乙型肝炎患者血清HBV cccDNA检测的临床意义

目的观察乙型肝炎患者乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（covalently closed circular DNA,cccD-NA）在血清中的分布特点及与HBV感染状态的联系,探讨HBV cccDNA与患者病情的轻重、HBV的复制指标（HBeAg、HBV DNA）的关系。方法分别采用PCR荧光分子信标、荧光定量PCR、酶联免疫吸附分析法（ELISA）检测162例乙型肝炎患者外周血清中HBV cccDNA定量、HBV DNA定量和乙型肝炎病毒标志物。结果162例乙型肝炎患者,血清HBV cccDNA阳性率为48.15%（78/62）。HBV cccDNA阳性率在HBV DNA阳性患者中为60.94%（78/128）,显著高于HBV DNA阴性者[0（0/34）]（P〈0.01）;HBeAg阳性患者HBV cccDNA检出率为61.70%（58/94）,显著高于HBeAg阴性者29.04%（20/68）（P〈0.01）;中、重度慢性乙肝患者HBV cccDNA检出率为58.97%,高于轻度慢性乙型肝炎患者（45.45%）（P〈0.05）。重型肝炎患者HBV cccDNA阳性者存活率（37.5%）明显低于HBV cccDNA阴性者（78.26%）（P〈0.05）。结论HBV cccDNA仅存在于血清HBV DNA阳性乙型肝炎患者外周血清中;HBV cccDNA检出率与外周血HBV复制指标（HBeAg、HBV DNA）有显著的相关性,并与肝细胞炎症相关,是乙型肝炎病毒在患者体内大量复制及肝细胞损伤的血清标志。     

检测慢性HBV血清HBVcccDNA的临床意义

目的观察HBV阳性患者血清中HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）的检出率及其与不同疾病状态的关系。方法选取2008年1月-12月收治的慢性HBV感染者120例,其中慢性HBV携带者21例,HBeAg阳性慢性乙型肝炎38例,HBeAg阴性慢性乙型肝炎35例,非活动性HBsAg携带者26例。采用巢式PCR法检测全部患者血清中的HBVcccDNA。结果 120例血清中HBVcccDNA阳性检出率为43.3%（52/120）;慢性HBV携带者、HBeAg阳性慢性乙型肝炎、HBeAg阴性慢性乙型肝炎和非活动性HBsAg携带者的cccDNA阳性检出率分别为76.2%（16/21）、63.2%（24/38）、34.3%（12/35）和0%,各组间的差异均有统计学意义（P〈0.05）;血清高HBVDNA定量组的HBVcccDNA阳性检出率高于低HBVDNA定量组（P〈0.05）。结论 HBVcccDNA检出率与外周血HBV复制指标HBVDNA有关,并与不同疾病状态相关。     

HBV RNA检测在慢性乙型肝炎中的临床价值

目的对检测乙型肝炎病毒(HBV)RNA的方法进行评估,比较不同乙型肝炎血清标志物模式患者血清HBV RNA水平及其与HBV DNA之间的相关性。方法对HBV RNA检测方法的精度密、灵敏度及线性范围进行评估。收集81例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性慢性乙型肝炎患者的血清,同时检测HBV RNA、HBV DNA及乙型肝炎血清学标志物。按乙型肝炎e抗原(HBeAg)是否阳性、不同乙型肝炎血清标志物模式及是否接受抗病毒药物治疗分别分组。结果 HBV RNA高值、低值样本的批内精密度分别为0.56%、2.30%,批间精密度分别为3.13%、6.03%,均符合临床要求;对接近厂商声明的检测下限的样本重复检测20次,检出率为100%,灵敏度符合要求;在HBV RNA 1.0×10²～1.0×10⁷拷贝/mL范围内成线性。HBeAg阳性组血清HBV RNA和HBV DNA载量均高于HBeAg阴性组(P<0.01、P<0.05)。在不同乙型肝炎血清标志物模式中,HBeAg阳性且乙型肝炎e抗体(HBeAb)阴性患者血清HBV RNA载量最高(P...     

