急性坏死性胰腺炎肺损伤时RegⅠ基因表达

目的 研究RegⅠ在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺组织中的表达及其与ANP肺损伤的关系.方法 健康成年SD大鼠随机分为假手术对照(C)组(30只)和ANP组(60只). C组开腹后只翻动胰腺,ANP组大鼠胰胆管恒速逆行注射3%牛磺胆酸钠,制成ANP大鼠模型.观察胰腺和肺组织的病理改变及肺组织湿/干重比的改变,应用RT- PCR检测胰腺、肺组织中RegⅠ mRNA的表达水平,并研究所观察指标与RegⅠ基因表达的相关性.结果 与C组相比,ANP组肺组织中RegⅠ的mRNA水平过度表达.RegⅠ的表达水平分别与肺组织的病理学评分(r=0.5212,P＜0.01)和肺组织湿/干重比(r=0.4797,P＜0.01)呈正相关.结论 ANP时大鼠肺组织中RegⅠmRNA的表达水平明显上调;RegⅠ mRNA的表达与ANP所致的急性肺损伤的严重程度相关.     

褪黑素干预急性坏死性胰腺炎肺损伤及巨噬细胞移动抑制因子表达

目的：研究急性坏死性胰腺炎（acute necrotizing pancreatitis,ANP）大鼠肺组织巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、TNF-α的变化及褪黑素（MT）的干预效果。方法：36只大鼠随机分为假手术组（SO组）、急性坏死性胰腺炎组（ANP组）和MT干预组（MT组）,每组12只。应用胰胆管内注射牛磺胆酸钠的方法诱导ANP模型,MT组于诱导模型前30min皮下注射MT。术后4h和24h分批处死大鼠（每个时间点n=6）,用RT—PCR检测肺组织MIF、TNF-αmRNA的表达情况,用SABC免疫组织化学法检测肺脏MIF蛋白表达情况,并行胰腺及肺脏的病理检查。结果：ANP组4、24h肺组织MIF、TNF-αmRNA表达较SO组明显升高（P〈0．05）,肺脏及胰腺病理损伤较严重;MT组较ANP组肺组织MIF、TNF-αmRNA表达下降（P〈0．05）,病理损伤减轻;MIF主要表达于肺脏支气管上皮细胞胞浆。结论：MIF可能参与急性胰腺炎肺损伤的发生,MT可减弱其肺内表达及胰腺炎相关肺损伤的严重程度。     

N-乙酰半胱氨酸对急性胰腺炎大鼠肺组织中趋化因子MCP-1、MIP-2表达的影响

目的 探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)与巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)在急性胰腺炎(AP)相关性肺损伤中的作用,观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对其表达的影响.方法 35只SD大鼠随机分为假手术(SO)组、急性坏死性胰腺炎(ANP)3、6、12 h组和NAC干预3、6、12 h组.采用4%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备ANP动物模型,NAC组在诱导ANP前30 min给予腹腔注射NAC 500 mg/kg.检测血淀粉酶、肺泡灌洗液/血清伊文氏兰比值、髓过氧化酶(MPO),观察肺病理组织学改变,采用逆转录-PCR检测肺组织中MCP-1与MIP-2 mRNA的表达.结果 ANP各组血淀粉酶明显升高,肺MPO、泡灌洗液/血清伊文氏兰比值随肺损伤的加重而升高.SO组肺组织MCP-1 mRNA、MIP-2 mRNA表达阴性或弱阳性;ANP各组肺组织中均有MCP-1 mRNA与MIP-2mRNA表达上调,并随ANP病变的加重表达逐渐增强.MCP-1与MIP-2 mRNA的表达与胰腺的病理损伤成正相关.经NAC干预后,趋化因子MCP-1 mRNA与MIP-2 mRNA的表达下调,白细胞浸润减少,肺血管通透性下降,肺组织损伤得到改善(P＜0.05或P＜0.01).结论 趋化因子MCP-1、MIP-2参与AP相关性肺损伤.NAC通过下调趋化因子MCP-1与MIP-2的表达使AP相关性肺损伤得到改善.     

