茉莉酸甲酯影响阳春砂挥发性萜类代谢和基因转录

目的：研究茉莉酸甲酯对阳春砂挥发性萜类合成的影响,深入了解挥发性萜类生物合成的分子调控机制。方法：用不同浓度茉莉酸甲酯溶液喷施阳春砂的叶片和果实,用微波法提取果实中的挥发性萜类成分,应用气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术检测挥发性萜类成分的变化,通过转录组测序构建cD－NA 文库并进行生物信息学分析。结果：果皮和种子团中分别检测到20 种和33 种挥发性萜类成分,600μmol?L-1 MeJA 喷果24 h 后果皮和种子团中大部分挥发性萜类成分的积累量明显增加,如乙酸龙脑酯、樟脑和龙脑等;而200μmol?L-1 MeJA 喷施叶片或果实对果皮及种子团中不同挥发性萜类含量的影响存在差异,且200μmol?L-1 MeJA 喷施果实比喷施叶片更能提高种子团中挥发性萜类成分的积累量。此外,转 录组测序共获得68 168 个Unigene,通过与公共数据库比对,共有48 627 个Unigene 获得注释。对KEGG代谢通路的注释结果进行初步分析,发现挥发性萜类代谢密切相关的Unigene 有208 个,MYC2 类转录因子（JA 信号转导的重要调控因子）相关的Unigene 有22 个。结论：MeJA 能有效调控阳春砂中挥发性萜类成分的代谢,转录组测序获得了多个与挥发性萜类合成相关的候选基因,为深入开展阳春砂挥发性萜类生物合成相关功能基因的发掘及调控研究提供了丰富的数据资源。     

阳春砂2个蒎烯合酶的催化功能和表达模式比较

阳春砂果实中含有丰富的挥发性萜类,其中蒎烯是其主要成分之一,且具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等广泛的药理活性。课题组前期通过GC-MS检测发现阳春砂果实中含有丰富的α-蒎烯,且克隆并鉴定了以β-蒎烯为主产物的萜类合酶(WvTPS63,原名AvTPS1),但以α-蒎烯为主产物的萜类合酶还未被鉴定。该研究基于阳春砂基因组数据,筛选发现与WvTPS63序列高度相似的WvTPS66,并对WvTPS66进行体外酶功能鉴定及与WvTPS63进行序列、催化功能、表达模式及启动子比较分析。多序列比对表明WvTPS63与WvTPS66的氨基酸序列高度相似且萜类合酶的保守motif基本一致。体外催化功能比较显示两者均能生成蒎烯,其中WvTPS63主产物为β-蒎烯,而WvTPS66的主产物为α-蒎烯。表达模式分析显示WvTPS63主要在花中高表达,WvTPS66在全株均有表达,且在果皮中表达量最高,表明其可能主要负责果实中α-蒎烯的合成。此外,对WvTPS63与WvTPS66启动子的分析显示二者启动子区域存在多个与胁迫响应相关的调控元件。以上研究结果可为萜类合酶基因的功能研究提供参考,也可为蒎烯的生物合成提供新的基...     

刺柏属6种植物枝叶和果实中挥发性成分分析

目的分析刺柏属6种植物枝叶和果实中挥发性成分。方法采用顶空-气质联用(HS-GC-MS)法对密枝圆柏、高山柏、垂枝香柏和香柏的枝叶,以及大果圆柏与滇藏方枝柏枝叶和果实中挥发性成分进行分析,利用NIST14谱库检索解析,并结合相对保留指数对分离得到的化合物进行结构鉴定,采用面积归一法确定各组分相对含有量,并对枝叶部分的挥发性成分进行聚类分析。结果共鉴定出62种成分,占各样品总成分的90.08%～98.82%,包括单萜烯类15种、含氧倍半萜类11种、倍半萜烯类20种、含氧二萜类2种、含氧单萜类12种、异戊酸酯类2种,并以α-蒎烯、β-蒎烯等单萜烯类成分含有量最高。果实部位单萜烯含有量高达80%以上,主成分β-蒎烯含有量超过45%,与枝叶部位有显著差异。大果圆柏、滇藏方枝柏、高山柏和香柏中挥发性成分相似度较高,均以β-蒎烯含有量最高;密枝圆柏和垂枝香柏的最主要成分分别为α-蒎烯和α-松油烯。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于该属植物的质量控制。     

