巨噬细胞移动抑制因子在原发性肾小球肾炎肾脏组织中的表达及其意义

目的 研究巨噬细胞移动抑制因子（MIF）在原发性肾小球肾炎患者肾脏组织中的表达水平及其与巨噬细胞浸润、肾脏病理改变、肾功能损害的相关关系。方法 正常人和原发性肾小球肾炎患者肾组织MIF蛋白、巨噬细胞标记抗原（抗CD68,KPI）的检测应用微波免疫组织化学染色方法检测;MIF的基因表达应用原位杂交方法;MIF与KP1的相关关系应用免疫组织化学双标记技术检测。肾脏组织的病理改变应用常规病理学方法检测。24h尿蛋白、血肌酐的测定按本院检验科常规方法检测。结果 正常人肾脏组织仅有少量MIF的表达,原发性肾小球肾炎患者肾脏组织MIF表达水平（包括蛋白和mRNA）显著上调。原发性肾小球肾炎患者肾组织MIF表达水平与KP1^ 细胞数有显著相关性,MIF表达水平、MIF^ KP1^ 细胞数与肾脏病理改变程度及肾功能损害明显相关。结论 MIF在原发性肾小球肾炎患者肾脏组织的表达水平显著上调;并与肾脏组织巨噬细胞浸润、肾脏病理改变程度、肾功能损害密切相关,提示MIF表达水平显著上调可能是原发性肾小球肾炎患者肾损害的重要机制之一。     

核因子-κB在狼疮肾炎肾组织中的表达及其意义

目的了解狼疮肾炎(LN)肾组织中核因子(NP)-κB的表达并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系.方法以NF-κB亚基P65单抗为抗体,采用微波免疫组织化学染色(APAAP法)检测LN肾组织NF-κB表达,并进一步分析其与肾小球内C-myc蛋白表达、LN活动指数、肾脏病理和功能损害的关系.结果狼疮肾炎肾组织中NF-κB表达较正常肾组织显著增高,以WHOⅣ型为最显著.NF-κB在肾小球和肾小管均有表达,但小管表达更显著.LN肾组织NF-κB阳性细胞数与肾小球C-myc蛋白表达量、肾组织活动指数、肾脏病理改变和肾功能损害显著相关.结论NF-κB可能参与了LN的发病机制,肾组织中NF-κB的表达可作为反映狼疮肾组织活动病变和进行性肾损害的参考指标.     

巨噬细胞移动抑制因子在狼疮性肾炎中的作用

目的了解狼疮性肾炎肾组织巨噬细胞移动抑制因子（ＭＩＦ）的表达及其与肾脏病理和功能损害的关系。方法采用微波免疫组化双重染色的方法，观察正常肾和狼疮肾组织ＭＩＦ表达及狼疮肾皮质ＭＩＦ＋、小鼠抗人ＣＤ６８抗体（Ｋｐ１＋）、ＭＩＦ＋Ｋｐ１＋细胞数与狼疮肾组织活动指数、肾脏组织功能损害的关系。结果狼疮性肾炎肾组织ＭＩＦ表达较正常组明显增多、增强，狼疮组肾组织ＭＩＦ＋、Ｋｐ１＋、ＭＩＦ＋Ｋｐ１＋细胞数与狼疮肾组织活动指数、肾脏病理和功能损害明显相关。结论ＭＩＦ在介导狼疮性肾炎病损中起重要作用，其上调表达可作为反映狼疮肾活动及进行性肾损害的指标。     