P物质在急性坏死性胰腺炎肠源性胰腺感染中的作用

目的 研究急性坏死性胰腺炎(ANP)时大鼠回肠组织中P物质的表达, 初步探讨P物质在ANP肠源性胰腺感染中的作用.方法 健康成年S-D大鼠,随机分为对照组和ANP组,每组24只.对照组开腹后只翻动胰腺, ANP组大鼠胰胆管恒速逆行注射5%牛黄胆酸钠, 制成ANP大鼠模型.两组大鼠均于8、16h处死取标本,检测P物质在回肠组织中的表达水平和组织学定位,测定肠黏膜通透性(99m Tc-DTPA排泄率),并分别行胰腺组织和小肠内容物细菌培养.结果 ANP组大鼠肠粘膜病理学评分以及胰腺组织细菌培养阳性率较对照组显著升高(P＜0.05);P物质表达于大量浸润的炎症细胞、淋巴细胞表面.结论 ANP时大鼠回肠组织中P物质表达升高; P物质可能与多种细胞共同作用, 加重ANP病情.     

P-选择素在大鼠重症急性胰腺炎时肺损伤中的作用

目的探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)并发急性肺损伤(acutelung injure,ALI)之大鼠P-选择素浓度的变化及其机制。方法取20只大鼠,随机分为假手术组(A组)及胰腺炎组(B组),每组10只。胰管内逆行性注射3%牛磺胆酸钠的方法建立SAP并发ALI大鼠模型,24小时后检测血清淀粉酶、P-选择素和肺组织P-选择素浓度,并取胰腺和肺组织做病理形态学检查。结果制模后B组大鼠血清淀粉酶、P-选择素和肺组织P-选择素浓度较对照组显著升高(P<0.05);A组胸、腹腔内及胰腺、肺组织均无明显病理变化。B组腹水形成,腹腔内组织广泛分布有皂化斑,胰腺广泛水肿、出血、坏死,胸腔内有胸水形成,肺组织存在组织结构紊乱,灶性或片状肺不张,肺泡腔及间质出血等病理学改变,胰腺及肺组织均发现有大量的中性粒细胞浸润。结论SAP合并ALI时,血清P-选择素和肺组织P-选择素浓度均同时异常升高,提示它们在其发病机制中可能具有重要作用。     

外源性白介素—10对急性出血坏死性胰腺炎肝损害时一氧化氮水平、一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响

目的：探讨IL-10对急性坏死性胰腺炎(ANP)肝损害大鼠胰腺、肝脏组织中一氧化氮合成酶表达的影响及ANP肝损伤的保护作用。方法：采用5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠ANP肝损害模型，随机分成3组：30只大鼠作为正常对照组，IL-10腹腔注射治疗30只，急性坏死性胰腺炎组30只，观察血中N0含量变化。观察了胰腺、肝脏组织中一氧化氮合成酶表达的变化，肝、胰腺组织病理改变。结果：建立ANP模型后6h、12h、24h，血中N0水平明显升高，一氧化氮合成酶表达阳性渐升高，IL-10治疗后，IL-10组N0水平降低，一氧化氮合成酶表达阳性表达降低，肝、胰腺组织损害也相应减轻。结论：N0和iNOS参与了ANP肝损害发病机制，IL-10通过降低N0和iNOS水平对ANP具有防治作用。在急性坏死性胰腺炎早期给予IL-10对减轻肝脏、胰腺病变的程度，改善预后可能是有益的。     

黄芪多糖对慢性阻塞性肺病大鼠肺组织HO-1表达的影响

目的 探讨黄芪多糖(APS)对慢性阻塞性肺病(COPD)模型鼠肺组织中血红素氧合酶(HO)1表达的影响.方法 60只大鼠随机均分成5组,每组12只:A组为COPD模型,B1、B2、B3组分别用APS 10、20、40 mg/kg灌胃,另设C组为正常对照.采用香烟熏吸加气管内注人脂多糖(LPS)法建立大鼠COPD模型.RT-PCR与Western blot分别检测大鼠在APS干预前后肺组织HO-1 mRNA及蛋白的表达水平.结果 给药后1、15、30 d,A组大鼠肺组织HO-1 mRNA及蛋白水平高于C组(P<0.05).APS干预30 d后,B3组HO-1 mRNA及蛋白水平较A组明显增加(P<0.05).结论 在COPD模型鼠肺组织中HO-1表达增加;APS可以通过HO-1介导的抗氧化作用来改善COPD大鼠肺组织损伤程度.     

