PGE2与LTB4在微管对TNF—α合成调节中的作用

本研究证实完善的微管功能对下ＴＮＦ－α的合成是必要的。如用秋水仙碱抑制微管聚合，则可减少ＭΦ产生ＴＮＦ－α，Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α的抑制作用部分是由于该药引起前列腺素Ｅ２升高所致，因为用环加氧酶抑制剂消炎痛阻断ＰＧＥ２合成，可部分拮抗Ｃｏｌ的这一抑制作用。此外，Ｃｏｌ可抑制花生四烯酸的另一产物白三烯的产生，然而补充外源性ＬＴＢ４并不影响Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α的抑制作用。     

秋水仙碱对肿瘤坏死因子—α基因表达的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌ，１０μｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ刺激ＰＵ５－１．８细胞的ＴＮＦ－ａ基因表达，以前工作曾证实Ｃｏｌ主要抑制ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的转录。本研究进一步证实这种抑制作用呈延迟性，即Ｃｏｌ需作用３小时才能充分表现其负性影响。而且这种抑制作用可被蛋白合成抑制剂放线菌酮（ＣＨＸ）完全阻断。单用Ｃｏｌ对ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－αｍＲＮＡ稳定性无明显影响，而与ＣＨＸ联用时则可明显延长ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－αｍＲＮＡ半衰期。以上资料堤示，Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α基因表达的影响可能是对其在转录及转录后水平综合影响的结果。     

花生四烯酸产物对系膜细胞增殖作用的研究

用［３Ｈ］胸腺嘧啶核甙（［３Ｈ－ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ，［３Ｈ］－ＴｄＲ）掺入法测定花生四烯酸产物对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞的增殖作用。前列腺素Ｅ２（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ，ＰＧ）抑制血清所致的系膜细胞增殖。血栓素Ａ２（ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ，Ｔｘ）类似物Ｕ４６６１９、白三烯（ｌｅｕｋｏｔｕｉｅｎｅ，ＬＴ）Ｃ４、ＬＴＤ、１２－羟二十碳四烯酸（１２－ｈｙｄｒｏｘｙｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃａｃｉｄ，１２－ＨＥＴＥ）、１５－ＨＥＴＥ促进静息的系膜细胞增殖，ＬＴＢ４及５－ＨＥＴＥ无此作用。用特异性蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫｃ）抑制剂可抑制Ｕ４６６１９、ＬＴＣ４、ＬＴＤ４及１２－ＨＥＴＥ的促增殖作用。ＰＧＦ２α、Ｕ４６６１９、ＬＴＣ４、ＬＴＤ４促进系膜细胞合成二脂酰甘油（ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ，ＤＡＧ）。ＰＧＦ２α及ＬＴＤ４刺激系膜细胞合成三磷酸肌醇（ｉｎｏｓｉｔｏｌｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＩＰ３）。提示部分花生四烯酸产物活化ＰＫＣ而促进系膜细胞增殖。     

兔抗人ClqIgG（Fab＇）_2的制备及鉴定

本文利用硫酸铵盐析及ＤＥＡＥ纤维素层析提取兔抗人ＣｌｑＩｇＧ．经胃蛋白酶消化及ＳＰＡ－Ｓｅｐｌｉａｒｏｓｅ４Ｂ层析，制备了兔抗人ＣｌｑＩｇＧ（Ｆａｂ＇）＿２．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析分子量为９３ＫＤ；经Ｃｌｑ－ＥＬＩＳＡ滴定其效价为１０￣（－４）．与人ＩｇＧ无交叉反应；当该制剂预先经人Ｃｌｑ处理后，阻断其与Ｃｌｑ特异结合的能力，在合适的条件下可抑制Ｃｌｑ与Ｒａｊｉ细胞上ＣｌｑＲ的结合。表明用该法制备的兔抗人ＣｌｑＩｇＧ（Ｆａｂ＇）＿２具有较好的纯度及特异性，可用于ＣｌｑＲ功能的研究。     

实验性肾炎肾皮质TXA_2－PGI_2平衡失调与肾小球病理变化的关系

本文用阳离子化牛血清白蛋白制作大鼠原位性肾炎模型，观察血栓素Ａ＿２前列环素平衡的变化及与肾小球病理变化的关系。将模型动物随机分成２组，分别腹腔内注射Ｄａｚｏｘｉｂｅｎ、蒸馏水，共注射２周。结果显示，大鼠免疫２周后，肾皮质ＴＸＢ＿２升高，６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿１α降低，尿蛋白量增加。４周后上述改变加重伴血小板聚集强度增大。治疗组大鼠肾皮质ＴＸＢ＿２降低，６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿１α升高，ＴＸＢ＿２／６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿１α比值降低，血小板聚集强度减弱，肾小球足突融合部分缓解，ＧＢＭ中电子致密物有溶解吸收迹象。统计处理提示，尿蛋白与ＴＸＢ＿２呈正相关（ｒ＝０．７８４４），与６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿１α呈负相关（ｒ＝－０．７１６３）。表明原位性肾炎大鼠肾皮质存在着ＴＸＡ＿２－ＰＧＩ＿２平衡失调，肾小球病理变化与ＴＸＡ＿２－ＰＧＩ＿２平衡失调有关。     

