人参皂苷Rh2对小鼠移植瘤生长及对细胞间连接黏附分子表达的影响

目的：观察人参皂苷Rh2对小鼠移植瘤生长及其对细胞间连接黏附分子（JAM）在癌组织表达的影响，探讨其抗肿瘤作用。方法：昆明种小鼠40只，前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水0．2mL，成瘤后随机分为2组，实验组给予人参皂苷Rh2（20mg·kg^-1）灌服，2mL／只；对照组给予等量生理盐水，6周后取材。用免疫组化法观察JAM-1，JAM-2在癌细胞、淋巴管及血管的表达。结果：对照组JAM-1阳性表达的肿瘤细胞吸光度（A）549．90，实验组340．55，P〈0．05；JAM-2阳性表达弱。对照组JAM-1和JAM-2阳性表达的血管数密度分别为2．33和1．34，实验组分别为1．09和0．9。对照组JAM-1和JAM-2阳性表达的淋巴管数密度分别为2．23和1．88，实验组分别为0．99和0．79；两组间的差异均为P〈0．05。结论：人参皂苷Rh2通过下调JAM在肿瘤细胞的表达，抑制肿瘤组织血管及淋巴管的生成，进而抑制肿瘤生长。     

转基因西洋参冠瘿组织中人参皂苷类成分的分离鉴定

 目的分离鉴定转基因西洋参冠瘿组织中的化学成分。方法以本研究组转导和培养的西洋参冠瘿组织为实验材料,体积分数为70%乙醇超声提取,硅胶柱色谱分离,用MS,¹H-NMR、¹³C-NMR、HMBC等谱学方法确定结构。结果分离得到5个化合物,分别为20(S)-人参皂苷Rh₁(Ⅰ)、20(S)-人参皂苷Rg₃(Ⅱ)、人参皂苷Re(Ⅲ)、20(S)-达玛烷-3β,6α,12β,20,25-五醇-6-O-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ)和人参皂苷Rg₁(Ⅴ)。结论上述5个成分均为首次从转基因西洋参冠瘿组织培养物中分离得到,化合物Ⅳ为新天然产物。     

基于止血作用的三七粉质量标志物研究＊

目的 探索三七粉活血作用的质量标志物。方法 采集家兔血浆，采用体外凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）检测试剂盒观察三七粉主要成分对凝血系统的影响；收集家兔富含血小板血浆，以二磷酸腺苷（ADP）诱导血小板聚集，观察三七粉主要成分对血小板聚集率的影响；取家兔主动脉条，置于体外组织灌流系统中，以去氧肾上腺素诱导血管条收缩，观察三七粉主要成分对血管平滑肌收缩功能的影响。结果 以蒸馏水溶解的三七总皂苷（PNS），与水溶剂组比较，可显著延长TT、APTT、PT，降低FIB含量（P<0.05、P<0.01），降低ADP诱导的血小板聚集率（P<0.01）。以5%二甲基亚砜（DMSO）溶解的单体成分，与5%DMSO溶剂组比较，人参皂苷F₂、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rk₁、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₂，可显著延长TT（P<0.05，P<0.01）；人参皂苷F₂、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rb₁、槲皮素可延长APTT（P<0.05）；人参皂苷Re、槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rb₃，可显著延长PT（P<0.05）；槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₃、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₃、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₂可显著降低血浆FIB含量（P<0.05）；人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rh₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rg₂、三七皂苷R₁、人参皂苷F₂、人参皂苷Rg₃、人参皂苷Rd和人参皂苷Rb₁可显著降低ADP诱导的血小板聚集（P<0.05）；人参皂苷Rg₃、人参皂苷Rh₁、人参皂苷Rd、三七皂苷R₁、人参皂苷Rk₁和人参皂苷Rg₂可明显扩张血管动脉条（P<0.05，P<0.01）。结论 三七粉活血作用表现在抗凝、抗血小板聚集、扩血管等方面，人参皂苷F₂、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₃、三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg₁、槲皮素等可能为三七活血作用的物质基础，可作为三七粉活血作用的质量标志物进一步研究。     

