尿素对幽门螺杆菌生长的影响研究

目的 :研究尿素对幽门螺杆菌生长的影响。方法 :在幽门螺杆菌培养基中分别加入 3种浓度 (5 mmol/ L,10 mmol/ L和 2 0 m mol/ L )的尿素 ,然后将培养基 p H分别调至 3.5、4 .5、5 .5。将 10株 Hp分别接种于这 9种培养基中 ,以确定最佳条件组合。之后采用最佳条件进行胃黏膜活检标本 Hp的培养。结果 :10株 Hp在 9种含尿素培养基中以尿素浓度为 10 mmol/ L、p H为 4 .5时生长最好 ,其他 8种与之比较差异极为显著 (P<0 .0 1) ,5 7份胃镜活检标本分别接种于尿素浓度为 10 mm ol/ L、p H为 4 .5时生长最好 ,其他 8种与之比较差异极为显著 (P<0 .0 1) ,5 7份胃镜活检标本分别接种于尿素浓度为 10 mmol/、p H 4 .5培养基和 p H 7.0不含尿素的普通 Hp培养基中 ,32份标本 (5 6 .1% )在尿素培养基中培养阳性 ,其中 2 2份 (38.6 % )在普通培养基中培养阳性。结论 :含有适当浓度尿素的培养基可用于胃黏膜 Hp的分离培养。     

培养法检测嗜酸乳杆菌对幽门螺杆菌的拮抗作用

目的：检测嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）的抑制作用。方法：采用固体培养法将Hp分为Hp临床分离菌株组、Hp标准菌株组、培养基对照组及10 g•L^-1乳酸组,分别测定嗜酸乳杆菌上清液对各组Hp作用的抑菌环大小;液体培养法中,分别计数不同时间嗜酸乳杆菌与Hp单纯培养及混合培养菌落数。结果：嗜酸乳杆菌上清液对Hp临床分离株及标准菌株生长的抑菌环直径分别为（2.35±0.05）cm和（2.45±0.05）cm,与10 g•L^-1乳酸组抑菌环［(1.40±0.15)cm］比较差异有显著性（P< 0.05）;液体培养基混合培养12、24、48和72 h 时Hp细菌数分别为(3.67±0.07)×10⁴ 、(3.48±0.18)×10³、(1.70±0.56)×10² 和0 CFU•mL^-1,与Hp单纯培养比较差异有显著性（P< 0.01）。结论：嗜酸乳杆菌在固体及液体培养中均可拮抗Hp的生长。     

组织块法兔肌腱细胞体外培养观察

目的 :探索肌腱组织块培养法中腱细胞的生长规则及形态 ,为腱细胞培养提供一种简便、可靠的方法。方法 :取家兔 2 0只 ,体重 1.5～ 2 .5kg ,应用显微外科技术剥除屈肌腱外膜组织后 ,以胰酶及胶原酶消化去除残存腱外膜组织 ,腱组织剪成 1mm3 小块 ,放入 5 0ml培养瓶中 ,向瓶内加入少量培养液 (约 1ml) ,培养液由F -12培养基加 2 0 %胎牛血清、青霉素 6mg/L、链霉素 0 .1g/L及抗坏血酸 30mg/L组成。用无菌探针将组织块均匀分置 ,小心置入 37℃、5 %CO2 培养箱中培养 ,2 4h后组织块与瓶壁粘着后再加入F - 12完全培养液。当融合成单层细胞后进行传代培养 ,并以 10 0 0转 /min速度离心淘洗 10min ,去除上层液体 ,向沉淀物加入F -12完全培养液 ,吸管吹打后计数吸取 ,按 1∶2分瓶传代培养。结果 :组织块培养法成功率 95 % ,腱细胞自组织块内爬出贴壁生长时间平均为 (12± 1.7)d左右 ,细胞倍增时间平均为 (6± 0 .9)d。结论 :组织块方法兔腱细胞培养简便、易行。     

