拟除虫菊酯对大鼠脑突触小体谷氨酸摄取的抑制作用

体外研究显示，溴氰菊酯（１ｘ１０￣（－７）～１ｘ１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ）可使大鼠大脑皮层和海马突触小体￣３Ｈ－ＤＬ－谷氨酸摄取量分别降低７．２％～２１．５％和１０．４％～２５．１％，且存在明显的剂量。效应关系。而氯菊酯却只在高剂量（１ｘ１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ）方使海马突触小体￣３Ｈ－ＤＬ－谷氨酸摄取明显降低。此外，溴氰菊酯还可降低小脑和纹状体￣３Ｈ－ＤＬ－谷氨酸的摄取，抑制率分别为１６．５％和３１．８％。结果表明，溴氰菊酯和氯菊酯可严重干扰脑组织高亲和性谷氨酸摄取机制的功能，其中以含氰基的溴氰菊酯作用较强，因此在拟除虫菊酯杀虫剂对哺乳动物的中枢兴奋性毒性作用中可能具有重要意义。     

铅对大鼠海马脑片谷氨酸递质体外释放的影响

为了探讨铅损害学习记忆功能的神经生物学机制，采用大鼠海马脑片观察铅在体外对谷氨酸递质释放的影响。结果显示，３．１～５０．０μｍｏｌ／Ｌ铅使海马脑片无钙状态下的３Ｈ－ＤＬ－谷氨酸自发性释放量增加２３．２％～６６．２％，并有剂量－效应关系。但在含钙介质中，当铅染毒剂量从１．０μｍｏｌ／Ｌ增加为５０．０μｍｏｌ／Ｌ时，３Ｈ－ＤＬ－谷氨酸的自发性释放量减少２２．６％～５５．３％，而高钾去极化释放量增加８９．３％～３３２．１％，而且均存在剂量－效应关系。表明铅对谷氨酸递质自发性和去极化释放过程均有干扰作用。     

溴氰菊酯对大鼠大脑皮层突触膜谷氨酸受体结合的影响

为研究溴氰菊酯对大鼠大脑皮层突触膜谷氨酸受体结合功能的影响，应用放射配基受体结合法进行了观察。结果显示，在１×１０－８～１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ剂量下，溴氰菊酯明显增加突触膜与３Ｈ－谷氨酸的结合量，而且具有剂量效应关系。与二甲基亚砜溶剂对照比较，谷氨酸结合率增加３．２％～１３．５％。受体－配基结合动力学分析呈现正协同作用，表明溴氰菊酯神经兴奋毒作用可能与中枢谷氨酸递质系统紊乱有关。     

β－胡萝卜素对人体乳腺癌细胞株BCap－37生物学作用的研究

应用细胞培养技术，分子杂交的ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ方法和图像细胞分析技术（ＩＣＭ）研究了β－胡萝卜素对体外培养的人乳腺癌细胞株ＢＣａｐ一３７的生物学作用。细胞生长曲线的结果显示，两个实验组（５×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ，１×１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ）对细胞的生长有显著抑制作用并伴有明显的细胞形态学特征的改变。抑制率分别为３３．３３％和２８．２５％（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。血浆生理浓度组（１×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ）对细胞的生长没有抑制作用（Ｐ＞０．０５）。基因表达的研究显示，β－胡萝卜素（１×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ，１×１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ）对癌基因Ｃ一ｅｒｂＢ２ｍＲＮＡ的表达没有抑制作用，１×１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ浓度组对癌相关基因ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达有抑制作用，应用ＩＣＭ技术测定四项指标，即ＤＮＡ指数（ＤＩ值），Ｓ期百分比（Ｓ％），总ＤＮＡ含量以及细胞核面积。结果显示，两实验组（１×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ，１×１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ）ＤＩ值为１．８１和１．７４，反映细胞呈异倍体水平，为恶性细胞的特征。两组的Ｓ期百分比为３３．７０％和３０．３９％，核面积为１４３．０μＭ２和１２０．９０μＭ２，均低?     

