套式及免疫套式聚合酶链反应检测乙型肝炎表面抗原阴性肝病患者血清中乙型肝炎病毒DNA

为了更准确、简便而又快速地了解乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性肝病患者的病因，建立了套式和免疫套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的技术，结合丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染指标的检测，对ＨＢｓＡｇ阴性肝病患者的病因进行了研究。发现套式ＰＣＲ能将单次ＰＣＲ的敏感性稳定地提高１０００倍；免疫套式ＰＣＲ可检测到０．１～０．０１ｐｇ／Ｌ水平。检测ＨＢｓＡｇ阴性肝硬化２２例（Ａ组）、ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝炎１３例（Ｂ组）、ＨＢｓＡｇ阴性和乙型肝炎病毒核心抗体（抗－ＨＢｃ）阳性正常对照组３０例（Ｃ组）及ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（－）肝硬化患者１２例（Ｄ组），分别有４５．５％、３０．８％、１３．３％和１００％患者血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性。ＨＢＶＤＮＡ在一些抗－ＨＢｓ（＋）肝病患者和所谓健康人的血清中也存在。Ａ、Ｂ两组检出有ＨＢＶ和（或）ＨＣＶ感染患者分别占８１．８％和５３．８％。提示套式和免疫套式ＰＣＲ是简便、快速而又高度敏感的检测方法；ＨＢＶ感染可能是引起ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝病的重要原因，且ＨＢｓＡｇ阴性肝病病因大多与病毒感染有关；应该重新认识自然感染者血清中抗－ＨＢｓ的临床意义。     

用套式聚合酶链反应检测乙型肝炎疫苗免疫后无抗体反应者血清HBVDNA

为了解乙型肝炎（乙肝）疫苗接种后不产生抗－ＨＢｓ的原因，作者用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了正常人群中乙肝疫苗免疫后１５例不产生抗－ＨＢｓ和２０例产生抗－ＨＢｓ者血清的ＨＢＶＤＮＡ，同时用Ａｂｂｏｔｔ试剂检测血清的ＨＢｅＡｇ。结果发现，不产生抗－ＨＢｓ的１５例中有６例（４０％）第２次ＰＣＲ扩增ＨＢＶＤＮＡ为阳性，其中３例（５０％）为ＨＢｅＡｇ阳性，产生抗－ＨＢｓ者的２０例其血清ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ均为阴性。提示：常规方法漏检的低水平ＨＢＶ感染可能是造成乙肝疫苗免疫后不产生抗－ＨＢｓ的原因之一。     

多重和套式聚合酶链反应检测血液,腹膜透析患者血清中HBV D…

利用免疫学和聚合反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透），１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感     

用套式聚合酶链反应检测乙型肝炎疫苗免疫后无抗体反应者血清…

为了解乙型肝炎（乙肝）疫苗接种后不产生抗－ＨＢｓ的原因，作者用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了正常人君中乙肝疫苗免疫后１５例不产生抗－ＨＢｓ和２０例产生抗－ＨＢｓ者血清的ＨＢＶ ＤＮＡ，同时用Ａｂｂｏｔｔ试剂检测血清的ＨＢｅＡｇ。结果发现，不产生抗－ＨＢｓ者的１５例中有６例（４０％）第２次ＰＣＲ扩增ＨＢＶ ＤＮＡ为阳性，其中３例（５０％）为ＨＢｅＡｇ阳性，产生抗－ＨＢｓ者的２０例其血清ＨＢＶ     

多重和套式聚合酶链反应检测血液、腹膜透析患者血清中HBV DNA和HCV RNA

利用免疫学和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透）、１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染率显著高于一般人群。血、腹透两组ＨＣＶ感染率相差非常显著，血透患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性高于腹透患者，表明血透过程在丙型肝炎传播方面起重要作用。作者还采用多重和套式ＰＣＲ方法，将ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ在合并的逆转录和ＰＣＲ扩增系统中，连续进行逆转录和第一轮多重ＰＣＲ扩增，再进行第二轮多重ＰＣＲ，具有特异、敏感、简便、快速和经济等特点，适于临床应用。     

