精杞胶囊对大鼠生精功能损伤的保护作用

目的探讨精杞胶囊(蛹虫草、熟地、枸杞子,等)对环磷酰胺诱导大鼠生精功能损伤的保护作用。方法精杞组和丙酸睾酮组先期给药2周后,除正常组外,均腹腔注射环磷酰胺25 mg/(kg·d)连续造模5 d,与此同时精杞组和丙酸睾酮组延续给药,造模结束后次日处死全部动物。放射性免疫法检测血清睾酮含有量;称取大鼠体质量、睾丸、附睾、前列腺质量,计算脏器指数;HE染色观察大鼠睾丸组织形态;CASA仪检测精子密度与精子活率;TUNEL检测细胞凋亡。结果精杞组与模型组比较,血清睾酮含有量升高;睾丸、附睾、前列腺脏器指数增加;生精上皮损伤减轻,各级生精细胞数量增多;精子密度与精子活率增高;TUNEL显示细胞凋亡率降低。结论精杞胶囊对环磷酰胺所致大鼠生精功能损伤有保护作用。     

二紫胶囊对生精障碍大鼠凋亡调控基因的影响

目的:观察二紫胶囊对生精障碍大鼠凋亡调控基因的影响.方法:将40只健康雄性大鼠分为模型组、对照组、二紫胶囊高、低剂量组,以环磷酰胺注射液40 mg· kg-1,ip制造大鼠生精障碍模型,分别ig生理盐水、二紫胶囊浸膏(4.8,2.4g·kg-1),连续60 d,用TUNEL法检测大鼠睾丸生精细胞凋亡,免疫组化法测定Bax和Bcl-2蛋白在大鼠睾丸组织中的表达.结果:与模型组相比较,二紫胶囊高、低剂量组生精细胞凋亡指数明显下调[(7.16±1.47)％,(13.83±2.40)％ vs(20.50±2.17)％],Bax蛋白表达明显下调[(16.01±2.02),(26.67±1.79)vs(9.94±1.14)](P＜0.01),Bcl-2蛋白表达明显上调[(40 12±3.06),(22.87±2.94)vs(16.26±1.03)](P＜0.01).结论:二紫胶囊能通过下调Bax和上调Bcl-2表达,减少生精细胞凋亡的发生.     

生精细胞凋亡的基因调控

生精细胞的凋亡是维持精子发生动态平衡，限制生精上皮生殖细胞数量的一个重要生理机制，受多种因素调控。本文就基因对精子发生过程中生精细胞凋亡调控的研究近况做一简述。     

调治天癸方对环磷酰胺致少弱精症模型大鼠生精细胞凋亡的影响

目的研究调治天癸方对环磷酰胺致少弱精症模型大鼠生精细胞凋亡的影响。方法采用环磷酰胺法造模,随机分为正常对照组,模型组(35 mg/kg),生精胶囊组(0.6 g/kg),调治天癸方高、中、低剂量组(33.8、16.9、8.5 g/kg),每组12只,连续灌胃给药2周。采用TUNEL法检测生精细胞凋亡,Western Blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与模型组比较,调治天癸方组、生精胶囊组生精细胞凋亡数显著减少(P0.01),Bax蛋白表达显著降低(P0.01),Bcl-2蛋白表达显著增高(P0.01)。结论调治天癸方可以有效减少少弱精症大鼠生精细胞的凋亡,其对生精细胞凋亡的干预作用可能与上调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达、下调凋亡促进蛋白Bax表达有关。     

生精细胞凋亡及相关中医药治疗概述

生精细胞凋亡在精子的发育、成熟过程中起着重要的作用,而过度凋亡则可能是男性不育的病理环节。目前针对生精细胞凋亡并无特效治疗方法,中医药在此方面有一定优势。就生精细胞凋亡与不育症的关系及相关中医药干预情况做一综述。     

脾气虚对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的：观察脾气虚对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响,探讨脾气虚引起不育的病理机制。方法：选用雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组、脾气虚21天模型组、35天模型组及50天模型组。采用双因素复合法即苦寒泻下加劳倦过度法（大黄灌胃加游泳法）建立脾气虚模型,流式细胞术分别检测各组大鼠睾丸凋亡细胞数及各级生精细胞百分比。结果：正常组出现低平的凋亡峰,各模型组出现明显的凋亡峰,且随着造模时间的延长凋亡峰增高。各模型组1C和4C生精细胞百分比较正常组明显降低,以50天模型组为甚。结论：脾气虚可引起睾丸生精细胞大量凋亡,各级生精细胞数量减少,这可能是脾气虚引起睾丸生精功能障碍从而导致不育的根本机制。     