AG490 对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响

摘要： 目的 探讨 AG490 对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡及凋亡基因 FasL 和 Bcl-2 表达的影响。方法 健康 Wistar 大鼠 72 只, 按随机数字表法分为对照组(24 只)、 SAP 模型组(24 只)和 AG490 治疗组(24 只)。后 2 组采用 5%牛磺胆酸钠胆胰管内逆行注入诱导 SAP 大鼠模型, 3 组大鼠均于术后 6 h、 12 h、 24 h 心脏采血, 检测血清淀粉酶。剖腹取胰腺组织, 光镜下观察胰腺组织病理改变并进行病理学评分, TUNEL 法检测胰腺腺泡细胞凋亡指数, RT-PCR 检测胰腺组织 FasL、 Bcl-2 mRNA 的表达。结果 与对照组比较, SAP 模型组大鼠胰腺病理损伤加重, 病理评分增高, 血清淀粉酶明显升高, 胰腺腺泡细胞凋亡指数升高, FasL mRNA 表达明显升高, Bcl-2 mRNA 表达明显降低(P＜0.05 或 P＜0.01)。与 SAP 模型组相比较, AG490 治疗组大鼠胰腺病理损伤明显改善, 病理评分降低,血清淀粉酶明显降低, 胰腺腺泡细胞凋亡指数升高, FasL mRNA 表达明显升高, Bcl-2 mRNA 表达明显降低(P＜0.05 或 P＜0.01)。结论 抑制 JAK/STAT3 信号通路可能通过调节凋亡相关基因, 增加胰腺腺泡细胞凋亡, 从而减轻胰腺炎症反应及病理损害。     

罗格列酮对急性坏死性胰腺炎的保护作用

目的探讨罗格列酮对急性坏死性胰腺炎(ANP)的保护作用。方法 72只健康SD大鼠随机均分为假手术组(SO组)、ANP组及罗格列酮处理(R)组。采用经十二指肠胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导大鼠ANP模型,于模型制作前30min腹腔内注射罗格列酮(10mg/kg)进行预处理。各组于术后3、6、12h分批处死动物,分别观察各组大鼠血浆淀粉酶(AMY)、TNF-α、IL-6水平,胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)水平的变化以及胰腺组织病理改变。采用免疫组化法检测胰腺组织核因子κB(NF-κB)的表达,采用RT-PCR法检测胰腺组织过氧化物酶增殖物活化受体γ(PPARγ)mRNA、热休克蛋白-70(HSP-70)mRNA。结果 ANP组AMY、TNF-α、IL-6、胰腺组织MPO、胰腺组织病理学评分及胰腺组织NF-κB的表达较SO组明显升高(P<0.05或P<0.01),R组上述各检测指标均较ANP组显著降低(P<0.05或P<0.01)。R组各时点胰腺PPARγmRNA及HSP-70mRNA表达水平增加(P<0.05或P<0.01),胰腺组织损伤明显减轻。结论罗格列酮可能是激活PPARγ后通过诱导胰腺HSP-70的表达,抑制胰腺NF-κB的活化,减少细胞因子的产生,从而改善ANP病情。     

转录因子T-bet/GATA-3在哮喘大鼠中失衡表达及地塞米松的调节作用

目的 观察T细胞特异转录因子T-bet/GATA-3在支气管哮喘中失衡表达,探讨地塞米松对其调节作用.方法 36只雄性SPF级SD大鼠随机分为对照组(C组)、哮喘组(A组)和地塞米松组(D组).苏木精-伊红染色观察气道病理改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清中IL-4、IL-5、IFN-γ含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)测定法分别检测肺组织T-bet和GATA-3 mRNA和蛋白表达.结果 肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞、管壁面积/支气管管腔内周长(WA/Pi) 支气管平滑肌面积/支气管管腔内周长(ASM/Pi)A组比C组明显增多或增厚(P<0.01),D组明显低于A组(P<0.01);血清中IL-4和IL-5含量,A组高于C组(P<0.01),D组低于A组(P<0.01),IFN-γ含量A组和D组均低于C组(P<0.01);肺组织中T-bet mRNA和蛋白表达A组明显低于C组(P<0.01),D组明显低于C组(P<0.01);肺组织中GATA-3 mRNA和蛋白表达A组高于C组(P<0.01),D组与C组和A组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 转录因子T-bet/GATA-3在哮喘中失衡表达,地塞米松明显抑制转录因子T-bet表达,但对GATA-3表达无明显影响,其抑制哮喘的气道炎症并非通过调节转录因子T-bet和GATA-3的平衡实现.     