HBV—DNA和HBV—M定量检测的相关性研究

目的探讨HBV—DNA和乙型肝炎五项（HBV—M）定量检测之间的相关性及其在乙型肝炎感染诊断中的应用价值。方法收集我院363例乙型肝炎和既往感染HBV患者血清,实时荧光定量PCR检测HBV—DNA,同时以时间分辨免疫荧光技术（TRFIA）定量检测HBV-M,用统计软件分析两者之间的关系。结果乙型肝炎大三阳（HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性）患者外周血HBV—DNA阳性率为92．9％（79／85）,平均DNA含量（4．31±1．64）×10^6Copies／ml。乙型肝炎小三阳患者（HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性）外周血HBV．DNA阳性率为47．7％（105／220）,平均DNA含量（2．47±2．21）×10^4Copies／ml。HBsAg、HBcAb阳性3例,HBV-DNA均阳性,HBV—DNA为（5．73±1．14）×10。Copies／ml。余人群外周血HBV—DNA均阴性。HBV—DNA拷贝量与HBeAg载量呈正相关（r=0．59,P=0．041）;HBV。DNA拷贝量与HBsAg含量相关一致性不明显（r=0．221,P=0．077）。结论HBV—M与HBV—DNA之间既有联系又有不同,临床上可以多项检测来估计病情,判断疗效。     

定量检测乙型肝炎HBeAg与HBV—DNA的临床意义

目的：探讨乙型肝炎患者血清中HBeAg定量结果与乙型肝炎病毒核酸（HBVDNA）的检测结果在临床上的意义。方法：本院住院及门诊HBV感染患者248例,抽取静脉血,采用1235全自动时间分辨荧光免疫分析仪和PE5700全自动荧光PCR仪对这248例标本分别进行检测。结果：乙型肝炎患者定量测定e抗原（HBeAg）阳性者其HBV—DNA阳性率远大于HBeAg阴性者（P〈0.05）;HBsAg及HBeAg2项阳性模式HBeAg定量结果显著大于HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性模式（P〈0.05）,其HBV—DNA波动范围也大于H＆Ag、HBeAg、HBcAb阳性模式。结论：HBeAg定量结果能较好地反映乙型肝炎患者体内HBV—DNA的含量,并对患者病情进展和诊治有一定应用价值。     

替比夫定治疗e抗原阳性慢性乙型肝炎的疗效预测因素研究

目的探讨替比夫定酯治疗HBeAg（＋）慢性乙型肝炎的疗效预测指标,为个体化治疗提供依据。方法选取广州医学院第一附属医院HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者60例,均予替比夫定600 mg治疗48周,检测治疗前及治疗后24、48周的HBsAg、HBeAg、HBV DNA定量及丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平。根据治疗24周时血清HBV DNA水平,将患者分为两组,聚合酶链反应（PCR）低于检测下限（〈300拷贝/m l）的A组和高于检测下限（≥300拷贝/m l）的B组。结果治疗24周时HBV DNA水平越低,HBsAg下降幅度越大,在48周HBV DNA达到PCR检测不到的水平、HBeAg血清转换率和ALT复常率越高。A组患者在48周时HBeAg血清转换率为44.1%,B组患者则为8.3%,两组比较差异有统计学意义（χ2=22.1,P〈0.01）。结论乙型肝炎患者应用替比夫定治疗24周时HBV DNA水平及HBsAg下降幅度可作为48周疗效的预测指标。     

