新生儿缺氧缺血性脑病的细胞免疫功能研究

目的:研究新生儿缺氧缺血性脑病( HIE) 患儿IL-1茁、IL-2、IL-10、sIL-2R 和肿瘤坏死因子琢 (TNF-琢)水平及外周血T 细胞亚群的变化,探讨免疫学变化在HIE 发病中的意义,为其免疫治疗提供可能的理 论依据。方法:应用ELISA 法检测HIE 患儿及足月正常新生儿血清IL-1茁、IL-10、TNF-琢、IL-2、sIL-2R 水平, Ficoll 常规分离外周血单个核细胞,用免疫组化法检测HIE 患儿及足月正常新生儿CD+ 3、CD+ 4、CD+ 8、CD+ 4/ CD+ 8 细胞百分率。结果:HIE 患儿血清IL-1茁、IL-2、IL-10、TNF-琢、sIL-2R 水平较对照组增高( P<0. 05 或 P<0. 01);而HIE 患儿外周血CD+ 3、CD+ 4、CD+ 8 细胞数量降低(P<0. 01)。结论:HIE 患儿存在一定程度的免疫 功能紊乱。IL-1茁、IL-10、TNF-琢、IL-2、sIL-2R 和T 细胞亚群参与了HIE 的病理生理过程。     

细胞因子在新生儿缺氧缺血性脑病中的表达

目的：研究新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿白介素（IL）-1β、IL-10、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IL-2、sIL-2 R水平的变化,探讨细胞因子的变化在HIE发病中的意义,为其免疫学治疗提供可能的理论依据。方法：应用ELISA法检测HIE患儿及足月正常新生儿血清IL-1β、IL-10、TNF-α、IL-2、sIL-2R水平。结果：HIE患儿血清IL-1β、IL-10、TNF-α、sIL-2 R水平均显著高于正常对照组（P〈0.05）,而IL-2水平显著低于正常对照组（P〈0.05）。结论：HIE患儿存在一定程度的免疫功能紊乱。IL-1β、IL-10、TNF-α、IL-2、sIL-2 R参与HIE的病理生理过程。     

转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α、可溶性白细胞介素2受体及T细胞亚群与肺尘埃沉着病分期和肺功能的关系

目的 探讨外周血和支气管肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子-β1 （TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）水平及外周血T细胞亚群与肺尘埃沉着病（简称尘肺）分期和肺功能的关系.方法 选择2010年4月～2012年7月在郑州煤炭工业集团有限责任公司总医院治疗的尘肺患者68例为尘肺组,另选择同期接尘组和对照组各35例,采用酶联免疫吸附法检测三组外周血及尘肺组BALF中TGF-β1、TNF-α、sIL-2R水平,采用流式细胞技术检测三组外周血T细胞亚群并检测尘肺组肺功能.结果 尘肺组、接尘组和对照组血清TGF-β1和sIL-2R水平差异有统计学意义（P＜0.05）,尘肺组不同分期血清TGF-β1、TNF-α、sIL-2R水平差异有统计学意义（P＜0.05）,不同尘肺分期血清TGF-β1、sIL-2R水平均显著高于接尘组和对照组（P＜0.05）,Ⅱ、Ⅲ期血清TNF-α水平显著低于接尘组和对照组（P＜ 0.05）;血清TGF-β1、sIL-2R水平与尘肺分期呈正相关（P＜0.05）,血清TNF-α水平与尘肺分期呈负相关（P＜0.05）.不同分期尘肺患者BALF中TGF-β1、TNF-α、sIL-2R水平差异均有统计学意义（P＜0.05）,尘肺患者BALF中TGF-β1、TNF-α水平与分期无显著相关（P＞0.05）,尘肺患者BALF中sIL-2R水平与分期呈正相关（P＜0.05）.尘肺组、接尘组和对照组外周血CD8＋及CD4＋/CD8＋差异有统计学意义（P＜0.05）,不同尘肺分期外周血CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋差异有统计学意义（P＜0.05）,Ⅱ、Ⅲ期尘肺外周血CD4＋及CD4＋/CD8＋显著低于接尘组和对照组（P＜0.05）,Ⅰ、Ⅲ期尘肺外周血CD8＋百分百显著高于接尘组和对照组（P＜0.05）;外周血CD4＋、CD8＋百分百与尘肺分期无显著相关（P＞0.05）,而CD4＋/CD8＋与尘肺分期呈负相关（P＜0.05）.外周血TGF-β1水平与FVC、FEV1/FVC及DLCO呈负相关,sIL-2R与FVC、DLCO呈负相关,TNF-α水平与肺功能无显著相关,CD4＋百分百与FEV1/FVC、DLCO呈正相关,CD8＋百分百与FVC呈负相关,CD4＋/CD8＋与FVC、DLCO呈正相关.外周血TGF-β1水平与CD8＋呈正相关,与CD4＋/CD8＋呈负相关,TNF-α与CD4＋/CD8＋呈正相关,sIL-2R与CD4＋、CD4＋/CD8＋呈负相关,与CD8＋呈正相关.结论 不同分期尘肺患者均可能存在细胞免疫抑制状态,外周血TGF-β1高表达可能参与了尘肺的纤维化过程和肺功能的损害,TNF-α与尘肺分期有关可能与肺功能损害无关,sIL-2R高表达及CD4＋/CD8＋倒置形成的免疫抑制参与尘肺分期进展和肺功能损害.     

