酸浆化学成分的研究

目的 研究酸浆Physalis alkekengi var.franchetii的活性成分.方法 酸浆的宿萼经乙醇渗漉提取,提取物经硅胶、Sephadex LH-20色谱分离,并通过理化常数和波谱学方法鉴定化合物结构.结果 分离鉴定了11个化合物,分别为β-谷甾醇(I)、酸浆苦素A(Ⅱ)、酸浆苦素B(Ⅲ)、酸浆苦素O(Ⅳ)、酸浆苦素L(V)、酸浆苦素M(VI)、胡萝卜苷(Ⅶ)、商陆素(Ⅷ)、5,4',5'-三羟基-7,3'-二甲氧基黄酮醇(Ⅸ)、木犀草素(X)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅺ).结论 化合物Ⅸ为新化合物,命名为酸浆黄酮醇(physaflavonol).     

锦灯笼中酸浆苦素类化学成分的研究

目的 研究锦灯笼95％乙醇提取物的石油醚、氯仿、醋酸乙酯萃取部位中化学成分.方法 利用硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、制备液相色谱等方法进行分离、纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构.结果 分离得到了7个化合物,经结构鉴定分别为酸浆苦素A(1)、酸浆苦素D(2)、酸浆苦素L(3)、酸浆苦素O(4)、木犀草素(5)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)和胡萝卜苷(7).结论 共分离得到7个化合物,并对酸浆苦素类化合物1～4进行了较为详细的解析和更为全面的NMR归属.     

小酸浆中甾体类化学成分研究

目的研究小酸浆Physalis minima全草中甾体类化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、中压ODS柱色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,根据理化常数和核磁共振谱、质谱等光谱数据鉴定化合物结构。结果从小酸浆全草的乙醇提取物中分离得到7个甾体类化学成分,其中酸浆苦素类化合物2个,分别鉴定为16,24-cyclo-13,14-secoergost-2-ene-18,26-dioicacid-14:17,14:27-diepoxy-5α,6β,13α,20α,22β,25β-hexahydroxy-1,15-dioxo-γ-lactone-δ-lactone(1)、酸浆苦素D(2);醉茄内酯类化合物5个,分别鉴定为physagulin L(3)、physagulin M(4)、physaminimin F(5)、physagulin K(6)、withagulatin A(7)。结论化合物1为新化合物,命名为25-羟基酸浆苦素D;化合物3、4、7为首次从该植物中分离得到。     

苦蘵的化学成分及其细胞毒活性研究

目的对酸浆属植物苦蘵Physalis angulata的全草进行化学成分及肿瘤细胞毒活性研究。方法运用硅胶、Sephadex LH-20凝胶等柱色谱和HPLC等方法,并结合液质联用分析技术,采用活性跟踪的方法从苦蘵全草中分离细胞毒活性成分。根据理化常数测定和各种谱学(1D和2D NMR、MS)数据分析等鉴定化合物结构,MTT法测定化合物的细胞毒活性。结果从苦蘵全草的95%乙醇水提取物中共分离得到12个化合物,分别鉴定为酸浆苦素A(1)、酸浆苦素B(2)、酸浆苦素C(3)、酸浆苦素D(4)、酸浆苦素F(5)、酸浆苦素H(6)、酸浆苦素I(7)、5α-乙氧基-6β-羟基-5,6-二氢酸浆苦素B(8)、酸浆苦素O(9)、β-谷甾醇(10)、2-羧基苯胺羰酸甲酯(11)、2-(乙酰胺基)-苯甲酸(12)。结论化合物11为新天然产物,化合物1~3、9为首次从苦蘵中分得,化合物1~9为酸浆苦素类(physalins)甾体化合物。细胞毒活性实验结果显示,化合物1~9对肺癌细胞株A549均具有较强的增殖抑制活性,其中以2、3、6、8的抑制活性最为显著,其IC50值为1.9~20.2μmol/L。     

酸浆化学成分研究(Ⅱ)

目的研究酸浆Physalis alkekengivar.franchetii宿萼内活性成分。方法采用硅胶、凝胶、高效液相等色谱技术分离,利用理化性质和核磁共振光谱、MS等技术鉴定结构。结果分离得到4个化合物,分别为反式咖啡酸乙酯(1)、25,27-二脱氢酸浆苦素L(2)、酸浆苦素D(3)、大血藤苷E(cuneataside E,4)。结论化合物2为新的天然产物,化合物4为首次从该植物中分离得到。     

