应用单克隆抗体检测蚊体内幼丝虫的实验观察

以马来丝虫感染期幼虫为靶抗原制备多株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）从中筛选出１Ｇ１、１Ｈ１单克隆抗体，检测人工感染马来丝虫的中华按蚊。当中华按蚊吸食含马来微丝蚴的兔血后，分别解剖，同时以ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测饲养不同时间的中华按蚊。结果显示，饲养９ｄ的按蚊马来丝虫幼虫阳性率，人工解剖为８６．６％，ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法分别为８２．２％和７７．８％。经统计学处理，人工解剖与单抗检测无显著性差异，其灵敏度为每只蚊０．５条幼虫。实验证明，此ＭｃＡｂ与牛腹腔指状丝虫、猪肺丝虫抗原无交叉反应，显示了一定的特异性。     

三种免疫学方法检测抗班氏丝虫IgG的比较

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）同步检测５０份班氏微丝蚴血症者血清中抗丝虫ＩｇＧ。ＥＬＩＳＡ，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测抗体阳性率分别为８６％（４３／５０），９０％（４５／５０）。ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ联合应用阳性率为９６％（４８／５０）。ＥＬＩＳＡ与Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测微丝蚴血症者抗体阳性率有     

COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

斑点免疫金银染色与Dot—ELISA检测抗弓形虫抗体的对比研究

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１：３８４及１：     

斑点免疫金银染色用于弓形虫病血清学诊断的研究

采用斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和斑眯酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＩ．ＩＳＡ），以弓形速殡子可溶性蛋白抗原作为靶抗原检测６５例弓形虫感染者血清抗弓 虫ＩｇＧ，Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＳＩＳＡ检测阳性率分别不９８．４６％和９２．４６％。血清平均滴度在Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为１：３９４，在Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为１：２１８。两法均一的有５９例，其中在两法中抗体滴度相同者２８例，Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测滴     

四种弓形虫病血清学诊断方法的比较研究

本研究应用弓形虫的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）及间接血凝抑制试验（ＩＨＡ）四种方法，分别检测了同一批人血清（１５０份）。结果表明：（１）四种方法中以Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ最为敏感，血清阳性检出率最高为１９．３％；ＩＦＡ次之为１１．３％；ＥＬＩＳＡ为８．６９％；ＩＨＡ最低仅为６．６６％。（２）Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ明显优于常规ＥＬ     

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46-58kD蛋白的纯化及其在诊断中的应用

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旅毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴＳＬＩ－ＥＳ）中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病．检测结果：旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血精１００份未发现假阳性；对蛔虫病人（１２份）、囊虫病人（１５份）、血吸虫病人（１５份）及肺吸虫病人（２０份）血清亦无交叉叵应出现；建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ易于操作．重复性和稳定性较好。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ比较纯化抗原和ＴｓＬ１－ＥＳ的诊断效果，结果经卡方检验后显示：用纯化抗原和用ＴｓＬ１－ＥＳ检测的敏感性无显著差异，但纯化抗原的特异性显著优于ＴｓＬ１－ＥＳ。     

联合检测循环抗原和抗体在血吸虫病基本控制地区应用价值…

血吸虫病基本控制地区７岁以上的人群共８４７名为检测对象，应用抗日本血吸虫ＣＣＡ单克隆抗体Ⅲ Ｄ１０建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测血虫循环抗原（ＣＡｇ），以ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测循环抗体（ＣＡｂ）。结果ＣＡｇ的阳性检出率为３．１９％，ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测ＣＡｂ的阳性检出率分别为６．２６％和９．４５％，两者的检出率间差异有显著性（Ｐ〈０．０１），ＣＡｇ与ＣＡｂ（ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测）的联合检出率分别     

白色PVC Dot-ELISA用于基本消灭丝虫病后的血清学监测报告

在经过积极防治实现基本消灭丝虫病的地区，微丝蚴血症者明显减少，采用常规的血检方法进行监测很不敏感。多年来国内外学者已把敏感性强、特异性高、快速的ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ［１，２］等方法作为丝虫病的诊断方法。在成功地建立了检测抗淋巴丝虫抗体的白色...     

Dot-IGSS,Dot-IGS和Dot-ELISA检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的比较研究

应用自制的直径２０ｎｍ的胶体金标记ＧＡＲ－ＩｇＧ，以斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）、斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种方法，同时检测９９例脑囊虫病人脑脊液（ＣＳＦ）中循环抗原（ＣＡｇ），阳性率分别为９４．９５％、９３．９４％和９２．９３％。检测５１份非囊虫病患者和６２例其他脑部疾病患者的ＣＳＦ，三种方法均为阴性。诊断指数分别为１９４．９５％、１９３．９４％和１９２．９３％。检出ＣＡＳ的最小量Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为２４４ｎｇ／ｍｌ．Ｄｏｔ－ＩＧＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为４８８ｎｇ／ｍｌ。试验表明三种方法诊断脑囊虫病具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行．有希望用于脑囊虫病的临床诊断。     

华支睾吸虫病快速Dot-ELISA试剂盒的应用

华支睾吸虫病快速Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试剂盒的应用广东省江门市卫生防疫站江门５２９０５１周春洪，周煜民，吕渭栋我们试用四川省寄研所提供的诊断华支睾吸虫病快速Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试剂盒（下称Ｄｅｔ－ＥＬＩＳＡ）检测华支睾吸虫病，报告如下：１方法按试剂盒说明书...     