慢性丙型肝炎患者的细胞免疫功能

目的探讨慢性丙型肝炎患者的细胞免疫功能及细胞因子生成量变化。方法采用免疫技术对31例慢性丙型肝炎患者外周血T细胞亚群,红细胞免疫功能及血清中转化生长因子-β（TGF-β）、白细胞介素-2（IL-2）、可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2R）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）等细胞因子水平进行检测。结果慢性丙型肝炎患者外周血CD4＋T细胞,CD4/CD8比值及红细胞表面C3b受体花环率（RBC-C3bRR）显著低于正常对照（P〈0.01）;CD8＋T细胞及血清中TGF-β、IL-2、sIL-2R、IL-6、TNF-α及sICAM-1则显著高于正常对照组（P〈0.01）。结论丙型肝炎病毒的感染可致患者细胞免疫功能紊乱,细胞因子过量表达。     

新生儿缺氧缺血性脑病血清细胞因子变化及临床意义

目的:了解HIE患儿血清细胞因子水平的变化及其临床意义,并探讨其在HIE监测中的意义。方法:以2007年1月～2011年12月我院符合HIE诊断标准的新生儿为病例,随机抽取同期正常分娩的新生儿作为对照,用ELISA双抗体夹心法检测2组新生儿出生后24h内(急性期)和出生后第7天(恢复期)的血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α水平。结果:①急性期,HIE组患儿血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α水平均高于正常新生儿,且随着HIE病情的加重,IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α5种细胞因子水平均有显著性上升;②恢复期,HIE轻度患儿和正常新生儿的IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α水平无显著性差异,HIE中度患儿和正常新生儿的IL-8、IL-10无显著性差异,HIE轻度患儿和中度患儿IL-1β、IL-8、IL-10无显著性差异,HIE中度患儿和重度患儿TNF-α无显著性差异;③急性期IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α5种血清细胞因子水平都显著高于恢复期。结论:血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α参与了新生儿HIE脑损伤过程,随着HIE病情的加重,血清细胞因子水平显著上升,在HIE脑损伤好转的过程中,细胞因子水平逐渐下降,其动态变化可作为HIE病程监测的重要指标。     

隐型孢子虫病患者细胞免疫功能及细胞因子网络的实验研究

目的:为了探讨细胞免疫功能及细胞因子在隐型孢子虫感染中的作用.方法:本文采用免疫分析技术对29例隐型孢子虫病患者外周血T细胞亚群,红细胞免疫功能及血清中IL-2(白细胞介素-2)、IL-6(白细胞介素-6)、sIL-2R(可溶性IL-2受体)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)及sICAM-1(可溶性细胞间粘附分子-1)等细胞因子水平进行测定.结果:患者外周血CD 4T细胞、CD4/CD8比值和红细胞表面C3b受体花环率(C3bRR)显著低于正常对照组(P＜0.01),血清中IL-2、sIL-2R、IL-6、TNF-α及sICAM-1水平则显著高于正常对照(P＜0.01).结论:隐孢子虫感染可致机体细胞免疫功能降低,细胞因子网络失衡.     

