BubR1基因表达对肝癌细胞对紫杉醇的敏感性的影响

目的:探讨BubR1基因在紫杉醇治疗肿瘤中的作用。方法:构建针对BUBR1基因的特异性短发夹RNA载体,导入人肝癌细胞株HepG-2,转染48 h后,运用实时荧光定量PCR、Western印迹法评价RNA干扰效果;BubR1表达下调的肝癌细胞及对照组细胞用不同浓度(1、3、10、30、100、300、1000和3000 nmol/L)的紫杉醇处理,MTT法检测细胞增殖情况。结果:shRNA-BubR1可有效抑制BubR1的mRNA、蛋白水平以及内源性表达。MTT结果显示,BubR1表达下调的细胞在不同浓度紫杉醇作用下的增殖抑制率与对照组相比明显增加(P<0.05),并呈现剂量依赖性。结论:下调BubR1的表达能增强肝癌细胞对紫杉醇的敏感性。     

纺锤体检查点蛋白BubR1在肝癌组织和肝癌细胞株HepG2中的表达

目的观察纺锤体检查点蛋白BubR1在人类肝癌组织、正常肝组织以及肝癌细胞系（HepG2）、正常肝细胞系（LO2）有丝分裂期表达水平的差异,以探讨BubR1蛋白在肝癌发生中的作用。方法用荧光定量PCR和Westernblot检测BubRl基因在肝癌组织、正常肝组织,以及在2种细胞中用Nocodazole处理前后的mRNA和蛋白的表达水平。结果BubR1基因在正常组织中的表达高于肝癌组织,在Nocodazole处理前2种细胞中表达无显著差异,在处理后2种细胞中表达均增高,但在L02细胞中上调水平大于HepG2细胞。结论BubR1基因低表达可能在肝癌的发生过程中起重要作用。     

Synaptotagmin1影响小鼠卵母细胞纺锤体组装和稳定

目的:确定Synaptotagmin1(Syt1)对小鼠卵细胞纺锤体组装和稳定的影响。方法:免疫荧光法检测Syt1在小鼠卵母细胞发育不同时期的亚细胞定位。用紫杉醇处理小鼠MⅠ期卵母细胞,明确Syt1与微管动力的关系。注射Syt1特定的寡聚核苷酸降调卵母细胞中Syt1的表达,免疫荧光法检测Syt1降调后卵母细胞纺锤体的形态变化、染色体异常以及中心体蛋白γ-tubulin定位变化。结果:Syt1在卵母细胞减数分裂成熟的不同发育阶段都有表达,主要集中分布皮质区和MⅠ和MⅡ期纺锤体的两极。Syt1在MⅠ和MⅡ期与中心体相关蛋白γ-tubulin共定位。紫杉醇实验发现Syt1集中定位于星体和高度集中的微管两极。降调Syt1表达后,染色体排列紊乱,纺锤体组装异常比例升高,且大多数为无极、单极或者多级纺锤体,其次有拉长纺锤体和形态各异纺锤体。并影响微管组织中心相关蛋白γ-tubulin的正确定位。结论:Syt1可能作为一种微管组织中心相关蛋白调节纺锤体的组装稳定。     

人类小脑症基因1与基因组稳定性

人类小脑症基因1（Microcephalin 1,MCPH1）又叫人端粒酶逆转录酶抑制基因（BRCT-repeat inhibitor of hTERT ex－pression,BRIT1）,它编码一个110 kD的含有835个氨基酸的核结合DNA损伤应答蛋白,能与癌症相关基因蛋白（E2F、p53、BRCA1/2等）、DNA损伤应答蛋白（ATM、ATR、RAD51和Condensin Ⅱ等）以及细胞周期调节蛋白（CDK1、cyclins）等多种重要蛋白相互作用,它能参与到细胞周期调控、DNA损伤修复以及抑制肿瘤发生发展等多种细胞活动中,在维持基因组稳定性方面起重要作用。本文对MCPH1的生化结构、维持基因组稳定性以及在人类肿瘤中所发挥的作用做一综述。     