应用套式聚合酶链反应检测HBsAg及HBsAg／HBeAg阳性母亲血清和初乳中HBV DNA

应用套式聚合酶链反应检测ＨＢｓＡｇ及ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ阳性母亲血清和初乳中ＨＢＶＤＮＡ黄晓军，黄雅蓉，郑惠童本文作者应用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术来阐明ＨＢｓＡｇ及ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ阳性母亲外周血清中的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ与其血清及初乳...     

抗HCV阳性慢性肝病患者HBV感染及前C／C区基因变异

探讨ＨＢＶ基因变异在ＨＢｓＡｇ阴性抗ＨＣＶ阳性慢性肝病中的意义。方法用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）与限制片段长度多态性相结合，对５６例慢性肝病患者６例ＨＢｓＡｇ阴性抗ＨＣＶ阳性（Ａ组）．１９例ＨＢｓＡｇ阳性抗ＨＣＶ阳性（Ｂ组）及３１例单独ＨＢＶ成染（Ｃ组）进行前Ｃ区密码２８终止变异（Ａ８３）和Ｃ区密码９７异亮氨酸亮氨酸变异（Ｌ９７）分析。结果Ａ组和Ｂ组Ａ８３和Ｌ９７变异检出率分别为３３％和４２％显著低于Ｃ组８１％（Ｐ值＜０．００１）：而Ａ组和Ｂ组间无统计学差异（Ｐ值＞０．０５）。结论ＨＢＶ和ＨＣＶ双重感染ＨＢｓＡｇ阴性与Ａ８３和Ｌ９７变异无相关。     

快速简便筛检乙型肝炎病毒C基因启动子变异的方法及应用

目的明确中国乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）区段变异特点及其可能的临床意义。方法应用错配聚合酶链反应限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法，结合核苷酸序列分析，检测１４３例ＨＢｓＡｇ阳性的ＨＢＶ慢性感染者中Ｘ基因／ＢＣＰ区的核苷酸（ｎｔ）１７６２碱基由Ａ→Ｔ和１７６４碱基由Ｇ→Ａ变异。结果在１１４份ＨＢＶＤＮＡ阳性血清中，３７例感染ＢＣＰ变异株，其中３１例为慢性肝炎病例，６例为慢性ＨＢＶ无症状感染者（ＡｓＩ）；其中４１例ＨＢｅＡｇ阳性ＡｓＩ中仅２例检出，１８例ＨＢｅＡｇ阴性ＡｓＩ中也有４例检出。ＨＢｅＡｇ阳性的６５例中，１３例有ＢＣＰ区变异，而ＨＢｅＡｇ阴性的４９例中，２４例有ＢＣＰ区变异（Ｐ＜０．０１）。结论错配ＰＣＲ－ＲＦＬＰ检测这一对点突变，具有快速、简便、适用的优点；ＨＢＶ毒株ＢＣＰ变异可能与肝病变活动有一定关系。     

聚合酶链反应检测HBV DNA的临床意义

应用ＰＣＲ对１７１例肝病血清检测结果，ＨＢＶＤＮＡ阳性率５９．１％，ＥｌｉＳＡ检测ＨＢｓＡｇ阳性率４３．２７％，二者比较有显著性差异（Ｐ〈０．０１），ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（＋）组ＨＢＶＤＮＡ阳性率７９．５％，而ＨＢｓＡｇ（＋）抗－ＨＢｅ（＋）组主５７．９％，ＨＢｓＡｇ（－）／抗－ＨＢｓ（＋）组，ＨＢＶＤＮＡ阳性率３６．８％。     

