异种无细胞真皮组织相容性及血管化实验研究

目的：研究异种无细胞真皮的组织相容性及血管化速度,并将结果与异体无细胞真皮的相关结果进行比较分析。方法：制备巴马香猪无细胞真皮和大鼠无细胞真皮,将二者同时皮下埋植于同一大鼠受体,1、4、8、12w后取材,组织学切片观察其组织相容性;将二者分别进行单纯无细胞真皮移植,1、2、3、4w后分别取材,组织学切片观察其血管化速度。结果：异种无细胞真皮与异体无细胞真皮皮下埋植后各时间点组织学反应相似,未引起受体免疫排斥反应,胶原结构未降解;单纯无细胞真皮移植后,异种无细胞真皮与异体无细胞真皮均能在2w内完成血管化进程,且二者之间同一时间点新生血管数量无显著差异。结论：异种无细胞真皮与异体无细胞真皮同样具有组织相容性好、血管化速度快等生物学特性,理论上可替代异体无细胞真皮应用于临床。     

无细胞真皮复合皮制备及移植的实验研究

体外构建表皮细胞-无细胞真皮活性复合皮，移植于裸鼠背部创面，并与单纯移植表皮细胞膜片相对照。术后观察创面愈合情况，行光镜、电镜及免疫组化检测。结果示复合皮移植后创面覆盖率高，外观情况良好，收缩程度低。组织学检测提示复合皮移植后上皮分化充分，胶原增生有序，表皮-真皮连接结构重建明显，提示无细胞真皮复合皮移植可改善创面愈合质量。     

无细胞毒性猪去细胞真皮基质制备及转归研究

DM植入SD大鼠皮下后未引发免疫排斥.术后3周,PADM与创面黏附牢固,不易从创面揭离;术后24周仍然可见其结构;早期PADM被大量炎性细胞浸润,随时间延长成纤维细胞逐渐增多,并出现新生的毛细血管,胶原纤维逐渐排列规则、致密.结论 高渗盐水/氢氧化钠方法 制备PADM过程简单,所得真皮基质无细胞毒性,生物安全性高,在体内可作为真皮支架长期存在.     

无细胞真皮研究进展

皮肤是人体最大的组织器官,无论在平时还是战时,皮肤损伤都是最常见的。皮肤创伤修复是一个复杂而渐进的过程,需要多方面的协同作用,不仅需要机体内部的生理修复,同时也需要人为提供创伤修复材料及时覆盖伤口,提供有利于伤口愈合的环境。因此,近年来对创伤修复材料的研究很多。创伤修复材料主要分为天然材料和人工材料。天然生物材料是最早使用的创伤修复材料之一,同时也是其他生物材料不可替代的重要材料,尤其在近20年来发展更快。     

鼠异体无细胞真皮基质（ADM）的制备和应用

目的：通过动物实验方法,探讨一种适合薄的自体断层皮片或培养表皮细胞膜片生长的真皮床,使两者结合成为复合皮,以期为临床应用。方法：将异体鼠的全厚皮切制成厚０．３ｍｍ的中厚皮征,先后经１Ｍ ＮａＣｌ溶液去表皮、０．１％戊二醛交联、０．５％ＳＤＳ脱真皮细胞、０．２５％胰蛋白酶再消化及冷冻干燥处理,清除皮肤中具有抗原性的所有细胞成分,而较完整地保留了无免疫源性的细胞外基质蛋白和胶原,制得无细胞真皮基质（ＡＤＭ）。与薄的自体断层皮片（厚０．１ｍｍ）一起制成复合皮移植于创面上。结果：术后２周见复合皮成活率高。组织学检查证实ＡＤＭ血管化良好,宿主细胞如成纤维细胞可长入ＡＤＭ中。长期观察证实无明显瘢痕形成及挛缩畸形,后期收缩轻;表面平滑,质地柔软,有弹性,无水疱形成及排异反应。结论：目前认为,表皮－真皮复合皮是一种较为理想的真     

异种(猪)去细胞真皮基质与自体微粒皮及自体刃厚皮复合移植的比较研究

目的　比较异种 (猪 )去细胞真皮基质 (PADM)与自体刃厚皮、PADM与自体微粒和同种异体皮以及自体微粒皮加同种异体皮覆盖烧伤创面后愈合质量的差异。方法　72只SD大鼠背部全层皮肤缺损创面分别用PADM +自体刃厚皮 (实验组I)、PADM +自体微粒皮 +同种异体皮 (实验组II)和微粒皮 +同种异体皮 (对照组 )覆盖 ,术后定期观察创面愈合情况并计算植皮成活率和收缩率 ,同时行组织学观察。结果　实验组I、II复合皮外观较平整 ,植皮成活率高 ,收缩程度轻 ,与对照组比较差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,且实验组I创面愈合情况优于实验组II。组织学观察实验组I、II上皮化良好 ,胶原纤维排列有序 ,基底膜结构完整。结论　异种 (猪 )去细胞真皮基质与自体刃厚皮覆盖烧伤创面后愈合质量最佳 ,异种 (猪 )去细胞真皮基质与自体微粒和同种异体皮覆盖烧伤创面后愈合质量次之 ,但明显优于微粒皮加同种异体皮组。     

