大鼠慢性氟中毒听觉损伤的实验观察

目的探讨慢性氟中毒大鼠耳蜗毛细胞形态学的改变和听力损失的机制。方法借助畸变产物耳声发射（distortion product otoacoustic emissions，DPOAE）测试和扫描电镜技术，对60只大鼠进行了实验观察。结果DPOAE测试结果显示对照组与低氟组、高氟组8kHz反应幅值差异均有显著性（P〈0．05），0．5、1、2、4kHz各组数据经统计学处理（P〉0．05），无统计学意义。对照组耳蜗内、外毛细胞排列规则。低氟组的内、外毛细胞都有不同程度的损害，表现为静纤毛粘连、倒伏。高氟组内、外毛细胞的损害严重，出现明显的粘连、倒伏、融合，并可见散在的节段性缺失，以底圈明显。表皮板结构发生不同程度的病变，严重者表皮板穿孔，细胞内容物流出，形成气球样改变。结论慢性氟中毒明显影响听力，导致高频感音神经性耳聋，其损害机制可能是氟对耳蜗毛细胞的直接损害造成的。听功能损害的严重程度与氟中毒程度相关。     

维生素E和辅酶Q10对大鼠内耳组织线粒体DNA 4834 bp缺失突变的预防作用

目的研究维生素E、辅酶Q10对大鼠线粒体DNA 4834缺失突变的预防作用。方法Wistar大鼠46只，采用抽笼法随机分为3组，实验组(A组，18只)阿霉素1mg／kg腹腔注射，每周2次，共3个月，同时给予维生素E50mg／kg和辅酶Q10 10mg／kg灌胃，每天1次；生理盐水对照组(B组，18只)在给予阿霉素的同时予以生理盐水灌胃；空白对照组(C组，10只)仅给予生理盐水灌胃。提取内耳组织总DNA，利用巢氏聚合酶链反应技术检测内耳组织线粒体DNA 4834 hp缺失突变的发生情况，并检测血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性的变化。结果A组大鼠线粒体DNA 4834 bp缺失突变发生率为23．08％(3／13)，B组为68．75％(11／16)，C组为0(0／8)，经Fisher’s精确概率检验，单侧检验，A组和B组之间差异有显著性(P=0，018)，A组和C组之间差异无显著性(P=0．215)。A组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性较B组高，差异有显著性(校正t’检验，单侧检验，t’=6．474，P＜0．01)；A组和C组之间差异无显著性(校正t’检验，双侧检验，t’=1．920，P＞0．05)。结论维生素E和辅酶Q10具有增加机体对自由基的清除能力，保护内耳组织线粒体DNA，降低4834bp缺失突变发生率的作用。     

大鼠畸变产物耳声发射的基本特性

目的　探讨正常大鼠畸变产物耳声发射 (DPOAE)的基本特征。方法　采用CELESTA - 5 0 3型耳声发射分析仪对 4 0只 ( 80耳 )健康大鼠行DPOAE“听力图”和输入 输出曲线及阈值测试。结果　各频率的DPOAE检出率均为 10 0 % ;1kHz的DPOAE幅值为 17.6 0± 5 .96dBSPL ,反应阈值为 36 .6 7± 3.83dBSPL ;2kHz以上DPOAE幅值均大于 2 5dBSPL ,反应阈值低于 1kHz;I O曲线表明各频率DPOAE幅值随初始音的强度上升而增加 ,两者间存在极为显著的相关性 ;同频率、同强度时 ,DPOAE幅值、反应阈值两耳间差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　大鼠的DPOAE检出率高 ,幅值大 ,各项指标反应稳定 ,为实验动物的筛选及实验提供参考资料     

