基质金属蛋白酶在稽留流产发生中的作用和调控机制研究

目的研究基质金属蛋白酶在稽留流产患者绒毛组织中的表达变化,探讨其在稽留流产中的作用及其调控机制。方法选取2015年11月至2016年5月期间就诊于苏州大学附属第一医院计划生育门诊和苏州市立医院北区妇产科的稽留流产患者30例作为实验组,同期健康早孕流产患者30例作为对照组。采用ELISA法检测血浆TGF-β1水平,定量PCR(RT-PCR)检测患者绒毛组织中NF-κB、TGF-β1、TIMP-1和MMP-9的mRNA表达情况,采用蛋白印迹法(Western Blot)检测分析NF-κB、TGF-β1、TIMP-1和MMP-9的蛋白水平。结果实验组血浆中TGF-β1的平均水平低于对照组(P0.05);实验组绒毛组织中MMP-9的mRNA表达量高于对照组,而NF-κB1、TGF-β1和TIMP-1mRNA表达量均低于对照组(P0.05);实验组绒毛组织中MMP-9的蛋白表达水平高于对照组,NF-κB p50、TGF-β1和TIMP-1的蛋白表达水平均低于对照组(P0.05)。结论 NF-κB表达水平的降低导致TGF-β1水平降低,从而影响MMP-9/TIMP-1的平衡,使ECM过度降解,导致胚胎植入失败及胎盘形成障碍,最终发生胚胎停育。     

稽留流产患者绒毛组织中Netrin-1、DCC、UNC5B和VEGF表达

目的:探讨神经轴突导向因子(Ntrin-1)、结直肠癌缺失基因(dDCC)、不协调同源基因5B(BUNC5B)与血管内皮生长因子(VEGF)在稽留流产绒毛组织表达。方法:收集2020年2月-2020年8月在本院就诊的孕妇60例,其中正常早孕待行人工流产30例为对照组,稽留流产并待行人工流产30例为稽留流产组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术及免疫组织化学技术检测两组绒毛组织中Netrin-1、DCC、UNC5B、VEGF mRNA及蛋白表达。结果:稽留流产组绒毛组织中Neterin-1、DCC和VEGF mRNA的相对表达量均低于对照组,UNC5B mRNA高于对照组(P0.05);Netrin-1(0.78±0.22)、DCC(0.52±0.15)、VEGF(0.81±0.23)蛋白相对表达量均低于对照组(1.24±0.29、1.09±0.25、1.42±0.35)(P0.05),UNC5B蛋白(1.82±0.34)高于对照组(1.04±0.21)(P0.05)。结论:稽留流产患者绒毛组织中Netrin-1、DCC、VEGF蛋白及mRNA表达均低于正常孕妇,UNC5B蛋白及mRNA表达高于正常孕妇,这种异常表达与稽留流产绒毛血管的生成障碍可能有关。     

Barret食管组织p53、COX-2基因表达与TNF-α、NF-κB水平的关系

目的 探讨Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)患者病变组织中p53、COX-2基因表达与TNF-α、NF-κB水平的关系。方法 选取2016年3月—2017年3月确诊的BE患者19例,SSBE 13例(SSBE组)、LSBE 6例(LSBE组),另选食管正常者20例作为对照组。应用荧光定量PCR法检测各组食管组织中p53、COX-2 mRNA表达,ELISA法检测组织TNF-α、NF-κB水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。采用Pearson相关分析变量间关系。P0.05为差异有统计学意义。结果 对照组、SSBE组、LSBE组p53 mRNA相对表达量分别为1.00±0.33、2.77±0.41、3.54±0.45,COX-2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.28、2.33±0.25、3.78±0.32,TNF-α水平分别为(23.15±4.41、65.78±5.32、87.94±4.83)pg/ml,NF-κB水平分别为(18.52±8.41、52.71±10.25、76.45±9.36)pg/ml。SSBE组、LSBE组p53、COX-2 mRNA相对表达量及TNF-α、NF-κB水平均高于对照组(均P0.05),LSBE组COX-2 mRNA相对表达量及TNF-α、NF-κB水平高于SSBE组(均P0.05),但两组p53相对表达量比较差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关分析显示,SSBE组、LSBE组p53 mRNA相对表达量与COX-2 mRNA相对表达量及NF-κB、TNF-α水平均呈正相关(r=0.623、0.601、0.502;0.701、0.589、0.536,均P0.05),COX-2 mRNA相对表达量与NF-κB水平呈正相关(r=0.453、0.583,均P0.05),而与TNF-α水平无相关性(r=0.253、0.329,均P0.05)。结论p53、COX-2、TNF-α、NF-κB共同介导的炎症反应可能在BE的发生发展中起重要作用,联合检测有助于BE的早期诊断、治疗及评估预后。     