胃癌患者免疫功能状态研究

目的:探讨胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群(CD3、CD4和CD8)和血清白细胞介素-12(IL-12)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平的变化及其与胃癌临床病理的关系。方法:应用流式细胞术和酶联免疫吸附试验检测80例胃癌患者手术前外周血CD3、CD4、CD8和血清IL-12、sIL-2R的水平,并以30例健康体检者为对照组。结果:胃癌患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显低于正常对照组(P<0.01);胃癌患者血清IL-12水平低于正常对照组(P<0.01),而血清sIL-2R水平高于正常对照组(P<0.01)。胃癌患者T淋巴细胞亚群及血清IL-12和sIL-2R的改变与胃癌组织病理学类型、细胞分化程度无关,而与浸润程度有关。CD4+/CD8+与血清IL-12和sIL-2R之间存在显著相关性(P<0.05)。结论:胃癌患者外周血CD3、CD4、CD8和血清IL-12和sIL-2R水平可作为研究胃癌的发生、发展和转移的重要免疫学指标。     

T细胞亚群、IL-2、NSE与新生儿HIE的研究及临床意义

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）外周血T细胞亚群、IL-2及神经元特异性烯醇化酶（NSE）的动态变化,为新生儿HIE的诊断、分度、治疗及预后提供新的理论依据。方法选择36例围生期有缺氧缺血性脑病的新生儿为研究对象（HIE组）,同时选择20例同期出生的正常足月儿为对照组,分别检测T细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值、IL-2和血清NSE的动态变化。结果①急性期HIE组T细胞亚群CD3、CD4、CD4/CD8比值及IL-2水平低于正常对照组（P〈0．01）,CD8及NSE水平高于对照组（P〈0．01）;②不同程度HIE组急性期T细胞亚群、IL-2及NSE水平之间相比有显著差异性（P〈0．01）;（④恢复期T细胞亚群、IL-2及NSE水平与正常对照组之间相比仍有显著性差异（P〈0．01）,和急性期相比随病情的好转各项指标有明显改善（P〈0．01）;（垒）T细胞亚群CD3、CD4、CD4/CD8比值、IL-2与NSE呈负相关。CD8T细胞亚群与NSE呈正相关。结论①新生儿HIE存在着免疫功能紊乱;②T细胞亚群、IL-2及NSE参与了新生儿HIE的病理生理过程;③外周血CD8T细胞亚群和NSE水平升高,CD4/CD8比值和IL-2水平下调．与新生儿HIE轻重程唐呈正相关。     

新弧菌相关的腹泻患儿细胞免疫功能研究

目的:探讨新弧菌感染相关的腹泻患儿细胞免疫功能。方法:T淋巴细胞亚群测定采用APAAP法,血清IL-2、sIL-2R测定采用ELISA法,IL—6和IL—8测定采用双抗体夹心ELISA法。结果:与对照组比较,新弧菌感染相关的腹泻患儿CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值及血清IL-2水平明显降低(P<0.01);sIL-2R、IL-6和IL-8水平明显升高(P<0.01)。结论:新弧菌感染相关的腹泻患儿细胞免疫功能低下和紊乱,细胞免疫功能测定可为患儿免疫疗法的应用提供可靠依据。     

新生儿缺血缺氧性脑病免疫功能检测的临床意义

目的 对新生儿缺血缺氧性脑病（HIE）免疫功能进行探讨,为其治疗提供理论依据.方法 检测患儿的IL-6、IL-2、sIL-2R、T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白和补体C3,分别采用双抗体夹心ELISA、APAAP、放射免疫扩散试验法进行.结果 与对照组比较,HIE患儿的IgM和C3补体的浓度、CD3、CD4百分率、CD4/CD8比值和IL-2和IL-6水平明显降低（P均＜0.01）,而sIL-2R水平明显升高（P均＜0.01）.结论 HIE患儿存在明显的体液和细胞免疫功能低下且紊乱,易继发感染.     