视黄酸对淋巴细胞膜IL—2Ra,TfR表达及淋巴细胞功能活性影…

用流式细胞仪观测一定剂量视黄酸对淋巴细胞蛋白介素２受体ａ链及铁传递蛋白受体表达及淋巴细胞细胞周期相细胞分布特征的影响，同时测定淋巴细胞增殖功能和＾４５Ｃａ内流，结果显示：１＞ＲＡ在２．５×１０＾－５－２．５×１０＾７ｍｏｌ／Ｌ剂量范围内能促进人外周血淋巴细胞膜ＩＬ－２Ｒａ，ＴｆＲ表达，２．５×１０＾６ｍｏｌ／Ｌ作用最明显，２．５×１０＾－４ｍｏｌ／ｌ     

间接竞争抑制性酶联免疫吸附试验测定豚毒鱼类中河豚毒素的研究

将河豚鱼样品的组织匀浆用０．１％乙酸溶液煮沸２次，合并滤液用乙醚脱脂２次，将水相用０．０５ｍｏｌ／ＬＰＢＳ稀释后（调ｐＨ６．５～７．０）供ＥＬＩＳＡ检测之用。结果表明，本法的最低检出浓度为１．０×１０－３ｍｇ／Ｌ（０．１ｎｇ／检测孔），线性范围为０．０１～１．０ｍｇ／Ｌ，方法的加标回收率为７３．８％～１１７．４％。用传统的小鼠生物试验比较了方法的准确性。测定结果表明，两种方法之间在统计学上无显著性差异（配对ｔ检验，Ｐ＞０．２），并具有良好的相关性（ｒ＝０．９１６）。     

维生素A对甲醛暴露小鼠脾淋巴细胞转化反应及IL—2活性水平的研究

对甲醛暴露的小鼠脾淋巴细胞转化反应及ＩＬ２活性水平进行了研究，在０．０５ｍｇ／ｍ３、０．１０ｍｇ／ｍ３、２．０ｍｇ／ｍ３、３．０ｍｇ／ｍ３甲醛浓度下，小鼠脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ的转化反应逐渐受到抑制，抑制率分别为１．６５％、３．０３％、２５．７４％、３５．６４％；ＩＬ２活性也受到相应的抑制，其抑制率分别为１．０７％、１．６９％、１９．８０％、３１．４０％。用维生素Ａ在体外进行营养干预，其最适浓度分别为２．５×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，５．０×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，１．０×１０－７ｍｏｌ／Ｌ，７．５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ，可拮抗不同浓度甲醛暴露小鼠脾淋巴细胞转化反应和ＩＬ２活性水平，效果显著。     

用Hantzsch反应光度法测定食品中蛋白质的研究

蛋白质经消化生成铵盐，在ｐＨ４．８乙酸盐介质中，铵与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色的３，５－二乙酰－２，６－二甲基－１，４－二氢化吡啶化合物，借此拟定了一种测定食品中蛋白质的光度分析新体系。在波长４００ｎｍ处，氮浓度在０～１０．０ｍｇ／Ｌ范围符合比尔定律，摩尔吸光系数（ε）为１．７×１０３，样品中加标回收率为９９．６％～１０１．２％，相对标准偏差＜３．７％。     

某油田开放型放射性实验室放射卫生监测与评价

报道了对辽宁某油田开放型放射性实验室进行放射卫生防护监测的结果。工作人员操作位置的(照射量率为４．７×１０(－７)Ｃ·ｋｇ(－１)·ｈ(－１),室内空气气溶胶总ａ、总(采样后４ｄ的测值分别为（８．２２８．０）×１０(－４),（０．６～６．３）×１０(－２)Ｂｑ·ｍ(－３),各类房间的地面、墙壁等表面ａ、β放射性范围分别为（４．２～１６．７）ｘ１０(－４),（１．１～２．３）ｘ１０(－１)Ｂｑ·ｃｍ(－２)。同时,对监测结果进行了评价。     

