六味地黄方醇沉工艺研究

目的 通过对六味地黄方醇沉工艺合理化研究,得到稳定的、可产业化的醇沉工艺.方法 以马钱苷、芍药苷、莫诺苷、甘露三糖、多糖质量分数、相对分子质量分布及浸出物等为评价指标,对乙醇加入方式、离心方式及是否加入乙醇洗涤工艺进行考察,筛选出最佳醇沉工艺.结果 醇沉工艺中以体积计算加入乙醇的量较合理;采用乙醇洗涤法可有效完成多糖部位与醇沉上清液的分离;改进工艺后,多糖浸出物质达标,苷类、甘露三糖的质量分数达标.结论 经优化后的乙醇醇沉工艺具有易操作、可控性好、重复性好的特点,可以开展产业化推广.     

六味地黄生物制剂总多糖的精制工艺优选

目的:优化六味地黄生物制剂总多糖的精制工艺,为该制剂的开发提供参考。方法:以粗多糖质量为指标,采用正交试验考察醇沉浓度、醇沉时间、药液相对密度对总多糖醇沉工艺的影响。在单因素试验基础上,以蛋白质清除率和总多糖保存率的综合评分为指标,采用正交试验优化三氯乙酸(TCA)-正丁醇法脱蛋白工艺。以色素清除率和总多糖保存率的综合评分为指标,利用正交试验优化活性炭除色素工艺。结果:最佳醇沉工艺为醇沉浓度85%,醇沉时间6 h,药液相对密度1.05;粗多糖质量8.92 mg。最佳脱蛋白工艺为粗多糖溶液与TCA-正丁醇体积比1∶2,TCA-正丁醇(1∶15),振荡时间20 min,静置时间0.5 h;蛋白质清除率80.23%,总多糖保存率85.45%。最佳除色素工艺为脱色温度40℃,活性炭加入量6%,脱色时间40 min;色素清除率74.84%,总多糖保存率78.69%。结论:优选的精制工艺稳定可行,适用于六味地黄生物制剂总多糖保健产品的开发。     

六味地黄生物制剂多糖对果蝇抗氧化作用的影响

目的:观察六味地黄生物制剂多糖(LW-PSB多糖)对果蝇抗氧化作用的影响。方法:采用美国野生型黑腹果蝇为实验对象,收集8 h内羽化未交配果蝇,雌雄分开,在温度为(25±1)℃,相对湿度为(60±5)%的人工气候箱中用培养基进行培养,将果蝇随机分为阴性对照组(普通培养基),阳性对照维生素C组(添加维生素C 1 g·kg-1的培养基),LW-PSB多糖低、中、高剂量组(含不同浓度的LW-PSB多糖的培养基,浓度依次为1,3,9 g·kg-1),共5组,每组雌、雄各500只。果蝇30 d龄时分别制成匀浆,测定果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化物(TAOC)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与阴性对照组比较,LW-PSB多糖各剂量组能提高果蝇SOD,CAT,GSH-Px和TAOC活性(P<0.05,P<0.01或P<0.001),降低MDA含量(P<0.01或P<0.001);与维生素C组比较,LW-PSB多糖各剂量组能不同程度地提高GSH-Px和TAOC活性(P<0.05或P<0.001),降低MDA含量(P<0.01或P<0.001)。结论:六味地黄生物制剂多糖饲喂果蝇可提高果蝇体内的抗氧化能力。     

六味地黄生物制剂抗衰老活性部位的筛选研究

目的:筛选六味地黄生物制剂抗衰老的活性部位。方法:经口喂饲果蝇0.1%六味地黄生物制剂不同部位提取物(乙酸乙酯提取物,正丁醇提取物,水提物)和0.1%六味地黄生物制剂,并以普通培养基作为空白对照,通过果蝇寿命实验,繁殖力实验,以及测量给药30天果蝇体内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),总抗氧化物(TAOC),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:寿命实验中,正丁醇提取物能延长果蝇平均和最高寿命;酶实验中,正丁醇提取物能不同程度地提高GSH-PX,TAOC,SOD,CAT活力,降低MDA水平;繁殖力实验中,正丁醇提取物能明显增加果蝇子代成虫数量。结论:正丁醇提取物具有良好的抗衰老的作用。     

蒽酮-硫酸法测定六味地黄生物制剂中多糖含量的研究

目的六味地黄生物制剂中多糖含量的测定方法。方法以蒽酮-硫酸比色法,检测波长为625 nm,用葡萄糖为对照品对六味地黄生物制剂中多糖的含量进行测定。结果葡萄糖对照品溶液在6.04～48.32μg/ml范围内呈良好的线性关系,线性回归方程为A=15.813C+0.033 1(r=0.997 7),平均回收率为100.01%(n=6),RSD为1.12%。结论该方法灵敏度高,准确度高,简单易行,适用于六味地黄生物制剂中多糖含量的测定。     

