基于TWEAK/Fn14信号通路探讨大黄酚对OVA诱导哮喘小鼠的保护作用

[目的] 观察大黄酚对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘小鼠模型的保护作用,并探讨肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子（TWEAK）/成纤维细胞生长诱导因子14（Fn14）信号通路与其保护作用的关系。[方法] 60只C57BL/6小鼠按体质量随机分为正常对照组（CON组）、模型组（OVA组）、地塞米松阳性对照组（DEX组）、大黄酚低剂量组（RHU-L组）、大黄酚中剂量组（RHU-M组）和大黄酚高剂量组（RHU-H组）,每组10只。实验结束后,对各组小鼠的哮喘症状进行评分;Diff-Quick染色法计量各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数。苏木精-伊红（HE）染色法观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附法检测各组小鼠BALF中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量;免疫组化法检测各组小鼠肺组织中TWEAK蛋白的表达水平。蛋白免疫印迹法检测各组小鼠肺组织TWEAK/Fn14信号通路蛋白TWEAK和Fn14的表达水平。[结果] 大黄酚可明显降低哮喘症状评分（P<0.05）,减少哮喘小鼠BALF中总细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量（P<0.05）,改善肺组织的病理学变化,降低BALF中IL-4、IL-5、TNF-α和IL-1β炎症因子的水平（P<0.05）,减少肺组织中TWEAK和Fn14蛋白表达（P<0.05）。[结论] 大黄酚对OVA致哮喘小鼠模型具有较好的保护作用,其可能与调节TWEAK/Fn14信号通路有关。     

胰激肽原酶对他克莫司诱导肾损伤的保护作用

目的 观察鱼藤素对幼鼠过敏性哮喘的抑制作用,并探究其作用机制。方法 将50只4周龄SPF 级BALB/c小鼠随机分为5组：正常组、模型组、甲强龙组、鱼藤素高剂量组、鱼藤素低剂量组,每组各10只。除正常组外,其余各组小鼠均通过卵清蛋白（OVA）致敏和激发建立过敏性哮喘模型。造模第21天开始给药,雾化前1 h,鱼藤素高剂量组和鱼藤素低剂量组小鼠分别腹腔注射给予4 mg/kg和2 mg/kg的鱼藤素,甲强龙组小鼠腹腔注射10 mg/kg的甲强龙注射液,正常组和模型组小鼠腹腔注射等量生理盐水,每天1次,连续3 d。收集小鼠血浆和支气管肺泡灌洗液（BALF）,ELISA试剂盒检测血浆总IgE和BALF中IL-1β、IL-13水平,并对BALF中炎性细胞分类计数。HE染色观察肺组织病理变化,qRT-PCR检测肺组织IL-1β、IL-13 mRNA水平,Western blot检测肺组织p-NF-κB p65、p-IκBα、p-p38 MAPK、p-ERK1/2、p-JNK蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠血浆IgE水平和BALF中IL-1β、IL-13含量和mRNA表达水平均显著升高,BALF炎性细胞总数、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数量均高于正常组（P＜0.05）;与模型组比较,高剂量和低剂量鱼藤素组小鼠血浆IgE水平和BALF中IL-1β、IL-13含量和mRNA表达降低,BALF炎性细胞总数、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数量均减少（P＜0.05）;鱼藤素高剂量组BALF炎性细胞计数与甲强龙组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。HE染色结果显示,正常组小鼠肺组织基本无炎性细胞浸润;与正常组比较,模型组小鼠肺组织炎性细胞浸润明显,肺泡壁异常增厚;与模型组比较,鱼藤素高、低剂量组小鼠气道血管周围的炎症细胞浸润和肺泡壁水肿增厚情况减轻。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组p-NF-κB p65、p-IκBα、p-p38 MAPK、p-ERK1/2、p-JNK蛋白表达水平升高（P＜0.05）;与模型组比较,高剂量和低剂量鱼藤素组p-NF-κB p65、p-IκBα、p-p38 MAPK、p-ERK1/2、p-JNK蛋白表达降低（P＜0.05）;鱼藤素高剂量组p-NF-κB p65、p-IκBα、p-p38 MAPK、p-ERK1/2、p-JNK蛋白表达水平与甲强龙组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 鱼藤素对幼鼠过敏性哮喘具有改善作用,其作用机制与抑制NF-κB/MAPK信号通路的活化有关。     