对氨基苯甲酸对粘性放线菌生长影响的研究

目的　探讨对氨基苯甲酸 (PABA)对牙根面龋致病菌之一的粘性放线菌生长的影响。方法　在加入不同浓度 PABA的改良 Carlsson培养基中采用厌氧培养技术 (80 % N2 ,10 % H2 ,10 % CO2 )培养细菌 48小时 ,通过 UV- 16 0 1紫外可见分光光度仪测定细菌浓度 OD值 (λ=5 40 nm) ;并用平板倾注法对细菌进行计数及琼脂平板培养观察细菌生长的情况。结果　 10 - 1 0～ 10 - 4 g/ L 浓度的 PABA有促进粘性放线菌生长的能力 ,且当 PABA浓度增加到 10 - 6g/ L 时 ,促进生长的作用达最强 ;当 PABA浓度增加到 10 - 3 g/ L 时 ,对粘性放线菌的生长无明显的促进作用。结论　 PABA可促进粘性放线菌的生长 ,在 PABA浓度为 10 - 6g/ L 时 ,促进生长的能力达最强     

细菌生长对解脲脲原体液体培养结果的影响分析

目的　探讨细菌和真菌生长对解脲脲原体 (UreaplasmaUrealyticum ,UU)液体培养结果的影响。方法　将UU阳性的培养液 95 4份作进一步细菌分离和脲酶试验分析 ;同时将已知脲酶特性的细菌制成不同浓度分别接种入UU液体培养管 ,置 37℃、CO2 培养箱培养 48小时观察细菌对UU液体培养管的干扰情况。以My coplasmasIST培养基作为诊断评价标准 ,随机选取 2 0 0份标本同时接种UU培养管和IST培养基进行阳性率比较。结果　 95 4份UU阳性的培养液分离出细菌 15 6株 ,分离率 16 .0 %(15 6 / 95 4) ,以凝固酶阴性葡萄球菌为主。98株细菌分解尿素 ,占所分离细菌的 6 3.0 %(98/ 15 6 ) ;已知脲酶阳性的细菌的菌液浓度达 10 4 /ml、10 5/ml时干扰UU结果的判断 ;UU培养管和IST培养基检出阳性率比较存在差异 (χ2 =4.84,P <0 .0 5 ) ,引起差异的主要原因是脲酶阳性细菌的可能干扰。结论　本文所用UU液体培养基抑菌效果欠佳 ,补充细菌分离和脲酶试验有助于UU结果的正确判断。     

米非司酮对雄激素非依赖性前列腺癌LNCaPC_(4-2)和PC3细胞的作用机制

为探讨抗孕激素药米非司酮对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株LNCaPC4 2 、PC3的促凋亡及生长抑制作用 ,将不同浓度的米非司酮加入到体外培养的 2株前列腺癌细胞中 ,分别在培养后 3d、5d、7d用SRB染色法检测细胞生长抑制率 ;用流式细胞仪检测加药后 2 4h、48hLNCaPC4 2 和PC3细胞凋亡情况。发现 :高浓度米非司酮 ( 2 0μmol/L)对雄激素非依赖性细胞株LNCaPC4 2 、PC3于 3d、5d、7d的细胞生长抑制率分别为 5 5 .79%、66.3 7%、71 .5 4%和 87.42 %、98.1 5 %、1 0 0 %。不同浓度米非司酮即 2 .5、5、1 0、1 5、2 0 μmol/L对LNCaPC4 2 、PC3细胞株 7d时的细胞生长抑制率分别为 1 7.0 7%、3 5 .77%、5 3 .66%、63 .41 %、71 .5 4%和 48.2 5 %、63 .42 %、82 .3 7%、95 .3 1 %、1 0 0 %。前列腺癌细胞株LNCaPC4 2 受 1 5 μmol/L米非司酮作用 2 4h和 48h细胞凋亡率分别为 1 9.3 0 %、3 0 .0 4% ;PC3受米非司酮 1 5 μmol/L作用 2 4h细胞凋亡率为 44.5 2 %。提示 :米非司酮对LNCaPC4 2 、PC3细胞株有时间和剂量依赖的生长抑制作用 ,其生长抑制作用是通过促进细胞凋亡实现的。     