骨肉瘤细胞中KDM5C与有丝分裂期纺锤体组装检查点关系的研究

目的 :探讨赖氨酸特异性去甲基化酶5C(lysine-specific demethylase 5C,KDM5C)在骨肉瘤细胞有丝分裂期的变化及其对有丝分裂期纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint,SAC)的调控。方法:利用细胞周期同步化方法,收集不同骨肉瘤细胞系有丝分裂期各时间节点的细胞样品,利用Western blot检测各时间点KDM5C蛋白质含量的变化及其翻译后修饰与有丝分裂期进程的关系;并用特异性抑制剂CPI-455抑制KDM5C的去甲基化转移酶活性,利用Western blot检测有丝分裂期进程中抑制KDM5C的去甲基化酶活性对SAC相关标志蛋白细胞分裂周期蛋白-27(cell division cycle protein 27,cdc27)、周期蛋白B1(Cyclin B1)的影响。结果:在有丝分裂进程中,与SAC相关的标志蛋白cdc27的磷酸化滞后条带的位移变化和Cyclin B1的蛋白降解均与文献报道相似,但KDM5C蛋白含量无明显变化;KDM5C截短体表达未观察到明显的位移减慢或泛素化降解条带;抑制其去甲基化酶活性后,相较对照组,标...     

细胞周期检测点激酶1/2在相关肿瘤诊断治疗中的研究进展

细胞周期检测点激酶(Checkpoint kinase)的主要作用是在细胞DNA损伤后,通过及时阻滞细胞周期有效介导受损DNA的检测与修复,进而维持细胞基因组的稳定。当前细胞周期检测点激酶主要包括细胞周期检测点激酶1(Checkpoint kinase 1,Chk1)和细胞周期检测点激酶2(Checkpoint kinase 2,Chk2),二者均为蛋白激酶,具有相似的化学结构和重叠的底物谱,但在不同肿瘤的组织细胞中有不同的表达。本文就Chk1和Chk2的基本结构、生理功能及相应分子生物学机制,分析总结Chk1和Chk2作为肿瘤细胞的重要靶点与人类相关肿瘤诊断治疗的关系,旨在为今后相关肿瘤的临床治疗提供新思路。     

胃癌中PCMT1表达的预后价值及其对纺锤体组装检查点的调控作用

目的 探讨蛋白质-L-异天冬氨酸（D-天冬氨酸）-甲基转移酶（PCMT1）在胃癌中的表达及对预后的影响,并分析其潜在的作用机制。方法 UALCAN数据库在线分析PCMT1在胃癌组织的表达情况,通过DAVID数据库进行基因本体注释（GO）及京都基因和基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析其可能的功能与信号通路。纳入2014年1月–2017年12月于我院接受胃癌根治术的120例患者,免疫组织化学染色检测PCMT1、Ki67在胃癌组织中的表达;Cox回归、Kaplan-Meier曲线和受试者工作特征（ROC）曲线用于胃癌患者术后5年生存率的预后分析。采用慢病毒构建干扰或过表达PCMT1载体,转染人胃癌细胞系MGC-803与HGC-27细胞,设置干扰空载体（sh-NC）组与干扰PCMT1载体（sh-PCMT1）组,过表达空载体（LV-Vec）组与过表达PCMT1载体（LV-PCMT1）组;Western blot检测各组细胞中PCMT1、CyclinB1、CDC20蛋白表达,CCK-8法检测胃癌细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期。注射4组MGC-803细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型,每组3只...     

食管癌组织中Mad2蛋白的表达

目的 探讨食管癌组织中有丝分裂检验点调控蛋白Mad2的表达。方法 采用免疫组化SP法检测92例食管癌组织和83例正常食管黏膜中Mad2蛋白的表达。结果 Mad2蛋白在食管癌组织中的表达阳性率为71.74%（66/92）,与食管正常黏膜中的表达阳性率85.54%（71/83）相比,差异有显著性（P〈0.05）。与肿瘤组织分化程度呈负相关（P〈0.005）。与有无淋巴结转移无相关性（P〉0.05）。结论 Mad2蛋白在食管癌的发生发展过程中起到了重要作用,其检测有助于食管癌恶性程度的评价。     

中心体异常与宫颈癌关系的研究进展

中心体作为哺乳动物细胞微管组织中心,在细胞分裂间期通过成核作用和微管的形成来维持细胞正常结构.双极纺锤体的形成是细胞有丝分裂中染色体均衡分离的必需条件,而中心体对双极纺锤体的形成起着关键作用.中心体的异常已经在越来越多的恶性肿瘤细胞中被发现.然而关于中心体异常和宫颈癌的关系,国内外研究较少.本文主要对中心体异常与宫颈癌的关系进行综述.     