促精汤对小鼠生精细胞凋亡的影响

目的： 探讨促精汤对模型小鼠精液常规、性激素和精子凋亡的影响。 方法： 40只雄性小鼠用环磷酰胺60 mg·kg^-1 ip 5 d造少精、弱精症模型,并随机分为模型组、促精汤低、中、高剂量组,每组10只,另设空白对照组。造模后,空白组与模型组给予生理盐水（0.5 mL/只）灌胃;促精汤低、中、高剂量（10,5,2.5 g·kg^-1）灌胃,均持续30 d。采用CASA技术检测精子质量,采用酶联免疫法检测血清性激素,采用流式细胞仪检测精子凋亡率。 结果： 造模后模型组小鼠各级精子密度、活力和活率均明显减少 （P<0.05）;促精汤各剂量组明显提高小鼠精子密度、活力和活率 （P<0.05）,高剂量组已与空白组小鼠无显著性差异;造模后,血清黄体生成素（LH）、睾酮（T）、雌二醇（E₂） 显著升高,促卵泡生成激素（FSH）、催乳素（PRL）无明显变化,促精汤各剂量组能明显降低LH,T,E₂水平（P<0.05）,其中高剂量组已与空白组无显著差异。造模后,模型组小鼠精子凋亡显著升高（P<0.05）,促精汤各组均能降低小鼠生精细胞凋亡率,高剂量组最明显,已与空白组比较无明显差异。 结论： 促精汤可增加各级精子密度、增强精子活力和活率,可修复睾丸病理损伤,有降低睾丸生精细胞凋亡率的作用。     

生精衍宗胶囊的生精作用

本文探讨了生精衍宗胶囊的生精作用。结果,生精衍宗胶囊能升高未成熟雄性大鼠的血清睾丸酮含量、精子数及精子活力;能使去势大鼠包皮腺及附性器官(前列腺和精囊)重量增加;能增加棉子油(棉酚)负荷大鼠的精子数及精子活力;能提高雄性小鼠的生育力。结果证明:生精衍宗胶囊有生精作用。     

四子种王胶囊对大鼠生精细胞损伤的保护

目的:观察四子种王胶囊对生精细胞损伤模型大鼠睾丸组织一氧化氮合酶和抗氧化系统的影响。方法:以腺嘌呤灌胃SD大鼠,诱发生精细胞损伤大鼠模型。测定服用四子种王胶囊前后大鼠睾丸组织超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶活性及一氧化氮、丙二醛含量。结果:四子种王胶囊可提高生精细胞损伤大鼠睾丸组织超氧化物歧化酶活性,降低一氧化氮合酶活性及一氧化氮、丙二醛含量。结论:四子种王胶囊对腺嘌呤诱发的大鼠生精细胞损伤具有保护作用。     

补肾生精法对老龄大鼠睾丸细胞凋亡的影响

目的 观察补肾生精法对老龄大鼠睾丸细胞凋亡的影响.方法 将10只3月龄成年雄性SD大鼠设为正常对照组(AC组):20只22月龄老龄雄性SD大鼠随机分为2组,每组10只,分别为老龄组(SC组)、补.肾生精组(KT组).KT组灌胃给药补肾生精颗粒,连续用药60 d.应用流式细胞仪检测技术,观察补肾生精颗粒对老龄大鼠睾丸生殖细胞凋亡率和增殖指数的影响.结果 老龄组大鼠与正常对照组大鼠比较,细胞凋亡率下降非常显著(P<0.001);细胞增殖指数明显增加(P<0.05).补肾生精组生殖细胞凋亡率明显下降(P<0.05).结论 补肾生精法对老龄大鼠睾丸功能具有减少其生殖细胞凋亡的作用.     

