姜黄素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α表达的影响

目的研究姜黄素防治非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的作用及其机制。方法采用高脂饮食制备大鼠NASH模型。大鼠分正常对照组、模型组、姜黄素防治组、东宝肝泰防治组，观察肝细胞脂肪变性、炎症活动程度；采用免疫组化和Western blot技术检测各组大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白表达变化。结果与模型组相比，姜黄素防治组大鼠肝细胞脂肪变性、炎症活动程度皆有明显改善（P〈20．05），TNF-α蛋白含量显著减少（P〈0．01），部分作用明显优于东宝肝泰防治组（P〈0．01或P〈0．05）。结论姜黄素有防治NASH作用，作用机制考虑与纠正致炎因子TNF-α蛋白高表达相关。     

杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α蛋白表达的影响

目的：观察杞蓟制剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）肝组织肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor，TNF-α）蛋白表达的影响，探讨其作用机制。方法：采用高脂饮食复制大鼠NASH模型。实验分正常对照组、模型组、杞蓟制剂组、复方蛋氨酸胆碱片对照组。观察动物一般情况。计算肝指数、肝组织细胞脂肪变性、炎症活动程度，测定血清丙氨酸转氨醇（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TCH）等指标。结果：与模型组相比，杞蓟制剂预防给药明显改善NASH大鼠肝指数、肝组织脂肪变程度、炎症活动程度及血清ALT、AST、TG、TCH等指标（P〈0．01或P〈0．05），同时明显降低肝组织TNF-α蛋白表达（P〈0．05），优于复方蛋氨酸胆碱片对照组（P〈0．05）。结论：杞蓟制剂抑制TNF-α蛋白在肝组织表迭是其防治NASH的重要机制。     

多不饱和脂肪酸对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织脂肪细胞因子的影响

目的 观察多不饱和脂肪酸对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织中瘦素、抵抗素和脂联素的影响.方法 将44只大鼠随机分为4组,对照组(10只)给予普通饲料喂养,模型组(10只)、低剂量组(12只)和高剂量组(12只)给予高脂饲料喂养制备NASH模型.低剂量组和高剂量组在喂养8周后加用ω-3多不饱和脂肪酸干预(0.5 ...     

白藜芦醇对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织SIRT3表达的影响

目的研究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织沉默交配型信息调节因子2同源蛋白3(SIRT3)的表达变化,探讨其在NASH发病中的作用及白藜芦醇对其的影响。方法 60只SD大鼠被随机分为正常对照组、NASH模型组和白藜芦醇处理组,每组20只。采用高脂饲料喂养建立NASH大鼠模型。制备新鲜肝组织匀浆,检测肝组织内活性氧(ROS)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。常规检查肝组织病理学变化和超微结构的变化。采用免疫组化法分析SIRT3蛋白的亚细胞定位,采用Western Blot定量检测SIRT3蛋白的表达。结果模型组大鼠肝指数、血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C含量和氧化应激水平显著高于对照组(P0.01),药物处理组显著低于模型组(P0.01);模型组大鼠非酒精性脂肪性肝病活动性评分(NAS)为(6.83±0.41)分,显著高于对照组[(0.24±0.08)分,P0.01],处理组为(3.27±0.29)分,显著低于模型组(P0.01);模型组大鼠肝细胞线粒体半定量评分为(3.24±0.21)分,显著高于对照组[(0.17±0.03)分,P0.01],处理组为(1.39±0.12)分,显著低于模型组(P0.01);免疫组化检测显示SIRT3蛋白在细胞核和细胞质中均有表达,模型组SIRT3蛋白相对表达量为(0.24±0.03),显著低于对照组[(0.58±0.02),P0.01],而处理组为(0.46±0.03),显著高于模型组(P0.01)。结论 NASH大鼠肝组织SIRT3表达量下降,白藜芦醇干预可通过上调SIRT3的表达改善NASH病理学变化。     