Wistar大鼠畸变产物耳声发射长期稳定性观察

目的：观察Wistar大鼠畸变产物耳声发射（DPOAE）长期稳定性。方法：对12只（21耳）健康、无耳疾病Wistar大鼠，分别于产后2、4、8、16周时测试F2为553、783、1105、1560、2211、3125、4416、6250、837Hz各点DPOAE（2f1-f2,f2/f1=1.2,L1=L2=70dB SPL)幅值。结果：除2周龄Wistar大鼠在F2为553、783、1105Hz三点DPOAE幅值较其后各周低，且差异有显著性意义（P＜0．05）外，其他各周龄在各频率点DPOAE幅值差异均无显著性意义（P＞0．05）。结论：4－16周龄Wistar大鼠DPOAE幅值在各频率点相对稳定，DPOAE可作为4－16周龄Wistar大鼠听力跟踪实验的指标，以此判断相应时期内耳蜗功能的改变。     

糖尿病早期内耳损伤听力学改变的实验研究

目的研究糖尿病内耳损伤早期的听力学改变及其机制。方法建立糖尿病动物模型,每日检测动物血糖,持续2周。实验前后检测ABR及DPOAE,2周后检测血脂、超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）、血清丙二醛（MDA）,并与对照组比较。结果模型组大鼠的血糖、血脂增高,GSH-Px的活性下降,ABR阈值无显著变化,DPOAE的反应幅值下降,与正常组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论糖尿病造成大鼠内耳损害的机制与机体代谢紊乱引起内耳毛细胞的氧化损伤有关;这种损伤所致的耳声发射的异常改变早于听性脑干反应异常的出现。     

噪声暴露引起大鼠听觉器官线粒体DNA缺失

目的　探讨线粒体DNA(mitochondrialDNA ,mtDNA)缺失与噪声性聋的关系。方法　3月龄大鼠分噪声暴露组和无暴露对照组 ,各 2 0只。噪声暴露组暴露于 1 0 8～ 1 1 0dBSPL的白噪声4h/d ,共 40d ;对照组不接触噪声。噪声暴露结束 2周后测试两组大鼠的听性脑干反应 (auditorybrainstemresponse ,ABR)阈值 ,聚合酶链反应 ( polymerasechainreaction ,PCR)检测其耳蜗、蜗核、颞叶脑组织和颞肌组织中是否存在mtDNA4834缺失 ,对存在的缺失进行定量分析 ;PCR产物进行克隆、测序。结果　噪声暴露组大鼠出现永久性阈移 ,其ABR平均阈值 ( x±s,下同 )为 ( 75 2 5± 6 1 7)dBSPL ( 4 0耳 ) ,对照组为 ( 34 75± 3 80 )dBSPL( 4 0耳 ) ,两组ABR阈值的差异具有非常显著性意义 (P<0 0 1 )。噪声暴露组大鼠的耳蜗、蜗核、颞叶脑组织中mtDNA4834缺失发生率 ( 2 4 /40、1 6/2 0、1 8/2 0 )明显高于对照组 ,两组之间的差异具有非常显著性意义 (P <0 0 1 ) ;而与听觉无关的颞肌组织中mtDNA4834缺失发生率 ( 2 /2 0 )在两组中均很低 ,两组之间的差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;噪声暴露组大鼠的耳蜗、蜗核、颞叶脑组织和颞肌中mtDNA4834 缺失占总mtDNA的平均百分率 ( x±s)分别为( 0 9988± 0 5 5 1 6)× 1 0 - 2 %、( 1 0     