藿酮胶囊诱导人体血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的：从细胞凋亡水平研究藿酮胶囊抗动脉样硬化的作用机理。方法：实验培养人胚胎胸主动脉平滑肌细胞,用白细胞介素－１（ＩＬ－１）刺激平滑肌细胞建立血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ）增生模型,从细胞形态学,ＤＮＡ凝胶电泳,流式细胞术３个方面观察用藿酮胶囊诱导增生的ＶＳＭＣ凋亡现象。结果：透射电镜观察发现：藿酮胶囊处理的ＶＳＭＣ出现细胞皱缩,染色质凝集后细胞     

抗毒补心胶囊对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:观察抗毒补心胶囊对环磷酰胺(CTX)所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:注射CTX形成免疫低下小鼠模型,ig给予不同剂量的抗毒补心胶囊(4,8 g.kg-1)和阳性对照药香菇多糖片(10 g.kg-1),以小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,外周血白细胞数及淋巴细胞转化率为观察指标。结果:ig给予抗毒补心胶囊4 g.kg-1后小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和淋巴细胞转化率分别为(63.2±10.9)%和(47.33±6.18)%,ig给予8 g.kg-1的为(57.4±10.2)%和(43.07±6.23)%。抗毒补心胶囊对CTX致小鼠外周血白细胞减少有明显提升作用(P<0.05),并能明显改善CTX所致小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和淋巴细胞转化率的降低(P<0.05)。结论:抗毒补心胶囊能增强CTX致免疫功能低下小鼠免疫功能,对免疫失衡机体具有保护作用。     

三康胶囊对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠的保护作用

目的:观察三康胶囊对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法:用环磷酰胺(100 mg/kg,ip)制备小鼠免疫低下模型,灌胃给予不同剂量的三康胶囊(250 mg/kg,500 mg/kg)和阳性对照药贞芪扶正胶囊(500mg/kg),观察小鼠外周血白细胞计数、免疫器官重量、单核吞噬细胞吞噬指数、血清溶血素水平和脾脏淋巴细胞转化指数。结果:对免疫功能低下小鼠,三康胶囊能增加外周血白细胞数量及免疫器官指数,增强单核吞噬细胞的吞噬能力,提高血清溶血素水平和脾脏淋巴细胞转化指数。结论:三康胶囊能够增强环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能,对免疫失衡机体具有保护作用。     

芪红胶囊对柯萨奇病毒引起细胞凋亡的影响

目的 探讨柯萨奇病毒是否能够引起心肌细胞凋亡,以及芪红胶囊对凋亡发生是否有抑制作用。方法 将培养细胞分为4组：病毒感染对照组、芪红胶囊加病毒组、芪红胶囊对照组和正常细胞对照组。应用原位末端标记法(TUNEL)、Hoechst33258染色和Annexin-V／PI染色观察各组细胞凋亡发生情况;并通过流式细胞仪分析各组细胞的凋亡发生率;应用RT-PCR方法观察与凋亡相关细胞因子的表达改变。结果 病毒感染对照组细胞经Hoechst33258染色发现病毒感染后的细胞核出现强亮度的蓝色荧光,可观察到凋亡细胞的典型变化;Annexin-V／PI染色可见HeLa细胞膜呈强绿色荧光,细胞核显强红色荧光;通过流式细胞仪检测PI染色的细胞DNA,发现病毒感染组出现明显凋亡峰;芪红胶囊加病毒组凋亡发生率明显下降,正常对照组细胞未发生凋亡;同时芪红胶囊能够调节与凋亡相关细胞因子的表达。结论 芪红胶囊能够抑制柯萨奇病毒引起的细胞凋亡。     

温心胶囊对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的：探讨临床有效中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法：采用盐酸异丙肾上腺素连续多点皮下注射制备大鼠心肌缺血模型。运用透射电镜技术及TUNEL法,观察温心胶囊对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达的影响。结果：异丙肾上腺素所致心肌缺血损伤可明显诱导大鼠心肌细胞发生凋亡,显著引发Fas基因蛋白表达增强,并轻度引发Bcl-2基因蛋白表达增强,温心胶囊可显著下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。结论：通过调节缺血心肌Bcl-2、Fas基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生,可能是中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制之一。     