锦灯笼化学成分的研究(Ⅱ)

前文[1]曾报道从通化产茄科植物锦灯笼Physalis alkekengi L.var.francheti(Mast.)Makino中分离鉴定了4种化合物即酸浆苦素A,B,R及豆甾醇,我们又对前文的氯仿萃取部分及正丁醇部分进行硅胶柱层析,分离得到了3个化合物,分别鉴定为酸浆苦素L(Ⅰ)、M(Ⅱ)及阿魏酸(Ⅲ).其中阿魏酸为首次从该植物中分得.     

HPLC法同时测定锦灯笼果实中5种成分及等级鉴定

目的建立HPLC同时定量测定锦灯笼果实中木犀草苷、木犀草素、酸浆苦素A、酸浆苦素P和酸浆苦素O的方法并选择分级标准的测试成分。方法利用Agilent TC-18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离,乙腈-0.2%磷酸进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,切换波长,0～24 min(350 nm),24～37 min(220 nm)。结果木犀草苷、木犀草素、酸浆苦素A、酸浆苦素P、酸浆苦素O分别在0.052～0.26μg/mL(r=0.999 5),0.04～0.2μg/mL(r=0.999 5),0.048～0.24μg/mL(r=0.999 6),0.04～0.2μg/mL(r=0.999 7),和0.36～1.8μg/mL(r=0.999 7)范围内线性关系良好,平均回收率大于98%。结论由于木犀草素、酸浆苦素P和O含有量过低,故以木犀草苷和酸浆苦素A为分级标准的测试成分是合理的。     

锦灯笼宿萼中甾体类化学成分与抗炎活性

目的 研究锦灯笼Physalis alkekengi var. franchetii宿萼95%乙醇提取物的化学成分与抗炎活性评价。方法 采用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱、HPLC制备等方法进行分离、纯化,通过波谱技术对化合物结构进行鉴定,采用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的RAW264.7小鼠单核巨噬细胞体外炎症模型进行抗炎活性评价。结果 分离得到14个化合物,分别鉴定为7β-ethoxy-25,27-dihydro-3,6-didehydroisophysalin M（1）、异酸浆苦素B（2）、4,7-didehydroneophysalin B（3）、酸浆苦素B（4）、25,27-dihydro-4,7-dedehydro-7-deoxyneophysalin A（5）、酸浆苦素E（6）、酸浆苦素L（7）、酸浆苦素O（8）、酸浆苦素D（9）、ergosta-4,24(28)-diene-3-one（10）、24-ethylcholesta-4,24(28)-dien-3-one（11）、sitosterone（12）、gramisterol（13）、柠黄醇（14）;在抗炎活性评价实验中,化合物2～6、8～9对NO生成具有抑制作用。结论 化合物1为新化合物,命名为酸浆苦素M1;化合物10～12、14均为首次从该属植物中分离得到;此外,化合物6对NO具有显著抑制作用,半数抑制浓度（median inhibition concentration,IC₅₀）值为 15.07 μmol/L,与阳性L-NMMA（IC₅₀＝36.11 μmol/L）相比具有较好的抗炎活性。     

苦皮藤根皮的化学成分

目的:研究苦皮藤根皮醇提物的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱和高效液相分离纯化,通过NMR鉴定化合物的结构。结果:分离并鉴定了11个化合物,分别为celahin B(1),celastrine A(2),celahin D(3),苦皮素E(4),苦皮素A(5),celangulatin C(6),苦皮藤素XIX(7),苦皮素P(8),苦皮素H(9),苦皮藤素III(10),苦皮素J(11)。结论:化合物1～3为首次从苦皮藤中分离得到。     

反相高效液相色谱分离和分析酸浆苦素

酸浆苦素是新的一类具有13,14-闭联-16,24-环-甾族化合物结构的天然产物。含有亚甲基内酯系统的许多倍半萜烯内酯可能有抗癌作用。这些化合物结构相似,难以分离。本文介绍用高效液体色谱法(HPLC)成功地分离了六个酸浆苦素类化合物[酸浆若素A(Ⅰ),B(Ⅱ)B-环氧化合物(Ⅲ)DL-5,6-二羟酸浆苦素B(Ⅳ),E(Ⅴ)和H(Ⅵ)]     

Physalin F from Physalis minima L. triggers apoptosis-based cytotoxic mechanism in T-47D cells through the activation caspase-3- and c-myc-dependent pathways

Ethnopharmacological relevance

Physalin F (a secosteroid derivative), is well recognized as a potent anticancer compound from Physalis minima L., a plant that is traditionally used to treat cancer. However, the exact molecular anticancer mechanism remains to be elucidated.