老年大鼠耳蜗螺旋神经节及耳蜗核线粒体DNA缺失的研究

目的　探讨耳蜗螺旋神经节及耳蜗核线粒体DNA(mitochondrialDNA ,mtDNA)缺失在老年聋发病中的可能作用。方法　分别测试老年组及青年组大鼠听性脑干反应 (ABR)阈值 ,应用聚合酶链反应 (polymerasechainre action,PCR)技术对老年及青年大鼠耳蜗螺旋神经节及脑组织中耳蜗核mtDNA 4 834bp缺失片段进行检测。结果老年组及青年组大鼠ABR阈值分别为 71.0 0± 6 .75、39.83± 4 .4 5dBpeSPL。老年大鼠耳蜗螺旋神经节及脑组织中耳蜗核mtDNA483 4 缺失出现率分别为 6 6 .7%、10 0 % ;青年鼠耳蜗螺旋神经节及脑组织中耳蜗核均无此片段缺失。　结论　老年大鼠耳蜗螺旋神经节及脑组织中耳蜗核存在mtDNA片段缺失 ,并可能在老年聋发病中起重要作用。     

水杨酸钠对豚鼠畸变产物耳声发射的影响

本文以１０％水杨酸钠４００ｍｇ／ｋｇ经豚鼠腹腔注射２小时和４天后,进行较系统的畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）测试,并以自身为对照,探讨用药前后水杨酸钠对豚鼠ＤＰＯＡＥ的影响。结果发现,用药２小时和４天后,水杨酸钠具有对ＤＰＯＡＥ相似的影响作用;水杨酸钠在低刺激强度下可明显卫低ＤＰＯＡＥ的测出率;对各频率ＤＰＯＡＥ的幅值和阈值分别有降低和升高的作用,前者降低２～６ｄＢ,后者升高３～９ｄＢ,均以低频为     

不同缺铁期大鼠畸变产物耳声发射的改变

目的　观察不同饲养期铁缺乏大鼠畸变产物耳声发射 (DPOAE)的改变 ,探讨铁缺乏引起听毛细胞损伤的可能机制。方法　幼龄Wistar大鼠 ,随机分组 ,缺铁饮食饲养法复制铁缺乏动物模型 33只 ,标准饮食饲养 33只作对照。每组分别于喂养第 4、8、12周各随机取 11只测双耳DPOAE幅值。结果　铁缺组第 4周平均DPOAE幅值中、高频率段下移 ,在 2、4kHz两点下移具有显著性意义 (P <0 .0 5 )。第 8周比第 4周中高频率段下移明显 ,在 1.4、2、3、4、6、8kHz各点差异具有显著性意义 (P <0 .0 5 )。第 12周与第 8周对比 ,DPOAE幅值各点相近 (P >0 .0 5 )。结论　铁缺乏大鼠DPOAE幅值下降具有时间特征性     

实验性糖尿病大鼠内耳毛细血管超微结构变化

目的观察糖尿病性聋动物内耳毛细血管超微结构的变化。方法实验动物分为三组:正常对照组、糖尿病2月组及糖尿病3月组。用链脲佐菌素诱导建立实验性糖尿病大鼠模型,在造模前及成模后2、3月进行ABR测试,应用透射电镜动态观察不同病程糖尿病性聋动物内耳毛细血管超微结构的变化情况。结果造模前三组动物ABR阈值差异无统计学意义(P>0.05),糖尿病组动物成模后2月起ABR阈值较对照组提高(P<0.05)。至成模后3月,糖尿病动物ABR阈值明显提高,较对照组差异有显著统计学意义(P<0.01)。动物成模后2月,内耳血管纹毛细血管内皮细胞及周细胞核异染色质聚集靠边,内皮细胞线粒体肿胀,但基底膜无明显增厚;成模后3月,上述病变更为明显,基底膜显著增厚。结论糖尿病可导致内耳毛细血管超微结构的变化,包括基底膜增厚。     

PTPRQ基因的内耳功能及突变致聋机制的研究进展

受体型蛋白酪氨酸磷酸酶Q(Receptor type protein tyrosine phosphatase Q,PTPRQ)作为一种蛋白酪氨酸磷酸酶,能催化不同的底物,参与多种细胞内的功能.PTPRQ基因突变可导致常染色体隐性和显性非综合征性耳聋DFNB84A型和DFNA73型耳聋的发生,两型耳聋的临床表型差异提示...     

