石蜡组织芯片制备技术的改良

目的：探讨组织芯片制备方法以及相关技术改良,提高组织芯片制备的质量。方法：使用组织芯片空心蜡模一次性成型的模具,应用改良的组织芯片制备方法以及二次石蜡包埋技术,制作食管癌肿瘤组织芯片,常规病理石蜡切片制备组织芯片,观察实验结果。结果：组织芯片空心蜡模制备成功率达100%。所制备的组织芯片石蜡块内组织芯切片平面整齐,无组织芯倒浮现象。组织芯片切片中组织芯片微组织片阵列整齐,无微组织片皱褶以及微组织片脱片现象。组织芯片常规HE染色后,经病理诊断医生阅片,并与各组织芯原供体石蜡标本常规病理HE染色片进行对照观察,病理诊断结果一致。结论：改良的石蜡组织芯片制备技术简单易学,操作流程容易掌握控制,提高了组织芯片制作的质量,有利于组织芯片技术的普及和推广应用。     

简易大鼠组织芯片在石蜡切片制备中的应用

目的:探索制作大鼠各主要脏器的组织芯片的简易方法。方法:对SD大鼠多脏器不同组织分类处理,分批脱水,整体包埋,整体切片制作HE染色。结果:镜下观察各种组织结构完整,细胞核呈蓝黑色,细胞质呈桃红色,染色鲜艳,对比鲜明。结论:该法制备组织芯片具有高通量、高效率、低误差、低消耗等优点。     

组织芯片和基因突变检测在肺癌及乳腺癌石蜡组织中的应用

目的:探讨利用石蜡包埋的人类肿瘤组织开展病理新技术临床应用的可能性和可行性。方法:存档肺癌、乳腺癌的石蜡组织,分别进行组织芯片的制备和基因突变的检测。结果:组织芯片用于常规切片染色和免疫组化等分子病理学研究;存档石蜡组织切片可用于基因突变检测。肺癌FFPE中的DNA经PCR扩增后,核酸电泳显示结果良好。结论:运用分子病理学技术和病理科存档蜡块,可以广泛应用于大宗病例的回顾性研究,为人类肿瘤研究提供良好的基础,也可以为临床肿瘤诊疗提供分子病理学依据。     

组织芯片在乳腺癌病理研究中的应用价值

目的探讨组织芯片在乳腺癌病理研究中的应用价值。方法选取105例乳腺癌标本,使用改造的骨髓穿刺针采集组织芯,运用胶水黏贴、石蜡包埋制成组织芯片蜡块,并进行HE切片、染色。结果芯片蜡块所有点阵排列整齐,显微镜下观察HE切片的组织微阵列排列整齐,组织芯彼此分界清楚,基本无掉片、折叠和严重移位。结论手工石蜡包埋制作组织芯片所需工具简单,操作简便而仍有较高质量,适于科研和临床的应用。     

组织芯片制作过程中石蜡的使用

组织芯片又称组织微阵列 (ｔｉｓｓｕｅｍｉｃｒｏａｒｒａｙ) ,是将数十个、数百个小的组织样本整齐地排列在某一载体上 (通常为载玻片 )而成的缩微组织切片。组织芯片具有快速、平行、高通量分析组织切片提供给我们的生物信息 ,并且可以根据不同的需要进行组合和设计等特点 ,因而具有非常重要的应用前景[1 ] 。其主要特征是 :对目标组织块可以进行多次打孔 ,但对组织块的损伤很小[2 ] 。在芯片的制作过程中 ,石蜡的质量好坏、柔韧性和硬度的平衡对于构建一个完整的组织芯片十分重要。本文对影响石蜡柔韧性和硬度的因素进行了探索。1　材料…     

两种石蜡包埋组织DNA提取方法的比较

目的 比较两种不同的DNA提取方法 对DNA质量的影响.方法 选取石蜡包埋的病理组织24例,采用二甲苯脱蜡法和改良TES水浴法提取DNA.通过对所提DNA的浓度、纯度及完整性的检测,比较两种DNA提取方法 的优劣.结果 二甲苯脱蜡法提取样品D260/D280比值在1.6～1.8之间的为62.5%,电泳条带清晰可见;改良TES水浴法提取样品D2eo/D280比值在1.6～1.8之间的为41.2%,电泳条带模糊不清.结论 二甲苯脱蜡法提取DNA简单快速,需要的组织样品少,是一个值得推荐的石蜡包埋组织DNA的提取方法 .     