Aim of the study

We have recently reported the apoptosis-based cytotoxic effect of the chloroform extract of this plant. Here, we investigated the cytotoxicity and possible cell death mechanism elicited by the active constituent, physalin F on human breast T-47D carcinoma.

Materials and methods

Cytotoxic-guided fractionation of the chloroform extract of Physalis minima has led to the isolation of physalin F. The cytotoxicity activity was assayed using MTS assay. The effect of the compound to induce apoptosis was determined by biochemical and morphological observations through DeadEnd Colorimetric and annexin V assays, respectively, and RT-PCR analysis of mRNA expression of the apoptotic-associated genes.

Results

Cytotoxicity screening of physalin F displayed a remarkable dose-dependant inhibitory effect on T-47D cells with lower EC₅₀ value (3.60 μg/ml) than the crude extract. mRNA expression analysis revealed the co-regulation of c-myc- and caspase-3-apoptotic genes in the treated cells with the peak expression at 9 and 12 h of treatment, respectively. This apoptotic mechanism is reconfirmed by DNA fragmentation and phosphatidylserine externalization.

Conclusion

These findings indicate that physalin F may potentially act as a chemopreventive and/or chemotherapeutic agent by triggering apoptosis mechanism via the activation of caspase-3 and c-myc pathways in T-47D cells.     

酸浆化学成分及抗胃溃疡活性研究＊

目的 明确酸浆中哪些成分具有抗胃溃疡活性。方法 本课题组对酸浆乙酸乙酯萃取部位进行系统化学成分分离。酸浆乙酸乙酯部位在大孔吸附树脂富集后经过反复硅胶柱色谱进行分离，再根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。采用乙醇诱导胃溃疡模型测定粗分片段和目标化合物抗胃溃疡活性。结果 从酸浆活性部位分离获得30个化合物，化合物3、4、12、24和30为首次从酸浆中分离得到。9组粗分片段中，Fr G、Fr K和Fr OPQR三组表现出显著的抗胃溃疡活性（P<0.05，P<0.01），抑制率分别为55.3%、74.5%和93.8%，与之相比较，法莫替丁组的抑制率为89.3%；灌胃剂量为6.25、12.5和25 mg·kg^-1时，酸浆苦味素B的抑制率分别为27.8%、67.3%和74.6%；灌胃剂量为10、20和40 mg·kg^-1时，木犀草苷的抑制率分别为29.7%、45.6%和64.2%。结论 酸浆苦味素B和木犀草苷可能是酸浆抗胃溃疡活性的主要成分。     

Physalin A induces apoptosis via p53-Noxa-mediated ROS generation,and autophagy plays a protective role against apoptosis through p38-NF-κB survival pathway in A375-S2 cells

Ethnopharmacological relevance

Physalin A is a bioactive withanolide isolated from natural plant Physalis alkekengi L. var. franchetii (Mast.) Makino, a traditional Chinese herbal medicine named Jindenglong which has long been used for the treatment of cough, sore throat, hepatitis, eczema, dysuria and tumors in China.

Aim of the study

Based on the previous study that physalin A induced cytotoxic effect in human melanoma A375-S2 cells, this study was designed to further illustrate the molecular mechanisms underlying.

Materials and methods

Cell viability was evaluated in A375-S2 cells by MTT assay, and the mechanisms involved in physalin A-induced A375-S2 cell death were investigated by phase contrast microscopy and fluorescence microscopy, siRNA transfection, flow cytometry and western blot analysis.