TNF-α、NF-κB蛋白表达在稽留流产患者绒毛组织中的变化及其意义分析

目的 观察稽留流产患者绒毛组织中TNF-α、NF-κB的表达情况,并分析其在稽留流产中的作用.方法 将2016年1月至2017年1月本院收治的30例早期稽留流产患者纳入研究,并纳入同期在本院正常妊娠早期妇女30例为正常对照组,两组患者自愿要求终止妊娠.收集以上对象的绒毛组织作为研究对象,通过免疫组化法观察TNF-α、N...     

儿童肥胖症合并肺炎支原体感染TLR4/NF-κB信号通路与致炎细胞因子水平的关系

目的探讨肥胖症合并肺炎支原体(MP)感染患儿Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路与致炎细胞因子水平的相关性。方法选取2018年5月-2020年8月淮安市第二人民医院收治的68例肥胖症合并MP感染患儿作为研究组;另收集同期收治的肥胖症患儿60例为肥胖组,以及健康体检的健康儿童60名为健康组,检测和比较三组外周血TLR4、NF-κB、NF-κB抑制蛋白(IκB)mRNA相对表达量和血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,分析TLR4、NF-κB、IκB与血清致炎细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α之间的关系;并采用单因素、多因素Logisitic回归分析肥胖症患儿发生MP感染的危险因素。结果三组TLR4、NF-κB、IκB mRNA相对表达量和血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均有统计学差异(P0.05),研究组和肥胖组TLR4、NF-κB mRNA相对表达量及血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于健康组,IκB mRNA低于健康组(P0.05),且研究组TLR4、NF-κB mRNA相对表达量高于肥胖组,IκB mRNA低于肥胖组;相关性分析结果显示,肥胖症合并MP感染患儿TLR4、NF-κB表达分别与IL-6、IL-8和TNF-α呈正相关性(P0.05),IκB与IL-6、IL-8、TNF-α均呈负相关性(P0.05)。多因素分析结果显示,年龄3～7岁、处于低补体状态和有流行接触史是肥胖症患儿发生MP感染的独立危险因素(P0.05)。结论肥胖症合并MP感染患儿TLR4/NF-κB信号通路处于过度活化状态,并可能通过该途径促进IL-6、IL-8、TNF-α等致炎细胞因子释放,诱导发生肺部炎症反应。     

细菌脂多糖对急性胰腺炎大鼠核因子-κB及肿瘤坏死因子的影响

目的探讨细菌脂多糖(LPS)对大鼠实验性急性胰腺炎(AP)核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA及病理改变的影响,了解LPS在AP发生中的作用.方法 24只Wistar大鼠分为3组:AP组、LPS干预组及对照组;AP组蛙皮素诱导产生AP;LPS干预组在AP组基础上,给予腹腔内注射大剂量LPS(2mg/kg);对胰腺组织标本进行病理评分;RT-PCR检测胰腺组织中TNF-α mRNA表达的变化;应用流式细胞术(FCM)检测NF-κB表达的改变.结果与AP组相比,病理结果显示,LPS干预组胰腺组织水肿程度及炎性细胞浸润和坏死明显加重,胰腺组织损伤程度明显加重(病理评分7.21±0.53us,3.65±0.37,P＜0.01);FCM显示由于LPS的作用,NF-κB的表达明显上调(61.28±7.56us,41.13±11.72,P＜0.05),胰腺组织内炎性介质TNF-αmRNA的表达也同步上调(3.798±0.438us,2.856±0.365,P＜0.05).结论 LPS有加重AP病情的作用,其可能机制是LPS通过激活NF-κB及TNF-α从而实现了上述病理损害.     

