抗人肝癌单抗制备的HAg18-1血清酶联免疫检测试剂在肝癌病人诊断中的初步应用

报道了用抗人肝癌单克隆抗体(McAb)制备的HAg18-1血清快速EIA检测试剂对良恶性消化系疾病血清检测结果。阳性率如下:原发性肝癌(PLC)79.63％(43/54);肝硬变9.09％(2/22);乙型肝炎4.88％(2/41);胃癌23.08％(6/26);大肠癌20％(5/25)。19例胃肠炎、16名正常人均为阴性。该试剂对PLC诊断的特异性为89.52％,HAg18-1阳性与甲胎蛋白(AFP)含量无关。两者合用对PLC诊断阳性率达94.44％。     

抗人肝癌单抗HBb18F（ab‘）2片段的制备及纯化

目的：制备抗人肝癌单抗（McAb)HAb18F(ab')2片段。方法：用二硫苏糖醇（DTT）激活木瓜蛋白酶,pH5.5环境下消化HAb18McAb(IgG1),然后用快速蛋白液相色谱（FPLC）DEAE－Sepharose-FF柱（2cm×18cm)纯化,对所获F(ab')2段的纯度,免疫活性,热原质,细菌,产率等方面进行质量检测。结果：在酶：抗体为1：20,消化HAb182h,95%以上IgG裂解为F（ab')2段,纯化后F(ab')2段的纯度为＞96．1％,纯化周期60min,一次制备量可达500mg产率为53％,免疫尖性1：8000,细菌,热原检测结果为阴性。结论：该法是一种快速,大量制备高产率,高质量McAb IgG1亚类F（ab')2段的有效方法。     

抗人肝癌单抗HAb18F(ab’)_2片段的制备及纯化

目的：制备抗人肝癌单抗（ ＭｃＡｂ） ＨＡｂ１８ Ｆ（ａｂ’）２ 片段。方法 ：用二硫苏糖醇（ＤＴＴ） 激活木瓜蛋白酶,ｐＨ５ ．５ 环境下消化ＨＡｂ１８ ＭｃＡｂ（ＩｇＧ１） ,然后用快速蛋白液相色谱（ＦＰＬＣ） ＤＥＡＥ－ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ － ＦＦ 柱（２ｃｍ ×１８ｃｍ）纯化。对所获Ｆ（ａｂ’）２ 段的纯度、免疫活性、热原质、细菌、产率等方面进行质量检测。结果：在酶∶抗体为１∶２０ ,消化ＨＡｂ１８ ２ ｈ ,９５ ％ 以上ＩｇＧ 裂解为Ｆ（ａｂ’）２ 段,纯化后Ｆ（ａｂ’）２ 段的纯度为＞ ９６ ．１ ％ ,纯化周期６０ ｍｉｎ , 一次制备量可达５００ ｍｇ ,产率为５３ ％ ,免疫活性１∶８０００ ,细菌、热原检测结果为阴性。结论：该法是一种快速、大量制备高产率、高质量ＭｃＡｂ ＩｇＧ１ 亚类Ｆ（ａｂ’）２ 段的有效方法。     

小细胞肺癌肿瘤标志物--胃泌素释放肽前体酶联免疫检测方法的研究进展

介绍一种新的小细胞肺癌的肿瘤标志物,用基因重组的人胃泌素释放肽前体（ｐｒｏ－ｇａｓ－ｔｒｉｎ－ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅ,ＰｒｏＧＲＰ）制备单克隆抗体和抗血清,建立ＰｒｏＧＲＰ的双抗体夹心酶联免疫检测（ＥＬＩＳＡ）方法。临床实验研究显示该检测方法对小细胞肿瘤诊断的特异性高,对早期小细胞肺癌也有较高的阳性率,检测的可靠性也很高。各种临床实验结果也证明,ＰｒｏＧＲＰ是临床诊断和临别诊断小细胞肺     