维生素B_6的离子交换HPLC法测定

本实验详细地研究了维生素Ｂ＿６（吡哆醛，ＰＬ；吡哆醇，ＰＮ；吡哆胺，ＰＭ）在阳离子交换树脂柱ＩＳＣ－０７／Ｓ１５０４上的色谱行为，建立了测定各种样品中维生素Ｂ＿６含量的高效液相色谱法。方法采用甲酸盐作流动相，荧光检测（Ｅｘ３２０ｎｍ，Ｅｍ４００ｎｍ）；对于不同的样品采取不同的提取、净化和分离方式。维生素Ｂ＿６组分与杂质之间以及维生素Ｂ＿６组分之间达到了基线分离。方法的标准添加回收率：８２．６％～１１１．３％，荧光响应值与标准量间的相关系数＞０．９９９，变异系数（ＣＶ）：０．４１％～０．６２％，最小检出量；ＰＬ，８．９７３×１０￣（－４）μｍｏｌ／Ｌ；ＰＮ，５．９１１×１０￣（－４）μｍｏｌ／Ｌ；ＰＭ，２．９７３×１０￣（－４）μｍｏｌ／Ｌ。     

拟除虫菊酯对大鼠脑突触体谷氨酸摄取功能的影响

作者观察了拟除虫菊酯对大鼠脑突触体谷氨酸重摄取功能的影响。在一定量的突触体与不同剂量的氯氰菊酯或氯菊酯中加入放射性标记谷氨酸，测定突触体摄取的谷氨酸的放射活性，在１０－ ９ ～１０－ ４ ｍ ｏｌ／ Ｌ的剂量范围内，氯氰菊酯及氯菊酯明显抑制突触体对谷氨酸的重摄取量，并有一定的剂量依赖性。在相同剂量水平，氯氰菊酯作用明显强于氯菊酯。结果表明拟除虫菊酯对大鼠脑突触体谷氨酸高亲和性重摄取功能有抑制作用，提示突触体谷氨酸重摄取系统功能障碍在拟除虫菊酯兴奋性神经毒性中具有重要意义。     

雌二醇对溴氰菊酯染毒大鼠皮层突触体神经毒性的影响

目的观察雌激素对溴氰菊酯染毒动物皮层突触体膜兴奋性氨基酸递质释放和ATPase活力的影响.方法用高效液相色谱(HPLC)检测不同水平17β-雌二醇(10-5、10-8、10-111mol/L)对2×10-5mol/L溴氰菊酯染毒的去卵巢大鼠皮层突触体氨基酸释放的影响;用化学比色法检测17β-雌二醇(10-5、10-8、10-11mol/L)对2×10-4mol/L溴氰菊酯染毒的去卵巢大鼠皮层突触体Na+-K+ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPage活力的影响,并观察雌激素受体拮抗剂Tamoxifen对雌二醇作用的影响.结果2×10-5mol/L氰菊酯处理可增加高钾去极化状态下大鼠皮层突触体天冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)的释放;10-8、10-11mol/L的17β-雌二醇可抑制溴氰菊酯所致高钾去极化状态下突触体Asp和Glu的释放,对Asp释放抑制率为28.42%、24.36%,对Glu释放抑制率为21.52%、14.57%;Tamoxifen对17β-雌二醇的抑制作用未见拮抗.2×10-4mol/L溴氰菊酯可抑制突触体4种ATPage活力;10-5mol/L雌二醇可拮抗溴氰菊酯对4种ATPase活力的抑制;l0-8、10-11mol/L雌二醇可增加Ca2+-ATPase活力;Tamoxifen对雌二醇的拮抗作用仍未见明显影响.结论 17β-雌二醇对溴氰菊酯染毒所致皮层突触体兴奋性氨基酸递质释放增加和ATPase活力抑制有一定的保护作用,该作用可能是雌二醇非基因学机制的表现.     