增液汤抑制幼鼠胸腺细胞凋亡作用的机制探讨

目的 :观察预防性应用增液汤注射剂对幼鼠胸腺细胞凋亡及其相关基因的影响。方法 :给 4～ 5周龄Wistar大鼠腹腔注射增液汤注射剂和地塞米松 ,采用原位末端标记 (TUNEL)法分析不同处理组的凋亡细胞 ,同时采用免疫组化方法检测幼鼠胸腺细胞bcl 2和bax基因蛋白表达情况。结果 :用TUNEL法标记凋亡细胞 ,荧光显微镜下 ,地塞米松组可见致密浓染的黄绿色荧光 ,呈局灶状分布 ;而增液汤组只有散在的荧光。光镜观察地塞米松组TUNEL阳性细胞数目较多 ,其凋亡指数为 0 4 1± 0 0 1;增液汤组TUNEL阳性细胞数目较少 ,凋亡指数为 0 0 7± 0 0 0 4 ,与地塞米松组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。免疫组织化学结果表明 ,地塞米松组bcl 2基因蛋白呈低表达 ,其蛋白阳性率为 (0 196 0± 0 0 0 6 0 ) % ,bax蛋白过度表达 ,蛋白阳性率为 (0 4 315± 0 0 16 5 ) % ,bcl 2 /bax <1;相反增液汤组细胞bcl 2基因蛋白呈高表达 ,bax基因蛋白仅有少量表达 ,其蛋白阳性率为 (0 5 0 10± 0 0 170 ) %和 (0 185 4± 0 0 0 9) % ,bcl 2 /bax >1。两组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 :通过调控凋亡基因bcl 2 /bax表达 ,增强胸腺细胞对地塞米松的抵抗 ,进而抑制细胞凋亡 ,可能是增液汤抑制幼鼠胸腺细胞凋亡的重要作用环     

不同补益方剂对老龄小鼠生精细胞凋亡的影响

目的:探讨不同补益方剂左归丸、右归丸、六味地黄丸、金匮肾气丸、五子衍宗丸、八珍汤对老龄小鼠生精细胞凋亡的影响。方法:将80只15月龄BALB/c小鼠随机分为老年组、左归丸组、右归丸组、六味地黄丸组、金匮肾气丸组、五子衍宗丸组、八珍汤组以及阳性药物(左卡尼汀)组,每组10只,另设10只2月龄BALB/c小鼠为青年组,各给药组按中药含生药2.5 g·kg-1分别灌胃给予相应药物,左卡尼汀组肌肉注射给药45 mg·kg-1,每天1次,连续4周。于末次给药24 h后将小鼠摘眼球取血,分离血浆、血清,利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血中丙二醛(MDA),一氧化氮合酶(NOS),促红细胞生成素(EPO),超氧化物歧化酶(SOD)以及外周血促卵泡生成激素(FSH),促黄体生成激素(LH),睾酮(T)的含量;采用免疫组化法检测各组小鼠睾丸组织Ki-67的表达;采用TUNEL法检测各组小鼠生精细胞凋亡情况。结果:与青年组比较,老年组小鼠MDA,NOS,EPO水平明显上升(P0.05);与老年组比较,各治疗组小鼠血清MDA,NOS,EPO水平明显下降(P0.05),除五子衍宗丸组和六味地黄丸组外,各治疗组小鼠血清SOD水平上升(P0.05)。与青年组比较,老年组小鼠血清FSH明显升高及LH,T含量明显下降(P0.05);与老年组比较,五子衍宗丸组小鼠血清FSH明显下降及LH,T含量明显升高(P0.05)。免疫组化法检测结果显示,与青年组比较,老年组小鼠睾丸组织内Ki-67表达水平明显下降(P0.05);与老年组比较,左卡尼汀组、六味地黄丸组、八珍汤组以及五子衍宗丸组小鼠睾丸组织Ki-67表达水平升高(P0.05)。TUNEL法检测结果显示,与青年组比较,老年组小鼠生精细胞凋亡率明显上升(P0.05);与老年组比较,各治疗组小鼠生精细胞凋亡率均明显下降,以五子衍宗丸下降率最显著(P0.05)。结论:6个不同的补益方剂对老龄小鼠生精细胞凋亡都有一定的抑制作用,其中以五子衍宗丸效果最佳。     

调免毓麟汤对免疫性不育大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的:观察免疫性不育大鼠睾丸生精细胞凋亡的变化以及调免毓麟汤对免疫性不育大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响.方法:采用同种异体抗原主动免疫法复制免疫性不育雄性大鼠模型,并予分组给药(调免毓麟汤低、中、高剂量组和醋酸强的松组分别给予相应药物,正常组及模型组予生理盐水灌胃).结果:模型组大鼠睾丸生精细胞凋亡数、凋亡率与各治疗组比较有极显著性差异(P＜0.01),调免毓麟汤低剂量组与醋酸强的松组比较差异不显著(P＞0.05),调免毓麟汤中、高剂量组与醋酸强的松组比较有极显著性差异(P＜0.01).结论:调免毓麟汤中、高剂量组能显著降低模型大鼠生精细胞凋亡率,提高模型大鼠各级生精细胞数量.