下调PGI/AMF基因协同人参皂苷Rh2对白血病KG1α细胞作用的体外研究

目的 通过干扰RNA的方法下调人磷酸葡萄糖异构酶/自分泌因子（PGI/AMF）基因的表达,研究人PGI/AMF基因协同人参皂苷Rh₂对白血病KG1α细胞的影响。方法 将对数生长期KG1α细胞及转染细胞分成对照组和用药组,对照组常规培养,药物组细胞培养体系中分别加入30、45、60、75、90 μmol/L的人参皂苷Rh₂,各组分别培养24、48、72 h后,CCK-8检测人参皂苷Rh₂对白血病KG1α及转染株细胞增殖的影响;台盼蓝检测人PGI基因对KG1α细胞增殖的影响;Antibody Array检测人参皂苷Rh₂对Akt通路蛋白的影响;Western blotting检测下调PGI/AMF与人参皂苷Rh₂在mTOR、Raptor、Rag蛋白表达变化方面的相关性。结果 人参皂苷Rh₂抑制KG1α的增殖;下调PGI/AMF使KG1α对人参皂苷Rh₂更加敏感;下调PGI基因抑制细胞增殖;Antibody Array结果显示人参皂苷Rh₂通过下调P38、mTOR、Akt、AMPKα、PARP、Bad的表达影响KG1α增殖;Western blotting结果显示下调PGI基因通过抑制mTOR、Rag、Raptor表达与人参皂苷Rh₂产生协同作用调节人白血病细胞增殖。结论 下调PGI基因协同人参皂苷Rh₂抑制KG1α细胞的增殖。     

人参皂苷Rg3对肿瘤血管生长调控因子蛋白表达抑制作用的研究

目的探讨中药单体人参皂苷20(R)-Rg₃对肿瘤血管生长调控因子(VEGF,bFGF,MMP2)蛋白表达的抑制作用。方法进行人肺腺癌细胞株A549、人脐静脉血管内皮细胞HUVEC304细胞株培养、10^-6mol·L^-1浓度Rg₃药物干预72h,采用免疫组化、基因芯片技术,检测上述因子蛋白表达阳性率和灰度变化以及A549细胞基因的差异表达情况。结果Rg₃干预后,A549细胞VEGF蛋白阳性表达率显著降低(P=0.03),VEGF,Flt,KDT以及MMP2蛋白阳性表达的强度较对照组均有显著下降(P<0.05),内皮细胞VEGF,Flt和KDT蛋白阳性表达的灰度较对照组均有显著下降(P<0.05)。基因芯片差异性表达显示其中14个基因下调,10个基因上调。结论Rg₃可显著抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞的血管生长调控因子蛋白表达,通过不同靶点作用于肿瘤细胞影响肿瘤新生血管的生成。     

基于心血管保护作用的三七粉质量标志物研究＊

目的 探索三七粉心血管保护作用的质量标志物。方法 采用CoCl₂制备心肌细胞（H9C2）损伤模型，观察三七粉主要成分对心肌细胞成活率、LDH、MDA、SOD的影响；采用H₂O₂制备人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤模型，观察三七粉中主要成分对内皮细胞存活率、LDH、ACP的影响。结果 人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₃、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rk₁、人参皂苷Rh₁、三七素能够显著增加H9C2细胞存活率（P<0.05，P<0.01），多个成分能够减少LDH、MDA，增加SOD；三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rk₁、人参皂苷Rh₁、三七素可显著提高HUVEC细胞存活率（P<0.05，P<0.01），多个成分能够减少LDH、ACP。结论 三七粉发挥心血管保护作用的药效物质基础包括多种皂苷类成分、三七素，以及黄酮类成分槲皮素。     

人参皂甙Rh2对小鼠移植瘤细胞间连接蛋白JAM的表达及对肿瘤淋巴管形成的影响

目的:观察人参皂甙Rh2对小鼠移植瘤肿瘤细胞间连接黏附分子JAM在肿瘤细胞间及淋巴管上表达的影响,探讨其抗肿瘤转移作用机制。方法:昆明小鼠40只(雌雄共用),前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水0.2mL造模,成瘤后随机分为2组,给药组给予人参皂甙Rh2(20mg/kg-1)灌服;对照组给予等量生理盐水,4周后取材。免疫组化二步法观察LYVE-1在肿瘤组织淋巴管和JAM-1在癌细胞,JAM-2在淋巴管的表达。结果:JAM-1在两组阳性表达的肿瘤细胞吸光度(IA)有明显差异。LYVE-1在两组阳性表达的淋巴管数密度有明显差异。JAM-2阳性表达的淋巴管数密度两组间的明显差异P<0.05。结论:人参皂甙Rh2抑制肿瘤细胞脱离癌巢及淋巴管的生成,进而抑制肿瘤生长,干扰肿瘤的转移途径。     