两种有机磷酸酯对人成神经细胞瘤细胞生长与钙摄取的影响

目的　探讨具有迟发性神经毒性的有机磷酸酯 (organophosphates,OPs)对人成神经细胞瘤细胞SH SY5Y的毒性作用。方法　采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法测定SH SY5Y细胞活力 ;用培养的SH SY5Y细胞与45CaCl2 和磷酸三邻甲苯酯 (tri o cresylphosphate ,TOCP)或甲胺磷共育后 ,洗脱 ,裂解 ,经液闪仪计数测定细胞对钙的摄取情况。结果　甲胺磷在较低浓度 (7× 10 -7～ 7× 10 -6mol/L)时可刺激SH SY5Y细胞的生长 ,在 7× 10 -7mol/L浓度时细胞的增长比对照增加了 2 8% ,而在高浓度 (7× 10 -4～ 7× 10 -3mol/L)时抑制细胞生长 ,在 7× 10 -3 mol/L时的抑制率为 6 2 % ;但TOCP只在高浓度 (7× 10 -3 mol/L)时才对细胞的生长有抑制作用 (抑制率为 34% )。TOCP在几乎所有的测试浓度下都对SH SY5Y细胞的钙摄取量有影响 :在低浓度 (1× 10 -9～ 1× 10 -7mol/L)时刺激细胞的钙摄取 ,细胞的钙摄取量最高增加 2 4 1% ,但在高浓度 (1× 10 -6～ 1× 10 -4mol/L)时抑制细胞的钙摄取 ,最高的抑制率达 5 5 %。结论　OPs的神经毒性可能涉及阻遏神经细胞生长和干扰细胞钙平衡。     

溴氰菊酯对大鼠脑中苄氧基试卤灵O-脱烷基化酶活力及CYP2B1/2B2蛋白水平的影响

目的　研究溴氰菊酯 (deltamethrin ,DM)对大鼠脑组织中苄氧基试卤灵O 脱烷基化酶(benzyloxyresorufinO dealkylatase,BROD)活力及CYP2B1 / 2B2蛋白水平的影响。方法　采用荧光分光光度法 ,在体内、体外研究了DM对大鼠脑组织中BROD活力的影响 ,并用Western blot法检测了DM对CYP2B1 / 2B2蛋白水平的影响。结果　大鼠连续 5d腹腔注射DM 1 2 .5mg·kg- 1 ·d- 1 染毒后 ,其全脑、大脑皮层及小脑BROD活力明显被抑制 ,其抑制率分别是 2 6 .7%、2 3 .8%和 33 .3 % ,差异均有显著性(P <0 .0 5) ;在体外 ,DM浓度在 2× 1 0 - 8～ 2× 1 0 - 4mol/L范围内对BROD活力无明显影响 ;DM在体内明显降低小脑中CYP2B1 / 2B2蛋白水平 ,其酶蛋白合成抑制率为 42 .6 %。结论　DM在体内能明显抑制脑内BROD活力 ,其机制与抑制该酶蛋白合成有关     