高半胱氨酸促THP-1巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白-1和辛伐他汀的调节作用

目的 :研究高半胱氨酸 (Hcy)对人单核细胞系 (THP 1)分化而来的巨噬细胞 (THP 1巨噬细胞 )表达单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)的影响及辛伐他汀可能存在的调节作用。方法 :在培养的THP 1中加入佛波脂(PMA) ,使终浓度为 2 0ng/ml,培养 4 8h ,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化。他汀组和Hcy组分别加入含有辛伐他汀(10 μmol/L ,5 0 μmol/L)或不含辛伐他汀完全培养基 37℃培养 2 4h ,再加入含DL Hcy(0 1mmol/L)完全培养基 ,对照组只加完全培养基 ,培养 2～ 2 4h ,上清离心 5 0 0g ,10min ,- 2 0℃保存。用ELISA法检测上清中MCP 1蛋白的量。每孔重复 3次。结果 :与对照组比较 ,加入 0 1mmol/LHcy可使THP 1巨噬MCP 1蛋白表达升高 ,4h后显著升高 (P <0 0 5 ) ,6h达高峰 (P <0 0 1) ,12h后逐渐下降 (P <0 0 5 ) ,分别为对照组的 2 9倍、5 8倍和 2 6倍 ,2 4h与对照组无显著差异。 10 μmol/L、5 0 μmol/L辛伐他汀分别使与Hcy共孵育 6h(高峰时间 )MCP 1蛋白量下降至Hcy组的 5 7 11%、2 3 6 4 %。结论 :病理浓度的Hcy(0 1mmol/L)可时间依赖性促进THP 1巨噬细胞表达MCP 1蛋白 ,该作用可被辛伐他汀下调。     

尿素对幽门螺杆菌生长的影响研究

目的:研究尿素对幽门螺杆菌生长的影响.方法:在幽门螺杆菌培养基中分别加入3种浓度(5 mmol/L,10 mmol/L和20 mmol/L)的尿素,然后将培养基pH分别调至3.5、4.5、5.5.将10株Hp分别接种于这9种培养基中,以确定最佳条件组合.之后采用最佳条件进行胃黏膜活检标本Hp的培养.结果:10株Hp在9种含尿素培养基中以尿素浓度为10 mmol/L、pH为4.5时生长最好,其他8种与之比较差异极为显著(P＜0.01),57份胃镜活检标本分别接种于尿素浓度为10 mmol/L、pH为4.5时生长最好,其他8种与之比较差异极为显著(P＜0.01),57份胃镜活检标本分别接种于尿素浓度为10 mmol/、pH 4.5培养基和pH 7.0不含尿素的普通Hp培养基中,32份标本(56.1 %)在尿素培养基中培养阳性,其中22份(38.6%)在普通培养基中培养阳性.结论:含有适当浓度尿素的培养基可用于胃黏膜Hp的分离培养.     

创伤弧菌优化培养条件的研究

目的：通过对创伤弧菌(VV)的培养研究，选择最佳优化培养条件，提高该菌的检出率。方法：用酶标仪测定各生长条件下的细菌吸光度值。结果：VV在各测试条件中，含1％NaCl培养10h细菌吸光度达峰值；640mg/L血红蛋白于6h达峰值；10％蛋白胨于8h达峰值；在pH值为8．0～8．5、温度为37℃时，细菌吸光度达峰值。结论：VV最佳优化培养条件为：1％NaCl、640mg/L血红蛋白、10％蛋白胨、pH8．0～8．5、温度37℃。本研究条件可进一步用于VV快速测定研究。     