酶联免疫吸附测定检测人血清胰岛素抗体的研究

报告用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定人血清胰岛素抗体(IAb),批内及批间平均变异系数分别为8.3％、14.6％;阻断试验及交叉反应试验证明有较高的免疫学特异性。用本法调查了177名正常人血清中IAb,P/N值为0.9±0.27((?)±S),以>1.6((?)+2.5S)为阳性,阳性率为1.1％(2/177);接受胰岛素治疗的糖尿病(DM)组血清IAb阳性率为60％(27/45),与非胰岛素治疗的DM组、非DM组及正常对照组差异非常显著(P<0.01);非胰岛素治疗的DM组、肾病组及结缔组织疾病组阳性率分别为11.30％(9/80)、59％(3/51)、25％(5/20),与正常对照组比差异显著(P<0.01、0.05>P>0.01、P<0.01);结果提示ELISA法测IAb具临床特异性。本法简便,可为研究DM患者对胰岛素的免疫应答提供一个实用的工具。     

肝动脉注射治疗剂量^131I—抗人肝癌McAb的RII

在动物实验基础上，以＾１３１Ｉ标记抗人肝癌单克隆抗体Ｈｅｐａｍａ Ｉ进行人体显像研究。单抗系小鼠ＩｇＧ１，裸鼠实验显示有良好的肿瘤定位效果。１８例原发性肝癌（ＰＨＣ）患者，以Ｓｅｌｄｉｎｇｅｒｓ法经肝固有动脉注入＾１３１Ｉ－Ｈｅｐａｍａ Ｉ，平均剂量为３５５ＭＢｑ／１．５ｍｇ ＩｇＧ１，术后行全身及肝区γ显像，测定全身重要脏器和癌区的放射性计数比值。结果：显像阳性率７７．７％，最佳时间为注入后９６     

^99mTc—抗转铁蛋白受体单抗放射免疫显像的初步研究

９９ｍＴｃ抗转铁蛋白受体单抗放射免疫显像的初步研究蒋宁一陈亚进吕斌转铁蛋白受体在肝癌组织细胞膜上有大量的表达，而正常肝细胞表达极少〔１，２〕。基于免疫学原理，用放射性核素标记抗转铁蛋白受体单克隆抗体（ＭｃＡｂ）进行放射免疫显像（ＲＩＩ），有可能成为...     

一种新型人TNFα对人肝癌裸鼠移植瘤的抗瘤作用

用人肝癌Ｂｅｌ７４０２瘤株建立了人肝癌裸鼠移植瘤模型，探讨新型重组人ＴＮＦａ对这种移植瘤的抗瘤作用，结果表明，ｒｈＴＦａＤ１１ａ和原型重组人ＴＮＦａ的抑瘤率在３０％左右时，后者后用的活性产闰数是前者的２倍；两者用量相同时，前者的抑产经比后者提高２３个百分     

^131I—抗HBxAg人／鼠嵌合抗体在裸鼠人肝癌模型定位的初步研究

在抗ＨＢｘＡｇ人／鼠嵌合抗体基因构建及表达成功后，进行了放射免疫显像研究，以评价在其在动物模型中的导向活性。＾１３１Ｉ标记嵌合抗体，经腹腔注射１，５，７天后行裸鼠人肝癌模型放射免疫显像，于第７天作组织分布测定，并以单区抗体及原鼠源抗体对照进行比较，结果显示实验组在标记抗体注入后２天即获肿瘤阳性显像，第７天更清晰，此时嵌合抗体，单区抗体，抗ＨＢｘ单抗及对照组的瘤／肝放射性比值分别为２．８，２．４４，     

酶联免疫试验测定血清中结核抗体的应用

采用酶联免疫试验(ELISA)技术检测38例肺结核病人血清中结核抗体，同时应用痰集菌法找抗酸杆菌．结果表明血清中结核抗体的检测可以作为结核病的辅助诊断。具体做法如下。     