甲胺磷与乙酰甲胺磷对乙酰胆碱酯酶毒效应的比较

目的　探讨高毒有机磷化合物甲胺磷及其替代品乙酰甲胺磷对乙酰胆碱酯酶 (AChE)的抑制作用及机制。方法　提取人红细胞膜及大鼠脑突触体膜后 ,体外实验中用Ellman法测定在不同受试物浓度、不同作用时间下剩余AChE活力 ;整体实验中用Ellman法测定不同脑区AChE活力。结果　乙酰甲胺磷和甲胺磷在体外对人红细胞膜及大鼠大脑皮层突触体膜AChE均有不可逆的抑制作用 ,且有明显的剂量 -效应和时间 -效应关系 ,两者对人红细胞膜及大鼠各脑区突触体膜AChE活力的半数抑制浓度 (IC50 )分别约为 1 0 - 4mol/L、1 0 - 5mol/L ,双分子速率常数 (Ki)分别为 1 0 2mol·L 1 ·min 1 、1 0 3mol·L 1 ·min 1 左右。在整体实验中 ,连续 5d给大鼠腹腔注射乙酰甲胺磷和甲胺磷 ,其全血AChE活力的抑制率逐渐上升 ,第 5天分别达到 68.2 4 %和 54 .80 %。乙酰甲胺磷仅对大鼠脑干AChE活力有抑制作用 (抑制率为 31 .68% ) ,其余脑区均未见明显影响 ;而甲胺磷对各脑区AChE活力均有较强的抑制 ,以小脑和脑干最强 ,分别为 71 .51 %和 61 .85 %。结论　乙酰甲胺磷和甲胺磷在体外对人红细胞膜和大鼠大脑皮层突触体膜AChE活力均有不同程度的抑制作用 ;在整体实验中对大鼠全血AChE活力均有抑制作用。对脑区AChE的抑制存在差异可能是两者毒     

溴氰菊酯对原代培养大鼠星形胶质细胞存活率和胞内游离钙浓度的影响

目的　观察溴氰菊酯 (DM)对原代培养大鼠神经星形胶质细胞存活率及胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法　以锥虫蓝染料排斥试验检测细胞染DM后存活率的变化 ;以Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,RF 5 30 1PC荧光分光光度计测定细胞内 [Ca2 + ]i的变化。结果　 1× 10 -5mol/L组染毒DM 72h后细胞存活率下降为 91.9% ,与对照组的差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,1× 10 -4mol/L组DM染毒4、12、4 8、72h后细胞存活率分别为 89.0 %、84 .8%、81.2 %和 79.2 % ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;1× 10 -7、1× 10 -6、1× 10 -5mol/L组DM染毒 5min后胞内 [Ca2 + ]i分别上升至 (45 1.4± 4 2 .3)、(5 36 .9± 4 7.5 )、(870 .9± 10 0 .5 )nmol/L ,与染毒前及对照组比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。以后各染毒组胞内 [Ca2 + ]i逐渐下降 ,15min时 1× 10 -8、1× 10 -7、1× 10 -6、1× 10 -5mol/L染毒组胞内 [Ca2 + ]i分别降至 (12 4 .3± 6 .0 )、(131.3± 19.1)、(118.9± 1.4 )、(136 .6± 3.8)nmol/L ,与染毒前及对照组比差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　DM在体外可降低神经胶质细胞的存活率并短时升高胞内 [Ca2 + ]i。     

反相高效液相色谱荧光法测定大鼠血清和脑组织中茶氨酸含量

目的建立一种反相高效液相色谱荧光检测法,测定大鼠血清和脑组织中茶氨酸含量。方法用ODS-SP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,粒径5μm),以磷酸二氢钾缓冲液(0.1 mol/L,pH6.0):四氢呋喃:甲醇体积比=62:3:35为流动相;高丝氨酸为内标;邻苯二甲醛柱前衍生;流速0.85 ml/min;荧光检测器激发波长340 nm、发射波长455 nm检测大鼠血清、脑组织中茶氨酸含量。结果茶氨酸浓度在1～20μmol/L范围内线性关系良好,相关系数为0.9997;浓度为1、10、20μmol/L时日内RSD(%)分别为3.51、1.58、0.75,日间RSD(%)分别为4.54,3.25,2.87;茶氨酸平均回收率范围为91.8%～99.1%;最低检测限为0.02μmol/L。SD大鼠给予200 mg/kg.bw茶氨酸灌胃后,血清中峰值出现在0.5～1.0 h之间,脑组织中浓度5 h达到峰值。结论该反相高效液相色谱荧光法灵敏度高,重复性好,能有效分离检测大鼠血清、脑组织中茶氨酸含量。     