各类慢性乙型肝炎患者HBV前S2抗原与HBV感染血清标志物及HBV DNA的关系

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）前S2抗原（preS2Ag）与HBV感染5项标志物（HBV-M）、HBV DNA之间的关系及对慢性乙型肝炎分类诊断的临床意义。方法对584例各类慢性乙型肝炎患者血清采用放射免疫法（RIA）检测preS2Ag,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV-M（HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc）,用聚合酶链反应（PCR）检测HBV DNA。结果慢性乙型肝炎轻度、中度、重度及肝炎后肝硬化患者preS2Ag的检出率分别为45.98%、67.10%、83.87%及92.86%;preS2Ag在HBeAg阳性、HBV DNA〉105拷贝/mL患者中检出率明显高于HBeAg阴性、HBV DNA〈105拷贝/mL患者,差异有统计学意义（P〈0.001）。结论preS2Ag的检出意味着病毒有复制或有传染性;开展preS2Ag的检测有助于慢性乙型肝炎的分类、慢性乙型肝炎急性发作和预后的判断。     

回顾性分析慢性乙型肝炎患者血清HBsAg与HBV DNA水平的关联性

目的回顾性分析慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者血清乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）定量与HBV DNA水平的相关性,并确定最佳的用于确定高HBV DNA水平的HBsAg定量值的诊断临界点。方法收集2013年7月至2014年5月期间柳州市中医院确诊为CHB的患者239例,检测受试者HBV DNA、HBsAg、HBeAg及ALT水平,对检测结果进行统计学分析。结果HBeAg阳性组CHB患者HBsAg定量和HBV DNA检测水平均高于HBeAg阴性组．且差异均有统计学意义（P均〈0．05）。所有CHB患者中HBsAg定量与HBV DNA水平之间呈正相关性（r=0．603,P〈0．01）。HBeAg阳性组HBsAg定量与HBV DNA水平之间呈正相关性（r=0．555,P=0．000）,HBeAg阴性组HBsAg定量与HBV DNA水平之间无相关性（r=0．076,P=-0．426）。在抗病毒治疗前组和治疗后组中,HBsAg定量与HBV DNA水平均有较好的正相关性（r=0．622,r=0．603,P均=0．000）。在ALT高水平组与ALT低水平组中,HBsAg定量和HBV DNA水平之间都存在正相关性（r=0．586．r=0．578,P均=0．000）。高DNA组（〉2000 copies／L）患者的HBsAg定量和HBV DNA水平之间呈正相关性（r=0．637,P=0．000）,低DNA组（〈2000 copies／L）患者的HBsAg定量和HBV DNA水平之间无相关性（r=0．226,P=0．057）。当HBsAg定量以5．03×10^3 IU／mL为临界点时,判定HBV DNA高水平的受试者工作特征曲线下面积最大,为0．727。结论CHB患者血清HBsAg定量值与HBV DNA水平呈正相关。血清HBsAg定量值可以较好地预测高HBV DNA水平。     

乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA检测方法的建立及应用

[目的]建立和应用半巢式聚合酶链反应法（PCR）检测慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）。[方法]根据HBV基因组DNA正负链上下游缺口序列，设计3个相对保守的引物，建立HBV cccDNA半套式PCR，并用该法检测96例慢性乙型肝炎患者血清中HBV cccDNA。[结果]96例慢性乙型肝炎患者中，35例HBV cccDNA阳性，阳性率为36．5％。HBV cccDNA阳性组的HBeAg、HBV DNA、ALT和AST水平均明显高于阴性组（P〈0．05），但两组的HBsAg水平无显著差异（P〉0．05）。HBV DNA≥10^5组的HBV cccDNA检出率为58．3％（35／60），明显高于HBVDNA〈10^5组（0％，0／36）（P=0．000）；HBeAg阳性组的HBV cccDNA检出率为50．9％（28／55），明显高于HBeAg阴性组（7／41，17．1％）（P=0．001）。[结论]半套式PCR方法简便，可用于测定血清中HBV cccDNA，以评价抗病毒治疗慢性乙型肝炎的疗效。     