木犀草素通过调控HMGB1改善脓毒症小鼠模型的认知功能障碍

[目的] 探究木犀草素通过调控高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对脓毒症性脑病（SAE）小鼠模型认知功能障碍的影响。[方法] 将小鼠随机分为6组：假手术组,模型组,木犀草素低、中、高剂量组和地塞米松组。通过盲肠结扎和穿刺诱导小鼠脓毒症。旷场实验和Morris水迷宫检测小鼠活动探索及学习认知能力;苏木精-伊红（HE）染色检测脑组织损伤;原位末端标记技术（TUNEL）染色检测神经细胞凋亡;酶联免疫吸附（ELISA）法检测白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）含量;蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测HMGB1蛋白表达水平。[结果] 与模型组比较,木犀草素中、高剂量组和地塞米松组小鼠存活率升高（P<0.05）,总行驶距离和中央区域停留时间增加（P<0.05）,逃避潜伏期时间缩短（P<0.05）,目标象限时间、穿越区域次数提高（P<0.05）,海马区组织病理损伤程度减轻,神经细胞凋亡率降低（P<0.05）,IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低（P<0.05）,SOD、GSH含量升高（P<0.05）,MDA含量降低（P<0.05）,HMGB1蛋白水平降低（P<0.05）。加入HMGB1抑制剂甘草酸后能够部分逆转木犀草素对SAE小鼠模型认知障碍、炎症水平、神经细胞凋亡和氧化应激的影响。[结论] 木犀草素可以通过调控HMGB1改善SAE小鼠模型的认知功能障碍。     

红参水提物对哮喘气道炎症小鼠的治疗作用及其机制研究

目的 探讨红参水提物对哮喘气道炎症小鼠模型的治疗作用及其机制。方法 选取BABL/c小鼠75只,采用随机数字表法分为正常组（等量生理盐水）、模型对照组（等量生理盐水）、低剂量组（红参水提物100mg/kg）、高剂量组（红参水提物200mg/kg）、阳性对照组（地塞米松0.5mg/kg）各15只,除正常组外均成功制作哮喘气道炎症小鼠模型,给予对应的处理措施,对比各组小鼠末次激发后24h的肺泡灌洗液（BALF）中的各种炎性细胞因子、血清免疫球蛋白E （IgE）、肺组织中羟脯氨酸含量,并采用HE染色观察各组大鼠肺组织病理变化。结果 模型对照组BALF中白细胞介素-4（IL-4）、IL-5、IL-14、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）、血清免疫球蛋白E （IgE）、肺组织羟脯氨酸均高于正常组（P<0.01）;低剂量组、高剂量组及阳性对照组的BALF中IL-4、IL-5、IL-14、TGF-β1、VEGF水平、血清IgE、肺组织羟脯氨酸均低于模型对照组（P<0.01）;高剂量组BALF中IL-4、IL-5、IL-14、TGF-β1、VEGF水平、血清IgE、肺组织羟脯氨酸均低于低剂量组（P<0.05）。结论 红参水提物主要通过减轻哮喘小鼠模型的气道炎性反应程度达到治疗作用。     

山茱萸环烯醚萜总苷对小鼠胰岛素抵抗和非酒精性肝损伤的改善作用及其机制研究

[目的]探讨山茱萸环烯醚萜总苷（ICO）对胰岛素抵抗和非酒精性肝损伤的改善作用及其作用机制。[方法]采用摄入高脂饲料的方法构建肥胖糖尿病大鼠模型,设置正常组、模型组、吡格列酮对照组和ICO低、中、高剂量组共5个实验组,给药3周,酶联免疫吸附（ELISA）方法测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、胰岛素和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）水平,蛋白免疫印迹（Western Blot）法测定肝脏组织p-P65,p-ERK1/2,p-JNK1/2,p-P38蛋白表达水平。[结果]ICO可以显著降低肥胖小鼠脂肪指数、降低血清中ALT、AST、TC、TG、LDL、HDL、胰岛素、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,改善葡萄糖耐量和胰岛素耐量,降低肝脏组织p-P65,p-ERK1/2,p-JNK1/2,p-P38蛋白表达水平。[结论]ICO可改善小鼠胰岛素敏感水平和肝损伤程度,这可能与其能够降低P65,ERK1/2,JNK1/2,P38蛋白磷酸化水平,抑制核因子-κB （NF-κB）和MAPKs信号通路激活,从而降低机体炎性水平有关。     