二(噁)英对成骨肉瘤细胞的凋亡及胰岛素样生长因子结合蛋白6表达的影响

目的 探讨二(噁)英(TCDD)对调控成骨肉瘤细胞(SaOS-2)凋亡和胰岛素样生长因子结合蛋白6(insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6)基因表达的影响.方法 应用1×10-9、1×10-8、1×10-7 mol/L浓度的TCDD作用于SaOS-2细胞株,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测TCDD对SaOS-2细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测SaOS-2细胞株细胞凋亡率,采用对硝基酚磷酸盐法测定SaOS-2细胞内碱性磷酸酶(ALP)的活力,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析SaOS-2中IGFBP-6 mRNA的表达,采用Western印迹杂交鉴定SaOS-2中IGFBP-6蛋白的表达.结果 在1×10-9、1×10-8、1×10-7 mol/L TCDD浓度下SaOS-2的增殖指数分别为18.4±4.5、22.5±3.6、29.4±4.2,SaOS-2 ALP的活力分别为1.12±0.28、1.58±0.14、1.96±0.17 U/mg Pro,均高于对照组;且1×10-7、1×10-8 mol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);1×10-7 mol/LTCDD浓度组的细胞凋亡率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).3个不同浓度组的mRNA表达和1×10-7 mol/L TCDD组蛋白的表达均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低浓度的TCDD对SaOS-2的凋亡代谢具有拮抗作用.TCDD对SaOS-2内IGFBP-6基因表达的抑制效应,可能是TCDD参与骨肿瘤发生及生长的作用机制之一.     

拟除虫菊酯对大鼠脑组织γ-氨基丁酸转氨酶活力的影响

目的　研究拟除虫菊酯对大鼠脑组织γ 氨基丁酸转氨酶 (GABAT)活力的影响。方法　应用偶联酶学紫外分光光度法 ,在体外和整体实验中 ,观察溴氰菊酯 (DM)和氯菊酯 (PM)对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑GABAT活力的影响。结果　在体外 ,终浓度为 10 -9～ 10 -4mol/L的DM或PM对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑的GABAT活力无明显影响 ;一次性经口给予 37.5mg/kg的DM组大鼠大脑皮层、海马和小脑的GABAT活力分别为 (2 .96± 0 .4 3)、(2 .13± 0 .4 4 )、(5 .12± 1.36 )nmol·mgpro-1·min-1,低于对照组 [(3.4 3± 0 .4 1)、(2 .6 8± 0 .4 7)、(6 .74± 1.6 4 )nmol·mgpro-1·min-1],差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,6 0 0mg/kgPM一次性染毒组大鼠大脑皮层和海马的GABAT活力分别为(4.5 7± 0 .30 )、(4.18± 0 .6 3)nmol·mgpro-1·min-1,高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;连续 5d每天 1次经口给予 12 .5mg/kg的DM或 2 0 0mg/kg的PM ,均对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑的GABAT活力无明显影响。结论　在体外 ,DM和PM均对大鼠脑组织GABAT活力无明显影响 ;在整体实验中 ,DM和PM对大鼠脑组织GABAT活力的影响可能存在差异。     

氯化甲基汞抑制脑α1-肾上腺素受体结合及恢复效应的体内及体外实验研究

为研究甲基汞对大鼠脑α1-肾上腺素受体的影响以及拮抗剂对甲基汞引起该受体特异结合抑制的恢复效果,本文应用放射性配体结合技术进行了体内外试验研究.结果显示:氯化甲基汞能明显抑制大鼠脑α1-肾上腺素受体与[3H]prazosin的特异结合,IC50为2.89 μmol/L.二琉基丙磺酸钠、二巯基丁二酸钠,半胱氨酸能使被氯化甲基汞抑制的[3H]prozosin结合得到不同程度的恢复.表明甲基汞与巯基基团的结合是脑α1-肾上腺素受体受其抑制的分子机制.而含巯基的化合物能把与受体上巯基基团结合的甲基汞竞争下来,从而恢复α1-肾上腺素受体与配体的结合能力.