尿Ⅳ型胶原浓度与IgA肾病肾组织损害的关系

目的:观察IgA肾病(IgAN)患者尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)浓度及其与肾组织Col-Ⅳ表达和肾脏病理之间的关系,以期寻找一种能反映IgAN肾损害的非创伤性临床检测指标.方法:ELISA法测定IgAN患者血、尿Col-Ⅳ浓度;免疫组化法检测肾组织Col-Ⅳ表达;应用计算机病理图像分析系统对肾小球基质基底膜面密度、小球细胞个数及肾小管间质病变程度进行半定量分析,观察尿Col-Ⅳ浓度与IgAN患者肾组织Col-Ⅳ表达及肾病理损伤的关系.结果:IgAN患者尿Col-Ⅳ浓度、肾组织Col-Ⅳ表达较健康人明显增高,尤其是增生硬化和间质纤维化显著者更为明显;尿Col-Ⅳ浓度与肾组织Col-Ⅳ表达、肾小球基质基底膜面密度、小管间质损害显著正相关,且在轻度细胞外基质积聚和小管间质损害时,尿Col-Ⅳ浓度即增高;与小球内细胞个数呈负相关,而与肾小球系膜区、毛细血管襻区免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和C3沉积的量和沉积范围无关,与血Col-Ⅳ水平无显著相关.结论:IgAN患者尿Col-Ⅳ浓度明显增高,尿Col-Ⅳ水平可作为监测IgAN患者早期肾硬化的一项指标.     

狼疮肾炎患者肾组织CD134(OX40)表达的免疫组织化学分析

目的：了解狼疮肾炎(LN)肾组织中CD134(OX40)的表达并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法：用免疫组织化学方法对40例LN患肾组织CD134的表达进行检测，并对其与LN的肾脏病理改变和肾功能损害的相关性进行分析。结果：LN患肾组织中，CD134表达显上调，尤其以WHO Ⅳ型LN更为明显。除系膜细胞、内皮细胞和远曲小管CD134表达明显增强外，肾间质毛细血管和大血管内皮细胞亦有CD134表达阳性的浸润细胞。LN肾组织加以表达与LN肾脏病理活动指数和肾功能损害显相关。结论：LN患确实存在CD134共刺激分子的异常表达，这在LN的发生和发展中可能起着重要的作用。     

巨噬细胞移动抑制因子在狼疮肾炎患者血清和尿液中的表达

目的探讨巨噬细胞移动抑制因子（MIF）在狼疮。肾炎（LN）发病过程中的分子生物学机制及其在疾病进展中的作用。方法选择我院LN患者30例，用酶联免疫吸附方法测定LN患者血清和尿液MIF浓度，并将血清和尿液MIF浓度与狼疮活动指数、24h尿蛋白定量、血尿和肌酐清除率（Ccr）进行相关性分析，以20名健康体检者作对照组。结果LN患者血清和尿液MIF浓度均高于对照组（P〈（）．01）；活动期LN患者治疗后尿液MIF浓度较治疗前降低（P％0．（）1），而血清MIF浓度治疗前、后无统计学差异（P〉0．05），活动期较静止期LN患者血清和尿液MIF浓度升高（P〈0．01），LN患者血清和尿液MIF浓度与狼疮活动指数呈正相关（r分别为0．598和0．641，P〈0．01）；LN患者血清和尿液MIF浓度均与24h蛋白尿定量呈显著正相关（r分别为0．524和0．749，P〈0．01），与血尿和Ccr均无相关性（P〉0．05）。结论LN患者尿液MIF浓度明显升高，与病情活动程度相关，对于判断患者病情的活动有一定价值。     

中性粒细胞细胞外网络与B淋巴细胞在狼疮肾炎患者肾组织的表达及其意义

目的 探讨中性粒细胞细胞外网络(NET)在狼疮肾炎(LN)患者肾组织中的表达与狼疮活动的关系.方法 采用免疫组织化学技术,分别检测NET(以瓜氨酸化的组蛋白H3为标志)在20例LN、8例微小病变(MCD)患者和3例健康对照的肾组织的表达,同时检测相应部位B淋巴细胞(CD19标志)的浸润.分析LN患者肾组织活动指数和慢性指数评分,以及它们与NET的关系.结果 LN患者肾小球中NET表达显著高于健康对照组和MCD组(1.056±0.985比0±0、0±0,均P＜0.01).在中、重度增生的系膜细胞、细胞新月体、有炎性细胞浸润的肾小管间质,NET表达显著上调;系膜细胞中、重度增生肾小球的NET表达显著高于其他类型肾小球,差异均有统计学意义(均P＜0.01).中、重度系膜细胞增生肾小球的平均NET阳性细胞数与LN病理活性指数呈正相关(r=0.620,P=0.004);与SLE-DAI评分呈正相关(r=0.492,P=0.027);与肾小管中NET阳性细胞数呈正相关(r=0.558,P=0.011).肾间质NET阳性细胞数与肾间质阳性B淋巴细胞数呈正相关(r=0.573,P=0.008);与LN病理慢性指数呈正相关(r=0.645,P=0.002).结论 NET在LN患者肾组织广泛表达,肾小球中浸润的NET可能参与了LN患者肾组织的活动性损伤.     