PCR直接法检测HBsAg阴性肝病的价值

目的研究ＨＢｓＡｇ阴性肝病患者和自然人群中乙肝病毒（ＨＢＶ）携带者。方法采用ＤＮＡＰＣＲ直接法测定急、慢性肝炎，肝硬变和单项ＡＬＴ增高者共２３１例ＨＢｓＡｇ阴性患者中ＨＢＶＤＮＡ，２４０例ＨＢＶ标志阴性的自然人群对照。结果检出率在患者组和对照组分别为３３．７％（７８／２３１）和１１．５％（２８／２４０），Ｐ＜０．０１。单项ＡＬＴ增高组最高，达６６．７％（１０／１５），其他依次为慢肝组（ＣＨ）４１．９％（１３／３１）、肝硬变组（ＬＣ）３０．７％（５２／１６９）和急肝组１８．７％（３／１０）。单项ＡＬＴ增高组与ＬＣ、急肝组有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论在ＨＢｓＡｇ阴性的肝病患者和自然人群中均有ＨＢＶ携带者     

重叠HCV感染对HBV／C基因热点变异的影响

为探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）重叠丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染时ＨＣＶ对ＨＢＶ复制和基因变异的影响，采用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）与限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）相结合。对１９例ＨＢＶ感染重叠ＨＣＶ感染（Ａ组）和３１例单独ＨＢＶ感染（Ｂ组）的慢怀肝病患者分析前Ｃ区密码２８终止是（Ａ８３）和Ｃ密码９７异亮氨酸变为亮氨酸变异Ｌ９７）。结果显示Ａ组第一次ＰＣＲ阳性率（１６％）明显低于Ｂ组（６５％）（Ｐ，０     

PCR技术检测HBV DNA评价

目的 为评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＨＢＶ ＤＮＡ较之传统酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）的优越性,评价ＨＢｓＡｇ阴性消化科住院病人携带ＨＢＶ的状态,方法 我们使用ＰＣＲ技术检测了１１９例ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性的消化科住院病人的ＨＢＶ ＤＮＡ,并与１０３例ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性传染科住院肝炎病人相比较。结果：５２．１％的消化科住院病人ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｅ、抗－Ｈ     

HBV—DNA在各型乙肝中的分布规律探讨

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测乙肝患者的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，商时用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢＶ各抗原抗体指标。结果显示，９０４例乙肝患者的ＨＢｅＡｇ阳性率为３７．９％，而ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率达６８．８％，血清ＨＢＶＤ－ＮＡ阳性率明显高于ＨＢｅＡｇ（Ｐ〈０．０５）。在ＨＢｅＡｇ阴性病例中，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率达５４．４％，其中有活动性肝病者阳性率为７２．３％，肝病静止期仅１９．９％，差异极显著（Ｐ〈０     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的临床意义

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对２７３７例乙肝患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，结果发现各组ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率：①ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为９９．２７％；②ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｅ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４４．７７％；③ＨＢｓＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４２．８６％；④ＨＢＶ标志物均阴性为１５．９２％。结果表明ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ检出先于其它乙肝病毒标志物，可早期发现乙肝。ＰＣＲ法直接检测ＨＢＶ－ＤＮＡ更有利于临床对乙肝的诊断和治疗。     

血液透析患者血清HCVRNA、HGVRNA检测结果分析(附30例报告)

选择３０例ＨＢｓＡｇ阴性的维持性血液透析（血透）患者,采用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴｎＰＣＲ）法分别检测其血清ＨＣＶＲＮＡ和ＨＧＶＲＮＡ。结果显示。血清ＨＣＶＲＮＡ、ＨＧＶＲＮＡ阳性率分别为４０．０％和３３．３％。表明血透也可引起ＨＣＶ或ＨＧＶ传播和感染,要减少血透患者之间的交叉感染,应对复用的透析这路和透析机等严格和充分消毒,并做到透析器和管路“一人一用”,同时根据血透患者肝炎病毒的感染状况分机透析。     