碎小组织石蜡包埋的改进

在制作组织切片中,技术人员对于碎小组织的包埋普遍感到棘手,原因之一是多个碎小组织往往不能包埋在同一平面;其二是在包埋过程中组织容易丢失,且在染色过程中碎小组织容易脱落,从而导致病理诊断的不全面或误诊,继而延长诊断时间,延误病人的治疗。笔经过半年的临床实践,取得     

应用组织芯片技术构建细胞免疫芯片

目的 探讨应用组织芯片制作技术构建细胞免疫芯片的方法.方法 设计布有多形性胶质母细胞瘤、人脑胶质瘤SHG-44细胞、神经干细胞、裸鼠骨髓细胞共24例的细胞微阵列,应用组织芯片仪制作细胞芯片蜡块,切片后进行CDC2的"EnVision"法免疫组化染色.结果 研制的24住点细胞芯片,细胞排列整齐,免疫组化染色效果好.结论 应用组织芯片制作技术构建细胞免疫芯片简单易行,结果可靠,开创了一种制作细胞免疫芯片的新方法.     

不同方法提取石蜡包埋组织DNA的比较分析

目的:比较福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中3种提取DNA的方法对DNA质量和回收率的影响,探讨一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法. 方法:选取新疆医科大学第一附属医院2004～2007年手术切除的10%甲醛固定石蜡包埋甲状腺癌组织标本,分别以试剂盒法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-试剂盒法提取其DNA,然后进行电泳分析. 结果:改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得样本DNA的OD260/OD280比值为(1.82±0.15),改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法为(1.86±0.17),两者比较无明显差异(P>0.05);分别与试剂盒法(1.75±0.14)相比,差异有统计学意义(P<0.01).改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得 DNA产量和质量均高于试剂盒法. 结论:改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯法简单快捷,是较理想的石蜡包埋组织DNA提纯方法.     

一种从石蜡包埋组织中获取高质量基因组DNA的改良方法

目的:比较现有的DNA制备方法,建立一种从甲醛固定石蜡包埋组织(formalin-fixed paraffin-embedded tissues,FFPET)提取高质量基因组DNA的方法。方法:将传统基因组DNA提取方法与市场供应的DNA亲和层析柱结合在一起,以水浴脱腊法替代二甲苯脱腊法,设计一种改良的基因组DNA快速提取方法,从石蜡包埋宫颈癌组织标本提取基因组DNA,并用琼脂糖凝胶电泳法和聚合酶链式反应法进行鉴定。结果:改良的基因组DNA提取法整合了水浴脱蜡与DNA亲和层析柱的优点,从石蜡包埋宫颈癌组织中获得了高质量的基因组DNA,特别是能以很高的效率回收大于20 kb的基因组DNA大片段。结论:改良的基因组DNA提取方法简单快捷,是一种从石蜡包埋组织中回收高质量基因组DNA的有效途径。     

组织芯片技术

组织芯片 (tissuechip)又称组织微阵列 (tissuemicroarray) ,是将数十个、数百个乃至上千个小的组织片按预先设计的需要整齐地排放在某一载体上(通常是载玻片 )而排列成矩阵的微缩组织切片[1] 。1986年Battifora首先创立了组织芯片的雏形。 90年代初 ,由美国Fodor博士提出并开始生物芯片技术的研究。至今生物芯片技术在医学各个领域中已显示出其巨大的发展潜力并取得了一定成功 ,其技术原理就是将少量组织高密度固定于固相载体上之后 ,用不同的基因探针或抗体与之杂交 ,以分析目的基因在相关的组织中表达的差异性。根据芯片上固定的生物物…     

制作鼠组织优质石蜡切片方法的探讨

目的 探讨制作大鼠各组织优质石蜡切片的方法。方法 鼠组织块的常规脱水、透明、浸蜡、切片与染色。结果 根据所述经验和方法可制作出3－4μm的优质石蜡切片。结论 所述经验和方法有助于制作出优质石蜡切片。     

选择适宜的灌注去细胞方法应用于全肝脏去细胞支架的制备

目的：对比低浓度十二烷基硫酸钠（SDS）和1％ Triton X-100对制备大鼠肝脏去细胞支架（DLBS）的影响,建立一种简单且适宜的DLBS的制备方法。方法将低浓度SDS（0．25％、0．50％）和1％ Triton X-100分别加入大鼠肝脏去细胞流程,通过免疫荧光及扫描电子显微镜观察支架结构,并对支架内成分进行定量分析,再通过四氮唑盐比色法（MTT ,Assay）观察支架对C3A的细胞毒性。结果 0．25％ SDS和0．50％ SDS处理组的DNA定量均小于50 ng／mg干质量,并且糖胺聚糖在0．25％SDS和1％ T riton X-100处理组的定量要高于0．50％ SDS处理组。同时,M T T 实验表明3种方法处理后的去细胞支架对于C3A细胞的生长无毒性作用。结论应用0．25％ SDS在5 mL／min灌注流速下去细胞能够制备更为理想且有效的DLBS ,从而为器官再生打下基础。     