HIF-1α、TLR 4与稽留流产妊娠滋养细胞凋亡的关系研究

目的研究稽留流产患者绒毛组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)、Toll样受体4(Toll like receptor 4, TLR 4)、Fas、FasL的表达、分布情况并进行相关性分析,探讨HIF-1α、TLR 4与稽留流产妊娠滋养细胞凋亡的关系。方法选取2017年1～8月于南通市第一人民医院妇科就诊的40例稽留流产患者为稽留流产组,同期行人工流产手术的正常妊娠孕妇40例为对照组。负压吸宫留取胎膜绒毛组织,采用HE染色及电镜检查,观察绒毛组织结构;酶联免疫吸附试验法检测绒毛组织中HIF-1α、TLR 4的浓度;免疫组织化学SP法检测绒毛组织中HIF-1α、TLR 4、Fas、FasL蛋白表达情况,并进行相关性分析。结果两组HE染色、ELISA检测、Fas/FasL蛋白表达、相关性分析4个方面比较,差异均有统计学意义(P0.05);稽留流产组绒毛组织中HIF-1α、TLR 4、Fas和FasL表达均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HIF-lα、TLR 4、Fas/FasL在稽留流产发生过程中均有一定作用,TLR 4-NF-κB-HIF-1α通路所导致的缺氧和炎症反应与稽留流产的发生密切相关。     

高危型HPV感染对乳腺癌癌组织中NF-κB p50、NF-κB p65及凋亡基因的影响

目的分析高危型人乳头瘤状病毒(HPV)感染对乳腺癌患者癌组织中核因子κB (NF-κB)p50、NF-κB p65及凋亡相关指标的影响。方法选取2017年8月-2020年7月于余姚市人民医院行乳腺癌手术治疗的150例乳腺浸润性癌患者为研究对象,采用第二代捕获杂交法检测高危型HPV感染情况和病毒载量,免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织NF-κB p50、NF-κB p65蛋白表达,实时荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA水平。结果 150例乳腺癌患者HPV感染95例,其中HPV 16型感染52例,18型感染35例,33型感染8例,HPV DNA载量为(2.08±0.50)lg(RLU/CO); HPV感染与乳腺癌组织学分级、ER阴性、PR阴性和淋巴结转移有关(P0.05);乳腺癌患者癌组织中NF-κB p50和NF-κB p65阳性表达率均高于癌旁组织(P0.05),HPV感染组患者癌组织中NF-κB p50、NF-κB p65阳性表达率分别为66.32%、70.53%,均高于未感染组(P0.05);乳腺癌患者癌组织中Bcl-2 mRNA水平高于癌旁组织(P0.05),Bax和Caspase-3 mRNA水平均低于癌旁组织(P0.05); HPV感染组癌组织中Bcl-2 mRNA水平(0.62±0.11)高于未感染组(t=7.207,P0.001),Bax和Caspase-3 mRNA水平分别为(0.29±0.05)和(0.27±0.05)均低于未感染组(t=11.383,7.881;P均0.001)。结论高危型HPV感染可以激活乳腺癌患者癌组织中NF-κB p50、NF-κB p65的表达,抑制凋亡基因表达。     

HMGB1/TLR4在卵巢癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)信号蛋白在卵巢癌组织中的表达差异及其与临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和蛋白质印迹(Western-blotting)方法分别检测HMGB1、TLR4、核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)在卵巢癌组织及卵巢囊肿组织中的表达情况。结果逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测显示HMGB1、TLR4、NF-κB、TNF-αmRNA在卵巢囊肿及卵巢癌组织中均有表达,卵巢癌组织中表达明显高于卵巢囊肿组,两组之间经t检验存在显著统计学意义(P0.001)。Western-blotting检测显示:HMGB1、TLR4、NF-κB及TNF-α在卵巢囊肿及卵巢癌组织中均有表达,卵巢癌组织中表达明显高于卵巢囊肿组,差异有显著统计学差异(P0.001),与实时荧光定量PCR结果相符。将卵巢癌患者根据临床分期、分化程度分组进行比较HMGB1、TLR4、NF-κB及TNF-α的表达差异,结果显示HMGB1、TLR4、NF-κB及TNF-α表达与临床分期和分化程度相关,分期较高的表达值较分期较低的表达明显增加,中低分化较中高分化的表达明显增加,差异具有统计学意义(P0.001)。Pearson相关性分析显示,NF-κB、TNF-α作为下游因子与HMGB1、TLR4呈高度正相关(P0.001)。结论 HMGB1、TLR4信号蛋白在卵巢癌组织中呈高表达并与临床病理特征相关,提示HMGB1、TLR4介导的炎性信号可能涉及卵巢癌发病机制。     