非全身型幼年特发性关节炎患儿外周血T辅助细胞1/2细胞因子水平分析

目的分析非全身型幼年特发性关节炎（SOJIA）患儿外周血T辅助细胞1/2（Th1/Th2）细胞因子水平变化特点，了解相关病理机制，以期为治疗决策提供依据。方法收集2012年11月至2015年5月浙江大学医学院附属儿童医院活动期非SOJIA患儿41例（非SOJIA组， n=41）的临床资料，其中多关节炎型11例，少关节炎型10例，附着点炎型20例。采用流式细胞术检测患儿血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α和γ干扰素水平，并与同期85例活动期SOJIA患儿及202名健康体检儿童（正常对照组， n=202）比较，同时分析非SOJIA患儿血清细胞因子水平与红细胞沉降率、C反应蛋白的相关性。 结果与正常对照组比较，非SOJIA组患儿血清IL-2、IL-6、γ干扰素升高（2.9 pg/mL与2.6 pg/mL，9.9 pg/mL与6.4 pg/mL，6.3 pg/mL与5.1 pg/mL，均 P < 0.05），而TNF-α、IL-10降低（2.7 pg/mL与3.9 pg/mL，2.9 pg/mL与7.1 pg/mL，均 P < 0.01）；与SOJIA组比较，非SOJIA组IL-6、IL-10降低（9.9 pg/mL与33.5 pg/mL，2.9 pg/mL与4.1 pg/mL，均 P < 0.01），IL-4、γ干扰素升高（3.1 pg/mL与2.3 pg/mL，6.3 pg/mL与4.4 pg/mL，均 P < 0.05）。同时非SOJIA组附着点炎型、多关节炎型患儿血清IL-6水平高于少关节炎型（12.7 pg/mL、11.0 pg/mL与4.2 pg/mL，均 P < 0.05）；附着点炎型患儿血清IL-6、TNF-α水平与超敏CRP呈正相关。 结论非SOJIA患儿Th1/Th2细胞因子失衡且Th1细胞占优势，血清IL-6可能参与非SOJIA的发病机制。     

苏拉明对脓毒症小鼠肺组织和循环炎症反应的抑制作用

目的观察苏拉明对脓毒症小鼠肺组织和循环炎症反应的抑制作用, 并初步探讨其相关分子生物学机制。方法① 体内实验:将24只雄性C57BL/6小鼠按数字表法分为苏拉明组和生理盐水组, 苏拉明组给予静脉注射5 mg/kg苏拉明预处理, 生理盐水对照组给予等体积0.9%氯化钠溶液, 30 min后采用静脉注射5 mg/kg脂多糖(LPS)建立脓毒症小鼠模型, 检测不同时间点肺组织和外周血TNF-α和IL-6水平。② 体外实验:苏拉明或生理盐水预处理人单核细胞系THP-1细胞30 min后, 用100 ng/mL LPS刺激建立脓毒症细胞模型, 于不同时间点收集THP-1细胞, 提取RNA, 定量PCR检测TNF-α和IL-6表达水平, 并分离细胞浆和细胞核蛋白, 蛋白质印迹法检测核因子κB(NF-κB)活性。结果LPS干预后小鼠肺和外周血TNF-α和IL-6水平增加, 提示成功建立脓毒症小鼠模型。与生理盐水组比较, 苏拉明干预脓毒症小鼠模型作用24 h时小鼠肺组织及外周血TNF-α和IL-6的水平降低(均 P < 0.01);而苏拉明作用72 h时各组小鼠肺组织及外周血TNF-α和IL-6的水平差异无统计学意义(均 P>0.05)。体外实验结果显示:苏拉明预处理减少LPS刺激THP-1细胞后TNF-α和IL-6的表达水平(均 P < 0.01), 苏拉明预处理还减少LPS刺激30 min、60 min和90 min后THP-1细胞NF-κB的活化水平(均 P < 0.01)。 结论苏拉明可减轻小鼠全身及肺组织炎症反应, 在对脓毒症肺损伤模型中具有保护作用, 其炎症反应的调控可能与抑制脓毒症单核细胞的过度活化有关。     