百草枯中毒早期大鼠肾组织中不规则趋化因子的表达

目的通过观察不规则趋化因子(Fractalkine,FKN,又称CX3CLl)在百草枯(Paraquat,PQ)中毒早期肾组织中的表达,探讨FKN在PQ致大鼠急性肾损伤中的作用。方法 SD大鼠80只,按随机数字法分为染毒组(40只)和对照组(40只)。染毒组腹腔注入PQ(22 mg/kg),对照组给予等量生理盐水。每组分别在染毒后0.5、1、3、5 d处死大鼠。测定血清肌酐及尿素氮,HE染色观察肾组织病理改变,免疫组化法检测FKN的表达。结果 PQ染毒后大鼠出现肾功能损害,血肌酐及尿素氮同步升高,且随染毒时间延长,肾功能损害逐渐加重,与同时间对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。镜下观察,染毒组大鼠肾组织病理改变为肾小球体积增大,肾小管上皮细胞肿胀及管腔变窄;此后随观察时间延长,可见水肿渗出、坏死,间质炎性细胞浸润增加,肾小管内蛋白管型。免疫组化发现:染毒组在染毒后0.5、1、3、5 d,FKN表达呈逐渐增高趋势(P<0.05),且明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 FKN在PQ早期大鼠肾组织中可表达,并与急性肾损伤的发病过程紧密相关。     

miRNA在2型糖尿病胰腺中的表达

目的 探讨糖尿病胰腺组织miRNA的表达变化.方法 链脲佐菌素(STZ)40 mg/kg腹腔注射+高脂高糖饲料喂饲健康雄性SD大鼠,成模(测血糖≥16.7 mmol/L)后4周,取胰腺组织常规抽提总RNA,采用含有2340种miRNA的芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析.结果 模型组miRNA表达谱中异常表达(2倍以上)的miRNA共有37个.其中,17个表达上调,20个表达下调.结论 在大鼠糖尿病模型中,部分胰腺miRNA的表达发生明显变化,提示miRNA可能参与糖尿病诱发的调节作用.     

替米沙坦联合氨氯地平对肾性高血压大鼠左室重构的对比研究

【摘要】目的比较替米沙坦、氨氯地平以及两者联用治疗肾性高血压大鼠左室重构的效果。方法健康雄性SD大鼠50只,随机分成两肾一夹高血压模型组（2KIC组）、假手术组、替米沙坦（10mg/kg）给药组、氨氯地平（2.5mg/kg）给药组、替米沙坦（10mg/kg）+氨氯地平（2.5mg/kg）给药组,每组10只;每周测1次尾动脉压。20周后,采用酶联免疫法检测血浆肾素活性（PRA）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、心钠素（ANP）含量。取心脏测定左室质量指数（LVMI）,观察心肌电镜超微结构。结果2KIC组的收缩压（SBP）、LVMI、PRA,AngⅡ、ANP含量均高于假手术组（P<0.01）;各单用药组的SBP、LVMI、PRA、ANP含量均低于2KIC组（P<0.01）,AngⅡ含量高于2KIC组（P<0.01）;联合用药组的SBP、LVMI、AngⅡ、ANP含量明显低于各单用药组（P<0.01）,血浆PRA水平差异无统计学意义（P＞0.05）。心肌电镜结果显示联合用药能更显著改善高血压大鼠左室重构。结论替米沙坦和氨氯地平均能有效地改善高血压左室重构,两者联用效果更明显。     

2型糖尿病相关基因表达谱的研究

目的筛查胰腺组织基因mRNA的表达变化,寻找与2型糖尿病(T2DM)发生相关的基因。方法 30只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,10只)和糖尿病模型组(B组,20只)。链脲菌素(STZ)40mg/kg联合高糖高脂饮食诱导T2DM大鼠模型,取胰腺组织常规提取总RNA,采用基因芯片检测系统进行mRNA表达谱差异分析,用实时定量PCR验证,并进行生物信息学的分析。结果基因芯片共检测出237个基因mRNA差异表达;其中,B组有17个基因发生了3倍以上的明显差异表达(上调12个,下调5个);生物信息学分析发现,差异表达基因涉及通路共9条。结论在大鼠糖尿病模型中,胰淀粉酶(Amy)1、Amy2、Amy3、聚-l-精氨酸酞酰胺(Pap2)、胰腺再生蛋白3α(Reg3a)等基因的表达均发生明显变化,提示其可能与糖尿病的发生密切相关。     