建立小鼠哮喘模型两种不同方法的比较

目的 比较两种小鼠哮喘模型建立方法的优缺点。方法 30只BALB/c小鼠随机正常对照组、OVA组、OVA/RSV组分为3组：采用卵白蛋白和氢氧化铝混悬液致敏,予以卵白蛋白持续雾化以及RSV多次滴鼻激发分别建立OVA组及OVA/RSV组哮喘小鼠模型,对照组采用无菌注射用水致敏和雾化激发。末次激发24h后,测定肺功能,行支气管肺泡灌洗液中细胞分类计数,HE染色观察其肺组织病理改变。结果 各模型组与对照组相比较,均有明显的哮喘症状,病理学结果显示气道壁增厚明显,管腔可见狭窄,管壁及其周围大量炎性细胞浸润,而且OVA/RSV组小鼠肺组织病理损害较OVA组明显加重。增强呼气间歇（Penh）值OVA/RSV组小鼠较OVA组小鼠明显升高（P<0.05）,其支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞计数、单核细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞计数显著高于OVA组（P<0.05）。结论 通过OVA致敏并予以RSV诱导建立哮喘小鼠模型,是一种更好地模拟人类哮喘发病机制的建模方法。     

清热利湿外治法对宫颈癌荷瘤裸鼠抗肿瘤作用与MARK信号通路的关系

[目的] 探讨清热利湿外治法对HPV（+）宫颈癌荷瘤裸鼠模型抗肿瘤作用及对ERK及P38/MAPK信号通路的影响。[方法] 建立人宫颈癌Siha细胞荷瘤裸鼠皮下移植瘤模型,裸鼠成瘤后,按随机数字表法分为5组,即顺铂组、空白对照组和清热利湿外治法高剂量（0.942 8 mg/kg）、中剂量（0.471 4 mg/kg）、低剂量组（0.235 7 g/kg）,连续用药观察28天。停药24小时后处死裸鼠,完整取出肿瘤组织,测量肿瘤体积及体质量,计算抑瘤率。将肿瘤组织切片后,HE染色法观察肿瘤的形态学变化,运用免疫组化SP的方法,检测肿瘤组织中的p-ERK及p-p38蛋白表达水平。[结果] 清热利湿外治法用药组的移植瘤体积均明显小于空白对照组（P<0.05）,高、中、低剂量组抑瘤率分别为36.23%、31.24%和14.94%;HE染色法显示清热利湿外治法用药组裸鼠的移植瘤组织出现明显坏死改变;清热利湿外治法中剂量、高剂量治疗组的p-ERK及p-p38蛋白水平明显下降,与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。[结论] 清热利湿外治法对人宫颈癌Siha细胞移植瘤的生长具有明显抑制作用;其作用机制可能与下调ERK/P38 MARK（丝裂原活化蛋白激酶）信号转导通路的磷酸化水平有关。     

青蒿琥酯抑制Wnt/β-catenin信号通路和改善大鼠哮喘模型气道炎症及气道重塑关系的研究

目的 研究Wnt/β-catenin信号通路在哮喘气道炎症和气道重塑中的作用,探讨青蒿琥酯（artesunate,ART）治疗哮喘的可能机制。方法 采用卵白蛋白（OVA）激发和雾化吸入的方式建立哮喘模型,并予以药物治疗。观察各组大鼠肺组织的病理形态改变、外周血、支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞计数;Image-Pro plus 6.0图像分析软件测量大鼠肺组织支气管壁厚度和平滑肌厚度;免疫组化法检测大鼠肺组织β-catenin和WISP-1表达情况,RT-PCR检测大鼠肺组织WISP-1表达情况,ELISA法检测血清及BALF中IL-6的表达情况。结果 ART干预哮喘组大鼠气道炎性细胞浸润、支气管壁厚度、平滑肌厚度均明显低于哮喘组大鼠,差异有统计学意义（P<0.01）;ART干预哮喘组肺组织β-catenin、WISP-1蛋白和WISP-1 mRNA的表达均明显低于哮喘组,差异有统计学意义（P<0.01）;ART干预哮喘组大鼠血清及BALF中IL-6水平表达均明显低于哮喘组,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 ART改善哮喘大鼠气道炎症及气道重塑的机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活性及下调IL-6水平有关。     