奥曲肽对中分化胃腺癌细胞的生长调控

目的　研究生长抑素类似物奥曲肽 (OCT)对人胃癌细胞株SGC790 1的体外调控作用及其机制 ,并探讨奥曲肽与 5 -FU是否具有协同作用。方法　采用MTT比色分析法测定奥曲肽和 5 -FU对细胞生长的调控 ;采用流式细胞术分析OCT 10 -6mol/L对SGC790 1细胞周期分布的影响。结果　OCT 10 -5mol/L、10 -6mol/L和 5 -FU及两药联合对SGC790 1细胞生长均有抑制作用 ,OCT 10 -5mol/L的抑制率为 32 .36 % ;OCT 10 -6mol/L与 5 -FU联合的抑制率 (37.5 6 % )高于两药单独使用 (5 -FU 31.0 1% ;10 -6mol/LOCT 13.5 0 % )。OCT 10 -6mol/L可诱导SGC790 1细胞G0 /G1阻滞 ,于加药后 12h开始 ,2 4h最显著 (71.2 9%± 1.2 5 % ,P <0 .0 1vs相应对照组 ) ,36h消失 ;而 2 4h换液、换药组 36h时G0 /G1阻滞依然存在 ,4 8h也消失。G0 /G1阻滞的同时伴S期细胞比例减少 ;亚二倍体细胞比例未见显著改变。结论　OCT可以抑制体外培养的人胃癌细胞株SGC790 1的生长 ,其机制之一是诱导细胞G0 /G1期阻滞。OCT和 5 -FU协同抑制SGC790 1细胞生长。     

反相高效液相色谱法测定苯巴比妥血药浓度

目的 :建立一种快速测定苯巴比妥血药浓度的方法。方法 :采用反相高效液相色谱法 ,以卡马西平为内标 ,测定苯巴比妥血药浓度。色谱柱 :ShimadzushimpackCLC -C18不锈钢柱 (6 0mm× 15 0mm) ,加保护柱 ,流动相为甲醇 水 (6 0∶40 ) ,流速 0 8ml/min ,检测波长 2 5 4nm。结果 :苯巴比妥在 5～ 40mg/L线性良好 (r =0 9999) ,最低检测限为 11 5 7μg/L。苯巴比妥高、中、低 3种浓度的平均回收率分别为 10 0 2 4% ,10 0 2 8% ,99 41% ,RSD分别为 0 7% ,2 7% ,5 8% (n =9)。日内和日间RSD分别为 2 4% ,6 3% ,8 6 %和 5 7% ,4 8% ,7 2 % (n =5 )。结论 :该方法准确、快速、简便 ,可作为苯巴比妥血药浓度监测的常规方法。     

Th1反应及γ-干扰素在幽门螺杆菌疫苗免疫保护中的作用

目的　探讨磷酸胞苷酰寡核苷酸 (CpG ODN)作为幽门螺杆菌 (Hp)疫苗佐剂的作用及Th1反应与γ 干扰素 (γ IFN)在免疫保护作用中的角色。方法　以Hp全菌超声粉碎物 (WCS)为抗原 ,CpG ODN为佐剂经鼻道或口服免疫小鼠 ,采用 5× 10 6CFU和 5× 10 8CFUHp两个菌量攻击小鼠 ,2周及 8周处死小鼠鉴定感染及炎症情况 ,收集小鼠血清、唾液、胃液 ,ELISA法检测血清中IgG、IgG1、IgG2a及IgA水平和唾液、胃液中IgA水平。流式细胞术检测脾细胞内CD+ 4 和CD+ 8T细胞分泌γ IFN和白细胞介素 4 (IL 4 )的水平。结果　当细菌攻击量由 5× 10 8Hp降至 5× 10 6Hp时 ,滴鼻WCS/CpG组保护率由 70 %提高至 90 % ,无免疫对照组的感染率也由 10 0 %降至 80 %。细菌攻击后2周及 8周时 ,滴鼻WCS/CpG ODN组的血清IgG和IgG2a均高于对照组 (P <0 0 5 ) ;CD+ 4 细胞和CD+ 8细胞中的γ IFN水平也均高于其他各组 (P <0 0 5 )。结论　CpG ODN可作为Hp疫苗佐剂成分 ,其免疫保护作用与Th1反应和γ IFN相关。     

无细胞壁细菌的分离培养

目的　观察普通血液培养中变异无细胞壁细菌 (L型细菌 )的生长现象 ,以提高血培养的阳性率。方法　对在普通血液培养过程中瓶底出现轻微暗紫红、上清液微混或瓶壁有少量颗粒状物生长时 ,分别用血浆分离针抽取可疑培养物同时转种于普通血液琼脂培养基、L型增菌培养基及L型琼脂培养基中培养 ,观察其生长情况。结果　从 2 0 0例普通血液培养瓶中分离出各种普通细菌 31例 (15 .5 % ) ,将可疑培养物再用血浆分离针转种于L型细菌液体培养基上又分离出 2 3例L型细菌 ,使原来一般血培养阳性率提高到2 7.0 %。结论　普通血培养过程中L型细菌生长时应及时、仔细观察和转种 ,才能提高L型细菌的检出率。     