细胞周期抑制蛋白p21 cipl在狼疮肾炎肾组织中的表达及其意义

目的 了解狼疮肾炎（LN）中细胞周期抑制蛋白p21^cip1的表达并探讨其与肾脏病病理改变，细胞增生及LN肾组织活动性的关系。方法 采用微波免疫组织化学染色法检测LN肾组织p21^cipl表达，并进一步分析其与肾小球增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞数、LN活指数、细胞增生等肾脏病理改变的相关关系。结果 正常肾小球细胞无或仅有p21^cipl表达，LN肾小球细胞p21^cipl的表达显著上调。尤以非Ⅳ型为显著，LN肾组织p21^cipl阳性细胞数，PCNA阳性细胞数及LN肾组织活动指数显著负相关，结论 p21^cipl在LN肾小球细胞中呈高表达，且与肾小球细胞增生程度密切相关，p21^cipl可能参与LN发病的过程。     

颗粒膜蛋白的表达与狼疮肾炎的关系研究

目的 了解血浆黏附分子颗粒膜蛋白（ＧＭＰ－１４０）水平及其在肾组织的表达与狼疮肾炎（ＬＮ）活动、肾脏病理及痛功能损害的关系。方法 用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定血浆ＧＭＰ－１４０水平,并用免疫组织化学染色法,观察正常肾和狼疮组织ＧＭＰ－１４０表达。结果 ＬＮ患者较正常人以及活动ＬＮ较非活动ＬＮ,血ＧＭＰ－１４０水平显著升高;ＬＮ肾组织ＧＭＰ－１４０表达较正常肾组织明显增强,且狼疮肾组织ＧＭＰ－     

骨调素对巨噬细胞在新月体肾炎肾脏组织局部浸润的影响

目的观察骨调素（ＯＰＮ）在大鼠实验性新月体肾炎肾脏组织中的表达及功能性抑制ＯＰＮ的活性对巨噬细胞在肾脏局部浸润的影响。方法ＯＰＮ在肾脏组织蛋白和基因水平的表达分别应用免疫组化双标记及原位杂交技术。结果在实验性新月体肾炎肾脏组织内ＯＰＮ的表达明显升高，并与肾脏局部巨噬细胞的浸润、肾脏病理损害程度及肾功能的下降明显相关。应用抗ＯＰＮ抗体治疗以后可显著抑制ＯＰＮ在肾脏组织的表达，同时巨噬细胞在肾脏组织局部的浸润也明显减少，肾脏病理损害减轻、肾功能明显改善。结论ＯＰＮ的高表达是实验性新月体肾炎发病过程中巨噬细胞在肾脏组织局部浸润的重要介导因子，抑制ＯＰＮ的表达和功能可显著抑制肾脏局部巨噬细胞的聚集及改善肾功能。     

MIF的研究及其在男性盆腔脏器疾病的研究进展

巨噬细胞游走抑制因子(MIF)是最早发现的淋巴因子,由多种细胞产生,作为一种多功能的细胞因子(CK),MIF在各组织内广泛表达,参与了多种疾病的发生发展.MIF在男性盆腔脏器疾病中发挥重要作用,如参与前列腺炎、尿道炎、膀胱炎的发生及发展,且可影响男性生育能力.本文就MIF近年来的研究及其在男性盆腔脏器疾病的研究作一综述.     