Effects of Chronic Furosemide Treatment and Age on Cell Division in the Adult Gerbil Inner Ear

Atrophy of the stria vascularis and spiral ligament and an associated decrease in the endocochlear potential (EP) are significant factors in age-related hearing loss (presbyacusis). To model this EP decrease, furosemide was delivered into the round-window niche of young adult gerbils by osmotic pump for seven days, chronically reducing the EP by 30–40 mV. Compound action potential (CAP) thresholds were correspondingly reduced by 30–40 dB SPL at high frequencies. Two weeks after withdrawal of furosemide, the treated ears showed an EP recovery of up to 20–30 mV along with a similar recovery of CAP thresholds. The influence of cell division on furosemide-induced and age-related decline of the EP was examined using a mitotic tracer, bromodeoxyuridine (BrdU). Cell proliferation was examined in three groups: young control, furosemide-treated, and aged cochleas. Sections immunostained for BrdU were bleached with H₂O₂ to eliminate ambiguities with melanin pigment in the inner ear. Cell types positively labeled for BrdU in all three groups included Schwann cells in Rosenthal's canal; glial cells in the osseous spiral lamina; fibrocytes in the limbus, sacculus, and spiral ligament (SL); epithelial cells in Reissner's and round-window membranes; intermediate cells in the stria vascularis; and vascular endothelial cells. Quantitative analysis showed that the mean number of BrdU-positive (BrdU+) intermediate cells in the stria did not differ significantly among the three groups. In contrast, there was a significant increase of BrdU + fibrocytes in the SL of furosemide-treated animals as compared to the young control group. Moreover, there was a significant decrease in labeled fibrocytes in the aged versus the young ears, particularly among the type II and type IV subtypes. The results suggest that the increased fibrocyte turnover in the SL after furosemide treatment may be related to the recovery of EP and CAP thresholds, supporting the hypothesis that fibrocyte proliferation may be essential for maintaining the EP and cochlear function in normal and damaged cochleas. Moreover, the decreased turnover of SL fibrocytes with age may be a contributing factor underlying the lateral wall pathology and consequent EP loss that often accompanies presbyacusis.     

哇巴因对小鼠内耳神经胶质细胞的影响

目的 研究哇巴因对小鼠内耳神经胶质细胞的影响,为干细胞移植治疗感音神经性聋的研究奠定基础.方法 成年雌性SPF级CBA/J小鼠60只,随机分为实验组和对照组,每组30只;实验组动物接受哇巴因(3 mM)经圆窗渗透给药,对照组给予等量生理盐水,于给药后7、14和30天用免疫组织荧光染色法观察位于耳蜗螺旋神经节内的内耳神经胶质细胞(inner ear glial cells,IEGs)的变化.结果 给药后7、14、30天实验组耳蜗各回螺旋神经节内可见内耳神经胶质细胞存活,但数量减少,排列紊乱;与对照组相比,哇巴因给药后7天实验组耳蜗各回神经胶质细胞的数量及密度即显著减少,给药后14天及30天后胶质细胞数量进一步减少;给药后30天各回螺旋神经节内内耳神经胶质细胞数降至最低,与实验组给药后7天、14天及与同时间点对照组比较显著减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 哇巴因经圆窗渗透给药可直接造成CBA/J小鼠内耳螺旋神经节内神经胶质细胞的急性进行性损伤.     

