuSO4 及FeSO4 温育 6小时 ,使脂蛋白在体外氧化修饰。转铁蛋白组在氧化修饰后加入4 0 0 μg ml的Tf作用 8小时。检测三种脂蛋白中脂质过氧化产物丙二醛 (MDA) ,维生素E(VitE)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :①HDL、LDL和VLDL与Cu2 或Fe2 温育后 ,MDA含量显著升高 (P <0 .0 0 1) ,并呈明显的时间效应。②在Cu2 或Fe2 修饰后加入 4 0 0 μg ml的Tf能使明显降低HDL、LDL和VLDL中MDA生成 ,阻止VitE含量下降 ,并显著提高SOD活性 ,呈现一定的浓度依赖性。结论 :结果提示Tf能显著逆转Cu2 或Fe2 介导的血浆HDL、LDL和VLDL氧化修饰 ,可能为一内源性抗动脉粥样硬化因子。其作用途径可能与阻断Cu2 或Fe2 诱导的自由基生成 ,保护内源性抗氧化物质SOD、VitE的活性有关。     

胞内游离钙浓度测定平台的建立

目的：建立一种简单有效的细胞内游离钙浓度测定平台。方法：用Fura-2作为荧光指示剂标记细胞内Ca2＋,在倒置荧光显微镜下交替检测340nm和380nm激发的荧光强度,计算F340/F380代表的Ca2＋相对浓度,再校正为标准浓度。结果：给予细胞刺激（如10mM咖啡因）,F340/F380迅速增高,表明细胞内游离钙浓度迅速升高。对于快速变化的胞内Ca2＋信号,系统反应灵敏、迅速,能很好地捕捉相关钙浓度变化。结论：由此建立起了一种简单有效的细胞内游离钙浓度测定平台,并应用于实际工作。这一平台在平滑肌细胞及心肌细胞游离钙浓度测定中都得到了充分的应用,平台建设中的第一手资料具有重要参考价值。     

四物汤对血虚小鼠红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶的影响

目的:探讨四物汤对血虚小鼠红细胞膜Na+-K+-ATP酶的影响。方法:将200只雄性小鼠,随机分为10组,每组20只,分别制成:空白对照组;骨髓抑制性血虚模型对照组,药物治疗组,自然恢复组;溶血性血虚模型对照组,药物治疗组,自然恢复组;失血性血虚模型对照组,药物治疗组,自然恢复组。用酶学比色法测定红细胞膜上Na+-K+-ATP酶的活性。结果:失血性血虚和溶血性血虚四物汤治疗组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性升高与自然恢复组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:四物汤能增高血虚时红细胞膜上Na+-K+-ATP酶的活性,能使红细胞恢复正常的形态和功能,对骨髓抑制性血虚四物汤疗效不明显。     

老年高血压病人红细胞变形能力与膜钙依赖中性蛋白酶活性的关系

①目的探讨老年高血压病人红细胞变形能力（ＥＤ）与红细胞膜钙依赖中性蛋白酶（Ｃａｌｐａｉｎ）活性的关系。②方法采用红细胞变形能力测定仪、分光光度计和凝胶电泳法分别检测了６８例老年高血压病人和６０例老年前期高血压病人及８０例健康人红细胞滤过指数（ＥＦＩ）、红细胞膜Ｃａｌｐａｉｎ和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性及红细胞膜收缩蛋白（ＳＰ）相对含量的变化。③结果老年高血压病人ＥＦＩ，Ｃａｌｐａｉｎ活性明显增高，Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性和ＳＰ相对含量明显降低，与老年前期病人和健康对照组比较差异均有极显著性（ｔ＝３．１７７～５．２０９，Ｐ均＜０．００１）。老年前期高血压病人各指标变化较老年前期健康人亦明显（ｔ＝２．６２６～３．０８４，Ｐ均＜０．０１）。老年高血压病人ＥＦＩ与Ｃａｌｐａｉｎ活性呈正相关（ｒ＝０．６２１，Ｐ＜０．００１），与Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性和ＳＰ相对含量呈负相关（ｒ＝－０．５７６，－０．４９６，Ｐ＜０．００１）；红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性和ＳＰ含量与Ｃａｌｐａｉｎ活性呈负相关（ｒ＝－０．５１１，－０．５２９，Ｐ＜０．００１）。④结论老年高血压病人ＥＤ降低与红细胞膜Ｃａｌｐａｉｎ活性增高所致的膜蛋白溶解和破坏有     