秋水仙碱对LPS诱导巨噬细胞TNF—α基因表达的抑制作用

细胞微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌ．，１０μｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ激活的小鼠巨噬细胞株ＰＵ５－１．８产生ＴＮＦ－α及减少其基因表达，而Ｃｏｌ．衍生物β－Ｌｕｍｉｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ对微管无作用，对ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ积累亦无影响，其它微管聚合抑制剂长春新碱、长春花碱等则有类似Ｃｏｌ．的抑制作用。用ｒｕｎ ｏｎ核转录试验和ｍＲＮＡ半寿期检测证实Ｃｏｌ．ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ积累     

高糖、肿瘤坏死因子促进血管内皮细胞表面整合素（α_vβ_3）表达

本文采用ＥＬＩＳＡ方法检测培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）表面玻璃连接蛋白受体（ＶｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒＶｎＲ即整合素家庭的α＿ｖβ＿３）的表达改变；用（５１）Ｃｒ－标记血小板（（５１）Ｃｒ－ｐｌａｔｅｌｅｔｅ，（５１）Ｃｒ－ｐＬ）检测ＨＵｖＥｃ的粘附功能；Ｆｕｒａ－２／Ａｍ负载ＥＣ，测定ＨＵＶＥＣ胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ（２＋）］），观察了高糖、肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）对ＥＣ粘附功能的影响。结果表明：①高糖（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）可明显促进ＥＣ与ＰＬ的粘附（ＣＰＭ值：３６１±２ｌ．９３ＶＳ２ｌ９．６７±１６．２６，ｎ＝６Ｐ＜０．０１），抗β３亚单位单抗（β３ＭｃＡｂ）可部分阻断ＥＣ与ＰＬ粘附。ＴＮＦ－α（１０００μ／ｍ１）也有相同作用（ＣＰＭ值：４ｌ０．７±１７．６ＶＳ２１９．６７±１６．２６１ｎ＝６Ｐ＜０．０１），β３ＭｃＡｂ也部分阻断ＴＮＦ－α诱导的ＥＣ－ＰＬ间的粘附。②不同浓度高糖和ＴＮＦ－α不同时间可影响ＥＣ表面的α＿ｖβ＿３表达，并且在一定范围内有浓度和时间依赖性。③高糖和ＴＮＦ－α可明显增加ＥＣ的［Ｃａ（２＋）］ｉ，上述资料提示?     

秋水仙碱抑制巨噬细胞合成肿瘤坏死因子—α机制的初步探讨

我们以前证实微管聚合抑制剂Ｃｏｌ（秋水仙碱）可抑制分泌ＴＮＦ—α。本文进一步证实Ｃｏｌ并非干扰将ＴＮＦ—α胞外的分泌过程，因Ｃｏｌ不引起ＴＮＦ—α在细胞内的潴留，而是抑制ＴＮＦ—α的产生。因为：（１）阻断新合成蛋白分泌过程的试剂Ｍｏｎ（莫能菌素），能完全抑制ＴＮＦ—α的释放，将大量ＴＮＦ—α阻留在细胞内。如加用Ｃｏｌ．则Ｍｏｎ阻留于胞内的ＴＮＦ—α明显减少；（２）Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示Ｃｏｌ可抑制ＴＮＦ—α前体一２６ＫＤ蛋白的产生。如在ＬＰｓ刺激的不同时间加Ｃｏｌ，其抑制效应在２～８ｈ内逐渐消失，若同时给予ＬＰＳ与Ｃｏｌ．则Ｃｏｌ的抑制效果最好，说明Ｃｏｌ作用于ＴＮＦ—α生物合成早期。在分子水平上，Ｃｏｌ明显减低ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ—αｍＲＮＡ水平。以上资料提示Ｃｏｌ主要通过抑制ＴＮＦ—αｍＲＮＡ转录而减少ＴＮＦ—α的合成。     