HBV外膜大蛋白在判断HBV复制中的价值

目的通过检测慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒（HBV）外膜大蛋白（LP）、DNA、前S1抗原（PreS1）并进行比较分析,探讨血清HBV-LP检测在慢性乙型肝炎中的诊断价值。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测416例慢性乙型肝炎患者乙型肝炎e抗原（HBeAg）、HBV-LP和HBV-PreS1,并应用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）平行检测HBV DNA。按HBeAg阴阳性不同分组,比较HBV-LP、HBV-PreS1及HBV DNA阳性率的差异。结果 416例慢性乙型肝炎患者血清HBV-LP有较高的阳性检出率（76.68%）,与HBV DNA的阳性率（72.60%）差异无统计学意义（P〉0.05）,两者阳性率均高于HBV-PreS1阳性率（36.06%,P〈0.01）;在HBeAg阴、阳性患者中,HBV-LP与HBV DNA的阳性率差异均无统计学意义（P均〉0.05）,均显著高于HBV-PreS1阳性率（P〈0.01）。结论血清HBV-LP水平能反映慢性乙型肝炎患者体内HBV复制程度,其敏感性高于HBV-PreS1,可作为判断HBV复制新的血清学指标。     

肝组织HBV cccDNA与HBV复制水平的相关性分析

目的 探讨乙肝患者肝组织中乙型肝炎病毒（HBV ） cccDNA与血清 HBV DNA及乙肝病毒e抗原（HBeAg）含量的关系。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测乙肝患者肝组织 HBV cccDNA和血清HBV DNA ,采用化学发光法检测其血清中 HBeAg。结果 肝组织HBV cccDNA与血清HBV DNA定量呈正相关（ r ＝0．806,P ＜0．01）,与血清 HBeAg定量值无相关关系（ r ＝0．219,P ＞0．05）。结论 血清HBeAg阳性组病毒复制较阴性组活跃,HBV DNA阴性不能完全反映肝组织内 HBV是否存在复制,而检测肝组织HBV cccDNA可精确反映肝内 HBV复制情况。     

HBV—DNA检出情况与乙肝五项结果之间的相关性研究

[目的]探讨HBV—DNA的检测结果与乙肝两对半结果之间的相关性。[方法]运用荧光定量PCR法检测225例疑似乙肝患者血清中的HBV—DNA含量,同时采用ELISA法检测乙肝两对半标志物,并对结果进行相关性分析。[结果]HBsAg（＋）HBeAg（＋）HBcAb（＋）组（大三阳组）患者血清中HBVDNA的阳性率为85％（51／60）,平均拷贝数为2．24×10^7 copies／mt;HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）组（小三阳组）患者血清中HBVDNA的阳性率为31％（31／98）,平均拷贝数为3．86×10^5copies／ml;HBsAg（＋）HBcAb（＋）组患者血清中HBVDNA的阳性率为38％（5／13）,平均拷贝数为6．93×10^5copies／ml。[结论]大三阳组和小三阳组阳性率相比差异有统计学意义（x^2=42．458,P〈0．005）;大三阳组和HBsAg（＋）HBcAb（＋）组阳性率相比差异有统计学意义（x^2=12．954,P〈0．005）;HBVDNA病毒含量检测更能准确反映患者HBV感染情况,因此在检测中应该联合使用两种方法,提高检测的准确性,指导临床对患者的病情进行诊断、指导治疗和观察疗效。     

慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA定量检测的临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）的临床意义。方法选取经肝组织病理学诊断的慢性乙型肝炎患者57例,其中乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性37例,HBeAg阴性20例;肝组织炎症轻度33例,肝组织炎症中度24例。采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）同时定量检测其血清HBVDNA和cccDNA。结果HBeAg阳性组血清HBV cccDNA对数值和阳性率分别高于阴性组,8.1±1.3vs6.5±1.9,73.0%vs30.0%（均P〈0.01）。肝组织炎症轻度组（G1～G2）血清HBVcccDNA对数值低于中度组（G3）,7.1±0.4vs8.5±0.4（P〈0.01）。血清cccDNA与丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶呈正相关（r=0.612、0.632,均P〈0.05）。结论血清HBVcccDNA为病毒复制的标志物,与肝组织细胞损伤相关。     

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBVDNA、HBeAg的相关性分析——附178例检测分析