乙型肝炎患者血清Pre-S-2抗原的意义

目的研究ＰｒｅＳ２抗原与乙型肝炎患者ＨＢＶ标记的关系．方法血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者２６例，血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者４７例及健康献血者２０例，血清用ＲＩＡ法检测ＰｒｅＳ２抗原及用ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ．结果血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者２６例，ＰｒｅＳ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ均阳性（１００％）；血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者４７例，ＰｒｅＳ２抗原３０例阳性（６３８％），１７例阴性（３６２％），ＨＢＶＤＮＡ３２例阳性（６８１％），１５例阴性（３１９％），ＰｒｅＳ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ均阳性２８例（５９６％），均阴性１４例（３００％）．健康献血者２０例，ＰｒｅＳ２抗原阳性１例（５０％），阴性１９例（９５０％），ＨＢＶＤＮＡ阳性２例（１００％），阴性１８例（８００％），ＰｒｅＳ２抗原及ＨＢＶＤＮＡ均阳性０例（０％），均阴性１８例（８００％）．结论ＰｒｅＳ２抗原可作为预测慢性乙型肝炎患者病情活动与传染的标志．     

多重聚合酶链反应检测乙型肝炎和丙型肝炎病毒

在同一反应体系中同时快速检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ），探讨多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）在临床中的应用价值。方法自行设计了ＨＢＶ和ＨＣＶ各一对引物，应用多重ＰＣＲ对临床标本进行检测。结果５例ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体均阳性者，其ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性；２０例单ＨＢｓＡｇ阳性标本，１１例单ＨＢＶＤＮＡ阳性，５例ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性；２０份单ＨＣＶ抗体阳性者，ＨＣＶＲＮＡ均阳性，３例合并ＨＢＶＤＮＡ阳性；１０例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢ）抗ＨＣＶ阴性肝炎标本８份ＨＣＶＲＮＡ阳性，１例ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ阳性。结论多重ＰＣＲ一次反应即可完成多次常规ＰＣＲ检测，是一种值得临床应用的方法。     

乙型肝炎病毒前核心区基因变异的研究

应用聚合酶链（ＰＣＲ）方法，分别扩增乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）标志为ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）抗ＨＢｃ（＋）的慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）１８例（第一组，ＨＢＶ标志物为ＨＢｓＡｇ（＋），抗ＨＢｅ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）的慢性乙型肝炎２１例（第二组，以及ＨＢＶ标志与第二组相同的体检健康的正常人１５例（第三组），其ＰＣＲ的阳性率分别为８３．３％，７１．４％和３３．３％，第二组与第三组要紫有显著差异（Ｐ〈０     

佛山地区存在经输血传播病毒(TTV)感染

我们应用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ法检测了４５例甲到戊型标志物均阴性的肝炎患者和４４例献血员血清中的ＴＴＶＤＮＡ。资料与方法：４５例肝炎患者均为我院传染科或门诊病人,血清经ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ均阴性,ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ,ＨＣＶＲＮＡ均阴性。４４例某院献血员检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ为阴性,肝功能正常。抽提标本血清ＤＮＡ进行Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ：以ＲＤ０３７和ＲＤ０３８为引物进行第一次ＰＣＲ,再以Ｒ…     

庚型肝炎病毒（GBV—C／HGV）与HBV和HCV联合或重叠感染的初步研究

目的 研究庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）与ＨＢＶ和ＨＣＶ联合或重叠感染的情况，方法 采用ＥＬＩＳＡ的方法检测血液制剂和血源乙肝疫苗原料血浆中的ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＣＶ；并用５′非编码区的引物，用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ。结果 ＨＢｓＡｇ和抗ＨＣＶ均阴性血浆的ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ阳性率为１８．８％（１５／８０）；ＨＢｓＡｇ阳性而抗ＨＣＶ阴性血浆的ＧＢＶ－