自噬基因Beclin1与肿瘤的研究进展

Beclin1基因也称BECN1基因,是酵母ATG6的同系物,Beclin1基因是细胞执行自体吞噬的必需基因,且和肿瘤的发生、发展密切相关。Beclin1通过对细胞自噬的调节,在肿瘤的病理生理过程中起重要作用。本文对Beclin1与肿瘤的关系,特别是Beclin1与妇科肿瘤的相关研究进行总结、综述。     

KAl1／CD82基因抑制肿瘤转移的研究进展

KAl1／CD82是近年来发现并分离出的一个新的肿瘤转移抑制基因，属于TM4SF（transmembrane 4 superfamily）家族成员，能与多种转录因子结合，调节基因转录。研究表明，KAl1／CD82在细胞膜上可与各种整合素分子、表皮生长因子受体组成复合体，通过PKC、IP4等信号通道来介导细胞的黏附，使肿瘤细胞不易脱离原发灶而起抑制转移功能，同时对肿瘤细胞的迁移和在转移部位的增殖有抑制作用，从而实现抑制肿瘤细胞转移和侵袭。本文就KAl1／CD82基因的结构、作用机制及抑制肿瘤转移及意义作一综述。     

KAI1/CD82基因抑制肿瘤转移的研究进展

KAI1/CD82是近年来发现并分离出的一个新的肿瘤转移抑制基因,属于TM4SF(transmembrane4superfamily)家族成员,能与多种转录因子结合,调节基因转录。研究表明,KAI1/CD82在细胞膜上可与各种整合素分子、表皮生长因子受体组成复合体,通过PKC、IP4等信号通道来介导细胞的黏附,使肿瘤细胞不易脱离原发灶而起抑制转移功能,同时对肿瘤细胞的迁移和在转移部位的增殖有抑制作用,从而实现抑制肿瘤细胞转移和侵袭。本文就KAI1/CD82基因的结构、作用机制及抑制肿瘤转移及意义作一综述。     

纺锤体检测点蛋白BUB1B在胃癌组织中的表达及意义

目的 检测胃癌组织中纺锤体检测点蛋白BUB1B的表达,探究BUB1B在胃癌发生中的重要意义.方法 采用荧光实时定量PCR检测30例胃癌组织及17例癌旁正常组织中BUB1B mRNA水平表达;免疫组织化学检测BUB1B在胃癌组织及癌旁组织中BUB1B蛋白的表达情况.结果 在mRNA水平,BUB1B在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,近(8.875±1.08)倍;免疫组织化学结果显示,胃癌组织中BUB1B的表达明显高于癌旁正常组织.按照评分标准统计显示,癌旁组织BUB1B表达均值为(92.12±12.99),胃癌组织表达均值为(133.39±8.49),两者之间存在明显差异(P＜0.05).且BUB1B表达与TNM分期相关,但与淋巴结转移,年龄,肿瘤大小及有无家族史无明显相关.结论 BUB1B的过表达在胃癌发生发展中起重要作用,为探索肿瘤发生机制及寻找更为有效的治疗提供新的思路.     

免疫检查点抑制剂相关甲状腺功能障碍研究进展

免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitors,ICPIS）对肿瘤患者总体生存率有极大提高,疗效显著,目前已批准用于多种肿瘤治疗,为众多癌症患者带来希望。但治疗同时,过度激活的免疫系统对全身各个器官均可产生免疫损伤,甲状腺功能障碍就是其中较为常见的内分泌不良事件之一。本文回顾相关文献,从ICPIS分布及作用特点、流行病学、发病机制出发,归纳总结其临床特点,并就临床工作中如何筛选高危患者,以及目前国内外指南关于ICPIS相关甲状腺功能障碍随访监测、治疗方式异同进行阐述。     

NDRG-1基因的研究进展

恶性肿瘤是危害人类健康最严重的一类疾病,死亡率仅次于心血管系统疾病[1],随着环境污染的加剧和人口老龄化,恶性肿瘤发病率和死亡率将逐步增加;而肿瘤的发生和发展涉及一个多因素、多基因参与的复杂过程,与细胞的增殖、分化和凋亡的调节密切相关,三者关系的失衡导致肿瘤的发生、发展和转移.     

免疫检查点抑制剂相关心脏毒性及其防治的研究进展

免疫检查点分子参与T细胞的功能调节,以防止其攻击自身组织,在免疫反应稳态中发挥了重要的作用。免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors, ICIs)在免疫系统受到抑制时可恢复机体免疫系统对肿瘤的杀伤能力,为多数恶性肿瘤提供了一个有效的治疗方法,现已成为肿瘤治疗的研究热点。然而,在恶性肿瘤治疗中ICIs的广泛应用导致了心血管系统的免疫相关不良事件（immune-related adverse events,irAEs）,其中心脏毒性是较常见的ICIs相关免疫毒性反应之一,如心肌病、心肌炎和致命性心衰,但常常易被人们忽视。本文就不同免疫检查点抑制剂对心脏的不良反应及其防治作一综述。