西洋参皂苷对缺氧性神经细胞坏死和凋亡的影响

目的:探讨西洋参皂苷(PQLS)对缺氧诱导的胎鼠大脑皮层神经细胞抗凋亡的保护作用。方法:实验分为正常对照组、凋亡阳性组、西洋参皂苷0.025g/L组、0.05g/L组、0.1g/L组、0.2g/L组。采用无血清体外培养SD胚大鼠大脑皮层神经细胞;建立缺氧-复氧性凋亡细胞模型;Trypan blue拒染法、MTT法、Hoechst33342荧光染色法、Annexin V-FITC/PI流式细胞术等观察西洋参皂苷的毒性剂量及对缺氧性神经细胞坏死和凋亡的保护作用。结果:①PQLS在0.05～0.1g/L范围内促进神经细胞增殖较正常对照组提高9.78%～18.89%(P﹤0.01);在缺氧条件下PQLS在0.05～0.2g/L范围内促进神经细胞增殖较凋亡阳性组提高25.62%～37.65%(P﹤0.05～0.01),而在0.05%～0.1g/L(87.09%～91.39%)范围内与正常对照组(100.00%)差异无显著性(P 0.05)。②Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪测定表明,PQLS在0.025g/L～0.2g/L凋亡率(6.13±0.80%～14.47±0.60%)均显著低于凋亡阳性组(28.77±0.61%,P<0.01),但高于正常对照组(2.05±0.17%,P<0.01);而PQLS在0.025g/L～0.2g/L坏死率(2.15±0.17%～5.47±0.21%)均显著低于凋亡阳性组(6.57±0.23%,P 0.01),但高于正常对照组(0.84±0.09%,P<0.01)。③Hoechst 33342荧光染色证明,PQLS在0.025g/L～0.2g/L凋亡率(16.07±0.71%～29.91±1.06%)均显著低于凋亡阳性组(39.47±0.92%,P<0.01),而高于正常对照组(8.51±0.68%,P<0.01)。结论:西洋参皂苷具有促进神经细胞生长,阻止缺氧引起的神经细胞生长抑制、以及坏死和凋亡。     

西洋参皂苷抑制缺氧性神经细胞凋亡机制的研究

目的:探讨西洋参皂苷(PQLS)抑制缺氧诱导的胚鼠大脑皮层神经细胞凋亡的作用机理。方法:正常对照组、凋亡阳性组、西洋参皂苷0.025g/L组、0.05g/L组、0.1g/L组、0.2g/L组;SD胚大鼠原代大脑皮层神经细胞体外无血清缺氧-复氧培养;应用MTT、DNA电泳、免疫细胞化学染色等方法观察西洋参皂苷的适宜剂量、DNA凋亡条带及凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达率。结果:①缺氧条件下PQLS在0.05～0.1g/L促进缺氧的神经细胞增殖较凋亡阳性组提高31.17%～37.65%(P﹤0.01)。②0.05～0.2g/L的PQLS使缺氧的神经细胞DNA只出现3条凋亡条带(凋亡阳性组6条带),且条带浓度也明显降低。③0.025g/L～0.1g/L PQLS显著减少缺氧的神经细胞表达Bax(67.02±1.69%～57.97±2.6%,凋亡阳性组72.19±3.97%,P<0.05～0.01)和Caspase-3(62.27±2.02%～50.34±2.65%,凋亡阳性组68.62±1.40%,P<0.05～0.01);提高缺氧的神经细胞表达Bcl-2(44.22±3.73%～63.76±2.96%,凋亡阳性组35.61±2.16%,P<0.01)和Bcl-2/Bax比值(0.69±0.11～1.11±0.04,凋亡阳性组0.56±0.11,P<0.05～0.01)。结论:西洋参皂苷通过降低缺氧的神经细胞表达Bax、Caspase-3,提高Bcl-2的表达及Bcl-2/Bax比例阻断缺氧诱导的神经细胞凋亡,保护缺氧的神经细胞。     