HS-SPME-GC/MS分析紫珠花中的挥发性成分

目的:分析紫珠花的挥发性成分。方法:采用顶空固相微萃取和气质联用技术(HS-SPME-GC/MS),结合保留指数法并用峰面积归一化法测定紫珠花中的挥发性成分相对百分含量。结果:从紫珠花中鉴定出了22种挥发性成分,占总峰面积的88.51%,其含量较高的成分为α-石竹烯(30.30%),石竹烯(10.04%),β-芹子烯(8.53%),3-辛醇(6.73%),β-蒎烯(6.35%),β-侧柏烯(3.99%)等。结论:紫珠花的主要挥发性成分类型为萜类。     

静态顶空进样气质联用法测定白玉兰花和紫玉兰花的头香成分

目的 对比分析白玉兰花和紫玉兰花头香的化学成分.方法 用静态顶空法收集白玉兰花和紫玉兰花的头香,并用GC-MS法对其进行了化学成分研究.结果 从白玉兰花中鉴定出26种化合物,占挥发性成分总量的94.90%,从紫玉兰花中鉴定出25种化合物,占挥发性成分总量的87.62%,两者主要成分均为单萜类化合物.两者共有的化合物有16种,共有的主要萜类化合物有β-侧柏烯、β-蒎烯、β-月桂烯、桉油精、α-蒎烯、β-香叶烯等.在白玉兰花中主要成分依次是β-侧柏烯(21.90%)、β-蒎烯(12.78%)、β-月桂烯(11.89%)、桉油精(10.84%)、α-蒎烯(8.99%)、β-香叶烯(8.76%).在紫玉兰花中主要成分依次是β-侧柏烯(16.06%)、β-香叶烯(13.24%)、十五烷(12.95%)、桉油精(10.18%)、α-崖柏烯(5.87%).结论 研究结果为进一步开发和利用白玉兰花和紫玉兰花奠定基础.     

版纳阳春砂与其伪品巴色砂的鉴别研究

目的 对版纳阳春砂及其常见伪品巴色砂进行鉴别研究。方法 采用传统性状鉴定方法对两者外观性状进行鉴别;应用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术分析两者挥发油成分差异;应用气相色谱仪定量分析两者乙酸龙脑酯含量。结果 版纳阳春砂和巴色砂在外观性状（颜色、毛刺、顶端、种子团、气味）方面存在一定差异;两者挥发油中分别鉴定出37、38种化学成分,两者挥发油中主要化学成分均为乙酸龙脑酯和左旋樟脑;其中挥发油含量分别为4.28%与3.35%,乙酸龙脑酯含量分别为2.04%与0.57%;版纳阳春砂挥发油中主要特有成分为α-蒎烯、cis-α-Bergamotene、β-杜松烯;巴色砂挥发油中主要特有成分为γ-芹子烯、Β-倍半水芹烯、β-榄香烯、（1S,8aα）-Decahydro-1,4aβ-dimethyl-7β-isopropenyl-1-naphthol、（1E,5E）-1,5-二甲基-8-（丙-2-亚基）环癸-1,5-二烯、（+）-香橙烯。结论 版纳阳春砂和巴色砂外观性状具有一定差异,挥发油化学成分存在显著性差异,两者挥发油含量均符合《中国药典》要求,但乙酸龙脑酯含量中,版纳阳春砂明显高于巴色砂,...     

羌活挥发性成分GC-MS分析

目的:气相色谱-质谱联用法(GC-MS)研究羌活及宽叶羌活的挥发性成分。方法:收集羌活(Notopterygium inchum)及宽叶羌活(N. franchetii)10个批次的样品,包括羌活及宽叶羌活的栽培品各1个批次;四川和甘肃野生品8个批次。参照2015年版《中国药典》方法提取挥发油成分,采用GC-MS技术,分析不同批次样品的挥发油成分。结果:鉴定出包括单萜、倍半萜以及非萜类共97个化学成分。化学成分相对含量的计算结果显示,α-蒎烯(25.39%～41.68%),β-蒎烯(19.34%～40.95%)和柠檬烯(4.59%～11.99%)为羌活及宽叶羌活挥发油的主要成分。野生羌活和栽培宽叶羌活中α-蒎烯的相对含量高于β-蒎烯;野生宽叶羌活中β-蒎烯相对含量高于α-蒎烯。贮存1年的羌活饮片中β-蒎烯的含量明显低于当年采收的样品。采用SIMCA-P+11.5软件进行偏最小二乘-判别分析,甘肃产羌活和四川产羌活差异不明显;当年采收的样品和贮存1年的样品明显聚为2类。结论:该研究显示贮存对羌活挥发油中主要成分存在影响;研究还揭示了羌活的野生、栽培品挥发油成分的差异。为不同品种的羌活的挥发油药理活性比较提供化学研究基础。     