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对结缔组织生长因子表达的影响

目的 :在体外培养的新生大鼠心肌成纤维细胞中 ,研究血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及其受体拮抗剂洛沙坦对结缔组织生长因子表达 (CTGF)的影响。方法 :差速贴壁法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞 (CFs)及免疫组化法对其进行鉴定 ,不同浓度的AngⅡ (10 -8、10 -7、10 -6、10 -5mol/L)刺激CFs 4 8h ,再选浓度 10 -6mol/L分别作用 6、2 4、4 8及 72h得出AngⅡ对CTGF表达作用的时量关系 ;再选 10 -6mol/L作诱导浓度 ,与 10 -5mol/L洛沙坦孵育 4 8h ,采用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术测定CFsCTGFmRNA的表达 ,WesternBlot法测定CTGF蛋白的表达。结果 :不同浓度的AngⅡ (10 -8、10 -7、10 -6、10 -5mol/L)作用 4 8h及 10 -6mol/LAngⅡ分别作用 12、2 4、4 8、72h ,AngⅡ以浓度 -时间依赖的方式促进CFsCTGFmRNA及蛋白水平的表达 ;洛沙坦 10 -5mol/L作用4 8h ,与AngⅡ组比较 ,6 5 %以上抑制AngⅡ诱导的CTGFmRNA水平的表达即 (1.4 6± 0 .18)比 (2 31± 0 .2 3) ,(P<0 .0 1) ,蛋白水平上使AngⅡ诱导的CTGF的表达减弱约 73%即 (35 .99± 5 .6 4 )比 (6 8.86± 7 2 7) ,(P <0 .0 1)。结论 :AngⅡ通过AT1受体介导机制上调CFs中CTGF的形成 ,可能是AngⅡ致纤维化通路中的关键环节 ;洛沙坦可能通过抑制CTGF的表达 ,从而延缓     

全自动血培养仪的临床应用及评价

目的评价全自动血培养仪 (BACTEC90 5 0 )临床应用情况。方法对BACTEC90 5 0全自动血培养仪检测的 4 6 8份标本 ,捡出阳性的时间、细菌种类及阳性率进行了评估。结果BACTEC90 5 0最短检出时间 4小时 ,最长 96小时 ,2 4小时以内阳性率为 6 0 .8% ,4 8小时以内阳性率 82 .4 % ,72小时以内阳性率 94 .1% ,细菌种类 12种 ,阳性 10。 9%。结论BACTEC90 5 0无论从出现阳性的时间、检出细菌种类和阳性率均明显高于本室往年传统方法的结果 ,而且操作简便、结果快速、准确。     

鱼藤素对小鼠小胶质细胞BV-2影响的实验研究

目的研究放射增敏剂鱼藤素对小鼠小胶质细胞BV-2的影响。方法 BV-2细胞以5×10^4/mL密度接种到细胞培养板中,加入8个不同浓度鱼藤素干预48 h后测定细胞增殖活力。在加入1×10^-6mol/L鱼藤素后6个时间点上测定细胞增殖活力。1×10^-8mol/L鱼藤素干预48 h,测定上清液中NO水平。结果 5×10^4/mL BV-2细胞以含10%胎牛血清DMEM培养基培养,第48 h达到细胞生长曲线的峰值。在0-1×10^-5mol/L剂量范围内,1×10^-6、1×10^-5mol/L鱼藤素干预48 h后BV-2细胞的增殖活力显著降低;1×10^-6mol/L鱼藤素加入后第24、48、72h等3个时间点上BV-2细胞增殖活力明显降低。1×10^-8mol/L鱼藤素干预48 h后BV-2细胞上清液NO水平提高。结论鱼藤素在一定的浓度时激活小胶质细胞,更高浓度时将导致小胶质细胞损伤甚至死亡。     