右美托咪定对脓毒症小鼠肺泡上皮细胞的保护作用

目的 探讨右美托咪定（DEX）在脓毒症小鼠肺泡上皮细胞炎性反应中的作用。方法 将雄性C57BL/6小鼠随机分为盲肠结扎穿孔（CLP）组和CLP+DEX组,每组36只。CLP组小鼠在CLP术前15 min腹腔注射1 mL无菌生理盐水,CLP+DEX组小鼠在CLP术前15 min腹腔注射50 μg/kg DEX。记录小鼠CLP术后24 h内的存活率,在CLP术后0、6、12、24 h时取小鼠血清和肺泡灌洗液,用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清和肺泡灌洗液中白细胞介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平。体外培养小鼠肺泡上皮细胞MLE12,分为脂多糖（LPS）组（1 μg/mL LPS）和LPS+DEX组（1 μg/mL LPS+0.2 μg/mL DEX）,处理0、6、12、24 h后用ELISA法检测细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平,蛋白质印迹法检测细胞外信号调节激酶（ERK）1/2和c-Jun氨基末端激酶（JNK）的磷酸化水平。结果 CLP+DEX组小鼠CLP术后24 h内的存活率高于CLP组（P<0.05）,6、12、24 h时小鼠血清和肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平均低于CLP组（P<0.05,P<0.01）。6、12、24 h时LPS+DEX组MLE12细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平和ERK1/2磷酸化水平均低于LPS组（P<0.05,P<0.01）,6、12 h时JNK的磷酸化水平也低于LPS组（P<0.05,P<0.01）。结论 DEX能减少脓毒症小鼠血清和肺泡灌洗液中炎性因子的产生,提高脓毒症小鼠存活率,其机制可能与抑制ERK1/2和JNK信号通路的激活有关。     

扶正散结方联合顺铂对腹水瘤小鼠免疫调节作用的研究

[目的] 探讨扶正散结方联合顺铂对H22腹水瘤小鼠的治疗效果及免疫调节作用。[方法] 建立H22腹水瘤模型,将40只小鼠随机分为空白对照组、荷瘤对照组、顺铂组、中药联合顺铂组,每日测量小鼠腹围及腹水量,连续给药2周后,采血并处死小鼠。称取瘤质量,计算抑瘤率,比较各组小鼠各脏器质量,采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）和白细胞介素-2（IL-2）含量。[结果] 荷瘤组小鼠体质量及腹围较空白对照组迅速增长,大量腹水生成,胸腺质量减轻。与顺铂组小鼠相比,中药联合顺铂组小鼠体质量、腹围增长缓慢,腹水量减少,胸腺质量增加。顺铂组与中药联合顺铂组较荷瘤对照组抑瘤作用明显,中药联合顺铂组的抑瘤率优于顺铂组（P<0.05）。各组荷瘤小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2含量均较空白对照组低（P<0.05）。与顺铂组比较,中药联合顺铂组IFN-γ、IL-2水平升高（P<0.05）。[结论] 扶正散结方能够减少肝癌H22腹水瘤小鼠腹水量,通过上调血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2水平来促进肿瘤免疫微环境的正性调控,提高小鼠免疫功能,有效抑制肿瘤生长。     