感冒药YL2000水煎与醇提物中挥发性成分GC-MS的分析比较——从提取工艺对现代中药的思考

目的:研究感冒药YL2000现代制剂中的挥发性成分,考查比较水煎与醇提工艺对复方挥发性成分的影响.方法:水蒸气蒸馏法提取挥发性成分,GC-MS法进行分析鉴定,峰面积归一法测定各成分的相对含量,并与水煎剂的挥发性成分进行对比.结果:从YL2000醇提制剂中初步分离鉴定了68个成分;同水煎剂相比,醇提制剂提高了挥发油的得率,去除了大量脂肪酸类成分,但保留了水煎剂中的88%的萜类成分,并将其含量提高了约6倍;同单味药材相比,醇提制剂和水煎剂均富集了萜类成分而大大降低了蒎烯和蒈烯类成分的含量.结论:YL2000醇提制剂保留了水煎降低蒎烯和蒈烯含量的特点,而且进一步富集了水煎剂中的萜类有效成分,降低了脂肪酸类成分.     

红松松塔挥发油的固相微萃取技术结合气相色谱-质谱法分析

目的 分析红松松塔挥发性成分的组成及含量,同时比较了三种固相微萃取纤维头对红松松塔挥发油的萃取效果.方法 利用PA、PDMS、PDMS/DVB 3种萃取头对红松松塔挥发性成分进行富集,采用GC-MS分析挥发性成分的组成.最后,运用累积峰面积标准化值对其萃取灵敏度进行评价.结果 PA萃取出43种化合物,PDMS和PDMS/DVB各萃取出46种化合物,其中共有化合物28种.结论 红松松塔挥发性成分主要为单萜和倍半萜类,其中含量较高的成分为α-蒎烯、D-柠檬烯、β-蒎烯、(1S)-3,7,7-三甲基二环[4.1.0]-3-庚烯等.3种萃取头萃取挥发性成分在种类和数量上均存在明显差异,通过对萃取松塔挥发性成分的种类、数量及累积峰面积标准化值的分析比较,确定PDMS萃取效果最佳.     

痹痛消膏中挥发性成分的含量测定

目的:建立痹痛消膏中挥发性成分的含量测定方法.方法:采用毛细管气相色谱法分离α-蒎烯、β-蒎烯、樟脑、薄荷脑、异龙脑、龙脑、丁香酚和氮酮,并用外标法定量.结果:上述8种成分均达到良好分离,在测定范围内线性良好,回收率均在97%～102%之间.结论:所建立的方法快速、稳定、可靠,可为该产品建立质量控制方法提供参考.     

阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱“数字化”信息的构建与应用

目的:建立阳春砂仁挥发油特征指纹图谱"数字化"信息模式,为阳春砂仁的内在质量评价和鉴定提供一种数字化标准.方法:采用GC-MS分析20批次阳春砂仁的主要成分,同时对1985年以来国内主要研究单位对16批次阳春砂仁的文献报道进行数据挖掘.结果:20批次阳春砂仁均含有α-蒎烯、茨烯、β-蒎烯、β-月桂烯、柠檬烯、芳樟醇、樟脑、异龙脑、龙脑、乙酸龙脑酯等10个主要特征成分,合计相对含量达(86.35±5.69)%,具有一定代表性;近20年来国内10余个主要研究单位报道的阳春砂仁大都含有以上10个特征成分,且相对含量也近似.以此10个特征指标成分计,本试验分析样品的均值与文献报道样品的均值相似度为0.990(夹角余弦法),由此合并数据处理以建立具有广泛代表性的阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱"数字化"信息."数字化"信息在药材质量评价中的应用表明,约85%以上阳春产砂仁的质量比较均匀稳定,与16个文献报道阳春砂仁相似度比对的结果显示与原文作者的结论基本一致;在药材品种鉴定中的应用表明,文献报道的10个非阳春砂仁中仅绿壳砂与阳春砂仁非常相似,而缩砂、长太砂、华山姜、山姜、长序砂仁等与阳春砂仁通过数字化模式可以明显区分开来.结论:阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息模式使在不同时间段(1985-2007)、不同仪器、色谱柱、色谱条件下的分析结果可以相互比对,适用于药材的质量评价与鉴定.     