电针对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核因子-κB活性的影响

目的：应用电针刺激SD大鼠肝俞、足三里、丰隆、太冲穴，观察其对高脂饮食所致的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝组织病理改变的影响。方法：40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和药物组，每组10只，16周断头处死，用HE染色观察肝组织光镜下的病理改变；EMSA法测定肝组织NF-κB活性。结果：模型组和药物组大鼠肝组织的NF-κB活性明显高于正常组（均P〈0．01）和电针组（均P〈0．05）。结论：肝组织NF-κB的活性增强与非酒精性脂肪性肝炎的发生密切相关；电针可以起到降低NF-κB活性而达到治疗NASH的目的。     

非酒精性脂肪性肝炎患者肝组织NF-кβ的表达及其意义

目的探讨核因子κβ（NF-κβ）在非酒精性脂肪性肝炎（NASH）患者肝组织中的表达状况及在发病机制中的意义。方法应用免疫组化方法检测41例不同病变程度NASH患者肝组织NF-κβ表达，分析其与NASH患者肝组织病理改变以及血清TNF-α、胰岛素抵抗（IR）之间的关系，并与39例酒精性脂肪肝、50例NASH合并慢性乙型肝炎（CHB）患者进行比较。结果与正常人肝组织中NF-κβ（1．13±0．05）表达比较，NASH（5．09±1．30）、酒精性脂肪肝（4．07±1．54）和NASH合并CHB（6．40±1．41）患者表达均明显增强（P〈0．05）；在NASH肝组织中，NF-κβ表达于肝脂肪变区及炎症活动区的肝窦壁细胞及炎细胞中，其阳性表达随肝脏炎症损伤程度和纤维化程度的加重而增加（P〈0．05），与血清TNF-α水平和IR成正相关（P〈0．05），而与脂肪变程度无明显相关性（P〉0．05）。结论不同类型的脂肪性肝病均存在胰岛素抵抗和肝组织NF-κβ的活化，NF-κβ的活化是非酒精性脂肪肝胰岛素抵抗持续进展的一个重要机制。     

杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核转录因子-κB/IκB的影响

目的 观察非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织P65(NF-κB亚型)、核转录因子-κB抑制因子(IκB)-α(IκB亚型)蛋白和mRNA表达情况及杞蓟制剂对其影响.方法 采用高脂饮食复制大鼠NASH模型.实验分正常组对照、模型组、杞蓟制剂组、复方蛋氨酸胆碱片组.测定肝组织P65、IκB-α蛋白和mRNA的表达.结果 与正常组相比,模型组大鼠肝组织P65、IκB-α蛋白和mRNA表达明显增强(P＜0.01),且P65蛋白主要在胞核分布;与模型组相比,杞蓟制剂组大鼠肝组织P65、IκB-α蛋白和mRNA的表达明显降低(P＜0.05).复方蛋氨酸胆碱片组大鼠肝组织P65、IκB-α蛋白和mRNA的表达虽有所降低,但与模型组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 NF-κB蛋白和mRNA表达增强及NF-κB蛋白活化增强参与了NASH的发病.杞蓟制剂能够抑制NF-κB(P65)蛋白和mRNA的表达,从而能防治NASH.     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核因子-κB mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织核因子(NF)-κB mRNA及蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料喂养复制NASH大鼠实验模型,施以造模因素的同时,各用药组大鼠分别灌服疏肝方、健脾方和疏肝健脾合方的高、低剂量进行干预。16 w后,各组大鼠以3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,腹主动脉采血,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,肝组织TC、TG含量;HE染色和油红O染色观察肝组织病理变化;实时定量PCR法检测肝组织NF-κB mRNA表达水平;Western印迹法检测肝组织NF-κB蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,血脂及肝脂均有不同程度的升高(P<0.05,P<0.01),大鼠肝组织NF-κB mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,各用药组血脂和肝组织NF-κB mRNA及蛋白的表达均较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01),尤以综合方高剂量及健脾高剂量作用最为显著。结论疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NASH有较好的防治作用,其机制可能与其下调肝脏NF-κB mRNA及蛋白的表达有关。     

电针对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核因子-κB活性与PPARγ表达的影响

目的:应用电针刺激SD大鼠肝俞、足三里、丰隆、太冲穴,观察其对高脂饮食所致的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织病理改变的影响。方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和西药组,每组10只。正常组大鼠予普通饮食喂养,模型组、电针组和西药组大鼠均给予高脂饮食12周;12周后正常组、模型组同前喂养,其他两组大鼠分别进行电针和西药熊去氧胆酸(UDCA)治疗,共4周;16周全部大鼠断头处死,用HE染色观察大鼠肝组织光镜下的病理改变;EMSA法测定大鼠肝组织NF(核因子)-κB活性;逆转录聚合酶链反应观察各组大鼠肝组织PPAR(过氧化物酶体增殖物激活受体)γmRNA的表达情况。结果:模型组和西药组大鼠的NF-κB活性明显高于正常组(P均<0.01)和电针组(P均<0.05)。模型组、电针组和西药组大鼠肝组织PPARγmRNA的表达均较正常组有不同程度减弱(P<0.01),且模型组大鼠的表达明显低于电针组(P<0.01)。结论:肝组织NF-κB的活性增强及PPARγ的表达减弱与NASH的发生密切相关;电针可以起到增强大鼠肝组织PPARγ的表达及降低NF-κB的活性作用。电针可能通过抑制NF-κB的活性、激活PPARγ的作用而达到治疗NASH的目的。     

病毒性肝炎肝组织TNF-α和NF-κBmRNA的表达与肝细胞凋亡

目的:检测TNF-α,NF-κBmRNA在病毒性肝炎中的表达以及与肝细胞凋亡的关系.方法:采用免疫组织化学方法、原位杂交技术以及原位末端标记技术(TUNEL 实验)检测65例病毒性肝炎患者和10例非肝病对照者肝组织中TNF-α,NF-κBmRNA的表达和肝细胞凋亡的情况.结果:病毒性肝炎患者肝组织中TNF-α,NF-κBmRNA阳性表达率分别为76.9%和70.3%,明显高于对照组的20.0%和10.0%(P＜0.01);TNF-α和NF-κBmRNA的表达与肝细胞凋亡密切相关(rs=0.267和rs=0.362,P＜0.05);病毒性肝炎患者肝组织中TNF-α,NFκBmRNA的表达存在明显的相关性(rs=0.385,P＜0.05).随着慢性肝炎病理损伤的程度的加重,NF-κBmRNA的阳性表达率增高(P＜0.05).结论:TNF-α,NF-κBmR NA的表达在病毒性肝炎的发病及肝细胞凋亡的发生中存在相关性.TNF-α,NF-αBmRNA的表达随着病变程度的加重而增高.     

硫酸锌对大鼠压力性溃疡TNF-α、NF-κB p65表达的影响

目的观察不同剂量硫酸锌对大鼠压力性溃疡面的保护作用,并分析其作用机制。方法 SPF级SD大鼠60只,采用缺血-再灌注损伤的方法建立大鼠压力性溃疡模型,实验分为6组:正常对照组、模型组、黄芪阳性对照组(10 ml/kg)、硫酸锌高、中、低剂量组(10.0、5.0、2.5 ml/kg)。造模成功后次日,黄芪阳性对照组和硫酸锌不同剂量组分别腹腔注射黄芪注射液和硫酸锌注射液,正常对照组不给予任何处理,模型组腹腔注射生理盐水10 ml/kg,1次/d,持续15 d。15 d后测量压力性溃疡部位面积,处死大鼠,心脏取血,检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量;取压力性溃疡部位组织进行苏木素-伊红(HE)染色,免疫组织化学法检测压力性溃疡组织NF-κB p65的表达。结果硫酸锌不同剂量组可显著促进压力性溃疡部位的愈合,增加SOD活性、降低MDA、TNF-α含量(P<0.05);HE染色结果显示炎性浸润程度明显减轻,有新生血管出现;免疫组化结果显示压力性溃疡部位NF-κB p65的表达明显降低。结论硫酸锌可通过增加SOD活性、降低MDA含量,抑制TNF-α、NF-κB p65的表达,从而抑制NF-κB介导的凋亡通路,阻止组织中细胞凋亡的发展,促进肉芽组织的增生,以促进大鼠压力性溃疡面的愈合。     

肝脂宁对非酒精性脂肪性肝炎大鼠炎症因子表达的影响

目的:通过观察中药肝脂宁对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠炎症因子、肝功能、肝纤维化指标的影响,探讨肝脂宁对NASH的作用机制,为临床用药提供实验依据。方法:造模大鼠经喂饲高脂饲料造模16周,随机分为模型对照组10只,中药高剂量组10只,中药低剂量组10只,甘草酸二铵对照组10只,脂必妥对照组10只,加上未造模的正常对照组10只,共6组。大鼠经4周灌胃蒸馏水或药物处理,于末次给药后,禁食12 h。腹腔麻醉大鼠,腹静脉取血分离血浆,测定空腹血糖、空腹胰岛素(Fins)含量;按公式计算稳态胰岛素评价指数(HOMA-IR);测定游离脂肪酸(FFA)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PⅢP)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、TOLL样受体(TLR-4)、谷胱甘肽S转移酶(GSHST)、脂联素含量。全自动生化分析仪测定:三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙氨酸氨转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。结果:NASH大鼠空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR、NOS、MDA、SOD、GSHST、血脂、脂联素、肝功能、肝纤维化指标、炎症因子均异常表达,肝脂宁可有效降低实验大鼠空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR,改善胰岛素抵抗。降低MDA、肝酶、肝纤维化指标,升高NOS、SOD、GSHST、脂联素含量,降低炎症因子、TLR-4水平。结论:中药肝脂宁可以调整脂代谢紊乱,提示其具有保肝降酶、抗肝纤维化,抗氧应激和脂质过氧化反应的作用。     

荔枝核提取物对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织巨噬细胞移动抑制因子表达的影响

目的：观察荔枝核提取物对实验性非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠的防护作用,以及对肝组织巨噬细胞移动抑制因子（MIF）表达的影响。方法：35只Wistar大鼠随机分为对照组（5只）、模型组（10只）、低剂量（10只）和高剂量荔枝核提取物组（10只）。除对照组外,其余各组均以脂肪乳剂（添加脂肪肝诱导药物丙基硫氧嘧啶）灌胃,另外低、高剂量荔枝核提取物组大鼠以荔枝核提取物溶液（250mg/kg、500mg/kg）灌胃。第6周末处死全部大鼠,进行肝脏组织学和免疫组化检测,对MIF的表达进行评分,并测定血清Glucose、ALT、AST、TG、TC、HDL和LDL水平。结果：与模型组大鼠相比,荔枝核提取物组大鼠可见肝脏脂肪变性、炎症和坏死改善,肝组织MIF表达及血清Glucose、ALT、TG和LDL水平显著降低（P〈0.01、P〈0.05）,血清HDL水平增高（P〈0.05）,且高剂量组Glucose、ALT、TG和LDL的降低显著优于低剂量组（P〈0.05）。结论：荔枝核提取物可改善NASH大鼠肝脏脂肪变性、炎症、坏死和血糖、血脂代谢以及肝功能损害,并能降低肝脏MIF的表达。     

二甲双胍对非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型肝组织肿瘤坏死因子-α表达影响

目的探讨二甲双胍对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的治疗作用和机制。方法36只雄性Wistar大鼠分为正常对照组(8只),喂养基础饲料,NASH组(28只),通过喂饲高脂饲料建立NASH大鼠模型,12w末处死NASH组4只,病理证实造模成功后,进一步将NASH组随机分为二甲双胍组、饮食治疗组和模型对照组(每组各8只)。二甲双胍组给予二甲双胍156mg·kg-1·d-1,饮食治疗组和模型对照组均给予等容积生理盐水灌胃,除模型对照组外,其余各组均转以基础饲料喂养,继续饲养12w后,空腹处死所有动物。分别检测各组大鼠肝功能、血糖、血脂、胰岛素和TNF-α水平,肝组织病理切片检查炎症坏死程度,RT-PCR检测组织TNF-αmRNA的表达。结果模型对照组大鼠肝组织表现为不同程度的脂肪变性、炎症坏死和纤维化,肝功能、血脂及胰岛素抵抗指数等各项指标均较正常组显著增高。二甲双胍能显著降低肝组织中TNF-αmRNA表达,明显改善肝组织脂肪变性、炎症坏死程度及各项血清学指标,饮食治疗组TNF-αmRNA的表达亦降低,肝组织学一定程度改善,但各项血清学指标仍持续增高。结论TNF-α表达增强参与了NASH的发生发展,应用二甲双胍可以抑制肝脏TNF-α基因的表达,调节肝脏脂肪代谢和改善肝组织炎症坏死。     

替米沙坦对大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化的影响

目的研究替米沙坦对高脂饮食非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝纤维化的预防和保护作用。方法 35只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)、模型组(FC,n=15)和替米沙坦干预组(FT,n=10)。FC和FT组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎,其中FT组于高脂喂养12周后,给予替米沙坦(5mg·kg-1.d-1)灌胃治疗4周。16周末处死所有动物。检测血清ALT、AST、TC、TG和HDL-C,RT-PCR法检测肝组织TIMP-1、MMP-2和TGF-β1mRNA的表达,病理切片检查和α-SMA免疫组织化学染色观察组织学改变。结果与FC组比较,FT组大鼠ALT降低,TIMP-1、MMP-2和TGF-β1mRNA的表达降低,肝星状细胞活化减少,肝脏病理学改善。结论替米沙坦对NASH大鼠有保护和抗肝纤维化的作用。     

抵抗素mRNA在非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织中的表达与定位

目的观察高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝组织抵抗素mRNA的表达与定位，探讨其在NASH发病中的作用。方法16只雄性Wistar大鼠被随机分为普通饲料和高脂饲料喂养组，连续18周后处死各组大鼠，测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、游离脂肪酸（FFA）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、空腹血糖（FBS）和空腹胰岛素（FINS），并计算胰岛素敏感指数（ISI），观察肝脏组织病理变化和炎症活动度计分；应用原位杂交和半定量RT—PCR技术检测各组大鼠肝脏组织抵抗素mRNA的表达及定位。结果模型组肝组织抵抗素mRNA表达较正常组显著性升高，其阳性颗粒主要分布于小叶内及汇管区炎细胞浸润区的巨噬细胞胞浆中。模型组肝组织抵抗素和血清TNF-α水平、肝脏炎症活动度计分成显著性正相关（r=0．873，0．892，P〈0．01），但与ISI无相关。结论NASH模型大鼠肝脏抵抗素定位于小叶内及汇管区炎细胞浸润区的巨噬细胞胞浆中，参与NASH的炎症发病机制。     

亚低温对急性肺损伤大鼠NF-κB、TNF-α影响的研究

目的探讨亚低温对内毒素（LPS）致急性肺损伤大鼠的保护作用及可能机制。方法雄性SD大鼠48只,按随机数字表法分为常温内毒素组（A组,n=12）、亚低温内毒素组（B组,n=12）、常温空白对照组（C组,n=12）、亚低温空白对照组（D组,n=12）。腹腔注射内毒素制备急性肺损伤大鼠模型,观察不同时间段各组大鼠血气变化、血清NF-κB、TNF-α含量变化以及处死后各组大鼠肺组织病理形态学变化和干湿重变化。结果与两组空白对照组相比,内毒素两组大鼠PCO2、肺含水量、肺血清NF-κB、TNF-α含量均明显升高（P〈0．05）,病理形态学显示肺组织中性粒细胞浸润、毛细血管充血、水肿及出血明显。与常温内毒素组相比,亚低温内毒素组大鼠肺组织病变明显减轻,各生物学指标及NF-κB、TNF-α水平也相应下降（P〈0．05）。结论亚低温能明显减少急性肺损伤大鼠血清中NF-κB、TNF-α含量,延缓了急性肺损伤的发展进程。