模拟中长期微重力和噪声环境对大鼠听功能及内耳毛细胞凋亡的影响

目的 研究模拟中长期微重力和噪声环境对大鼠听功能及内耳细胞凋亡的影响.方法 36只SD大鼠随机分为两组:空白组(6只)和实验组(30只).实验组给予持续尾部悬吊模拟微重力及飞船舱内噪声(稳态噪声+脉冲噪声)暴露,分别于悬吊及暴露前、悬吊及暴露3天、1周、2周、4周和8周后检测双耳ABR反应阈,并于悬吊及暴露3天、1周、2周、4周和8周取实验动物耳蜗行免疫组化染色观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)在内耳的表达.空白组不做任何处理,常规饲养,于实验前及实验3天、1周、2周、4周和8周分别检测双耳ABR反应阈,并于饲养8周后取耳蜗行免疫组化染色观察.结果 实验前两组大鼠ABR反应阈差异无统计学意义(P＞0.05).实验组大鼠悬吊及噪声暴露后各时间点ABR反应阈较空白组均明显增高(P＜0.01),悬吊及暴露4周实验组大鼠ABR反应阈为90.00±4.26 dB SPL,明显高于3天、1周、2周及8周时(P＜0.05);悬吊及暴露8周大鼠ABR反应阈(80.00±5.22 dB SPL)有所下降,与暴露2周(85.00±4.77 dB SPL)、4周大鼠比较差异有统计学意义(P＜0.01).悬吊及噪声暴露后大鼠内耳细胞caspase-3的表达较空白组明显增强,且在一定时间内随暴露时间的延长其表达有逐渐增强的趋势,尤以悬吊及暴露4周时最明显,暴露8周时其表达强度较4周时明显下降.结论 模拟中长期微重力和噪声环境对大鼠的听功能有明显损伤,且与内耳细胞凋亡呈相同的趋势;微重力和噪声因素造成的听功能损伤可能与内耳细胞的凋亡有关.     

感音神经性聋患者内耳高分辨率CT检查内耳畸形的分类

目的 探讨感音神经性聋患者中通过颞骨高分辨率螺旋CT检查内耳畸形的检出率及分类.方法 回顾性分析近10年来5 398耳感音神经性聋患者的颞骨高分辨率螺旋CT资料,患者年龄2个月~68岁,平均17.8±3.3岁;其中单侧24耳,双侧5 374耳;平均听阈83.90±5.2 dB HL,按听力损失程度分为:轻度170耳,中度1 446耳,重度1 386耳,极重度2 396耳;参照Sennaroglu 2010分类标准分析各类内耳畸形的检出情况.结果 5 398耳感音神经性聋患耳中共检出1 640耳内耳畸形(30.38%,1 640/5 398),其中,耳蜗畸形53.66%(880/1 640),非耳蜗畸形46.34%(760/1 640);880耳耳蜗畸形中,Michel畸形5耳、耳蜗未发育23耳、共同腔畸形6耳、耳蜗发育不全畸形69耳(CH-I 19耳、CH-II 16耳、CH-III 34耳)、耳蜗分隔不全畸形777耳(IP-I 44耳、IP-II 703耳、IP-III 30耳);760耳非耳蜗畸形中,大前庭导水管680耳,单纯前庭、半规管、内听道畸形80耳.与大前庭水管相关畸形共1 383耳(IP-II型 703耳、大前庭水管680耳),占全部内耳畸形的84.33%(1 383/1 640).结论 本组感音神经性聋患者内耳畸形检出率较高,且以大前庭水管相关畸形多见,Sennaroglu2010分类方法有利于各类内耳畸形发病率的流行病学统计.     

Experimental Autoimmune Labyrinthitis: Assessment of Molecular Size of Autoantigens in Fractions of Inner Ear Proteins Eluted on the Mini Whole Gel Eluter

In order to determine the molecular size of the causative autoantigens of experimental autoimmune labyrinthitis, crude inner ear antigen was separated into 14 fractions and the constituent molecules were identified by means of sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis using the Mini Whole Gel Eluter. The mean total protein recovery was &#44 66%. Sensitization with 55-65 kDa proteins induced the highest number of infiltrating cells among the fractions and sensitization with 38-45 kDa proteins induced the second highest number of inflammatory cells. These results suggest that 38-45 kDa and 55-65 kDa proteins are the causative autoantigens of experimental autoimmune labyrinthitis.