海南产肉豆蔻叶挥发油中α-蒎烯与β-蒎烯含量动态变化

目的 研究海南产肉豆蔻叶挥发油中α-蒎烯与β-蒎烯的含量动态变化,探讨挥发油成分积累,确定适宜采收期.方法 全年不同月份采集肉豆蔻鲜叶用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用GC-MS法分析α-蒎烯与β-蒎烯两成分的动态积累.结果 肉豆蔻叶挥发油中α-蒎烯含量,雌株1月最高为14.70%,雄株5月最高为29.24%;β-蒎烯含量,雌雄植株均11月最高分别为19.64%和19.47%.结论 全年不同月份,雌株叶中α-蒎烯含量变化差异小,而雄株差异明显;β-蒎烯含量在雌、雄植株叶中变化均较大,根据需要选择合适时间采收.     

气相色谱法测定连翘种子油纳米乳中β-蒎烯含量研究

目的:建立β-蒎烯在连翘种子油纳米乳中含量的测定方法。方法:采取GC法,HP-5毛细管色谱柱(30mm×0.32mm×0.25μm),程序升温,FID检测器,载气为氮气。结果:β-蒎烯进样浓度在0.453 2~2.266 0mg/mL(R~2=0.997 4)范围内呈良好线性,β-蒎烯平均回收率为101.30%,RSD=1.50%(n=6),β-蒎烯平均含量为232.87mg/g。结论:该方法快速、简便,可精确测定连翘种子油纳米乳中β-蒎烯的含量。     

向日葵花盘挥发油的GC-MS定性分析

目的:通过GC-MS来定性分析向日葵花盘的挥发油成分,为进一步对其研究开发提供科学依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取,运用GC-MS联用并结合计算机相似度检索鉴定向日葵花盘挥发油的化学成分,应用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果:从向日葵花盘的挥发油中鉴定出了29种化学成分,其中萜类化合物较多,其中含量较高的成分为α-蒎烯(21.95%)、桧烯(15.66%)、β-蒎烯(4.03%)、白菖油萜(3.29%)、大根香叶烯D(3.62%)、4-松油醇(2.68%)、柠檬烯(2.2%)等。结论:向日葵花盘的挥发油成分多为萜类化合物,有较高的药用价值,具有很大研究价值和广阔市场前景。     

感冒药YL2000水煎与醇提物中挥发性成分GC-MS的分析比较——从提取工艺对现代中药的思考

目的：研究感冒药YL2000现代制剂中的挥发性成分，考查比较水煎与醇提工艺对复方挥发性成分的影响。方法：水蒸气蒸馏法提取挥发性成分，GC—MS法进行分析鉴定，峰面积归一法测定各成分的相对含量，并与水煎剂的挥发性成分进行对比。结果：从YL2000醇提制剂中初步分离鉴定了68个成分；同水煎剂相比，醇提制剂提高了挥发油的得率，去除了大量脂肪酸类成分，但保留了水煎剂中的88％的萜类成分，并将其含量提高了约6倍；同单味药材相比，醇提制剂和水煎剂均富集了萜类成分而大大降低了蒎烯和蒈烯类成分的含量。结论：YL2000醇提制剂保留了水煎降低蒎烯和蒈烯含量的特点，而且进一步富集了水煎剂中的萜类有效成分，降低了脂肪酸类成分。     

阳春砂仁GC—MS特征指纹图谱数字化信息的GC验证

目的考察阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息在GC中的适用性。方法分别采用GC-MS和GC分析13批次阳春砂仁的主要成分,同时用已建立的阳春砂仁挥发油特征指纹图谱数字化信息与GC-MS、GC分析的样品进行相似度比对。结果13批次阳春砂仁均含有α-蒎烯、茨烯、β-蒎烯、β-月桂烯、柠檬烯、芳樟醇、樟脑、异龙脑、龙脑、乙酸龙脑酯等10个主要特征成分,合计相对含量达(88.15±2.97)%,具有一定代表性。以此10个特征指标成分计,GC-MS分析样品与GC分析样品的相似度为0.994～1.000(夹角余弦法);与阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息比对,GC-MS分析样品的相似度为0.978～0.999(夹角余弦法),GC分析样品的相似度为0.986～0.998(夹角余弦法)。结论阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息能应用于GC中,使不同时间、不同型号的仪器、色谱柱、色谱条件下的分析结果可以相互比对,具有推广应用价值,可用于药材的质量评价与鉴定。     