妊娠期糖尿病患者外周血甘露糖结合凝集素变化及作用机制研究

目的探讨妊娠期糖尿病患者外周血甘露糖结合凝集素(MBL)变化及作用机制。方法选取2017年6月-2018年10月医院收治的妊娠期糖尿病患者156例为妊娠期糖尿病组,另选正常孕妇100例为正常对照组;酶联免疫吸附法检测血浆MBL、白细胞介素-6 (IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平; Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,RT-PCR和Western blot检测Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白表达;使用不同浓度的重组MBL处理妊娠期糖尿病患者外周血单个核细胞分为4个亚组,检测细胞培养上清液中MBL、IL-6、IL-8、TNF-α水平以及细胞中Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白表达。结果妊娠期糖尿病组患者血浆MBL水平明显低于正常对照组,IL-6、IL-8、TNF-α水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。妊娠期糖尿病组Tlr4、NF-κB mRNA相对表达量明显高于正常对照组,Tlr4、NF-κB蛋白相对表达量明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。细胞培养上清液中MBL、IL-6、IL-8、TNF-α水平在4个亚组间差异有统计学意义(P0.01); MBL 0.5μg/ml组、MBL 1μg/ml组MBL水平明显高于空白对照组,IL-6、IL-8、TNF-α水平明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P0.01); MBL 0.1μg/ml组MBL、IL-6、IL-8、TNF-α水平与空白对照组差异无统计学意义(P0.05)。Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白相对表达量在4个亚组间差异有统计学意义(P0.01); MBL 0.5μg/ml组、MBL 1μg/ml组Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P 0.01); MBL 0.1μg/ml组Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白相对表达量与空白对照组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论妊娠期糖尿病发生可能与MBL低表达降低了对Tlr4/NF-κB信号通路及炎症反应的抑制作用有关。     

复发性流产患者TLR4、NF-κB p65的表达及意义

目的:研究复发性流产患者和正常人工流产妇女绒毛组织中TLR4和NF-κB p65的表达差异及二者是否存在相关性.方法:选择2011年5～1l月在解放军第202医院妇产科门诊、年龄25～35周岁、孕龄＜12周、≥3次自然流产的RSA患者30例作为实验组,有过正常生育史、要求人工流产终止妊娠的健康早孕妇女30例作为对照组.应用免疫组织化学法检测两组绒毛中TLR4和NF-κB p65的表达,采用RT-PCR法检测两组绒毛组织中TLR4和NF-κB p65 mRNA的表达.结果:与对照组比较,实验组HE染色的病理观察绒毛组织结构不清晰,可见结构缺损、水肿、变性以及炎性细胞浸润,滋养细胞亦见变性、坏死及明显增生;TLR4和NF-κBp65的蛋白及mRNA的表达均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:TLR4、NF-κBp65在妊娠的绒毛组织中蛋白和mRNA表达水平显著升高,可能预示TLR4-NF-κB信号传导通路与RSA发生密切相关,其机制有待于进一步研究.     

不同粒径汽车尾气颗粒物对A549细胞TNF-α等炎性因子及NF-κB的影响

目的 探讨并比较不同粒径汽车尾气颗粒物对人肺癌上皮细胞A549肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、核转录因子-κB(NF-κB)的mRNA及NF-κB蛋白表达的影响.方法 以不同粒径(0.18～3.2 μm)汽车尾气颗粒物混悬液(1 00 μg/ml)染毒A549细胞,48 h后RT-PCR法检测细胞TNF-α 、IL-6及NF-κB(P65)基因表达水平,Western Blot法检测胞浆及胞核内NF-κB(P65)蛋白表达水平.结果 与对照组相比,各染毒组细胞的TNF-α、IL-6及NF-κB(P65) mRNA表达水平均上升(P＜0.05),由高到低依次为0.56～、0.32～、0.18～、1.0～和1.8～3.2 μm组,两两之间(除0.18～和0.32～μ m组之间、1.0～和1.8～3.2 μm组之间)差异均有统计学意义(P＜0.05);各组TNF-α、IL-6 mRNA水平与NF-κB(P65) mRNA水平显著相关(r=0.944,0.890,P＜0.05).与对照组相比,除1.8～3.2 μm组无统计学意义外,其余各组胞浆NF-κB (P65)蛋白水平均降低(P＜0.05),由高到低依次为1.0～、0.18～、0.32～、0.56～μm组;而胞核NF-κB( P65)蛋白水平均升高(P＜0.05),由低到高依次为1.0～、0.18～、0.32～、0.56～μm组.结论 不同粒径汽车尾气颗粒物作用于A549细胞后均可使TNF-α、IL-6、NF-κB mRNA表达升高、NF-κB活化,活化的NF-κB由细胞质进入细胞核发挥其调控炎症反应的作用.各染毒组中以0.56～μm组炎性损伤效应最强,粒径是影响颗粒物毒性作用大小的重要因素之一.     