人参果中一对构型异构体的分离与鉴定

人参果为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Meyer的成熟果实.由于其具有高含量的人参皂苷和显著的生理活性,引起了国内外学者的广泛重视和研究。目前,已从人参果中分离鉴定出人参皂苷Rb₁、Rb₂、Rc、Rd、Re、Rg₁、20(S)-Rg2、20(R)-Rg₂、20(R)-Rg₃、Rh1₁、20(R)-Rh₂和20(RR)-原人参三醇、胡萝卜苷、β-谷甾醇等成分^[1～3]。     

人参皂苷Rg1对PD模型大鼠纹状体多巴胺含量的影响及其机制探讨

目的：研究人参皂苷Rg₁对6-羟基多巴(6-OHDA)制备的去卵巢(OVX)帕金森病(PD)模型大鼠纹状体(Str)多巴胺(DA)含量的影响及其机制探讨。方法：应用6-OHDA制备OVX的PD模型大鼠，腹腔注射Rg₁(10 mg·kg^-1)或侧脑室同时给予雌激素受体(ER)拮抗剂ICI 182,780(2.4 ng·kg^-1)，连续用药14 d，观察阿朴吗啡诱导的大鼠旋转行为。应用高效液相色谱法(HPLC)检测纹状体(Str)内DA及其代谢产物二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量的变化。结果：人参皂苷Rg₁可明显改善PD模型大鼠单侧旋转行为(P<0.01)，此作用可被ICI 182,780所阻断。Rg₁给药组可显著提高损毁侧Str DA及其代谢产物含量(P<0.01)。应用ICI 182,780可阻断Rg₁的神经保护作用，损毁侧Str DA及其代谢产物含量较Rg₁给药组明显降低(P<0.01)。结论：人参皂苷Rg₁对6-OHDA所致的去卵巢PD模型大鼠黑质多巴胺能神经元有一定保护作用，此作用与ER途径的激活有关。     

20(<>R)- 人参皂苷 Rg3 对 LPS 诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

  摘要：目的 观察 20(<>R)- 人参皂苷 Rg₃ 对人脐静脉内皮细胞（ HUVEC ）损伤的保护作用及其机制探讨。 方法 用脂多糖（ LPS ）诱导 HUVEC 损伤,采用 MTT 法观察 20(<>R)- 人参皂苷 Rg₃ 对 HUVEC 活性的影响; Fura-2/AM 荧光探针负载细胞,用双波长荧光分光光度法测定 HUVEC 细胞内游离钙离子浓度;用 ELISA 法测定培养的细胞上清液中组织型纤溶酶原激活物（ t-PA ）、纤溶酶原激活物抑制剂 -1 （ PAI-1 ）含量的变化。 结果 300 mg·L^-1 的 LPS 刺激内皮细胞 48 h 后,可明显降低 HUVEC 的吸光度,细胞内钙离子浓度升高, PAI-1 含量明显升高, t-PA 含量明显降低;各浓度的 20(<>R)- 人参皂苷 Rg₃ 可升高 LPS 引起的 HUVEC 的吸光度降低,并呈浓度依赖性地显著降低 HUVEC 内游离钙浓度的升高; 20(<>R)- 人参皂苷 Rg₃ 明显抑制 LPS 诱导的 PAI-1 分泌增多,对 t-PA 水平无明显影响。 结论 20(<>R)- 人参皂苷 Rg₃ 对 LPS 诱导的 HUVEC 损伤具有保护作用,其机制可能与降低细胞内钙离子浓度、抑制 PAI-1 产生、调节 t-PA /PAI-1 平衡密切相关。     

基于权重基因共表达网络分析挖掘人参皂苷Rh1生物合成相关基因

目的 通过权重基因共表达网络分析（weighted gene co-expression network analysis,WGCNA）挖掘人参皂苷Rh1生物合成相关基因。方法 以种植于吉林省人参主产区304个农家品种的转录组测序数据为基础,以人参皂苷Rh1含量为表型进行差异表达基因的挖掘。结果 通过WGCNA获得6个与人参皂苷Rh1含量密切相关的基因共表达模块,根据关联分析结果确定Green模块为与人参皂苷Rh1含量显著相关的关键模块。功能注释结果显示Green模块内的基因富集到m RNA结合、蛋白修饰等多个相关途径。通过构建基因互作网络筛选获得7个核心基因,功能预测表明这些基因可能在人参皂苷Rh1的生物合成途径中起着重要作用。对7个候选基因进行茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,Me JA）体外调控分析。对人参不定根进行MeJA诱导处理,随Me JA的诱导,comp9517＿c0＿seq1、comp10896＿c0＿seq1、comp43180＿c0＿seq2、comp64014＿c0＿seq8的表达量与人参皂苷Rh1的含量同时呈现显著变化,但只有comp64014＿c0...     