雷公藤红素对肥胖型哮喘气道高反应的影响

目的 探讨雷公藤红素（celastrol）对肥胖型哮喘小鼠气道高反应的影响。方法 雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为正常对照组、哮喘组、肥胖组、肥胖型哮喘组和雷公藤红素干预的肥胖型哮喘组（简称干预组）共5组。肥胖型哮喘组和干预组予以高脂饲料（HFD）喂养16周,于第13周起第1天和第13天腹腔注射卵清蛋白/氢氧化铝[OVA/AL（OH）₃]致敏,第25~31天连续7天雾化吸入OVA激发,干预组在每次雾化吸入前30min口服celastrol（10mg/kg）。哮喘组进行普通饲料喂养+OVA致敏激发。肥胖组进行高脂饲料喂养+生理盐水致敏激发。正常组进行普通饲料喂养+生理盐水致敏激发。运用小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应性（AHR）的指标呼吸气道阻力（Rn）,进行相关分析。结果 哮喘组和肥胖组Rn值显著高于正常对照组,肥胖型哮喘组Rn值高于其余各组,干预组Rn显著低于哮喘组和肥胖型哮喘组（P均<0.01）,而干预组Rn与正常组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。经乙酰甲胆碱激发后,哮喘组和肥胖组小鼠Rn 值上升幅度显著高于正常对照组（P < 0.01）,肥胖型哮喘组Rn值上升幅度高于其余各组,干预组小鼠较哮喘组、肥胖组和肥胖型哮喘组小鼠比较,Rn值上升幅度显著降低（P均<0.01）;而干预组小鼠Rn 值的上升幅度与正常对照组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 雷公藤红素显著减轻肥胖型哮喘小鼠呼吸气道阻力,改善了其AHR。     

流感嗜血杆菌下气道定植对哮喘小鼠肺组织TH17细胞表达及气道重塑的影响

目的 检测下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠TH17细胞的表达、气道炎症及对气道重塑的影响。方法 用卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致敏和激发制备慢性哮喘小鼠模型,同时制作流感嗜血杆菌琼脂糖菌珠,在气道注菌之后的第1、7、21天处理小鼠,观察肺组织病理变化,流式细胞仪检测肺组织TH17细胞表达、测定CD4⁺T细胞TLR4的表达,并进行气道细菌培养和肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）细胞计数。结果 与正常组和哮喘非注菌组相比,哮喘注菌组有明显的哮喘症状和感染症状;病理学结果显示哮喘组气道黏膜水肿,管壁增厚,大量的炎性细胞浸润,注菌后炎症加重。哮喘小鼠气道注菌之后,随着时间的延长,气管壁厚度（WAt/Pbm）和平滑肌厚度（WAm/Pbm）均显著高于哮喘非注菌组。细菌学培养结果显示正常组第1、7天气管流感嗜血杆菌培养阳性,第21天阴性;哮喘组注菌后1、7、21天气管流感嗜血杆菌检测均阳性。流式细胞仪检测小鼠肺组织TLR4和TH17在CD4⁺T细胞的表达,哮喘组的TLR4和TH17表达均显著高于正常组,注菌之后二者表达显著增加,观察指标在哮喘注菌组变化更明显,差异有统计学意义（P<0.05）。BALF细胞计数结果显示,哮喘组BALF中细胞数明显高于正常组,注菌后细胞数进一步增多。相关性分析发现,哮喘组小鼠肺组织中CD4⁺T细胞TLR4的表达与BALF细胞总数呈正相关（r=0.746,P<0.05）,TH17表达与CD4⁺T细胞TLR4的表达、气道WAt/Pbm、WAm/Pbm和BALF细胞总数呈正相关（分别r=0.612、0.611、0.537、0.752,P<0.05）。结论 流感嗜血杆菌下呼吸道定植可以通过激活TLR4,增加哮喘小鼠肺组织TH17细胞表达,加重哮喘气道炎症和气道重塑,可能是难治性哮喘预后的重要机制之一。     