老年重症肺部感染患者T细胞亚群和TLR4/NF-κB蛋白表达及其与预后的关系

目的分析老年重症肺部感染(SPI)患者T细胞亚群和Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)蛋白表达变化及其与预后之间的关系。方法选择2017年6月-2020年8月武汉市第一医院重症医学科(ICU)收治的178例老年SPI患者为研究组,同期178例老年非肺部感染患者为对照组。比较两组患者T细胞亚群CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+表达,炎症指标白细胞计数(WBC)、血清C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6水平,外周血单个核细胞TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达,并分析上述指标与老年SPI患者预后的关系。结果研究组T细胞亚群CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平均低于对照组(P0.05),WBC、CRP、TNF-α和IL-6水平均高于对照组(P0.05),外周血单个核细胞TLR4蛋白、NF-κB蛋白和p-IκB蛋白表达均高于对照组(P0.05); 178例老年SPI患者住院治疗后死亡52例、存活126例,入院第7天,死亡组T细胞亚群CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平低于存活组(P0.05),WBC、CRP、TNF-α和IL-6水平高于存活组(P0.05),外周血TLR4蛋白、NF-κB蛋白和p-IκB蛋白表达均高于存活组(P0.05)。结论老年SPI患者的免疫功能下降,TLR4/NF-κB蛋白表达升高,且其水平变化与患者的预后不良有关。     

利福平诱导小鼠肝脏炎性损伤中相关因子的动态变化

目的初步探讨利福平诱导小鼠肝损伤过程中,炎症因子及相关指标的变化情况。方法 48只昆明小鼠随机分为基线组和利福平组,灌胃3、5、7、10、15天后处死。酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。RT-PCR和ELISA法检测肝组织中核因子κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA及蛋白表达水平。结果肝组织病理学及MDA、SOD水平变化,提示肝脏损伤进展。与基线组相比,利福平组NF-κB或TNF-α的mRNA及蛋白表达水平均在第7天和第10天出现显著升高(P0.05)。结论利福平可能通过激活NF-κB信号通路诱导小鼠肝脏发生炎性损伤。     

幽门螺杆菌感染对胃癌患者NF-κB/NLRP3信号通路和炎性因子的影响

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)感染对胃癌患者单个核细胞核因子κB(NF-κB)/Nod样受体蛋白3(NLRP3)信号通路和炎性因子的影响。方法 选取2020年6月-2023年1月天津市第五中心医院收治的49例Hp阳性胃癌患者为感染组,选择同期Hp阴性的47例胃癌患者为对照组;采用酶联免疫吸附法检测患者血清炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白-1(Caspase-1)的水平;分别采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)以及Western blot方法检测NF-κB p56、NLRP3、Caspase-1三个基因mRNA以及蛋白表达水平。结果 感染组外周血炎性因子IL-1β、IL-18、TNF-α、Caspase 1水平均高于对照组,外周血单个核细胞中NF-κB p56 mRNA、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA表达量与蛋白相对表达量高于对照组(P<0.05);感染组、对照组Ⅲ期患者NF-κB p56、NLRP3、Caspase-1蛋白表达量均高于对照组Ⅰ～Ⅱ期,蛋白表达量随着病理分期增加而上升(P<...     

鼻内镜下鼻颅底肿瘤切除术后颅内感染病原学及TLR4/NF-κB信号通路基因表达

目的 分析鼻内镜下经鼻颅底肿瘤切除术(EESBS)后并发颅内感染病原学特点及Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路基因表达。方法 选取2018年5月-2021年5月于中国医科大学附属盛京医院进行EESBS治疗的150例患者,根据术后是否发生颅内感染分为感染组22例和未感染组128例。分析感染组脑脊液培养病原菌分布,检测患者外周血TLR4、NF-κB、NF-κB抑制蛋白(IκB)mRNA相对表达量以及炎症指标[白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]表达。结果 22例感染患者共分离出43株病原菌,其中革兰阳性菌26株占60.47%;感染组TLR4、NF-κB mRNA相对表达量高于未感染组,IκB mRNA相对表达量低于未感染组(P<0.05); IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于未感染组(P<0.05);死亡组患者TLR4、NF-κB mRNA相对表达量高于生存组,IκB mRNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。结论 EESBS术后颅内感染病原菌以革兰阳性菌为主,且感染会导致TLR4/NF-κB信...     