肿瘤患者血清中NO与Ca~(2+)的关系及其临床意义

研究了肿瘤患者血清中ＮＯ、Ｃａ２＋的含量和两者之间的关系，以及Ｍｇ２＋、γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）、前白蛋白（ＰＡＢ）、白蛋白（ＡＬＢ）等的变化规律。结果表明，ＮＯ和Ｃａ２＋含量增加（ｒ＝０．８６１２）；γ－ＧＴ活性升高，Ｍｇ２＋、ＰＡＢ及ＡＬＢ含量降低。Ｃａ２＋可促进ＮＯ生成，ＮＯ与肿瘤发生、发展有关。提示测定肿瘤患者中ＮＯ含量对肿瘤诊断、治疗和预后判断有重要意义。     

EFFECTS OF CALDESMON, CALPONIN, AND TROPOMYOSIN ON THE MG^2＋ -ATPase ACTIVITIES OF SMOOTH MUSCLE MYOSIN

Objective To test whether in the absence of actin, actin-binding proteins such as caldesmon, calponin, and tropomyosin interact with the myosin of unphosphorylation, Ca^2 -dependent phosphorylation (CDP), and Ca^2 -independent phosphorylation (CIP) and stimulate myosin Mg^2 -ATPase activities. Methods Mg^2 -ATPase activities were measured to evaluate the effects of caldesmon, calponin, and tropomyosin on the myosin in unphosphorylation, CDP by myosin light chain kinase (MLCK), and CIP by MLCK. (1) At different incubation-time, i.e., 5, 10, 20, 40, and 60 minutes, the highest Mg^2 -ATPase activity was observed when myosin was in the state of CDP, the medium was CIP of myosin, and the lowest was the unphosphorylated myosin. (2) In the absence of caldesmon, calponin, and tropomyosin, the Mg^2 -ATPase activities from high to low were in the following order: CDP, CIP, and unphosphorylated myosin. However, in the presence of caldesmon, calponin, and tropomyosin, the order of relative value of Mg^2 -ATPase activities from high to low was unphosphorylated, CIP, and CDP of myosin respectively compared to the corresponding controls. Conelusions The results propose that caldesmon, calponin, and tropomyosin are capable of stimulating Mg^2 -ATPase activity of smooth muscle myosin in Ca^2 -independent manner, since Ca^2 is not obligating for the stimulating effects of the three proteins. The common characteristic of the three proteins is that when myosin activities are low, their activations are relatively strong and this property might be involved in smooth muscle tension keeping.     

CHYLORRHEA COMPLICATING D2+a GASTRECTOMY: REVIEW OF THE LITERATURE AND CLARIFICATION OF TERMINOLOGY APROPOS ONE CASE

Lymphatic complications leading to retention,accumulation or drainage of peritoneal fluid are frequently encountered following extended or superextended lymphadenectomy for gastric cancer.1 The vast majority of these drainages usually subsides spontaneously, but in some instances they can persist for long period of time causing significant morbidity.However, the classification,     

慢性肝炎、肝硬化血清钙、磷离子测定的临床意义

目的 :探讨慢性肝炎 ,肝硬化患者血清钙 (Ca2 +) ,磷 (P3- )浓度变化 ,以及对临床治疗和预后的意义。方法 :对 94例慢性肝炎肝硬化患者及 35例健康对照组系列用邻甲酚酞络和酮法 (OCPC)和紫外法测定其血清Ca2 +、P3- 浓度 ,同时测定患者组的肝功能。结果 :患者组与健康对照组血清Ca2 +、P3- 存在显著差异 (P <0 .0 1) ,肝功能恢复前后血清Ca2 +、P3- 浓度存在显著差异 (P <0 .0 15 )。结论 :慢性肝炎 ,肝硬化患者存在高血磷 ,低血钙。肝功能恢复前后血清磷升高程度与肝损伤程度 ,病情严重程度密切相关 ,治疗疾病的同时应及时纠正Ca2 +、P3- 的失调。     

The cloning of Na+/Ca2+exchaanger Gene and its expression in brain ischemia

ＴＨＥＣＬＯＮＩＮＧＯＦＮａ￣＋／Ｃａ￣（２＋）ＥＸＣＨＡＮＧＥＲＧＥＮＥＡＮＤＩＴＳＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＩＮＢＲＡＩＮＩＳＣＨＥＭＩＡＴａｎｇＪｉａｎ汤健，ＷａｎｇＹｕ王瑜，ＺｋａｎｇＣｈｅｎｈｕｉ张晨晖，Ｅ．ＣｏｓｔａＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣａｒ...