L-精氨酸对大隐静脉内皮细胞的保护作用

目的 评价肝素化生理盐水和自体全血保存液中加入L-精氨酸后对大隐静咏内皮细胞存活率及分泌一氧化氮功能的影响。方法 选取该院连续10例进行择期、单纯冠状动脉旁路移植术的冠心病患者为自身对照研究对象。每例均采用“不接触”技术获取大隐静脉，并切割成环形片段（共26片段）随机分入对照组（未入保存液保存）及实验组。实验组依保存液不同分为：A组（肝素化生理盐水）、B组（肝素化生理盐水＋L-精氨酸10mmol／L）、C组（肝素化自体全血）和D组（肝素化自体全血＋L-精氨酸10mmol／L）。各实验组分别室温保存30、60和120min。各组大隐静脉片段分别Ho33342、PI双染色及DAF-FMDA染色，利用激光扫描共聚焦显微镜观察各组并分别记数细胞计算存活率及计算缓激肽刺激后一氧化氮产量。结果 存活率：各实验组均随时间逐渐降低，各时间点之间及与对照组比较差异均具有显著性。C组、D组在3个时间点分别显著高于A组、B组。D组-C组在60和120min两时间点、B组-A组在120min时间点前者分别显著高于后者。一氧化氮产量：D组在30、60、120min3个时间点均显著高于B组。B、D组在60min分别显著高于A、C组。结论 肝素化自体全血保存液对大隐静脉内皮细胞的保护效果优于肝素化生理盐水保存液。保存液中加入L-精氨酸对大隐静脉内皮细胞有一定的保护效果。     

不同扩张液在冠状动脉旁路移植术中对大隐静脉内皮细胞保护的对比研究

目的:对比研究不同扩张液对大隐静脉内皮细胞保护作用,探讨其临床应用价值。方法:连续90例行冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者被随机分为三硝酸甘油-维拉帕米组(GV组,n=28)、罂粟碱组(Pap组,n=32)以及空白对照组(n=30)。常规扩张离取后的大隐静脉,各组的扩张液各不相同。测量扩张过程中扩张压力的峰值,扩张后单位面积血管内皮细胞(VEC)的死亡数目,以及扩张后单位面积VEC合成释放一氧化氮(NO)的量。结果:3组扩张液扩张后均可见大隐静脉内膜VEC的死亡,以及中膜血管平滑肌的撕裂。但是GV组扩张压力峰值和单位面积VEC死亡数目明显小于Pap组和空白对照组(P<0.05),而单位内皮合成释放NO量明显高于Pap组和空白对照组(P<0.05)。结论:大隐静脉离取后扩张是损伤血管内膜的过程,GV组扩张液能明显降低扩张大隐静脉所需的压力,并且能最大限度的保护VEC和血管内膜的完整性,在具体的临床应用上能提高大隐静脉桥的远期通畅率。     

大隐静脉分段剥脱术预防隐神经损伤的探讨

目的探讨下肢大隐静脉曲张患者行大隐静脉剥脱术后对隐神经损伤的预防。方法选取64例单纯性大隐静脉曲张患者,其中32例接受大隐静脉全段剥脱术,32例行选择性大隐静脉分段剥脱术。结果在接受全段大隐静脉剥脱术的32例患者中有12例（37.5%）术后出现隐神经损伤临床表现,即患肢小腿皮肤麻木,感觉减退,皮肤针刺样感觉,膝关节内侧不适;接受选择性分段大隐静脉剥脱的32例患者中,术后无一例出现隐神经损伤的临床表现。结论选择性大隐静脉分段剥脱与全段大隐静脉剥脱相比具有隐神经损伤小,术后并发症少等优点。     

刮取法改良人原代大隐静脉内皮细胞的提取方法

目的 改良人原代大隐静脉内皮细胞的提取方法,为冠状动脉旁路移植术后静脉移植物衰败的研究提供细胞模型。方法 传统酶消法(酶消组)和刮取法(刮取组,刮取酶消法后的大隐静脉内皮并进一步酶消)从人大隐静脉中提取内皮细胞。获得的内皮细胞在含10%胎牛血清+1%内皮细胞生长补充剂+100 U/mL青霉素+100 mg/mL链霉素的内皮细胞培养基中传代培养。倒置显微镜观察内皮细胞形态和贴壁情况;血管性血友病因子(vWF)的免疫荧光实验鉴定内皮细胞特异性抗原;CD31流式细胞计数检测内皮细胞纯度;绘制不同观测日的内皮细胞生长曲线测定内皮细胞活性。结果 显微镜下观察到两组大隐静脉内皮细胞贴壁汇合并且呈典型的鹅卵石样排列;免疫荧光实验证实培养的细胞vWF阳性表达;流式细胞计数结果显示,酶消组99.9%、刮取组89.2%的细胞阳性表达CD31;不同观测日的生长曲线结果显示,两组内皮细胞活性的主效应不显著(P=0.057)。两组内皮细胞均能够传至第7～8代。结论 在传统酶消法的基础上增加刮取再消化的步骤,能够提取出数量更多且满足实验需要的原代人大隐静脉内皮细胞。     

大隐静脉及小隐静脉标本的制作方法

制作适用的教学标本 ,是解剖学教学工作的重要环节 ,以下特介绍大隐静脉及小隐静脉标本的制作方法     

尼可地尔对大隐静脉舒张功能的保护作用

目的 探讨不同温度下尼可地尔（NCR）和罂粟碱对冠状动脉旁路移植术（CABG）大隐静脉血管内皮超极化因子（EDHF）介导血管舒张功能的影响。方法 取材于临床CABG剩余的新鲜大隐静脉。采用器官槽法分别检测用重碳酸盐缓冲液（KH），含1．2mmol/L罂杰碱的KH及加入0．1mmol/L NCR和1．2mmol/L罂粟碱溶液的KH在不同温度（37℃，27℃，20℃）有氧条件下浸泡血管环1h后，再用7μmol/L吲哚美辛(Indo)和300μmol/L N－硝基－L－精氨酸（LNNA）作用后，检测30mmol/L U46619及不同浓度A23187引发的血管收缩舒张反应。结果 大隐静脉血管遇冷收缩，收缩的程度随温度的降低而加深；不同温度下，与单纯浸泡于KH中的血管环相比，浸泡于同样温度下的罂粟碱溶液中的A23187引发的血管舒张反应明显减低，浸泡于含NCR的1．2mmol/L罂粟碱溶液血管舒张反应差异无显著性。结论 随温度的降低，大隐静脉血管张力增高，低温状态下，NCR对EDHF介导血管舒张功能仍有保护作用，罂粟碱保护作用消失，加入了NCR的罂粟碱溶液仍能舒张血管，可减少血管桥的挛缩。     

Symmetry主动脉吻合器对大隐静脉移植物的损伤

目的　观察使用Symmetry主动脉吻合器时对大隐静脉移植物内皮有无损伤。 方法　对 10例使用Symmetry主动脉吻合器行冠状动脉旁路移植术患者进行自身对照研究。在主动脉吻合器使用前和使用后 ,切取自体大隐静脉片断 ,进行Ⅷ因子免疫组化染色 ,对照血管内皮损伤情况。结果　血管内皮细胞均匀着色 ,为深褐色颗粒 ,损伤处褐色颗粒排列中断。吻合器组内皮损伤处平均为 2 .5 5处 ,对照组为 2 .0处。结论　Symmetry主动脉吻合器对静脉内皮细胞无明显的机械损伤     

国人成人大隐静脉应用解剖观察

作者对100例成尸大隐静脉的长度,外径,瓣膜的数目和形态结构进行了观测,并在临床上对10例闭塞位置高低不等的下肢TAO进行了自体大隐静脉移植术,以求为大隐静脉在临床应用上开避一个新途径。根据成尸观察结果,临床大隐静脉原位动静脉转流术必须先用导管探插和肝素生理盐水灌注,证明彻底通畅后才能与股深A或股动脉吻合。吻合后在内踝前方看到动脉搏动即说明成功。     

大隐静脉剥脱术式的改进

1990年3月至1993年11月，我们对大隐静脉剥脱术的器械，手术程序和切口等作了一些改进，施术39例，共计48条肢体，效果满意，报告如下：临床资料一、一般资料：本组男34例、女5例；年龄23～68岁，平均42.5岁。病程最短2年，最长38年，平均11.3年。全部病例均有典型大隐静脉曲张表现；11条肢体有交通枝瓣膜功能不全；5条肢体伴小隐静脉曲张。48条肢体深静脉系统均通畅。     

大隐静脉移植在断肢再植中的应用

目的探讨大隐静脉移植在断肢再植中的应用。方法在断肢再植中应用健侧大隐静脉移植修复动、静脉缺损25例，移植长度为8～40cm。结果恢复血运时间为4～6h，25例断肢全部成活，血运良好．部分功能恢复。结论大隐静脉移植是修复血管缺损的首选方法，在断肢再植中起着重要作用，治疗中应注意功能恢复问题。     

内窥镜与常规切开法采集大隐静脉的组织学比较

目的：对比内窥镜和常规切开两种方法采集的大隐静脉组织学变化。方法：选取2010年1月～2011年1月于我院行冠状动脉旁路移植术患者110例,分为内窥镜静脉采集组（EVH组,48例）和常规切开静脉采集组（CVH组,62例）,比较两种静脉采集方法的切口局部并发症情况,光镜下观察静脉管壁的结构完整性,应用扫描电镜观察静脉内膜,评估内膜损伤情况。结果：两组患者切口并发症的发生率差异有统计学意义（P〈0．05）,EVH组患者切口并发症发生率明显低于CVH组（P〈0．05）,光镜和扫描电镜观察两种方法采集的血管组织学差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：EVH组对静脉壁的损伤情况与CVH组相似,但能够明显减少患者伤口并发症的发生率。     

内窥镜取大隐静脉技术应用于不同静脉管径下的对比性分析

目的   对比分析应用内窥镜取大隐静脉技术（ESVH）时静脉管径差异对手术进程及血管条件所造成的影响。方法   选取2011至2012年于我院进行的内窥镜取大隐静脉管径(SV)病例80例,根据术前超声测量的SV管径差异将病例分为A组（管径<3mm,19例）与B组（管径≥3mm,61例）,记录内窥镜手术所用时间及单纯采集静脉时间,及血管分支数、结扎分支数、修补分支数、桥血管长度等血管条件指标。术后光镜下观察两组静脉内膜结构,扫描电镜观察静脉内膜损伤,TUNEL法检测两组细胞近期凋亡。结果   小静脉管径组有更多的分支（A：12.9±3.2;B：6.3±4.1,P<0.05）,冠状动脉搭桥所用桥血管长度、各组修补所占比率差异无统计学意义（P>0.05）,两组内窥镜取SV耗时差异有统计学意义［A：（59.5±12.8）min;B：（41.9±15.4）min, P<0.05］,而其单纯静脉采集时间无差异（P>0.05）, 光镜和扫描电镜观察检测血管组织学差异,血管损伤组织学差异更显著（P<0.05）,TUNEL凋亡检测示近期血管凋亡水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论   与大管径SV相比,管径<3mm的SV应用ESVH需要更长的手术时间,同时对血管也造成相应的损伤, 其采集更适合应用传统开放手术。     

内镜大隐静脉获取术学习曲线研究

目的 研究初学者学习内镜大隐静脉获取术(EVH)的可行性及学习曲线.方法 选自2008年1月至2010年2月行择期冠状动脉旁路移植术的患者120例行内镜大隐静脉获取术,按手术时间分为6组,各20例患者.比较获取时间、静脉长度、手术结果等情况.结果 本研究长度-时间指数由G1组的0.41±0.08显著提高到G6组的0.85±0,03,这一变化也就代表了微创内镜大隐静脉获取术(EVH)的学习曲线.下肢伤口并发症的发生率及切口数随着手术例数的积累呈下降趋势,静脉修补个数无差异和组织学评估结果均证实所获取的静脉质量可靠.结论 EVH作为一种新兴技术有着广泛的应用前景,经80～100例的学习之后即可熟练掌握,满足临床实践的需要.     

磷酸腺苷激活的蛋白激酶对抵抗素诱导内皮细胞凋亡的保护作用研究

目的 研究抵抗素对内皮细胞功能的影响和磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)在抵抗素影响内皮功能中的作用.方法 原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),不同浓度人抵抗素(0、50和100ng/mL)培养24 h.TUNEL和Annexin V-FITC分别检测其对内皮细胞凋亡的影响,H2DCFDA染色检测细胞内活性氧簇(ROS)生成,Western-blot检测内皮细胞AMPK-α(Thr172)磷酸化水平.抵抗素干预后,采用AMPK激动剂AICAR干预观察AMPK在抵抗素影响内皮细胞中的作用.结果 抵抗素干预内皮细胞并不能增加其凋亡和ROS生成,但可抑制内皮细胞AMPK的磷酸化激活,且AMPK的激活能够抑制抵抗素作用的内皮细胞凋亡和ROS生成. 结论抵抗素对内皮细胞的作用机制中AMPK可能占重要地位,抵抗素可抑制内皮AMPK磷酸化.而AICAR激活AMPK后对内皮细胞损伤起保护作用.     