芒柄花素-3′-磺酸钠对胶原性类风湿关节炎的治疗作用及其机制

探讨芒柄花素-3′-磺酸钠对小鼠胶原性类风湿关节炎的治疗作用及其机制。采用鸡Ⅱ型胶原诱导C57小鼠成功建立了类风湿关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）模型,腹腔注射不同剂量的芒柄花素-3′-磺酸钠（50,100,200 mg/kg）,治疗前后观察所有组小鼠体重、食物摄入量和足肿胀情况。CBA试剂盒检测血清中TNF-α、IL-6、IL-10的水平,蛋白质印迹法测定脾脏组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65 （p-p65）、TIPE2、PCNP、IκB-α的表达水平,同时观察小鼠的脏器指数、踝关节软骨组织的病理变化及踝关节组织中NF-κB p65阳性表达情况。结果表明,与模型对照组比较,给药组小鼠体重及食物摄入量有所升高,足肿胀程度降低;血清中炎症因子TNF-α、IL-6表达水平降低,抑炎因子IL-10表达上升;脾组织中NF-κB p65、p-p65、PCNP蛋白表达降低,而TIPE2、IκB-α蛋白表达上升;给药组CIA小鼠的脾和胸腺指数降低,踝关节中炎细胞浸润减少,滑膜组织及软骨破坏程度减轻,NF-κB p65阳性表达水平下降;其中芒柄花素-3′-磺酸钠高剂量组显示出更好的治疗效果。结果提示芒柄花素-3′-磺酸钠对CIA小鼠具有治疗作用,其作用机制可能是通过调控NF-κB p65信号通路,抑制炎症因子水平表达来实现的。     

雷帕霉素对动脉粥样硬化小鼠斑块面积影响及机制探讨

[目的]探讨雷帕霉素对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块面积影响及机制。[方法]选取30只雄性ApoE基因敲除（ApoE^-/-）小鼠为研究对象,将其随机分为模型组、雷帕霉素组、阳性药物（瑞伐他汀）组。高脂饮食12周后灌胃干预4周。处死后取主动脉斑块组织油红O和苏木精-伊红（HE）染色评估斑块脂质情况、斑块面积;采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定外周血中促炎因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素（INF-γ）、白介素-6（IL-6）和转化因子β（TGF-β）、白介素-10（IL-10）表达情况。[结果]雷帕霉素组斑块面积明显小于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）;在炎症因子方面,雷帕霉素组能有效降低外周血TNF-α、INF-γ、IL-6表达,增加IL-10、TGF-β表达,差异有统计学意义（P<0.05）。[结论]雷帕霉素可通过增加抗炎因子含量、降低促炎因子含量来调控炎症反应,进而抑制斑块发展,降低血管狭窄程度。     

右美托咪定对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠TLR4/MyD88信号通路的影响

目的：　探究右美托咪定（dexmedetomidine,DEX）对博莱霉素（bleomycin,BLM）诱导的肺纤维化小鼠的保护作用以及对Toll样受体4/髓样分化因子（toll-like receptor 4/myeloid differentiation factor88,TLR4/MyD88）信号通路的影响。方法：　通过注射BLM诱导实验性小鼠肺纤维化。将小鼠分为生理盐水（Sham）组、BLM组、BLM+DEX组、BLM+PFD组和BLM+DEX+LPS组。苏木素-伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色和Masson染色分析肺组织病理学变化;免疫组织化学检测纤连蛋白（fibronectin,Fn）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠ）表达情况;原位缺口末端标记法（TdT mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）检测肺组织中细胞凋亡;检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中总细胞数量及蛋白质含量;Western blot检测肺组织中TLR4/MyD88信号通路和细胞凋亡相关蛋白水平。结果：　与Sham组相比,BLM刺激后肺组织中肺泡炎评分[（2.56±0.24）分vs.（0.15±0.02）分]和Ashcroft评分[（5.68±0.52）分vs.（0.09±0.01）分]明显增高,Fn[（63.63±5.48）% vs.（25.12±2.16）%]、α-SMA[（58.63±5.03）% vs.（17.56±1.25）%]和collagen Ⅰ[（55.32±5.16）% vs.（12.03±1.20）%]表达升高（P<0.05）,肺部炎症程度和纤维化程度增加;同时TUNEL阳性细胞率增高,细胞中bcl-2相关X蛋白（bcl-2 associated X protein,Bax）水平增高,B淋巴细胞瘤-2蛋白（B-cell lymphoma-2 protein,Bcl-2）水平降低（P<0.05）;BALF中总细胞数量[（3.54±0.06）×10⁵个/mL vs.（0.98±0.07）×10⁵个/mL]和蛋白质含量[（2.85±0.20）mg/mL vs.（0.29±0.03）mg/mL]升高（P<0.05）;肺组织中TLR4和MyD88蛋白水平升高（P<0.05）。DEX治疗可减轻BLM诱导的小鼠肺纤维化和炎症,降低TUNEL阳性细胞率,并逆转Fn、α-SMA、collagen Ⅰ、Bax和Bcl-2表达（P<0.05）;同时DEX也降低BLM诱导的小鼠BALF中总细胞数量和蛋白质含量（P<0.05）。此外,DEX降低BLM诱导的小鼠肺组织中TLR4和MyD88蛋白水平（P<0.05）。吡非尼酮（pirfenidone,PFD）与DEX具有相似的作用效果。脂肪酶（lipase,LPS）可以部分逆转DEX对BLM诱导的肺纤维化小鼠保护作用（P<0.05）。结论：　DEX可能通过抑制TLR4/MyD88信号通路改善BLM诱导的小鼠肺纤维化。     