人肝癌细胞中端粒酶RNA的克隆及序列分析

目的：比较不同组织细胞中端粒酶ＲＮＡ（ｈＴＲ）的序列，建立以ｈＴＲ为基础的肿瘤诊断与治疗新技术。方法：采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术从人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２）中扩增出了ｈＴＲ部分ｃＤＮＡ序列，并通过电泳的方法鉴定了其特异性。通过分子克隆技术将上述产物插入Ｔ－质粒后转化入大肠杆菌ＪＭ１０９中，经聚合酶链反应（ＰＣＲ）鉴定了插入片段的特异性及方向，最后采用自动ＤＮＡ序列分析仪分析了上述插     

原发性肝癌与血清中HBxAg和抗—HBx的关系

用病例对照的方法，研究了原发性肝癌与血清中HBxAg和抗-HBx的关系。结果表明，肝癌病人与非肝癌的其他肿瘤病人（所有两组病人皆有乙型肝炎感染标记），他们血清中HBxAg和抗-HBx的阳性率差别都不显著，提示HBxAg或抗-HBx与肝癌的关系不密切，二者都不适于作为肝癌的早期诊断指标。     

西妥昔单抗对人肝癌细胞HepG2的体外效应

目的探讨西妥昔单抗（爱必妥,cetuximab,Erbitux）对人肝癌细胞HepG2的体外效应。方法流式细胞术检测HepG2细胞表面表皮生长因子受体（EGFR）的表达。细胞划痕及Transwell实验检测西妥昔单抗对HepG2细胞迁移能力的影响。Western印迹检测西妥昔单抗对HepG2细胞EGFR、AKT及ERK表达及活化的影响。碘化丙啶（propidium lodide,PI）染色检测西妥昔单抗对细胞周期的影响。结果流式细胞分析结果显示,HepG2细胞表面存在较高水平的EGFR表达;细胞划痕及Transwell结果表明,西妥昔单抗对HepG2细胞迁移能力具有明显的抑制效应;Western印迹结果证明西妥昔单抗能显著降低HepG2细胞内EGFR、AKT及ERK的磷酸化水平;细胞周期分析显示西妥昔单抗作用24 h剂量依赖性影响HepG2细胞周期进程,并将其阻抑在G0/G1期。结论西妥昔单抗可以抑制高表达EGFR的肝癌细胞系HepG2胞内关键信号蛋白的活化,阻滞其细胞周期,抑制肝癌细胞的迁移能力。     

~(99m)Tc标记抗人肝癌单抗Fab片段修饰物在荷人肝癌裸鼠模型中的放射免疫显像

研究抗人肝细胞癌单克隆抗体Ｆａｂ片段修饰物的９９ｍＴｃ标记方法。用２亚氨基噻吩盐酸盐（ＩＴ）修饰ＨＡｂ１８Ｆａｂ片段。用９９ｍＴｃＧＨ转络合法标记ＩＴＦａｂ，测定标记物的放化纯度及生物活性，进行荷人肝癌裸鼠模型的放射免疫显像。结果：纸层析法测得标记率为５０％～８０％，体外细胞结合法测定免疫活性为３０％～４０％。荷人肝癌裸鼠模型尾静脉注入９９ｍＴｃＩＴＦａｂ后４～８小时，肿瘤区放射性有浓聚，１２～２２小时浓聚最多，Ｔ／ＮＴ值为５１８～７４８。因此，９９ｍＴｃＩＴＦａｂ可特异性浓聚于荷人肝癌裸鼠模型中，可能成为肝癌放射免疫显像的有效显像剂。     

抗人乳腺癌单克隆抗体3M1的制备

抗人乳腺癌单克隆抗体３Ｍ１的制备李卫平赵林普军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０李红芬李维华解放军总医院北京１００８５３在我国，妇女恶性肿瘤发病率中乳腺癌占首位，因而区别其良性还是恶性是临床上的重要课题。国内外相继用单克隆抗体作为乳腺良、恶性...