Construction of metastatic spinal cancer tissue microarrays

Objective： To explore the construction of metastatic spinal cancer （MSC） tissue microarrays and validate its value in immunohistochemical study of MSC. Methods： Paraffin-embedded specimens from 71 MSC cases and 6 primary tumor cases were selected as donor blocks and prepared into MSC tissue microarrays by tissue array arrangement, the steps of which included location, punching, sampling, sample seeding, and re-diagnosis by hematoxylin-eosin （HE） as well as MMP-9 and MMP-14 immunohistoehemical staining. Results： The MSC tissue microarrays thus constructed were intact and craekless, containing 154 complete and well arranged microarray points. None of the sectioned tissue microarrays was lost, and the results of HE staining was consistent with the primary pathologic diagnoses. Immunohistochemical staining was also good without non-specific or marginal effect. Conclusion： The MSC tissue microarrays have a high value in the immunohistochemical study of MSC.     

印模膏在制取无牙颌印模中的改良应用

目的:介绍一种提高全口义齿基托边缘封闭性的方法。方法:根据常规方法制取无牙颌初印模,制取个别托盘,在个别托盘边缘逐段分区添加印模膏与不同部位无牙颌边缘封闭区组织形成紧密或加压接触取得良好的边缘封闭效果。结果:与常规印模法比较,利用此方法制取的无牙颌印模在唇颊舌侧边缘及上颌后堤区均取得良好的边缘封闭效果。结论:印模膏的改良应用提高了全口义齿基托的边缘封闭性,从而增加义齿固位力。经济、实用,可操作性强。     

一种针对人体皮肤组织快速、低毒的石蜡切片新方法

目的:通过对皮肤石蜡切片过程中各步骤的优化,摸索出一个适用于皮肤组织快速、低毒的石蜡切片方法。方法:将250份皮肤标本分为两组,分别采用传统切片法和新型方法进行石蜡切片制作,计算两种方法所用时间;比较甲基环己烷和二甲苯在透明过程和切片染色的效果。结果:传统方法和新型方法制片都需经过12步来完成,新型方法组切片总过程所耗总时间(约7hrs)明显短于传统方法组(约83hrs)。结论:采用甲基环己烷替代二甲苯,降低了实验对人员的毒性,且制作出的石蜡切片与传统方法在质量上无明显区别。     

简易提取石蜡包埋组织DNA

DNA的提取是 PCR成功与否的关键 ,而 DNA提取最好是用新鲜标本 ,但对回顾性研究只能从石蜡包埋组织中提取。传统的石蜡包埋组织 DNA提取是用二甲苯脱蜡 ,酚 -氯仿反复多次的抽提 ,这样使得 DNA不断破坏 ,大量丢失 ,操作非常繁琐 ,费时费试剂 ,不适宜处理大量标本 ,且试剂对人体有毒害作用 ,而得到的 PCR反应的结果阳性率低 ,污染严重。为此 ,本室将传统的石蜡包埋组织 DNA提取法进行改良 ,介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　本室 1996～ 2 0 0 0年存档的手术切除的甲状腺癌标本 41例。水浴恒温振摇器 (SHA- C型 ,深圳天南海北实…     

高质量大鼠脑组织连续石蜡切片的制作方法

石蜡切片是形态学实验的重要组成部分,在制作过程中,由取材、固定至染色、封固,每一步都环环相扣。不同组织器官石蜡切片制作的实验条件不尽相同,脑组织因脂质含量较丰富、细胞排列较紧密等特点,若实验影响因素处理不佳,易出现切片时标本碎裂、展片时组织溶解或免疫染色过程中脱片严重等情况,导致镜下形态结构观察的偏差或失败。而优质的切片是优质染色的前提,是实验结果可靠的保障。经过反复地学习与积累,本研究对重要实验细节进行规     

组织石蜡切片烤片缸的改进与应用

为解决现在烤片仪的不足,改进烤片缸结构和加热原件的安装位置.具体实施时,在缸内不设斜格片,将加热原件装于缸体内,实现了一缸体可烤用盖 /载片捞取的组织片,不仅节省电能,而且加热恒定,便于操作和搬运,组织切片无龟裂、烤散、脱片等现象,提高了仪器稳定性、适用性.     

含有中肾旁管的小鼠胚胎组织石蜡切片制备

目的基于雌性小鼠胚胎连续石蜡切片进行中肾旁管定位,探讨制备高质量的含中肾旁管的小鼠胚胎组织切片的方法。方法正常孕15.5 d、17.5 d、19.5 d小鼠的胚胎,聚合酶链式反应(PCR)鉴定性别,取雌性鼠胚石蜡包埋,连续横断切片,每4张取1张行HE染色后获取连续切片图像。根据雌性小鼠胚胎生殖管道解剖走形,识别并定位中肾旁管。结果获取含不同发育天数中肾旁管的小鼠胚胎切片。结论利用石蜡包埋连续切片对中肾旁管进行解剖定位,是有效获得含中肾旁管的小鼠胚胎石蜡切片的方法。