无细胞真皮基质的血管化研究进展

深度皮肤缺损多见于烧伤、创伤、慢性皮肤溃疡、瘢痕整形等患者 ,传统的治疗方法常常导致植皮区及供皮区创面收缩、色素沉着及瘢痕形成 ,严重影响外观及功能 ,而皮肤缺损面积较大又面临自体皮源严重不足的问题 ,无细胞真皮基质的临床应用为改善创面修复质量 ,解决皮源问题 ,开辟了新途径。无细胞真皮基质 (Acellulardermalmatrix ,ADM )是指通过酶消化、高渗盐浸泡等方法去除异体 (种 )皮中的表皮层和真皮细胞成分 ,而保留正常的胶原三维结构及基底膜的真皮支架 ,在皮肤重建中具有较高的应用价值。目前临床多用自体薄层皮片移植或ADM加自…     

含表皮细胞的无细胞真皮复合皮的构建及生长活性研究

为探讨体外构建复合皮的可能性，制备来源于猪皮的无细胞真皮基质，在其表皮面种植表皮细胞于体外培养，定期消化分离无细菌真皮上的表皮细胞，采用细胞计数法和增殖试验观察表皮细胞增殖活力，并分别于1周和2周后通过组织切片HE染色、扫描电镜观察细胞生长状况。结果显示，表皮细胞随培养时间延长，数量明显增多，且仍具有一定的增殖潜力。培养1周、2周后分别形成单层细胞膜片及含3－6层细胞的复层膜片。提示以异种无细菌真皮为载体，可于体外成功构建含表皮细胞层的活性复合皮。     

脱细胞异体真皮与自体刃厚皮移植矫正瘢痕畸形

目的 评估脱细胞异体真皮在烧伤后期瘢痕畸形矫正中的应用价值。方法 对60例烧伤后期瘢痕畸形病人矫形后继发创面行脱细胞异体真皮与自体刃厚皮复合移植。结果 所有病人皮片全部成活，复合皮片外观平整，颜色与邻近正常皮肤近似，无明显收缩，柔软耐磨，富有弹性。结论 脱细胞异体真皮是烧伤后期瘢痕畸形矫形中较理想的材料。     

异种无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后细胞外基质的变化

目的观察异种无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后细胞外基质的动态变化。方法以SD大鼠为动物模型,在其背部造成4 cm×5 cm的全层皮肤缺损。大鼠分为薄自体皮移植组和猪无细胞真皮基质+薄自体皮移植组,分别于移植后1,2,3,4,8,12,16周取标本,检测羟脯氨酸含量、Ⅰ/Ⅲ型前胶原mRNA的表达、透明质酸含量及纤维连接蛋白的变化。结果猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后,各时相点羟脯氨酸含量、Ⅰ型前胶原mRNA的表达均低于薄自体皮移植组(P<0.05);Ⅲ型前胶原mRNA的表达与薄自体皮移植组差异无统计学意义(P>0.05);透明质酸含量高于薄自体皮移植组(P<0.05);而纤维连接蛋白的表达在早期高于薄自体皮移植组,后期则低于薄自体皮移植组(P<0.05)。结论猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后能够减少胶原合成和Ⅰ型前胶原mRNA的表达,增加皮肤中透明质酸含量,从而减轻瘢痕增生。纤维连接蛋白早期表达增高有利于创面愈合及基底膜的重塑,而后期表达降低有助于减轻瘢痕增生。     

Imaging features of volume replacement using an acellular dermal matrix in oncoplastic breast conserving surgery: A case report

An acellular dermal matrix (ADM) is a type of allograft that can be made from human, bovine, or porcine dermis and is used to support or reconstruct soft tissue. During breast reconstructive surgeries, ADMs are widely used to partially cover breast implants following a mastectomy to correct for insufficient subcutaneous tissue. Recently, ADMs have been used as a filling material for volume replacement in oncoplastic breast conserving surgery. In this report, we present the case of a female, middle-aged patient who underwent breast conserving surgery with volume replacement using an ADM.     