六味地黄生物制剂对残疾果蝇寿命的影响

目的:研究六味地黄生物制剂对残疾果蝇的寿命的影响;方法:用手术方法将果蝇造成残疾模型,模型一为剪去果蝇两侧中足的足尖,模型二为剪去果蝇一侧整个中足.通过交配实验,耐寒实验,攀爬实验来验证果蝇残疾模型成功与否,并以正常果蝇为对照.再经口喂饲残疾果蝇不同质昔浓度的六味地黄生物制剂(0.1%、0.2%),并以普通培养基为空白对照组,观察其对残疾果蝇的寿命的影响;结果:两种残疾的果蝇均比正常果蝇弱势,在寿命实验中,各浓度的含药组均能不同程度地延长模型一果蝇半数死亡期、平均寿命、最高寿命,其平均延寿率分别达到29.7%、14.9%、40.7%、44.8%,同时也能延长模型二果蝇半数死亡期、平均寿命、最高寿命,其平均延寿率分别达到13.7%、10.3%、28.5%、24.2%;结论:六味地黄生物制剂具有良好的延长残疾果蝇寿命,延缓其衰老的作用.     

六昧地黄丸复方的提取工艺比较研究

目的：探讨不同提取方法、提取溶剂对六味地黄丸复方提取效果的影响，并筛选出最佳提取工艺。方法：以丹皮酚、总多糖为指标，拟用回流、渗漉两种传统提取法，水、60％乙醇、95％乙醇三种提取溶剂进行正交试验，筛选出六种不同提取工艺的最佳提取条件，再对这六种提取工艺进行相同方法不同溶剂、相同溶剂不同方法的比较研究。结果：最佳提取工艺为水回流法，即10倍量水回流提取3次，每次1h。结论：该法筛选所得最佳提取工艺合理、可行，可为六味地黄丸复方制剂工艺改革提供依据。     

丹皮酚提取工艺的研究

对丹皮酚提取工艺进行了研究，用单因素法和正交试验法，得到丹皮酚提取的最佳工艺：加碱、酸中和醇提的条件下，加２～６倍量乙醇，提取温度４５℃，提取时间３０ｍｉｎ。     

六味地黄生物制剂对果蝇寿命和繁殖力的影响

目的 研究六味地黄生物制剂对果蝇的寿命和繁殖力的影响.方法 经口饲喂果蝇不同浓度的六味地黄生物制剂 (浓度为0.1 %,0.3 %,0.9 %),并以普通培养基为空白对照组,观察其对果蝇的寿命、繁殖力的影响.结果 各浓度的含药组能不同程度地延长雌雄果蝇平均寿命,最高寿命和半数死亡期,增加果蝇子一代和子二代成虫数.结论 六味地黄生物制剂具有良好的延缓果蝇衰老,提高果蝇生命活力的作用.     

芡实多糖的水提醇沉工艺研究

目的:优化芡实多糖的水提醇沉工艺。方法:以苯酚-硫酸法测定多糖的含量,以多糖得率和糖含量为指标,选取提取温度(A)、提取时间(B)、固液比(C)、提取次数(D)4个因素设计正交试验,采用单因素实验考察醇沉浓度的影响。糖含量的绿多糖,以蛋白,并结果:在实验影响因素中,影响程度从大到小依次为ADBC,最佳提取方案为:A1B2C3D3,即在70℃下,固液比1∶20时,提取2.5h,连续提取4次。最佳醇沉浓度为90%。结论:本实验优选出的工艺稳定可行,可以为进一步研究芡实提供参考。     

黄精总多糖醇沉纯化工艺研究

目的：黄精多糖水提液醇沉工艺的优化。方法：通过正交实验,用蒽酮-硫酸法测定醇沉干膏中多糖的含量,以多糖提取率的高低来筛选黄精多糖水提液的醇沉条件。结果：黄精多糖水提液的最佳醇沉条件为：药材：浸膏（g∶ml）（1∶0.8）,醇沉浓度为85%,醇沉1次。结论：该最佳醇沉工艺收率稳定,黄精多糖提取率为7.71%,提取率高。     

闪蒸—气相色谱法测定六味地黄口服液中丹皮酚的含量

采用闪蒸—气相色谱法测定六味地黄口服液中丹皮酚的含量。方法平均回收率100.26％。与部颁标准法测定数据对照,结果基本一致。     

六味地黄生物制剂正丁醇提取物延缓果蝇衰老作用的研究

目的:研究六味地黄生物制剂正丁醇提取物对黑腹果蝇衰老的影响。方法:经口饲喂果蝇不同浓度的六味地黄生物制剂正丁醇提取物(质量浓度为0.1%,0.3%,0.9%),并以基础培养基为空白对照组,观察果蝇的寿命、繁殖力和30d龄果蝇体内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),总抗氧化物(T-AOC),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:各浓度组能明显延长果蝇平均寿命和平均最高寿命,增强果蝇繁殖力,提高30d龄果蝇GSH-PX,T-AOC,SOD,CAT活性,降低MDA含量。结论:六味地黄生物制剂正丁醇提取物具有良好的延缓果蝇衰老的作用。     