组蛋白去乙酰化酶2的表达在烟草烟雾暴露后哮喘大鼠气道Th1/Th2平衡中的作用研究

目的 通过研究烟草烟雾暴露对哮喘大鼠气道组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）2以及血浆、支气管肺泡灌洗液（BALF）中干扰素（interferon,IFN）-γ、白细胞介素（interleukin,IL）-4表达的影响,探讨HDAC2在辅助性T淋巴细胞（T helper cell）Th1/Th2平衡中的作用。方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、烟雾暴露+哮喘组、布地奈德+哮喘组、布地奈德+烟雾暴露+哮喘组,建立哮喘大鼠模型、哮喘大鼠烟雾暴露模型以及布地奈德干预模型。免疫组织化学法检测各组大鼠气道HDAC2蛋白的表达,酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血浆和BALF中Th1型特征性细胞因子IFN-γ以及Th2型特征性细胞因子IL-4水平。结果 与对照组相比,烟雾暴露+哮喘组、哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,与哮喘组相比,烟雾暴露+哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,差异均有统计学意义（P均<0.05）。与布地奈德+哮喘组相比,布地奈德+烟雾暴露+哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组相比,哮喘组大鼠和烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;与哮喘组相比,烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;与布地奈德+哮喘组相比,布地奈德+烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;肺组织HDAC2蛋白的表达与血浆中IFN-γ表达呈正相关（r=0.533,P<0.01）,与IL-4表达呈负相关（r=-0.642,P<0.01）。结论 烟草烟雾暴露可以下调哮喘大鼠模型肺组织HDAC2蛋白的表达,从而影响气道炎症,IFN-γ、IL-4的表达以及布地奈德的治疗效果,这可能是烟草烟雾恶化哮喘气道Th 1/Th2平衡的一个免疫学机制。     

消渴灵片对2型糖尿病大鼠JNK信号通路的影响

[目的] 研究消渴灵片（XKL）对2型糖尿病大鼠JNK信号通路的影响。[方法] 将2型糖尿病模型大鼠,按随机数字表法随机分为正常组、模型组、XKL低、中、高组[分别以2、4、8 g/kg XKL作为低、中、高剂量灌胃）、阳性对照组（以0.8 g/kg盐酸二甲双胍灌胃）,测定各组大鼠空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧化酶（SOD）活性、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）及胰十二指肠同源盒-1（PDX-1）蛋白相对表达情况及JNK mRNA表达情况。[结果] XKL各剂量组均可有效降低模型大鼠FBG水平;XKL中高剂量组可降低MDA水平,提高FINS水平及SOD活性（P<0.05）;XKL中、高剂量p-JNK蛋白及JNK mRNA表达量显着下降（P<0.05）,PDX-1蛋白表达量显着升高（P<0.05）.[结论] XKL的降糖作用,可能与抑制JNK信号通路的激活有关。     