大蒜素对高半胱氨酸所致内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究大蒜素对高半胱氨酸所致内皮细胞损伤的保护作用。方法：将培养的内皮细胞分成高半胱氨酸组（模型对照组）、大蒜素大剂量组、大蒜素中剂量组、大蒜素小剂量组、空白对照组5组,分别加不同的培养液,并于加药后的12、24、36?h取出上清液测乳酸脱氢酶（LDH）;另外采用MTT比色法观察细胞的存活率。结果：大蒜素小、中剂量组显示出对内皮细胞的保护作用：大蒜素小、中剂量组与模型对照组比较均能明显降低LDH含量（P＜0.05）;大蒜素大剂量组在36?h拮抗Hcy损害作用降低,跟模型对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。这一结果跟MTT测试结果吻合：小、中剂量的大蒜素组光吸收值A较模型对照组明显升高（P＜0.01）,大蒜素大剂量组A值跟模型对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：大蒜素小、中剂量可明显降低高半胱氨酸对内皮细胞的损伤,有效防治高半胱氨酸血症。     

川芎嗪对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞高通透性的保护作用研究

目的:观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)通透性变化和细胞骨架相关蛋白表达影响.方法:以体外培养的HUVECs为实验对象,将...     

内窥镜获取大隐静脉在冠状动脉旁路移植术中的中期效果分析

目的探讨内窥镜获取大隐静脉在冠状动脉旁路移植术中的中期临床效果。方法选取2012年7月~2013年4月在郑州大 学第一附属医院心外科接受不停跳冠状动脉旁路移植术的205例患者为研究对象。内窥镜获取大隐静脉（EVH）66例为研究 组,男性35例,女性31例,年龄60.30±7.92岁,体质量69.77±10.66 kg;同期行开放获取大隐静脉（OVH）的139例为对照组,男性 109例,女性30例,年龄59.20±8.37 岁,体质量71.16±9.91 kg。结果205例患者均顺利完成手术。EVH组围术期死亡2例,死亡 率为3.03%;OVH组死亡5例,死亡率为3.60%,两组围术期死亡率差异无统计学意义（P=1.00）。OVH组围术期发生急性心梗3 例,发生率为2.16%,EVH组1例,发生率1.52%,亦无统计学差异;低心排综合征OVH组4例（2.88%）,EVH组2例（3.03%）,无 统计学差异。术后随访OVH组有8 例再发心绞痛,发生率为8.80%;EVH组5 例,发生率为8.06%,差异无统计学意义（P= 0.93）。两组患者随访期间均无再发心梗;2年静脉桥血管通畅率,OVH组为83.59%,EVH组为82.22%,差异也无统计学意义 （P=0.73）。结论EVH在减低术后下肢伤口并发症上具有明显的优势,中期通畅率同常规手术组无统计学差异,而远期临床效 果仍需进一步临床随访研究。     

内窥镜下大隐静脉采集术在冠状动脉搭桥术中的应用

目的:探讨在冠状动脉搭桥术(CABG)中应用内窥镜小切口采集大隐静脉(SVG)的微创技术和早期临床效果。方法:对26例行冠状动脉搭桥术(CABG)患者,应用内窥镜采集大隐静脉术(endoscopic vein harvesting,EVH)。观察手术情况及术后切口并发症发生率。结果:平均采集时间为(35.6±11.8)min,全组大隐静脉无损伤,术后无下肢切口感染、裂开、液化、疼痛,术后早期下肢的水肿不明显,平均卧床2d,术后平均住院天数6d。结论:内窥镜辅助下微创大隐静脉采集术创伤小,能明显减少术后下肢切口相关并发症。     

川芎嗪对脂多糖诱导的内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)RhoA、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil forming protein kinase,ROCK2)、肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)磷酸化及细胞骨架连接蛋白(ezrin-radxin-moesin,ERM)磷酸化水平的影响。方法:以体外培养的HUVEC为实验对象,分为对照组、LPS组和TMP组(0.5、1.0、1.5 mg/mL),荧光定量PCR测定内皮细胞RhoA、ROCK2和信使RNA(p-Ezr mRNA)的表达,Western blot法测定内皮细胞RhoA、ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白水平的表达。结果:与对照组比较,LPS组RhoA、ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白及RhoA、ROCK2和p-Ezr mRNA表达均显著升高(P<0.01);与LPS组比较,TMP 3组RhoA蛋白表达与mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05),ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白及ROCK2、p-Ezr mRNA表达均降低(P<0.05~P<0.01),且TMP 3组之间ROCK2、p-MLC和p-ERM的分子表达差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。结论:TMP对LPS诱导的HUVEC损伤的保护作用可能是通过抑制Rho/ROCK信号通路中ROCK2、p-MLC和p-ERM的表达,以减弱LPS对内皮细胞骨架的损伤。