大剂量极化液调节Th2类细胞因子治疗重症肝炎的应用

目的观察大剂量GIK治疗重症肝炎对Th2类细胞因子及临床各项肝功能指标的影响。方法 50例患者随机分为两组,对照组常规治疗。试验组加用大剂量极化液治疗。治疗前后采用ELESA法检测TNF-α、IL-1,IL-4、IL-6和IL-10的水平,同时查肝功能等常规检查。结果应用大剂量极化液治疗重症肝炎后患者血清ALT、AST、总胆红素、TNF-α、IL-1水平均较治疗前明显降低,而IL-10水平则升高,其变化幅度明显大与对照组,两组比较具有统计学意义。结论大剂量的GIK治疗重症肝炎疗效优于常规疗法,机制可能与调节Th2类细胞因子有关。     

结节病患者辅助性T细胞17和调节性T细胞与疾病活动的关系

目的观察结节病患者辅助性T细胞17（Th17）和调节性T细胞（Treg）的变化及与疾病活动的关系。方法选择2009年1月~2013年12月在鄞州人民医院治疗的23例结节病患者作为研究对象，以25例健康志愿者作为正常对照组，在糖皮质激素治疗前后分别用酶反应连续监测法测定血清血管紧张素转化酶（SACE），流式细胞术测定外周血和支气管肺泡灌洗液（BALF）中Th17细胞和Treg细胞比例，酶联免疫吸附试验法测定血清及BALF上清液中相关细胞因子水平，实时荧光定量PCR测定外周血转录因子ROR-γt和Foxp3 mRNA表达水平，分析Th17/Treg比值与病情活动的相关性。结果结节病患者活动期外周血Th17细胞比例较正常对照组明显升高（4.34%±0.89% vs 1.60%±0.42%），而Treg细胞比例明显降低（1.28%±0.37% vs 3.39%±0.50%）；转录因子ROR-γt mRNA表达水平较正常对照组明显升高（21.31±3.55 vs 3.63±1.00），而Foxp3 mRNA明显降低（1.60±0.24 vs 3.12±0.76），差异均有统计学意义（均 P＜0.01）。糖皮质激素治疗后上述指标均显著改善（外周血Th17细胞比例2.16%±0.68%，Treg细胞比例2.21%±0.42%，转录因子ROR-γt mRNA水平10.15±1.93，Foxp3 mRNA水平2.44±0.38），差异均有统计学意义（均 P＜0.05）。外周血Th17和Treg细胞相关细胞因子的变化与两类细胞比例变化一致；激素治疗后BALF中上述指标变化趋势与外周血一致。Th17/Treg细胞比值与外周血SACE水平呈显著正相关（r=0.781， P＜0.01）。 结论Th17/Treg细胞平衡失调与结节病的活动密切相关，可能参与了结节病的发病过程。     

应用大鼠血清建立体外软骨细胞退变模型

目的应用大鼠血清建立大鼠体外软骨细胞退变模型。方法取出生24 h SD大鼠关节处软骨, Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞, 取原代细胞进行实验。软骨细胞分别用含10%胎牛血清的DMEM(对照组)、含50 ng/mL白细胞介素(IL)-1β+10%胎牛血清的DMEM(IL-1β组)、含2.5%大鼠血清的DMEM(2.5%血清组)及含5.0%大鼠血清的DMEM(5.0%血清组)中培养。培养24 h后, 观察细胞形态变化, MTT法检测各组细胞的增殖情况, 蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原的表达和Ⅱ型胶原及MMP-13的表达, 实时定量PCR检测退变相关基因ADAMTS5、MMP-9、Aggrecan和SOX-9的表达。结果两血清组和IL-1β组的软骨形态均由原来的多角形变成长梭形, 且两血清组和IL-1β组均促进软骨细胞的增殖, 下调转录因子SOX-9和上调基质降解酶MMP-13、MMP-9、ADAMTS5的表达。结论大鼠血清具有促进软骨退变的作用, 可用于建立体外软骨退变模型。     