秋水仙碱对巨噬细胞分泌TNF－α的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌ．）能剂量依赖性地抑制ＬＰＳ刺激的大鼠巨噬细胞（Ｍψ）分泌ＴＮＦ－α。Ｃｏ１的衍生物β－ｌｕｍｉｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ对微管无影响，对ＴＮＦ－α的分泌亦无影响；其他微管抑制剂如长春新碱等亦能抑制Ｍψ分泌ＴＮＦ－α。间接免疫荧光染色和原位杂交法显示，ＬＰＳ能促进微管聚合，并使ＴＮＦ－αｍＲＮＡ及蛋白质表达明显增加；当ＬＰＳ与Ｃｏｌ．联用时，微管解聚，ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达及其蛋白质合成减少，ＴＮＦ－α失去原有的胞浆定位，弥散分布于胞浆。说明ＴＮＦ－α的合成需要完好的微管结构与功能，并提示在生理或病理条件下微管功能的变化可能直接或间接参与对ＴＮＦ－α生物合成的调节。     

血清及支气管肺泡灌洗液中癌胚抗原、β＿2微球蛋白的放免测定对肺癌诊断意义的研究

用放免方法对１１例肺癌和９例肺良性疾病患者的血清及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中癌胚抗原（ＣＥＡ）、β＿２微球蛋白（β＿２－ＭＧ）的含量进行测定，以探讨对肺癌的诊断意义。结果表明，ＢＡＬＦ中ＣＥＡ、β＿２－ＭＧ的检测有助于肺癌的诊断，尤其对肺癌早期及周围型肺癌的诊断有显著意义，其意义优于血清中ＣＥＡ、β＿２－ＭＧ的检测。     

秋水仙碱对单核细胞产生细胞因子的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌ，１０－５ｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ刺激人单核细胞分泌１７ｋＤＴＮＦ－α及膜相关２６ｋＤＴＮＦ－α；与之相反，它却可促进ＩＬ－１β（多为分泌型）的分泌，而对ＩＬ－１α（多为膜相关型）则表现为抑制作用。对于ＩＬ－６，Ｃｏｌ无明显影响。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析显示，Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α及ＩＬ－１βｍＲＮＡ产生亦表现为相反作用，即对前者抑制，对后者促进作用。     

常压缺氧大鼠血浆和肺组织TXB_2和6－keto－PGF_（1α）的动态变化

本文观察常压缺氧２４ｈ及１，２，４ｗ（６ｈ／ｄ，６ｄ／ｗ）后大鼠血小板数及聚集率和血浆及肺ＴＸＢ＿２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）的动态变化。结果表明（１）缺氧大鼠血小板数呈先增加、后恢复、再下降，血小板聚集率呈先减少、后增加再减少的动态变化。（２）血浆ＴＸＢ＿２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）均明显升高，（３）肺组织６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）升高早于ＴＸＢ＿２，提示ＰＧＩ＿２参干旱期缺氧肺血管张力调节。（４）缺氧大鼠２周时肺动脉高压达到高峰，右心室明显肥厚，而肺组织ＴＸＢ＿２至缺氧４周后才见增加，表明ＴＸＢ＿２不是缺氧早期肺血管收缩的主要因素。     

GM－CSF与IFN－r联合刺激人PBMC产生TNF－α

ＧＭ－ＣＳＰ本身并不能诱导人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＴＮＰ－α对ＬＰＳ的刺激作用也不具有协同性，但与ＩＦＮ－ｒ联合刺激ＰＢＭＣ可以产生ＴＮＦ－α，最大效应出现于刺激后１８～２４ｈ，且呈明显的时间和剂量依赖关系，消炎痛和多粘菌素Ｂ对此效应无影响，排除了ＰＧＥ２和ＬＢＳ存在影响的可能性。     

Clq调理酵母多糖颗粒刺激U937细胞产生TNF－α

Ｕ９３７细胞吞噬Ｃｌｑ、ＩｇＧ和Ｃｌｑ＋ＩｇＧ调理的酵母多糖颗粒（分别称为ＣＺ、ＩＺ、ＩＣＺ）后可产生ＴＮＦ－α，但对未调理酵母多糖颗粒（Ｚ）不应答。加入抗ＣｌｑＦ（ａｂ）２、将调理颗粒热灭活或以高浓度Ｃｌｑ或抗ＣｌｑＲＭｃＡｂＥ８预处理Ｕ９３７细胞，可完全或部分抑制ＣＺ或ＩＣＺ诱导的ＴＮＦα产生，但Ｃｌｑ预处理却使ＩＺ诱生的ＴＮＦ－α增加，同时赋予原本无作用的Ｚ以ＴＮＦ－α诱生能力，从而证实这种应答是Ｃｌｑ／ＣｌｑＲ系统特异的。ＣｙｔｏａｃｈａｌａｓｉｎＢ抑制吞噬，同时也抑制ＴＮＦ－α产生。资料表明：Ｃｌｑ／ＣｌｑＲ系统介导了Ｃｌｑ调理酵母多糖颗粒的ＴＮＦ－α诱生效应，且与ＦｃγＲ有协同作用，其机制即触发和促进吞噬。     