阳春砂果实脂溶性成分的GC-MS分析

目的:对阳春砂果实的脂溶性成分进行的定性定量分析。方法:采用索氏提取法分别提取阳春砂果皮和种子中的脂溶性成分,进行甲酯化处理后用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分离和鉴定其组成和含量。结果:通过检测,在阳春砂果皮和种子中分别鉴定了25种和13种脂溶性成分,主要为脂肪酸及其酯类,以油酸和亚油酸等不饱和脂肪酸含量最高。结论:该研究结果表明,阳春砂果实在食用、医疗保健等方面具有较大的应用潜力和开发前景。     

豆蔻果实挥发油成分研究

目的:通过GC-MS分析云南产地豆蔻果实中挥发油的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法从豆蔻果实中提取挥发油,运用GC-MS法对豆蔻挥发性成分进行鉴定,归一法确定各成分的相对百分含量。结果:鉴定了27个化合物,主要成分有桉油精(65.81%),对伞花稀(3.57%)、柠檬油烯(2.94%)、β-蒎烯(2.54%)、松油醇(2.23%)等。结论:该方法高效快速、分离效果良好,可以用于豆蔻药材的质量控制。     

银翘散煮散与饮片煎煮过程挥发性成分蒸发规律比较研究

目的 建立银翘散蒸馏液中主要挥发性成分的含量测定方法,比较银翘散煮散与饮片煎煮过程中挥发性成分的蒸发规律,为客观表征银翘散“香气大出即取服”煎煮终点判断方法提供科学依据。方法 收集不同煎煮时间段银翘散煮散与饮片煎煮蒸馏液,采用GC-MS法定性分析挥发性成分并测定α-蒎烯、(-)-β-蒎烯、月桂烯、对伞花烃、(R)-(+)-柠檬烯、γ-松油烯、薄荷酮、薄荷醇、4-萜烯醇、(R)-(+)-胡薄荷酮、(+)-香芹酮、胡椒酮12种主要挥发性成分的含量,比较不同煎煮时间银翘散煮散与饮片挥发性成分蒸发速度。结果 银翘散煮散与饮片挥发油GC-MS总离子流色谱图分别确定48和34个色谱峰,其中相对质量分数大于0.5%的色谱峰分别为26、21个;随着煎煮时间的延长,煮散蒸馏液中,12种成分的平均蒸发速度均先增加后减少,均在煮沸0～10 min达到最大值,分别为7.28、13.21、1.06、0.48、1.49、0.42、2.08、2.27、1.76、0.79、0.16、0.20 mg/min;饮片蒸馏液中,α-蒎烯、(-)-β-蒎烯、月桂烯、对伞花烃、(R)-(+)-柠檬烯、γ-松油烯的平均蒸发速度先增...     

假蒟地上部分和地下部分挥发性成分的GC-MS分析

目的:分析假蒟地上部分和地下部分化学成分的差异,为其临床应用及研究开发提供参考。方法:采用石油醚和二氯甲烷梯度回流提取法,提取假蒟不同部位的化学成分,采用GC-MS法对其挥发性成分进行分析。结果:从假蒟地上部分共鉴定出36个成分,地下部分共鉴定出32个成分。共有成分有氢化肉桂酸、α-荜澄茄油烯、β-石竹烯、葎草烯、β-细辛脑、α-细辛脑、异榄香素等20种成分,含量分别占地上部分和地下部分总成分含量的85%以上和55%以上,其中含量最高的为α-细辛脑,均占不同部位化学成分总含量的30%以上。地上部分特有成分有白菖油萜、α-蛇床烯、d-杜松萜烯、β-桉叶醇、顺式-橙花叔醇、5-十八烷烯、角鲨烯等16种成分;地下部分特有成分有(1R)-(+)-α蒎烯、β-蒎烯、3-苯基丙酰胺等12种成分。结论:假蒟地上部分和地下部分挥发性成分虽大部分相同,但含量存在明显差异;两部分均含不同特有成分,可能与其不同药用性质相关。