同种异体脱细胞真皮在外耳道胆脂瘤治疗中的应用

 目的 探讨同种异体脱细胞真皮在外耳道胆脂瘤治疗中的应用。 方法 回顾我科2006-02至2010-12收治的18例（18耳）外耳道胆脂瘤患者,根据Holt分期Ⅱ期12例、Ⅲ期6例。所有病例均在完全清除胆脂瘤病变的术腔缺损处放置同种异体脱细胞真皮（2 cm×3 cm）,并定期门诊复诊。 结果 18例术后均达到干耳,无外耳道狭窄及真菌感染的发生,随诊6个月以上无复发。 结论 对于Ⅱ、Ⅲ期的外耳道胆脂瘤患者,术腔放置脱细胞异体真皮能达到良好的治疗效果。     

脱细胞真皮基质的改建及其作为软骨细胞移植载体在兔软骨缺损修复中的应用

目的:探讨脱细胞真皮(acellular dermal matrix,ADM)经改建后作为软骨细胞移植载体的可行性。方法:取新生小牛背部真皮组织,分别用自制脱细胞剂和表面活性剂对其进行脱细胞处理后,观察得出自制脱细胞剂脱细胞的效果良好,但脱细胞后的胶原纤维结构需要改建;将自制脱细胞剂脱细胞后的真皮组织分别用按一定浓度配比的消化液和胃蛋白酶消化,发现经配比消化液改建后的胶原纤维表面光滑、孔隙均匀,符合软骨细胞移植载体的要求;比较戊二醛和水溶性交联剂对改建后脱细胞真皮基质的交联效果,可见水溶性交联剂交联后的ADM载体植入大鼠皮下后,其生物相容性良好;用生长因子对改建和交联后的ADM进行纤维表面修饰,然后接种乳兔软骨细胞,观察细胞粘附及生长情况;最后将接种有兔自体软骨细胞的ADM植入兔胫骨软骨缺损部位,术后定期取材观察修复效果。结果:(1)经戊二醛交联后的ADM植入大鼠皮下后有强烈的炎症反应,并有组织出血坏死;而经水溶性交联剂交联的ADM的组织相容性较好。(2)在植入接种有自体软骨细胞的ADM24周后,大白兔胫骨的软骨缺损修复完好,附和的细胞能够存活且增殖,ADM本身基本降解。结论:经脱细胞、纤维改建、交联及生长因子修饰的ADM孔隙均匀,组织相容性好,适于细胞粘附及长期生长。ADM胶原支架在兔体内可基本降解,未见排异反应,移植24周后骨缺损修复。     

真皮多能干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

目的：观察真皮多能干细胞（dMSCs）移植对脊髓损伤大鼠运动功能的修复作用。方法：32只SD大鼠在L4水平制成脊髓全横断损伤模型，并随机分为真皮多能干细胞移植组（A组）及损伤对照组（B组），每组10只大鼠。伤后1w，移植组于伤处移植大鼠真皮多能干细胞（dMSCs），而对照组仅注射等量PBS。分别于移植后1d、1w、8w、12w对两组大鼠进行动物行为学（BBB）评分和脊髓诱发电位（SEP和MEP）检测，并于移植后12w进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测。结果：BBB评分4w以后组间比较差异有统计学意义（P〈0．05），移植组明显高于对照组（P〈0．05）；SEP和MEP潜伏期和波幅值在8、12w后组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；移植后12w，移植组损伤脊髓结构的修复明显优于对照组。结论：移植治疗脊髓损伤，能明显改善其运动功能和神经形态，dMSC对脊髓损伤大鼠有治疗作用。     

激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质

目的 探讨激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质（PADM）的可行性。 方法 采用胰蛋白酶/TritonX-100的方法制备PADM，使用CO2激光加工机进行打孔。对比激光微孔PADM与传统网状PADM的外观。将48只SD大鼠背部制作全层皮肤缺损创面，随机分为3组，每组16只。微孔组：移植激光微孔PADM＋自体刃厚皮；网状组：移植网状PADM＋自体刃厚皮；对照组：仅移植自体刃厚皮。术后定期观察各组大鼠创面愈合情况，计算移植物成活率和创面收缩率。结果激光微孑LPADM微孔呈矩阵样整齐排列，与网状PADM比较真皮基质分布更均匀。术后6周，微孔组移植物成活率与对照组比较差异无统计学意义，但明显高于网状组（P〈0．05）；微孔组创面收缩率明显低于网状组和对照组（P〈0．05）。结论 激光打孔可制备激光微孔PADM，其真皮基质与自体刃厚皮复合移植可提高创面修复质量。     