MIF在肾小球肾炎发病机制中的研究进展

MIF抑制巨噬细胞移动,是一种前炎症因子,在局部参与多种炎性和免疫性疾病的发生发展,目前MIF在肾小球肾炎发病机制及治疗中的作用倍受关注。本文现就MIF与肾小球肾炎发病机制的关系及检测MIF对肾小球肾炎治疗的指导意义和应用前景作一综述。     

The MIF receptor CD74 in diabetic podocyte injury

Although metabolic derangement plays a central role in diabetic nephropathy, a better understanding of secondary mediators of injury may lead to new therapeutic strategies. Expression of macrophage migration inhibitory factor (MIF) is increased in experimental diabetic nephropathy, and increased tubulointerstitial mRNA expression of its receptor, CD74, has been observed in human diabetic nephropathy. Whether CD74 transduces MIF signals in podocytes, however, is unknown. Here, we found glomerular and tubulointerstitial CD74 mRNA expression to be increased in Pima Indians with type 2 diabetes and diabetic nephropathy. Immunohistochemistry confirmed the increased glomerular and tubular expression of CD74 in clinical and experimental diabetic nephropathy and localized glomerular CD74 to podocytes. In cultured human podocytes, CD74 was expressed at the cell surface, was upregulated by high concentrations of glucose and TNF-alpha, and was activated by MIF, leading to phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase 1/2 and p38. High glucose also induced CD74 expression in a human proximal tubule cell line (HK2). In addition, MIF induced the expression of the inflammatory mediators TRAIL and monocyte chemoattractant protein 1 in podocytes and HK2 cells in a p38-dependent manner. These data suggest that CD74 acts as a receptor for MIF in podocytes and may play a role in the pathogenesis of diabetic nephropathy.     

Polymorphisms of the MDR1 and MIF genes in children with nephrotic syndrome

Oral steroid treatment is the first line of therapy for childhood nephrotic syndrome (NS). Nonetheless, some patients are resistant to this treatment. Many efforts have been made to explain the differences in the response to steroid treatment in patients with NS based on the genetic background. We have investigated single nucleotide polymorphisms of the MDR1 [C1236T (rs1128503), G2677T/A (rs2032582), and C3435T (rs1045642)] and MIF (G-173C, rs755622) genes in 170 children with NS. Of these children, 69 (40.6%) were initial steroid non-responders, and 23 (13.5% of total) developed chronic kidney disease. Renal biopsy findings, which were available for 101 patients, showed that 35 patients had minimal change lesion and 66 had focal segmental glomerulosclerosis. The frequencies of the MDR1 1236 CC (18.8 vs 7.2%) or TC (53.5 vs 43.5%) genotype and C allele (45.5 vs 29.0%) were significantly higher in the initial steroid responders than in the non-responders. Analysis of MDR1 three-marker haplotypes revealed that the frequency of the TGC haplotype was significantly lower in the initial steroid responders than in the non-responders (15.8 vs 29.0%). There was no association between the MIF G-173C polymorphism and clinical parameters, renal histological findings, and steroid responsiveness. These data suggest that the initial steroid response in children with NS may be influenced by genetic variations in the MDR1 gene.     

siRNA沉默MIF基因抑制骨肉瘤143B细胞增殖

背景：巨噬细胞移动抑制因子（MIF）是一种多功能细胞因子,其在人体炎症、免疫反应和肿瘤发生发展中起重要作用。目的：研究应用小干扰RNA（siRNA）干扰RNA（RNAi）技术阻断MIF基因表达后对骨肉瘤细胞株143B细胞增殖的抑制效应。方法：转染MIF-siRNA为实验组,转染Fam-siRNA为对照组,采用免疫荧光法观测siRNA的转染率,分别用q-PCR和Western blot检测143B细胞中MIF-mRNA和MIF蛋白的表达水平,用MTT法检测143B细胞增殖能力。结果：实验组MIF-mRNA基因的相对表达量为对照组的26%,相比较有统计学差异（P〈0.05）;实验组MIF蛋白的相对表达量约为对照组的30%,相比较有统计学差异（P〈0.05）;143B细胞转染72h后,实验组能显著抑制143B细胞的活性。结论：MIF在骨肉瘤的发生发展过程中发挥重要作用,MIF-siRNA能阻断MIF蛋白表达,从而抑制143B细胞增殖,提示其可能成为骨肉瘤的新治疗靶点。     

Transgene of MIF induces podocyte injury and progressive mesangial sclerosis in the mouse kidney