目的：探讨HBV前S1抗原（pre-S1antigen,Pre—S1Ag）与HBVDNA、HBeAg的相关性,并评价Pre—S1鲰的临床应用价值。方法：对178例慢性乙型病毒性肝炎（慢乙肝）患者采用EUSA法检测Pre．S1Ag、HBeAg,采用荧光定量PCR法检测HBVDNA,比较Pre．S1Ag、HBeAg与HBVDNA的诊断符合率,并根据HBVDNA载量分为低复制组、中等复制组及高复制组,分析HBVDNA载量与Pre-S1Ag阳性率的相关性。结果：178例的HBVDNA均为阳性,其中Pre—S1Ag阳性144例（80．9％）,Pre—S1Ag阴性34例（19．1％）;HBeAg阳性112例（62．9％）,HBeAg阴性66例（37．1％）。Pre—S1Ag、HBeAg与HBVDNA的诊断符合率分别为80．9％、62．9％,上述两诊断符合率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。112例HBeAg阳性慢乙肝者中,Pre-S1Ag的阳性率80．4％;66例HBeAg阴性慢乙肝者中,Pre—SlAg阳性率82％。HBV高复制组的Pre-S1Ag阳性率（93％）高于中等复制组（80％）和低复制组（64％）,且HBVDNA载量与Pre—S1Ag的阳性率呈正相关（r=0．293,P〈0．01）。结论：Pre．S1Ag与HBVDNA有较好的相关性,在无法开展HBVDNA检测的基层医院,对于HBeAg阴性慢乙肝患者应增加检测Pre-S1Ag,以提高检测的准确度。     

ALT和HBV DNA联合诊断e抗原阴性的慢性活动性乙型肝炎诊断界值的建立及评价

目的建立和评估丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乙型肝炎病毒(HBV)DNA和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)对乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性活动性乙型肝炎的诊断界值(Cut-off值)。方法将290例HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者以肝组织活检结果为标准分为活动性(213例)和非活动性(77例)慢性乙型肝炎,用受试者工作特征(ROC)曲线评价ALT、AST和HBV DNA载量在诊断HBeAg阴性的活动性慢性乙型肝炎中的价值。结果血清中ALT、AST、HBV DNA载量的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.849、0.807、0.867;诊断界值为男性ALT 30 IU/L、女性ALT 19 IU/L,HBV DNA载量1×105拷贝/mL时的敏感性为90.6%、特异性为98.7%、阳性预测值为99.5%、阴性预测值为79.2%;AST以40 IU/L作为Cut-off值时的敏感性为77.0%、特异性为63.3%、阳性预测值为85.4%、阴性预测值为50.0%。结论可以以男性ALT 30 IU/L、女性ALT 19 IU/L且HBV DNA载量1×105拷贝/mL作为中国四川自贡地区HBeAg阴性的慢性活动性乙型肝炎的诊断Cut-off值。     

乙型肝炎病人及其配偶HBV血清标志物检测

目的比较分析乙型肝炎病人及其配偶HBV血清标志物的检测结果。方法采用ELISA法和荧光PCR法对316例乙型肝炎病人及其配偶进行乙型肝炎五项指标与HBVDNA定量检测。结果HBVDNA的阳性率和含量在HBeAg（＋）与HBeAg（-）组差异均有显著意义（χ^2=31．97、68．79,P〈0．01）;HBsAg的相对滴度与HBVDNA的含量关系不密切。乙型肝炎病人配偶HBV感染率为58．2％,有4例HBVDNA含量〉1．0×10^6 copies／L。结论HBeAg与HBV的复制和HBVDNA的高含量关系密切,而HBsAg的相对滴度则不能反映HBV的复制程度及传染性强弱。配偶间的密切接触可以引起HBV感染,但很少导致HBVDNA在体内的存在和复制。     

乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测对判断病毒复制的临床意义

目的探讨血清病毒外膜大蛋白(LHBs)与乙型肝炎病毒(HBV)感染和复制的相关性。方法检测282例乙型肝炎患者和30名健康对照者血清HBV DNA载量、LHBs和乙型肝炎e抗原(HBeAg)。以HBV DNA载量为标准,对LHBs和HBeAg进行对比分析。结果 HBV DNA载量<103拷贝/mL的107例乙型肝炎患者中LHBs阳性9例(8.41%),HBeAg阳性8例(7.48%);LHBs、HBeAg与HBV DNA载量相同等级的线性相关系数分别为0.972 1和0.837 0(P<0.01、P<0.05);LHBs与HBeAg诊断HBV感染的敏感性分别为92.57%、62.35%,特异性分别为82.52%、77.17%,阳性预测值分别为77.43%、64.08%,阴性预测值分别为59.18%、51.22%,准确率分别为97.05%、89.16%。结论 LHBs能较好地反映HBV复制情况,对乙型肝炎患者进行LHBs、HBV DNA及HBeAg联合检测将有助于疾病的诊断、疗效观察及预后判断。     

乙肝血清学两种常见模式与相应乙肝核酸定量及两种模式的危险性分析

目的 探讨乙肝血清学两种常见模式与相应乙肝核酸定量及两种模式的危险性.方法 分别采用酶联免疫吸附法（ELISA法）与实时荧光定量PCR法对60例乙肝患者的血清标志物与相应乙肝核酸定量检测,分别记为模式1与模式2.结果 ①两种模式阳性率与相应乙肝核酸阳性率差异均具有统计学意义（P＜0.05）,且模式1乙肝核酸阳性率与乙肝核酸载量对数值均明显大于模式2（P＜0.01）,但二者阳性检测率无统计学差异（P＞0.05）;②两种模式下HBsAg、HBeAg、HBcAb组合与HBsAb、HBeAb、HBcAb组合阳性检测率无统计学差异（P＞0.05）,但两种模式下HBsAg、HBeAb、HBcAb组合阳性检测率具有统计学差异（P＜0.05）;③模式1HBsAg、HBcAb组合与HBeAb阳性检测率均明显大于模式2（P＜0.05）,但两种模式下全阴性检测结果无统计学差异（P＞0.05）;④两种模式下HBsAg、HBeAb、HBcAb组合及HBsAb、HBeAb、HBcAb组合HBV DNA阳性率、HBV DNA含量与HBsAg、HBeAg、HBcAb组合相比,差异均具有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）.结论 实时荧光定量PCR法具有高敏感度与高特异度等特点,在乙肝早期诊断、传染性水平及病毒复制水平等方面具有十分重要的价值;HBV M阳性率与HBV DNA含量具有较好的相关性.     

乙型肝炎血清免疫标志物与病毒核酸含量的相关性研究

目的 通过对乙肝血清免疫标志物（HBV M）与乙肝病毒核酸（HBV DNA）的检测,探讨它们与HBV之间的关系及临床意义.方法 选择乙肝患者100例,根据HBV DNA含量高低分为A、B、C三组,分别采用化学发光法和荧光定量聚合酶链反应（ FQ-PCR）法检测HBV M与HBV DNA含量.结果 抗-HBs、抗-HBc没有显著变化（P〉0.05）;A组与B组、B组与C组的比较中只有HBeAg差异有统计学意义（P＜0.01）;A组与C组比较HBsAg有显著差异（P＜0.05）,尤以抗-HBe、HBeAg差异最为显著（P＜0.01）.在HBV M阳性标本中HBsAg、抗-HBs与抗-HBc含量与HBV DNA 之间没有相关性.HBeAg含量随着HBV DNA 含量增高而增高,HBV DNA与HBeAg之间呈正相关关系（r=0.531）,而抗-HBe含量随着HBV DNA含量增高而逐渐下降,它们之间呈负相关关系（r＝-0.339）.结论 HBV DNA的定量检测对乙肝早期诊断、病毒复制水平以及抗病毒治疗效果评价等提供了非常准确可靠的信息.HBV M的定量检测为乙肝数据管理奠定基础.