皮酚抑制帕金森病模型细胞凋亡的作用

目的观察丹皮酚对帕金森病模型细胞凋亡的影响。方法采用1-甲基-4-苯基吡啶（MPP+）处理具有多巴胺能神经元特性的PC12细胞建立帕金森病体外模型,并分为正常对照组、空白对照组、1 μmol/L丹皮酚组、3 μmol/L丹皮酚组和9 μmol/L丹皮酚组。以四甲基偶氮唑蓝比色法和乳酸脱氢酶法检测细胞损伤,以赫斯特荧光染剂染色及流式细胞术检测细胞凋亡,以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯法检测细胞活性氧生成,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、Bcl-2和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达水平。结果与正常对照组比较,空白对照组细胞存活率显著降低,乳酸脱氢酶漏出率升高,凋亡细胞增多,活性氧生成增加,凋亡相关分子caspase-3活性上调、Bax/Bcl-2比值升高,差异均具有统计学意义（均 P＜0.01）。与空白对照组比较,各浓度丹皮酚预处理后细胞存活率显著升高,乳酸脱氢酶漏出率降低,凋亡细胞减少,并抑制活性氧生成,降低Bax/Bcl-2的比值及caspase-3蛋白水平,差异均具有统计学意义（ P＜0.05或 P＜0.01）。 结论丹皮酚能抑制帕金森病模型PC12细胞凋亡,其发挥保护作用的机制可能与改善氧化应激、降低Bax/ Bcl-2比值、抑制caspase-3活化有关。     

细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂诱导HL-60细胞凋亡及分子机制研究

目的探讨细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）抑制剂SNS-032诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的效应及可能的机制。方法以CDK抑制剂SNS-032作用于HL-60细胞株，实验细胞分为对照组、SNS-032组、白细胞介素（IL）-6组和SNS-032+IL-6组。MTT法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡，microRNA芯片技术分析细胞microRNA的表达谱差异，蛋白质印迹法检测JAK/STAT3相关信号通路蛋白的表达。结果SNS-032可降低细胞存活率，诱导HL-60细胞凋亡，对照组、100nmol/L和200nmol/L的SNS-032干预组细胞凋亡率分别为（5.9±1.7）%、（12.1±3.1）%和（59.4±3.6）%。microRNA芯片分析结果显示，SNS-032显著下调HL-60细胞miR-30a、miR-183、miR-20b、miR-26b、miR-20a、miR-589、miR-107、miR-181a、miR-106a、miR-17和miR-378c的表达水平，显著上调miR-320a的表达水平。蛋白质印迹法显示SNS-032可抑制STAT3的磷酸化和JAK2、MCL-1、C-MYC蛋白的表达。作为JAK/STAT3通路的激活剂，IL-6联合SNS-032不能逆转后者对HL-60细胞的杀伤作用（ P＞0.05），也不能逆转SNS-032对JAK2蛋白表达和磷酸化STAT3的抑制作用。 结论SNS-032能显著诱导人急性髓系白血病HL-60细胞发生凋亡，其机制可能与抑制JAK2和STAT3磷酸化、抑制MCL-1和C-MYC及与之相关的miR-17-92基因簇表达水平有关。     

zeste基因增强子同源物2抑制剂GSK126对前列腺癌细胞的作用及机制

目的探究zeste基因增强子同源物2（EZH2）抑制剂GSK126对前列腺癌细胞增殖、凋亡及迁移的作用及机制。方法以磺酰罗丹明B实验考察GSK126对PC-3和DU145细胞增殖的影响，以Annexin V/PI双染法考察GSK126对细胞凋亡的影响，以Transwell实验和细胞划痕实验观察GSK126对细胞迁移和侵袭的影响，以荧光定量PCR检测GSK126对肿瘤相关基因mRNA表达的影响，以蛋白质印迹法检测相关蛋白水平的变化。结果GSK126仅在50.0μmol/L的高浓度剂量时能有效抑制PC-3和DU145细胞增殖，并促进其凋亡。经GSK126小、中、大剂量（5.0、20.0、50.0μmol/L）处理后，PC-3细胞划痕间距分别为（247.2±24.4）μm、（347.2±19.2）μm、（410.5±18.1）μm，与对照组（171.3±17.8）μm比较差异均有统计学意义（均 P < 0.05），且呈一定的量效关系。Transwell实验结果显示，每视野下侵袭的PC-3细胞数对照组为322.0±17.9，而经GSK126小、中、大剂量处理后分别为198.3±15.4、82.7±6.2、30.2±4.1，与对照组比较差异均有统计学意义（均 P < 0.05）。GSK126处理前列腺癌细胞后，与上皮细胞间质转化相关的E-cadherin基因mRNA表达量上升，N-cadherin、Vimentin基因mRNA表达量下降，但Snail、Fibronectin、VEGF-A基因的mRNA表达无变化。同时，蛋白质印迹法检测结果提示，E-cadherin的蛋白表达量增加，而VEGF-A蛋白表达量无明显改变。DU145细胞上述实验结果相似。 结论GSK126能有效抑制PC-3细胞和DU145细胞迁移和侵袭，其机制与抑制上皮细胞间质转化相关。GSK126可作为潜在的前列腺癌临床治疗用药。     