重症急性胰腺炎大鼠单核细胞趋化蛋白1的表达

目的 探讨单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）在重症急性胰腺炎（SAP）发病及其相关的急性肺损害（ALI）中的作用。方法 48只雄性SD大鼠随机分为SAP组和手术对照组,采用向胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型,术后1、3、6和12h分别观察血清淀粉酶,胰腺和肺组织病理组织学改变,酶联免疫固相吸附试验（EUSA）法测定血清中MCP-1水平,免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测胰腺和肺组织中MCP-1蛋白和MCP-1 mRNA的表达。结果 SAP组术后6、12h血清中MCP-1水平高于手术对照组（P〈0．05）,胰腺组织和肺组织中的MCP-1蛋白和MCP-1 mRNA的表达亦高于手术对照组（P〈0．05或P〈0．01）,且MCP-1的表达与胰腺和肺组织的病理学改变呈正相关。结论 MCP～1可能在SAP发病及其相关的ALI中起了重要的作用。     

ASSOCIATION OF THE BRAIN NATRIURETIC PEPTIDE GENE WITH BLOOD PRESSURE AND HEART WEIGHT IN THE RAT

1. Atrial natriuretic peptide (ANP) and brain natriuretic peptide (BNP) are important in the control of body fluid homeostasis, blood pressure (BP) regulation and vascular remodelling. The genes for these peptides may, therefore, be involved in the pathogenesis of genetic hypertension. We have previously described a quantitative trait locus (QTL) for BP in the ANP gene region on rat chromosome 5. We have now assessed the possibility that this QTL lies at the closely linked BNP locus. 2. Intra-arterial BP and heart weight were measured in 12-week-old (n = 207) and 24-week-old (n= 88) F2 rats derived from crosses between Wistar-Kyoto normotensive rats and spontaneously hypertensive rats. We designed polymerase chain reaction primers to amplify a microsatellite in the BNP gene from genomic DNA. Analysis of variance was used for cosegregation analysis. Linkage mapping and localization of QTL was performed using the Mapmaker computer package. 3. A significant correlation was found between genotype for the BNP gene and systolic BP (P < 0.001) in 12-week-old rats. The ANP gene, but not the BNP gene, was associated with systolic BP in 24 week rats. There was no segregation of heart weight with BNP genotype at 12 or 24 weeks of age. The BNP gene mapped approximately 20 cM from the ANP gene in our rat hybrids, away from the previously described QTL. There was evidence for a second BP locus near to but distinct from the BNP gene. 4. These results suggest that BP QTL are present in the natriuretic peptide gene region but that the ANP and BNP genes themselves have no major effect on BP in this cross.     

MitoKATP通道开放对重症急性胰腺炎大鼠心肌保护的实验研究

目的：探讨线粒体ATP敏感性钾通道（MitoKATP通道）开放对重症急性胰腺炎（SAP）心肌的保护作用及机制。方法：清洁级雄性SD大鼠36只随机分为4组：K组假手术;M组建立SAP大鼠模型;D组和H组分别给予连续腹腔注射二氮嗪(DZ)、DZ+5-羟基葵酸盐（5-HD）3d后建立SAP大鼠模型。观察4组大鼠术后24 h血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）水平;分光光度法测定心肌组织Na+-K+-ATPase活性;流式细胞仪检测心肌细胞线粒体线粒体膜电位(?ψm)变化;原位末端标记（TUNEL）法检测心肌细胞凋亡情况;留取部分心脏、胰腺组织行病理学检查。结果：M组CK-MB、LDH水平、心脏病理评分及凋亡指数较D组升高,Na+-K+ -ATPase活性及?ψm较D组降低,差异均有统计学意义（P < 0.01）,但M组上述指标与H组比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。结论：MitoKATP通道开放对SAP引起的心肌损伤有保护作用。