铅染毒对大鼠下丘脑、纹状体的损伤作用

目的探讨铅染毒对大鼠下丘脑及纹状体的损伤作用。方法 45只SPF级SD雄性健康大鼠随机分为对照组(双蒸水)、低铅组(60 mg/kg乙酸铅)、高铅组(120 mg/kg乙酸铅),每组15只。每天经口灌胃染毒,连续9周。应用旷场试验检测大鼠行为学变化,电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)测定大鼠下丘脑及纹状体的铅含量。应用实时荧光定量PCR方法检测大鼠下丘脑及纹状体中Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶基因1(OGG1)mRNA表达;采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)的方法检测下丘脑及纹状体中TLR-4、NF-κB、TNF-α、IL-1β和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)蛋白含量。结果染毒期间各组大鼠摄食和饮水量未见异常,体重变化未见明显差异。与对照组相比,铅染毒大鼠总运动距离、总穿格数及中央区域运动距离显著下降(P0.05)。低、高铅染毒组大鼠下丘脑和纹状体中的铅含量分别是(60.10±6.71)、(71.20±11.24)及(44.07±9.63)、(66.67±8.78)μg/g,显著高于对照组的(33.77±8.19)和(25.75±6.33)μg/g,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,低铅组和高铅组大鼠下丘脑中NF-κB和OGG1的mRNA表达分别为对照组的(3.47±0.15)、(1.43±0.16)及(0.67±0.13)、(0.57±0.19)倍,而只有高铅组大鼠下丘脑中的TLR4和NF-κB mRNA表达与低铅组比较差异有统计学意义(P0.05)。此外,低铅组大鼠下丘脑中NF-κB、TNF-α、IL-1β蛋白水平分别为(5.85±1.10)、(56.15±6.96)和(1.18±0.20)ng/g,显著高于对照组的(3.03±0.71)、(49.25±7.21)和(0.86±0.11)ng/g。高铅组大鼠下丘脑中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β蛋白含量分别为(0.67±0.12)、(4.74±0.68)、(69.73±9.61)和(1.43±0.29)ng/g,显著高于对照组,其中TLR4和TNF-α蛋白水平高于低铅组。高铅组大鼠纹状体中TLR4、NF-κB和IL-1βmRNA显著高于对照组(P0.05);同时,其TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β和8-OHd G蛋白分别为(0.33±0.02)、(4.66±0.51)、(82.63±7.99)、(1.92±0.35)和(1.21±0.14)ng/g,与对照组比较显著增加(P0.05);其中NF-κB蛋白表达显著高于低铅组(P0.05)。结论铅染毒可导致大鼠下丘脑和纹状体损伤,炎症损伤和DNA氧化损伤可能参与了此过程。     

胆碱能抗炎通路在子痫前期患者母胎界面的表达及意义

目的探讨胆碱能抗炎通路在子痫前期患者母胎界面的表达及意义。方法 2015年1月—2016年1月本院正常妊娠孕妇、轻度子痫前期患者和重度子痫前期患者各30例。采用qRT-PCR法和Western-blot法分别测定胎盘组织α7烟碱型乙酰胆碱受体(alpha-7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)的mRNA和蛋白表达,免疫组化法检测胎盘组织核因子-κB(nuclear factor-kB,NF-κB)蛋白表达,ELISA法测定胎盘组织白介素6(interleukin6,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)蛋白水平。结果 (1)轻度子痫前期组胎盘组织中α7nAChR mRNA的表达水平明显高于对照组和重度组(P 0. 01),而重度组明显低于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05)。α7nAChR蛋白表达结果与mRNA结果基本一致。(2)子痫前期组胎盘NF-κB蛋白表达均较对照组显著增强,差异有统计学意义(P 0. 05),且重度组显著高于轻度组(P 0. 05)。(3)子痫前期组胎盘IL-6和TNF-α蛋白表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05),且重度组显著高于轻度组(P 0. 05)。结论胎盘组织中α7nAChR和NF-κB表达异常及炎症介质的增多可能与子痫前期发病有关,胆碱能抗炎通路可能参与子痫前期的发生、发展的病理生理过程。     