Results

We demonstrated that physalin A decreased the proportion of viable A375-S2 cells in a time- and dose-dependent manner, and exposure of A375-S2 cells to physalin A led to both apoptosis and autophagy. Moreover, physalin A-induced apoptosis was triggered by activation of p53-Noxa pathway and intracellular reactive oxygen species (ROS) generation. The administration of ROS scavengers NAC and GSH resulted in the complete inhibition of physalin A-induced ROS generation and apoptosis. Application of p53 inhibitor PFT-α or transfection with Noxa-siRNA could also lead to the same results. Autophagy, demonstrated by the punctuate distribution of monodansylcadaverine staining, as well as the change of LC3-II/LC3-I proportion and Beclin 1 activation, played a protective role against apoptosis via up-regulation of the p38-NF-κB survival pathway in A375-S2 cells. Additionally, inhibition of autophagy by the specific autophagic inhibitor 3MA or blocking the p38-NF-κB pathway with p38 inhibitor SB203580 or NF-κB inhibitor PDTC obviously promoted physalin A-induced apoptosis.

Conclusions

Physalin A induced apoptotic cell death via p53-Noxa-mediated ROS generation, and autophagy played a protective role against apoptosis through up-regulating the p38-NF-κB survival pathway in A375-S2 cells. These results stated the possibility that physalin A would be a potential agent for the treatment of melanoma in the future.     

肩痛散通电加热外敷治疗实验性兔肩关节周围炎的相关生物化学指标观察

作者以肩痛散通电加热外敷治疗实验性兔肩周炎，并测定了模兔患肩肌腱组织中的羟脯氨酸、ＤＮＡ和蛋白质，结果治疗组三种测定指标含量在治疗各时相均与健侧无明显差异。     

慢性胃脘痛证型与胃电图,幽门螺杆菌感染的关系

对９６例慢性胃脘痛患者证型与胃电图的关系进行研究，结果表明：脾胃虚寒证组的胃电幅值在餐前，餐后均低于正常人组和其它三个实证组（Ｐ〈０．０５），而三个实证组与正常人组间两两比较，胃电幅值和频率餐前，餐后无明显差异（Ｐ〈０．０５），同时对３７例作了幽门螺杆菌检查的病例进行研究，发现：慢性萎缩性胃炎餐前波幅下降，明显低于其它三组和正常人（Ｐ〈０．０５）。而慢性浅表性胃炎，消化性溃疡，十二指肠球炎和正常     

天麻不同变异类型药材中天麻素含量比较

目的比较四种天麻不同变异类型药材中天麻素的含量。方法高效液相色谱法。结果四种天麻不同变异类型中天麻素的平均含量分别为:乌天麻1.440%,绿天麻1.697%,黄天麻0.904%,红天麻1.519%。结论以乌天麻和绿天麻作为重点保护和种植品种。     

海螵蛸接骨动物实验的组织学研究

本文采用化学方法处理后的海螵蛸作为接骨材料，在８６只家兔身上行实验研究，并与同种异体家兔骨相比较，术后行一般情况及组织学检查，海螵蛸植入动物体内，周围组织不引起炎症、毒性及免疫反应，从节段缺损、空洞缺损的修复情况看，处理后的海螵蛸与兔骨在成骨方面无明显差异，检查结果表明海螵蛸具有良好的组织相容性以及良好的成骨支架作用。     

盐锁阳与锁阳对小鼠睾丸、附睾和包皮腺组织学的比较研究

盐锁阳可使正常和阳虚模型小鼠睾丸曲细精管初级精母细胞分裂活跃，间质细胞及其胞核体积明显增大；附睾管扩张，管腔增大；包皮腺成熟细胞数量增多。锁阳的作用则相反。揭示盐销阳对睾丸、附睾及包皮腺的功能有显著促进作用，而锁阳则有一定抑制作用。     

喜树硷抑制兔结膜成纤维细胞的实验研究

用兔眼球结膜体外细胞培养和活体兔结膜下埋线并分别用喜树硷和５－氟脲嘧啶对埋线周围成纤维细胞的增殖进行抑制实验。结果证明，喜树硷无论在体内还是在体外，实验组与空白对照组相比，均有显著的抑制成纤维细胞增生的作用（Ｐ〈０．０１），体内实验组与５－氟脲嘧啶组相比，效果差异无显著性，但喜树硷所致的局部组织反应较５－氟脲嘧啶组轻，且对眼组织无毒副作用。