BACKGROUND: Recent evidence suggests that macrophage migration inhibitory factor (MIF) is a proinflammatory cytokine that plays a pathogenic role in glomerulonephritis. Renal expression of MIF is up-regulated in infiltrating and intrinsic renal cells, which include glomerular epithelial cells. The aim of the current study was to further clarify the role of MIF produced by podocytes in the process of renal disease. METHODS: We generated transgenic mice carrying a murine MIF cDNA driven by cytomegalovirus enhancer and beta-actin/beta-globin promoter, a hybrid promoter transactivated in podocytes in vivo. RESULTS: MIF expression was markedly up-regulated in podocytes in neonatal and adult transgenic kidneys. A longitudinal study of the MIF transgenic mice demonstrated a progressive matrix increase in mesangium accompanied by collagen IV accumulation, representing no significant glomerular cell hypercellularity. The glomeruli in transgenic kidney were not accompanied by influx of macrophages and T cells at the early stage of disease progression. Although a significant number of the mice showing higher expression of MIF died from renal failure at 8 weeks, most of them survived with significant proteinuria and progressive renal failure. Podocytes of transgenic mice frequently underwent characteristic ultrastructural changes, such as cell flattening, contracted foot processes, and villous transformation. In addition, immunohistochemical expression of synaptopodin, an actin-associated protein distributed in differentiated podocyte foot process, was significantly attenuated in transgenic kidney. CONCLUSION: Our results indicate that podocyte-expressed MIF could induce an injury of podocytes themselves, thereby accelerating the progression of glomerulosclerosis and leading to end-stage renal failure.     

MIF和Cyclin D1在肝细胞癌中的表达

目的 探讨巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及两者在肝癌发病机制及细胞周期调控中的关系.方法 应用定量PCR及Westem blot技术检测MIF和Cyclin D1在肝癌组织和癌旁组织的表达.化学合成MIF siRNA,将PLC细胞和HepG2细胞分成对照组、MIF siRNA 50 nmol/L干预组、MIF siRNA 1130 nmol/L干预组,脂质体法转染肝癌细胞PLC和HepG2,定量PCR技术和Western blot检测MIF siRNA干扰后MIF和Cyclin D1 mRNA和蛋白的表达变化.结果 MIF和Cyclin D1蛋白在肝癌组织中的相对表达量为0.825±0.13和0.843±0.104;MIF和Cyclin D1 mRNA在肝癌组织中的相对表达量为癌旁组织的(7.31±1.85)倍和(4.27±1.05)倍,与癌旁组织相比,差异均具有统计学意义(FMIF=15.5,P<0.01;fCyclin D1=87.5,P<0.01).应用小RNA干扰技术转染PLC和HepG2肝癌细胞后MIF mRNA分别下调71.2%±7.2%、87.4%±2.9%、74.3%±8.9%、88.4%±4.6%(FPLC=315.5,P<0.01;FHHepG2=201.2,P<0.01);MIF蛋白分别下调为0.33±0.03、0.11±0.02、0.81±0.08、0.36±0.02,并呈剂量依赖关系(FPLC=43.9,P<0.01;FHepG2:133.4,P<0.01).伴随MIF mRNA和蛋白的表达F调Cyclin D1 mRNA分别下调68.2%±3%、78.1%±1.4%、65.8%±4.7%、77.3%±2.6%(FPLC=1569,P<0.01;FHepG2=480.4,P<0.01);Cyclin D1蛋白下调0.28±0.06、0.15±0.03、0.44±0.04、0.13±0.02,亦呈剂量依赖关系,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),两干预组相比差异有统计学意义(FPLC=35.5,P<0.01;FHepG2=114.7,P<0.01).结论 MIF和Cyclin D1在肝细胞癌中过表达,MIF可能在转录水平调控Cyclin D1的表达,并促使肿瘤细胞通过细胞周期检测点,继续增值和分化,导致肿瘤的形成.     

巨噬细胞移动抑制因子与泌尿系统疾病

巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是一种多功能细胞因子,因与多种炎症性疾病及肿瘤等密切相关而倍受关注.本文就MIF结构特点、来源,生物学特征、与多种泌尿系统疾病(如肾炎、前列腺癌、膀胱癌)的研究现状以及临床应用前景作一综述.