新疆维吾尔族宫颈癌组织中NF-κB和HIF-la的检测及临床意义

目的通过比较维吾尔族宫颈癌与正常宫颈中NF-κB和HIF-la表达的差异,了解维吾尔族宫颈癌与NF-κB和HIF-la的关系及意义。方法采用含20 000条Oligo DNA的人类全基因组寡核苷酸芯片,对5例维吾尔族宫颈癌与正常宫颈成组检测差异表达基因,通过MAS分析得到两组间差异表达基因:NF-κB和HIF-la,并采用RT-PCR及免疫组织化学(免疫组化)验证芯片检测其mRNA和蛋白的表达。结果 12例宫颈癌组织中NF-κB、HIF-la mRNA的相对表达量均显著高于正常宫颈组,免疫组化结果显示:1NF-κB蛋白与HIF-la蛋白在宫颈癌组和正常宫颈组中表达差异有统计学意义(t=11.393、11.809,P0.05);2宫颈癌组织中NF-κB、HIF-la蛋白阳性表达与年龄无关(χ~2=2.918、2.920,P0.05),与病理分化成度及临床分期相关,差异有统计学意义(χ~2=11.565、14.799;18.026、17.432,P0.05);3NF-κB和HIF-la在宫颈癌组中表达呈正相关(r=0.368,P0.05)。结论 NF-κB和HIF-la蛋白的阳性表达随着宫颈癌的分化程度和临床分期的升高逐步升高,在宫颈癌组织中NF-κB表达量的升高与HIF-la表达量升高正相关,初步证明了NF-κB可能通过激活PI3K/AKt途径上调HIF-la的表达,促进了宫颈癌的发生、发展、浸润和转移。     

番茄红素对β-淀粉样蛋白诱导的脉络丛上皮细胞炎症损伤及TLR4信号通路的作用

目的探讨番茄红素对β-淀粉样蛋白诱导脉络丛上皮细胞炎症损伤的保护作用及可能机制。方法成年健康清洁级雄性SD大鼠40只,体质量(250±18.7g),随机分为空白对照、阿尔茨海默病(AD)模型、阿尔茨渊默病(AD)+番茄红素Ⅰ[ig.5 mg/(kg·d)]、AD+番茄红素Ⅱ[ig.10mg/(kg·d)]、番茄红素[ig.10mg/(kg·d)]共5组,每组8只。适应性饲养1w后,采用脑立体定位仪将8μg凝聚态Aβ1-42注入双侧大鼠海马区,建立AD动物模型。三个干预组连续灌胃番茄红素40 d,1/d。在造模后的第2、3、4、5w末进行水迷宫实验,评估大鼠学习记忆力。实验结束后,处死动物取血离心,ELISA法测定血清中TNF-α、IL-1β及IL-6β含量。RT-q PCR、Western blot法检测脉络丛上皮TLR4、NF-κB p65 mRNA、蛋白表达及海马神经元PS-1、β-APP mRNA、蛋白表达。结果神经行为结果显示,AD组大鼠平均逃逸时间及靶象限活动时间显著高于空白对照组(P0.05),而番茄红素干预后,显著低于AD组(P0.05)。血清中TNF-α、IL-1β及IL-6β含量结果显示,AD组大鼠TNF-α、IL-1β及IL-6β含量显著高于空白对照组(P0.05),而番茄红素干预后,TNF-α、IL-1β及IL-6β含量显著降低(P0.05)。脉络丛上皮TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达结果显示,AD组大鼠TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达显著高于空白对照组(P0.05),而番茄红素干预后TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达显著低于AD组(P0.05)。海马神经元PS-1、β-APP mRNA及蛋白表达结果显示,AD组海马神经元PS-1、β-APP mRNA及蛋白表达显著高于空白对照组(P0.05),而番茄红素干预后海马PS-1、β-APP mRNA及蛋白表达显著降低(P0.05)。结论:番茄红素对β-淀粉样蛋白诱导脉络丛上皮炎症损伤有一定的保护作用,其作用机制可能通过脉络丛上皮TLR4信号通路,抑制炎症介质的产生,缓解AD的病理进程。