抗重组人肿瘤坏死因子－α单克隆抗体的研制及其初步应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术获得１０株抗重组人肿瘤坏死因子－α（ｒＨｕＴＮＦ－α）ＭｃＡｂ。７株ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，２株为ＩｇＧ２ａ，１株为ＩｇＧ２ａ。１０株ＭｃＡｂ与淋巴毒素（ＬＴ或ｒＨｕＴＮＦ－β）、ｒＨｕＩＬ－６和载体菌菌体蛋白均无交叉反应。其中７株ＭｃＡｂ具有中和活性，７株ＭｃＡｂ能识到天然的ＴＮＦ－α。Ｇ１１和Ｅ６ＭｃＡｂ应用ＡＢＣ法免疫组化染色肝病患者组织细胞片得到明确的阳性结果。用２株识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了一步夹心ＥＬＩＳＡ法，检测ＴＮＦ－α的敏感性可达到１００ｐｇ／ｍｌ左右。     

GM—CSF与IFN—r联合刺激人PBMC产生TNF—α

ＧＭ－ＣＳＦ本身并不能诱导人外周血单核细胞产生ＴＮＦ－α，对ＬＰＳ的刺激作用也不具有协同性，但与ＩＦＮ－ｒ联合刺激ＰＢＭＣ可以产生ＴＮＦ－α，最大效应出现于刺激后１８－２４ｈ，且呈明显的时间和剂量依赖关系，消炎痛和多粘菌素Ｂ对此效应无影响，排除了ＰＧＥ２和ＬＰＳ存在影响的可能性。     

流行性出血热各期磷脂酶A_2、血栓素B_2与6－酮前列腺素F_（1α）的变化

用微量酸滴定法和放免分析法分别对４３例流行性出血热患者各期血清中磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）活性和血浆中血栓素Ｂ＿２（ＴＸＢ＿２）和６－酮前列腺素Ｆ＿１α（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿１α）水平进行了动态检测。结果显示：本病各期ＰＬＡ＿２和ＴＸＢ＿２明显升高，而６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿１α明显下降，上述变化程度与病情高度平行，本病危重型和病的极期变化最明显，并与血小板数量下降和肾功损害相关。初步探讨了ＰＬＡ与ＴＸＢ＿２－６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿１α平衡间的关系及各自在本病发生、发展过程的病理生理意义。     

新生儿缺氧缺血性脑病细胞因子的变化及临床意义

目的：研究新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）患儿细胞因子ＩＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的变化及其与ＨＩＥ严重程度的关系和临床意义。方法：用ＥＬＩＳＡ方法测定了５０例ＨＩＥ患儿血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外培养产生的细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的水平。结果：ＨＩＥ患儿血浆及ＰＢＭＣ体外培养产生的ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β水平均显著高于对照组；而且重度ＨＩＥ患儿急性期血浆及ＰＢＭＣ体外培养产生的ＴＮＦ－α、ＩＬ－β和ＩＬ－６水平均显著高于对照组和轻度ＨＩＥ组，其恢复期血浆ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β则显著降低，但血浆ＩＬ－６水平仍明显高于对照组。结论：ＨＩＥ患儿血浆及激活的ＰＢＭＣ产生的ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β水平与ＨＩＥ的严重程度有关，ＩＬ－６的产生可能与脑损伤后的修复机制有关，测定这些细胞因子对病情的监测具有一定意义。     

脑囊虫病患者外周血单个核细胞体外诱生IL-2、IFN-γ及TNF-α活性的研究

本文采用生物活性测定法检测了３１例脑囊虫病患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外诱生ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ－α活性，以３０例正常人作对照，探讨了脑囊虫病人细胞因子的变化及在免疫调节中的作用。结果显示：脑囊虫病患者ＰＢＭＣ体外诱生的ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ水平明显降低，与正常人相比差异显著（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），而患者ＰＢＭＣ体外诱生的ＴＮＦ－α水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；提示脑囊虫病患者的ＣＤ＋４Ｔｈ１细胞呈低应答状态，脑囊虫病患者过量产生的ＴＮＦ－α可能是造成脑囊虫病的免疫病理损害原因之一。     

细胞骨架系统对TNF－α产生的影响

本文证实细胞微管聚会抑制剂秋水仙碱、长春花碱、长春新碱等均可明显抑制脂多糖刺激的大鼠腹腔巨噬细胞合成肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）。微管解聚抑制剂重水与Ｔａｘｏｌ亦可使ＴＮＦ－α产生轻度减少，提示微管的聚合与解聚对ＴＮＦ－α的正常产生都非常重要，其中聚合功能对ＴＮＦ－α合成的调节尤其重要。此外，微丝聚合抑制剂细胞松弛素Ｂ亦可轻度抑制ＴＮＦ－α的产生，说明微丝亦参与对ＴＮＦ－α合成的调节。