邮票植皮联合异种ADM治疗大面积深度烧伤疗效观察

目的观察邮票植皮联合异种脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)治疗大面积深度烧伤创面的临床疗效。方法对2014年4月至2017年4月毕节市第一人民医院烧伤整形手外科收治的14例大面积深Ⅱ度及Ⅲ度烧伤患者采用邮票植皮联合异种ADM治疗,分别于术后第3、6、12、15天观察创面ADM的湿度、弹性及与创面的贴附情况,以及皮片成活情况、创面愈合时间及愈合效果。结果所有患者均顺利完成邮票植皮联合异种ADM治疗,其中深Ⅱ度烧伤创面及部分Ⅲ度烧伤创面于1次植皮后被完全覆盖,皮片完全成活;部分Ⅲ度烧伤创面于2~3次植皮后被完全覆盖,皮片成活良好。术后第3、6天,深Ⅱ度及Ⅲ度烧伤创面的ADM均较湿润、弹性良好、紧贴创面;术后第12天,深Ⅱ度烧伤创面的大部分ADM干燥、弹性较差、少许与创面分离,Ⅲ度烧伤创面的大部分ADM湿润、弹性尚可、贴附良好;术后第15天,深Ⅱ度烧伤创面的ADM均较干燥、弹性较差、大部分与创面分离,Ⅲ度烧伤创面的大部分ADM湿润、弹性尚可、贴附良好。所有患者创面均完全愈合,其中深Ⅱ度烧伤创面平均愈合时间为15 d,Ⅲ度烧伤创面愈合时间为15~35 d。患者出院后随访4~12个月,部分深Ⅱ度烧伤创面愈后留有轻度色素沉着和(或)扁平瘢痕,部分Ⅲ度烧伤创面愈后留有增生性瘢痕。结论邮票植皮联合异种ADM治疗大面积深度烧伤创面,可通过观察ADM的湿度、弹性及与创面的贴附程度初步判断创面修复情况;邮票植皮联合异种ADM治疗深Ⅱ度烧伤创面,可有效促进创面修复,缩短创面愈合时间,疗效显著,是修复深Ⅱ度烧伤创面较为理想的方法,值得临床推广应用;而邮票植皮联合异种ADM治疗Ⅲ度烧伤创面,虽然最终治疗效果欠佳,但能有效保护创面不受外界细菌侵袭,促进肉芽组织生长,为Ⅲ度烧伤创面的修复打下良好的基础。     

毛囊真皮鞘细胞在皮肤创伤愈合中作用的实验研究

目的：通过体外培养毛囊真皮鞘细胞移植于大鼠皮肤创面的实验研究,探讨真皮鞘细胞在皮肤创伤愈合中的作用。方法：组织块法原代培养Wistar大鼠触须毛囊真皮鞘细胞,5-溴脱氧尿苷（BrdU）标记。Wistar大鼠22只,采用背部皮肤缺损模型,分细胞移植组和生理盐水对照组。术后3d、7d、14d、1个月和2个月取材,图像分析计算创面收缩率,免疫组化观察植入细胞在体内的转归,光镜和扫描电镜观察创面愈合病理过程。结果：术后各时间点细胞移植组创面收缩率均大于对照组（P〈0．01）;术后7d移植组新生肉芽组织中见不均匀分布的标记细胞,14d标记细胞减少并出现凋亡;移植组愈合过程中肉芽组织形成、表皮再生、胶原增生和组织改建均较对照组有所提前。结论：毛囊真皮鞘细胞在皮肤创伤修复过程中参与肉芽组织形成,具有加速创面收缩和促进愈合进程的作用。     

肝移植受者鲍氏不动杆菌阳性检出特征及临床因素分析

目的观察肝移植术后鲍氏不动杆菌阳性检出的分布和药敏情况,分析阳性检出受者的临床特征及其临床相关因素。方法分析2007年1月至2010年10月161份肝移植受者鲍氏不动杆菌阳性样本的定植分布特征及药敏结果;回顾性地比较不同阳性分布来源患者的术前相关风险因素、临床特征及对预后的影响。结果阳性样本主要来自痰液(58.39%,94/191)、腹腔引流液(18.01%,29/161)、静脉导管尖端(8.70%,14/161)、胆汁(7.45%,12/161)和血液(7.45%,12/161);除2009年腹腔引流液阳性率高于其他年度外(2=15.294,P=0.002),阳性分布没有显著性年度差异。敏感率较好的抗生素依次为黏菌素、多黏菌素、米诺环素、头孢哌酮舒巴坦;碳青霉烯类耐药率高达85.09%(137/161)。阳性分布与术前应用三代头孢菌素显著相关(2=14.117,P=0.007)并严重影响患者ICU停留时间(F=2.681,P=0.034)、机械通气时间(F=4.281,P=0.003)和手术后早期死亡率(2=15.450,P=0.004);血液和胆汁培养阳性患者具有更高的临床风险。结论耐药鲍氏不动杆菌定植是肝移植术后医院内感染的重要风险因素,血液、胆汁培养阳性检出往往伴有严重后果,应引起足够重视。