不同模式口鼻式吸烟诱导急性肺损伤的实验研究

目的研究不同抽吸模式的口鼻式吸烟方式诱导大鼠急性肺损伤的效应。方法市售焦油含量分别为1、5、11 mg的卷烟按照加拿大深度抽吸模式（深度抽吸）及11 mg焦油含量的卷烟按国际标准抽吸模式（国标抽吸）抽吸，并以空气为载气将卷烟烟雾载入大鼠口鼻暴露塔中；大鼠固定于固定器中，仅口鼻暴露于主流烟气中，吸烟28 d后处死大鼠进行左肺肺泡灌洗，肺泡灌洗液用于炎症细胞计数和分类以及ELISA检测炎症因子IL-1β和TNF-α水平；右肺下叶进行组织病理学观察；右肺上叶冻存并用于髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及还原型谷胱甘肽（GSH）、活性氧和丙二醛含量检测。结果同等抽吸模式下，大鼠吸入卷烟的烟气质量浓度与样品卷烟盒标记的焦油等有害物质含量成正比。大鼠吸烟一周后即出现体质量下降。深度抽吸及国标抽吸11 mg焦油含量的卷烟均能显著诱导大鼠肺部巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞浸润，IL-1β和TNF-α分泌增加，以及MPO活性提高（均 P < 0.05）；反映肺组织氧化应激水平的GSH含量和SOD活性均显著下降（均 P < 0.05），活性氧和丙二醛含量则显著上升（均 P < 0.05）。深度抽吸5 mg焦油含量的卷烟能显著诱导淋巴细胞和中性粒细胞浸润、IL-1β和TNF-α分泌以及肺组织MPO活性上升，同时能显著促使肺组织中GSH含量及SOD活性下降以及活性氧和丙二醛含量增加（均 P < 0.05）；但深度抽吸1 mg焦油含量的卷烟无明显诱导炎症细胞浸润等作用。 结论口鼻式吸烟方式可以成功诱导大鼠肺损伤模型，大鼠肺部炎症细胞浸润程度、炎症因子分泌及氧化应激水平与主流烟气中有害物质含量成正比。     

食管癌患者NKG2D+CD8+NKT细胞及sMICA的检测

目的探讨食管癌患者外周血NKG2D+CD8+NKT细胞百分比及血清sMICA含量在免疫逃逸中的作用及临床意义。方法流式细胞仪测定80例患者(其中64例术后患者)及72例健康对照组NKG2D+CD8+NKT细胞百分比;酶联免疫吸附法测定sMICA含量。结果患者NKG2D+CD8+NKT细胞百分比低于对照组(P<0.01);术后低于对照组(P>0.05);术前低于术后(P<0.01);在TNM分期中,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者依次降低(P<0.01)。患者sMICA明显高于对照组(P<0.01);术后高于对照组(P>0.05);术前高于术后(P<0.01);在TNM分期中,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者依次增高(P<0.01)。患者sMICA对NKG2D+CD8+NKT细胞有抑制作用(P<0.01)。结论 NKG2D+CD8+NKT细胞及sMICA参与食管癌的免疫逃逸,两者的测定有助于食管癌的免疫治疗、早期诊断、临床分期及判断手术疗效。