甘草次酸修饰的人参皂苷Rh2脂质体的制备及其体外评价

目的:制备由甘草次酸修饰的人参皂苷Rh2脂质体,评价其体外理化性质和对人肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用。方法:采用薄膜分散法制备普通的人参皂苷Rh2脂质体(Rh2-L)和甘草次酸修饰的人参皂苷Rh2脂质体(GA-Rh2-L),利用UPLC测定人参皂苷Rh2的含量,流动相乙腈-水(28∶72),流速0.3 m L·min-1,检测波长203 nm。考察脂质体的包封率、粒径、体外释放率及Zeta电位,运用噻唑蓝(MTT)法评价人参皂苷Rh2溶液,Rh2-L和GA-Rh2-L对SMMC-7721细胞体外增殖的抑制作用。结果:与Rh2-L相比,GA-Rh2-L的包封率、粒径、体外释放率及Zeta电位等理化性质均无显著性差异。Rh2-L和GARh2-L的包封率分别为(91.67±1.05)%,(95.54±2.23)%,粒径(138.6±45.8),(146.5±48.9)nm,Zeta电位-(12.75±0.34),-(14.79±0.67)m V,72 h的体外释放率(84.67±7.23)%,(89.03±8.61)%。人参皂苷Rh2溶液在12 h内释药率达(91.23±5.17)%。细胞用药2 d后,GA-Rh2-L对SMMC-7721的半抑制率(IC50)分别为人参皂苷Rh2和Rh2-L的0.524,0.596倍,并呈浓度和时间以依赖关系。结论:甘草次酸修饰不会影响人参皂苷Rh2脂质体得理化性质,还可增加其对细胞的靶向性,增加了细胞毒性,为肝肿瘤的靶向治疗提供了新思路。     

原人参二醇类皂苷(PPD)在酶反应中转化动态及其产物稀有皂苷的制备

目的为了生物转化低成本制备人参稀有皂苷,利用Aspergillus g.848菌的粗酶与市售的原人参二醇类皂苷(PPD)混合皂苷反应,制备人参稀有皂苷C-K、C-Mc、F_2单体和4种异构体的Rh2组皂苷。方法酶与PPD皂苷反应,生成稀有皂苷;用HPLC法测定PPD皂苷原料和产物皂苷的组成,用硅胶柱法分离产物中的单体皂苷,用NMR法确认产物单体皂苷结构;用UPLC-MS法确认产物Rh2组。结果原料PPD中含有人参皂苷Rb_1、Rd、Rb_2、Rc和4种异构体的人参皂苷Rg3组;酶反应时,若生产以F_2为主的皂苷时,最佳反应时间为1.5~2.0h;若生产以C-K为主的皂苷时,反应时间为24.0~30.0h;若生产以Rh2组为主的皂苷时,反应6.0~12.0h时,Rg_3组产量低而Rh_2组产量高。以C-K为主的皂苷生产中,从30 g的PPD皂苷酶反应得到20 g产物,经硅胶柱分离,得到8.16 g的C-K、1.01 g的C-Mc、0.45 g的F_2单体和0.19 g的Rh_2组皂苷,并以NMR和UPLC-MS法核对了其结构。结论 PPD皂苷经酶转化成功地制备了高活性C-K、C-Mc、F_2和Rh_2组皂苷。     

人参皂苷Rg3对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管的影响

目的探究人参皂苷Rg3对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管形成的影响。方法裸鼠背侧近右后肢处sc胰腺癌SW-1900细胞建立胰腺癌皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为对照组及人参皂苷Rg3低、高剂量(10、20 mg/kg)组。给药组ip人参皂苷Rg3,对照组ip0.9%氯化钠溶液,每2天1次,连续4周。给药结束3d后裸鼠脱颈椎处死,取瘤组织。采用免疫组化法检测各组裸鼠瘤组织中内皮细胞标记物CD31表达,计算微血管密度;采用qRT-PCR和Westernblotting法检测各组裸鼠瘤组织中血管内皮钙黏素(vascularendothelialcadherin,VE-cadherin)、络氨酸激酶受体A2(erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2,EphA2)m RNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,人参皂苷Rg3组胰腺癌裸鼠皮下移植瘤质量显著降低(P<0.05),微血管密度显著降低(P<0.05),VE-cadherin、EphA2m RNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3可能通过调控VE-cadherin、EphA2m RNA和蛋白表达,从而抑制胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管形成。     