金马通络胶囊中东莨菪碱及士的宁成分的定量测定

目的 :建立一种用反相高效液相色谱法检测金马通络胶囊中东莨菪碱及士的宁含量的方法。方法 :用C18ODS柱为固定相。甲醇 :水 (5 8:4 2 ,V/V) (水相含 0 .0 5mol/L醋酸盐缓冲液及 0 .0 0 2 5mol/L十二烷基硫酸钠 )为流动相。检测波长2 2 6nm。结果 :该方法回收率为氢溴酸东莨菪碱 10 0 .3 3 % ,RSD =3 .19% (n =5 ) ;士的宁为 97.0 8% ,RSD =4 .5 1% (n =5 )。结论 :该方法操作简便、快捷、专一、准确性好 ,可用于金马通络胶囊质量控制。     

连续性高容量血液滤过在多脏器功能障碍综合征救治中的应用

目的 :探讨连续性高容量血液滤过 (continuous high volum e hem ofiltration,CHVHF )在多脏器功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)救治中的应用效果。方法 :应用 CHVHF治疗 MODS患者 5 8例 ,采用 FreseniusADM0 8TM/ ABMTM型肾替代治疗床边机 ,血滤器采用 Fresenius聚砜膜 AV6 0 0 S,置换液为 Fresenius4 0 0 8B- on line透析机制备碳酸氢盐置换液 ,置换液输入量 4 0 0 0～ 6 0 0 0 ml/ h,前稀释输入 ,39例 <6 0 L/ 2 4 h,19例 6 0～ 14 4 L/ 2 4 h,血流量 2 5 0～ 30 0ml/ min,每天治疗 8～ 2 4 h,平均 CHVHF(38± 10 .4 ) h。结果 :31例 (5 3.4 % )存活 ,2 7例 (46 .6 % )死亡 ,停止 CHVHF时平均BU N、Scr、CVP均显著降低 (P <0 .0 1) ,平均 Pa O2 、MAP均显著升高 (P <0 .0 1) ,而多巴胺用量显著降低 (P <0 .0 1) ;置换液输入量 6 0～ 14 4 L/ 2 4 h患者存活率显著高于 <6 0 L/ 2 4 h患者 (P <0 .0 5 )。结论 :CHVHF显著改善 MODS患者血流动力学 ,有助于提高生存率 ;CHVHF治疗剂量越大 ,预后越好。     

富铁对HL-60细胞Bcl-2基因表达的影响

目的 :探讨富铁对HL 60细胞Bcl 2基因表达的影响 ,揭示铁促进肿瘤细胞增殖的机制。方法 :体外加入不同浓度的三氯化铁培养HL 60细胞 6h、12h、2 4h、48h ,亲和免疫组化LSAB法检测HL 60细胞Bcl 2基因表达。结果 :Bcl 2表达在 5 0 μmol/L、10 0 μmol/L的三氯化铁作用HL 60细胞 12h、2 4h和 48h时最高 ,与对照组相比有差异 (P <0 0 5 )。结论 :铁可促进肿瘤细胞生长 ,铁诱导Bcl 2表达增高可能是铁促进HL 60细胞增殖的机制之一     

胸片阴性粟粒型肺结核并艾滋病1例

患者 ,男 ,4 0岁。因发热、乏力、纳差、咳嗽、盗汗、消瘦、头晕、听力下降 1月 ,于 2 0 0 2年 7月 12日收入院。患者 5年前有冶游史。查体 :T 39 5℃ ,P 10 8次 /min。消瘦 ,右颈部可触及 3个肿大淋巴结 ,无压痛及波动感 ,大小约 3cm× 3cm左右 ,双肺未闻及音 ,肝区无叩痛、腹部无压痛。血 :WBC 3 6× 10 9/L ,N 72 ,L2 8。ESR 90mm/h ,ALT 16 1U/L ,Na+ 131mmol/L ,Cl 92mmol/L ,PPD、甲丙肝抗体、两对半、肥达反应、TRUST均为阴性 ,血涂片未见疟原虫 ,血培养未见细菌生长。B超肝胆脾未见异常图像 ,心电图、癌谱均正常 ,胸…