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46—58kD蛋白的纯化及其在诊断中的…

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病。检测结果；旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血清１００份未发现假阳性；对蛔虫病人，囊虫病人，血吸虫病人及肺吸虫病血清谱无交叉反应出现。     

马来丝虫病特异性诊断抗原研究

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ技术分析马来丝虫成虫（ＭＡＡ）和微丝蚴（ＭＦＡ）可溶性抗原。马来丝虫成虫和微丝蚴采自感染沙鼠腹腔。分析结果表明，ＭＦＡ蛋白组分含有沙鼠腹腔液蛋白组分（６４－６７ｋＤａ和５６－５８ｋＤａ）。健康沙鼠血清与ＭＦＡ作ＥＬＩＢ，可见３条淡反应带（６０ｋＤａ、７４ｋＤａ和１００ｋＤａ），与ＭＡＡ无反应带可见。ＭＡＡ蛋白组分中的４２ｋＤａ和１４．５ｋＤａ可被感染６个月的阳性沙鼠血清识别，而不被阴性沙鼠血清识别。     

McAbDot-ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体ＩＦ８Ａ３检测了卫氏并殖吸虫感染犬血清循环免疫复合物动态。感染后１～２ｗｋ可以检测到免疫复合物，３～４ｗｋ阳性滴度逐渐上升，５～６ｗｋ处于较高水平，第８ｗｋ达高峰，然后较快地下降。研究结果表明，卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性；单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测特异的循环免疫复合物，可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感染的诊断。     

白色PVC载体快速Dot-ELISA诊断包虫病的研究

白色ＰＶＣ载体快速Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断包虫病的研究四川省寄生虫病防治研究所成都６１００４１曾明安，陈兴旺，邱加闽作者在白色ＰＶＣ快速Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断华支军吸虫病的基础上‘”，以该法和常规ＮＣ－Ｄｅｔ－ＥＬＩＳＡ比较研究诊断包虫病的效果。１材料...     

McAb Dot—ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体ＩＦ８Ａ３检测了卫氏并及虫感染犬血清循环免疫复合物动态，感染后１～２ｗｋ可以检测免疫复合物，３～４ｗｋ阳性滴度逐渐上升，５～６ｗｋ处于较高汪洋，第８ｗｋ达高峰，然后较快地下降，研究结果表明，卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性；单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测特异的循环免疫复合物，可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感     

单克隆抗体免疫放射测定法检测丝虫抗原

应用抗马来丝虫成虫单克隆抗体（ＭｃＡｂ）结合免疫放射测定法（ＩＲＭＡ），对马来丝虫成虫抗原、马来丝虫成虫排泄－分泌抗原（ＥＳ抗原）、马来微丝蚴抗原及班氏丝虫病病人血清中循环抗原进行了检测。马来丝虫成虫抗原检出的最低含量为０．４８ｐｇ，ＥＳ抗原、马来微丝蚴抗原可测得抗原结合量分别为０．３５μｇ和０．０６５μｇ，班氏丝虫病人血清中循环抗原的检测结果阳性率为８０％（４０／５０），丝虫病流行区５０份微丝蚴阴性血清及丝虫病非流行区５０份肠道蠕虫感染者血清全部为阴性。     

PCR及PCR-ELISA法检测蚊体内马来丝虫幼虫

目的：建立一种检测蚊体内马来丝虫幼虫的灵敏、快速、特异的方法。方法：选择应用PCR及PCR－ELISA法检测马来丝虫幼虫DNA的最佳反应条件，并在该条件下分别以马来丝虫Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期幼虫各1条作模板，测定检测的灵敏度及检测实验室人工感染中华按蚊体内的马来丝虫幼虫。结果：PCR及PCR－ELISA法均能检测出1条Ⅰ期幼虫（L1），而PCR的检测下限为1／10条L1，PCR－ELISA检测下限为1／100条L1；将分离的感染期幼虫加阴性蚊媒进行粗提、扩增及电泳，结果未见明显的扩增条带，扩增产物作ELISA检测，全部为阴 性；个体解剖人工感染的中华按蚊120只，分别收集113只阳性蚊体内的幼丝虫，用两种方法检测，结果均为阳性。结论：初步建立了PCR及PCR－ELISA法检测蚊体内马来丝虫幼虫的方法。     

Dot-ELISA的囊虫病免疫诊断价值

本文用纯化糖蛋白抗原对１１６ 例囊虫病人血清进行Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ检测,阳性率为９６．８％ （１１２／１１６）,３６ 例健康人血清皆为阴性,２７ 例肝吸虫病与包虫病人血清除２例外均为阴性,并以ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ作对照,结果表明Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ 在３种方法中敏感性和特异性较高     

抗恶性疟原虫复合重组抗原单克隆抗体的制备、鉴定及其体外抑制试验

目的制备抗恶性疟原虫单克隆抗体,为疟疾诊断及疟疾疫苗等方面的研究提供良好的材料。方法以恶性疟原虫复合重组融合蛋白为免疫原,经细胞融合及ＥＬＩＳＡ方法筛选获得阳性杂交瘤细胞。对其中３株２Ｈ１２、３Ｄ５、４Ｅ５进行了染色体核型分析,对其分泌的单克隆抗体作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ鉴定,并初步观察了３株单抗对恶性疟原虫（海南分离株）的体外抑制作用。结果两次细胞融合共获得８株阳性克隆,其中３株即２Ｈ１２、３Ｄ５、４Ｅ５的ＯＤ值超过阳性对照,传至２０代以上经ＥＬＩＳＡ检测仍呈强阳性反应,将其腹腔接种给ＢＡＬＢ／ｃ小鼠获得血性腹水,抗体滴度为１∶１２８００。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ分析显示３株单抗均与相应蛋白发生特异性反应。抑制试验结果表明：３株单抗对恶性疟原虫的体外生长和发育均有一定的抑制作用,抑制率分别为４９％±３％、７６％±６％、４１％±２％。结论已获得稳定分泌抗恶性疟原虫复合重组抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株。