银翘散调节呼吸道病毒感染相关性哮喘Th1/Th2细胞因子的临床观察

[目的] 观察银翘散对呼吸道病毒感染相关性哮喘（RVA）的临床疗效及对Th1/Th2细胞因子的影响。[方法] 将68例RVA患者随机分为对照组32例,常规西药治疗;治疗组36例,在常规西药的基础上加用银翘散治疗。2组均治疗10 d。观察治疗前后患者的哮喘控制评分（ACT）,肺功能[第1秒时间肺活量（FEV1）、一秒率（FEV1/FVC%）、呼气峰流速（PEF）]、中医证候疗效及Th1/Th2细胞因子[分泌性免疫球蛋白A（sIgA）、白介素-4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）、IFN-γ/IL-4]的变化。[结果] 治疗后两组患者的ACT评分均较治疗前明显改善,且治疗组优于对照组（P<0.05）;治疗组对肺功能的改善优于对照组（P<0.05）。治疗组中医证候有效率为94.44%（34/36）,对照组中医证候有效率为71.87%（23/32）。治疗后,治疗组sIgA水平高于对照组（P<0.05）。IFN-γ及IFN-γ/IL-4低于对照组（P<0.05）,IL-4水平两组之间未见差异（P>0.05）。[结论] 银翘散联合常规西药治疗RVA的临床疗效优于单用常规西药治疗,可能与银翘散可调节患者Th1/Th2细胞因子,逆转因子间的失衡,进而减少气道炎症相关。     

HPLC-QAMS法同时定量分析归芪补血口服液中8种成分含量

[目的] 建立高效液相色谱一测多评法（HPLC-QAMS）同时定量分析归芪补血口服液中党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸含量。[方法] 色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温为25℃。流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min。检测波长分别为254 nm（检测党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷）和210 nm（检测去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸）。进样量为10 μL。以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为内参物,建立党参炔苷、紫丁香苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸的相对校正因子,计算各成分含量,并与外标法（ESM）检测结果进行对比,验证所建立的HPLC-QAMS法的准确性和可行性。[结果] 党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸分别在1.91～47.75、0.64～16.00、1.57～39.25、0.98～24.50、1.40～35.00、0.76～19.00、0.58～14.50、1.16～29.00 μg/mL（r≥0.999 1）范围内线性关系良好。平均加样回收率及相对标准偏差（RSD）分别为98.2%（0.97%）、97.0%（1.05%）、100.1%（0.76%）、98.7%（1.32%）、99.1%（1.43%）、97.2%（0.89%）、97.3%（1.38%）和98.4%（1.69%）。HPLC-QAMS法计算结果与ESM实测结果无明显差异。[结论] 所建立的HPLC-QAMS法为归芪补血口服液现有质量标准提供了补充和完善。     

紫草素对脂多糖诱导的小鼠肺损伤的保护作用

目的 研究紫草素在小鼠ALI中的作用与机制,为ALI的药物治疗提供新的思路。方法 将BALB/c小鼠分成空白对照组、紫草素组、LPS组和LPS+紫草素组,小鼠气管内滴入LPS （5mg/kg）之前1h,预先通过灌胃法给予小鼠50mg/kg剂量的紫草素或其溶剂。LPS给药6h后采集肺泡灌洗液（BALF）及肺组织,用ELISA法检测BALF中TNF-α和IL-1β的浓度,BCA法测定BALF中蛋白浓度;肺组织行病理组织切片检查,测定肺湿干重比,比色法检测组织匀浆液中MPO活性及NO浓度,Western blot法检测肺组织中诱生型一氧化氮合成酶（iNOS）的表达水平。对上述结果进行分析,研究紫草素在ALI小鼠体内的抗炎作用与机制。结果 检测BALF中TNF-α和IL-1β的浓度以及BALF中的蛋白含量发现,紫草素+LPS组的浓度较LPS组显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。比色法测定肺组织中MPO活性和NO浓度发现,紫草素+LPS组也明显低于LPS组,差异有统计学意义（P<0.05）。紫草素预处理组的肺湿干重比也较LPS组明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。此外,紫草素预处理组的肺组织病理学改变也较LPS组有所减轻,尤其体现在肺组织炎性细胞的浸润明显减少。Western blot法检测显示,紫草素+LPS组的iNOS表达量较LPS组明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 紫草素可在病理学改变、减轻肺水肿、减少炎性因子的释放和中性粒细胞的浸润等多方面缓解ALI。这种保护作用的潜在机制可能与紫草素抑制iNOS有关。