六味地黄丸复方的提取工艺比较研究

目的:探讨不同提取方法、提取溶剂对六味地黄丸复方提取效果的影响,并筛选出最佳提取工艺。方法:以丹皮酚、总多糖为指标,拟用回流、渗漉两种传统提取法,水、60%乙醇、95%乙醇三种提取溶剂进行正交试验,筛选出六种不同提取工艺的最佳提取条件,再对这六种提取工艺进行相同方法不同溶剂、相同溶剂不同方法的比较研究。结果:最佳提取工艺为水回流法,即10倍量水回流提取3次,每次1 h。结论:该法筛选所得最佳提取工艺合理、可行,可为六味地黄丸复方制剂工艺改革提供依据。     

六味地黄汤生物制剂的抗衰老作用

六味地黄汤由熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮、茯苓等6味中药组成，具有滋阴补肾的功效，可用于肾阴亏损引起的衰老及头晕耳鸣、腰膝酸软、骨蒸潮热、盗汗遗精、消渴等病症的预防与治疗。目前该药在临床上主要用于糖尿病、难治性肾病、更年期综合征、绝经后妇女原发性骨质疏松、老年性阴道炎、矽肺等病症的治疗。药理学研究表明，该方具有治疗阴虚、延缓衰老、调节免疫功能和肾功能、抗肿瘤、抑制骨质疏松、抗氧化、抑制血管内皮凋亡、益智和抑制黑素细胞生成等作用。     

HPLC法测定六味地黄片中丹皮酚的含量

目的 :利用HPLC法测定六味地黄片中丹皮酚的含量;方法:流动相:甲醇-水(70∶30),色谱柱:Diamonsil-C18(200×4.6mm,5μm),检测波长:274nm,流速:1.0mL·min-1,理论塔板数计算不低于3500;结果丹皮酚在4.364~26.184μg范围内线性关系良好,平均回收率为102.3%,RSD为0.73%;结论该方法比《卫生部药品标准中药成方制剂》第八册所示的用紫外分光光度法测定六味地黄片含量,方便、简单、灵敏度高、准确,可用于六味地黄片中丹皮酚的含量测定。     

六味地黄口服液的质量标准提高研究

目的:探寻提高六味地黄口服液质量标准的研究。方法:采用HPLC法以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相。马钱苷测定,流动相为四氢呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(1∶8∶4∶87);流速为1mL·min^-1,检测波长为236nm;丹皮酚的测定,以甲醇-水(70∶30)为流动相,流速为1mL·min^-1,检测波长为274nm。结果:马钱苷和丹皮酚的线性范围分别为0.0417～0.4589μg、0.0437～0.4805μg;平均加样回收率,马钱苷为:99.47%,RSD:0.45%(n=6),丹皮酚为99.61%,RSD为1.32%。(n=6)。结论:实验表明,该方法方便快捷,准确,灵敏度高,重复性好,可用于六味地黄口服液的质量控制。     

六味地黄胶囊的质量标准研究

目的：建立六味地黄胶囊中酒萸肉的薄层色谱鉴别及莫诺苷和马钱苷的总量与丹皮酚含量的测定方法。方法：采用薄层色谱法对六味地黄胶囊中酒萸肉进行定性鉴别,采用高效液相色谱法同时测定方中酒萸肉里莫诺苷和马钱苷的总量及牡丹皮中丹皮酚的含量;色谱柱为Thermo-C18（4.6×250mm,5μm）,流动相：以乙腈为流动相A,以0.3%磷酸为流动相B,采用梯度洗脱,流速1m L/min,柱温35℃,马钱苷和莫诺苷的检测波长为240nm,丹皮酚的检测波长为270nm。结果：薄层色谱鉴别斑点清晰,阴性对照无干扰;莫诺苷在0.03508～1.0524μg范围中线性关系良好,平均回收率为100.41%,RSD为1.21%（n=6）;马钱苷在0.049342～1.480262μg范围中线性关系良好,平均回收率为101.91%,RSD为1.37%（n=6）;丹皮酚在0.17046～5.1138μg范围中线性关系良好。平均回收率为103.54%,RSD为0.92%（n=6）。结论：所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于六味地黄胶囊中酒萸肉的鉴别和酒萸肉里莫诺苷和马钱苷的总量及牡丹皮中丹皮酚的含量测定。