人参皂苷Rh_2促进K562细胞自噬凋亡的体内实验研究

该实验为研究人参皂苷Rh_2对人白血病细胞体内抑制作用,并从自噬凋亡角度来探讨其机制。采用人白血病K562细胞异体移植瘤模型,灌胃人参皂苷Rh_2后,测取肿瘤直径、体积、抑瘤率,观察人参皂苷Rh_2的抗肿瘤活性;化学发光法检测瘤组织HDAC和HAT活性;Western blotting法检测HDAC1,HDAC2,HDAC3,HDAC4,HDAC5,HDAC6的表达;Real-time PCR法检测自噬重要基因和HDAC6,Hsp90的mRNA表达水平;HE染色观察细胞凋亡,免疫组化法检测HDAC6,Hsp90和激活型的caspase 3蛋白表达水平。结果显示,人参皂苷Rh_2能抑制K562细胞异体移植瘤的生长,抑制率达53.10%;人参皂苷Rh_2能明显降低HDAC活性和降低HDAC1,HDAC2,HDAC6表达;人参皂苷Rh_2能抑制HDAC6和Hsp90表达,并增加自噬重要基因beclin-1,LC3A和LC3B表达;组织病理学结果显示人参皂苷Rh_2可明显增加肿瘤细胞凋亡。人参皂苷Rh_2具有较好的体内抗肿瘤作用,可能通过HDAC6,Hsp90通路调节自噬凋亡,抑制肿瘤细胞在体内增殖。     

稀有原人参三醇型皂苷的生物转化研究进展

人参是传统的名贵中药,其主要活性成分为人参皂苷,对心血管、肿瘤、中枢神经系统等疾病有显著的疗效。特别是原人参三醇(PPT)型皂苷Rh_1具有良好的抗炎、抗过敏、提高记忆力等活性。人参皂苷Rh_1仅微量地存在于人参、三七、西洋参中。生物转化方法制备稀有人参皂苷已成为一种有效的途径。综述利用生物转化方法对PPT型人参皂苷进行转化,生成稀有人参皂苷的研究进展,以期为稀有人参皂苷的进一步开发利用提供参考。     

人参皂苷Rh2抗肝癌作用机制的研究进展

人参皂苷 Rh_2是一种含有达玛烷型骨架的四环三萜类皂苷单体,具有毒性低、相对分子质量小、脂溶性好、抗癌作用强等优势,是人参中主要的抗癌有效成分。近年来,有关人参皂苷 Rh_2的研究成果不断涌现,其对发病率和死亡率较高的多种癌症,均表现出明显的抗癌活性,其中人参皂苷 Rh_2抗肝癌的作用显著,因此关于抗肝癌作用机制的研究逐渐被人们重视。该文查阅中国知网,万方数据,维普数据,Pub Med等多个中英文数据库近20年来100余篇国内外相关文献资料,并对其中有关人参皂苷 Rh_2抗肝癌作用机制的内容进行详细的整理、归纳、分析和总结,发现虽然有关人参皂苷 Rh_2抗肝癌相关研究的报道不少,但是对于人参皂苷 Rh_2抗肝癌的作用机制没有进行系统的阐述,因此该文全面地探讨了人参皂苷 Rh_2抗肝癌的作用机制,明确了人参皂苷 Rh_2抗肝癌的作用机制可能与抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞分化、促进肝癌细胞凋亡、抑制肝癌细胞侵袭与转移、降低肝癌细胞耐药性和提高机体免疫力等作用有关。首次对人参皂苷 Rh_2抗肝癌的作用机制进行较全面的整理,为科研人员开展有关人参皂苷 Rh_2抗肝癌的相关研究提供了参考和借鉴,为人参皂苷 Rh_2的进一步研究提供依据和思路,为肝癌的治疗提供新的研究方向,为肝癌患者带来了新希望。     

Enhancement of adipose differentiation of mouse 3T3-L1 fibroblasts by ginsenosides

Some ginsenosides, extracted and purified from the roots of Panax ginseng C. A. Meyer, stimulated adipose differentiation of mouse 3T3-L1 fibroblasts. Ginsenoside Rb₁ induced adipose differentiation of 3T3-L1 cells in a culture medium supplemented with 20% fetal calf serum, but not in one with 10% fetal calf serum. Furthermore, ginsenoside Rb₁ enhanced adipose differentiation induced by insulin or dexamethasone plus 1-methyl-3-isobutylxanthine (DEX-MIX). Other ginsenosides such as ginsenoside Rd and Rh₂ also enhanced DEX-MIX-induced adipose differentiation, but ginsenosides Re, Rg₁ and Ro had no effect. These results suggest that there is a clear structure-activity relationship to the 20(S)-protopanaxadiol aglycone group only in stimulation of adipose differentiation.