苦豆碱对氧糖剥夺再灌注损伤后海马神经元的保护作用

目的:探讨苦豆碱对氧糖剥夺再灌注损伤后海马神经元的保护作用。方法:以原代培养的新生大鼠海马神经元为研究对象建立氧糖剥夺再灌注损伤模型,MTT法检测神经细胞的存活率,分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率,激光共聚焦显微镜(CLSM)测定海马神经元细胞内Ca2+浓度和线粒体膜电位水平(MMP),利用hoechst33342检测细胞凋亡率。结果:与氧糖剥夺再灌注损伤组比较,苦豆碱(25,50,100 mg/L)组可显著提高细胞存活率,降低乳酸脱氢酶漏出率,抑制Ca2+浓度升高,苦豆碱(25,50,100 mg/L)组能显著降低线粒体膜电位水平,降低细胞凋亡率。结论:苦豆碱对海马神经元氧糖剥夺再灌注损伤具有明显的保护作用。     

阿魏酸钠对Ang Ⅱ诱导内皮细胞凋亡的抑制作用

目的:研究AngⅡ诱导内皮细胞凋亡作用及阿魏酸钠(SF)的抗凋亡作用和可能机制。方法:将体外培养的猪髂动脉内皮细胞(PIECs)随机分为:对照组、AngⅡ组、SF组、SF+AngⅡ组。倒置显微镜下观察细胞生长状况,MTT法检测PIECs;存活率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡状况和细胞内活性氧(ROS)水平,比色法法测定上清中MDA含量。结果:与对照组比较,AngⅡ组细胞凋亡率、上清中MDA含量及细胞内ROS水平增加(P<0.01),细胞存活率降低(P<0.01)。SF则降低细胞凋亡率(P<0.05)、上清液MDA含量及细胞内ROS水平(P<0.01),增加细胞存活率(P<0.05),但高浓度的SF有一定的细胞毒性。结论:SF可以抑制Ang诱导的内皮细胞凋亡,该作用与SF降低上清中MDA含量和降低细胞内ROS生成有关。     

4′-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究

目的探讨4′-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,呈剂量依赖,作用72h后其增殖抑制率分别为(14.14±0.75)%、(34.34±2.99)%、(61.11±2.99)%(P<0.01);4-MS作用72h后细胞内Ca2 浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。40mg/L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为(2.36±0.19)%、(4.22±2.44)%、(7.34±0.56)%,明显高于对照组(P<0.01)。20、40mg/L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01,明显低于对照组(P<0.01)。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2 浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。     

麝香提取物对大鼠皮层神经细胞炎性损伤的保护作用

目的研究麝香提取物(musk extract,ME)对脂多糖(LPS)诱导大鼠大脑皮层神经细胞炎性损伤的保护作用及其可能机制。方法分别培养新生大鼠大脑皮层神经细胞和星形胶质细胞(AC),使用终浓度为10mg/LLPS及ME18mg/L、36mg/L、72mg/L、144mg/L的分别作用于纯化的星形胶质细胞24h,收集条件培养液(ACM)。在神经细胞培养体系中分别加入ACM,采用MTT法及AO/EB染色法测定神经细胞存活率和凋亡率;ELISA法检测ACM中所含炎症因子的变化。结果 ME18mg/L、36mg/L、72mg/L及144mg/L组的神经细胞存活率(%)分别为52.55±3.52、55.77±2.36、64.89±3.45及73.67±1.80,较模型组(43.62±4.51)均显著提高(P0.05);细胞凋亡率(%)分别为68.11±2.16、44.27±3.68、32.56±2.14及21.89±2.46,与模型组(71.33±3.25)比较,均显著下降(P0.05,P0.01);ME组ACM中IL-6呈指数降低,且均呈剂量依赖性。结论麝香提取物对脂多糖所致神经细胞炎性损伤具有显著的保护作用,以144mg/L浓度最佳,其可能通过减少星形胶质细胞分泌IL-6起作用。     

人参皂苷Rg1对LPS诱导的SK-N-SH细胞株脑啡肽酶表达的影响

目的:探讨人参皂苷Rg1对LPS诱导的SK-N-SH细胞株脑啡肽酶(NEP)表达的影响.方法:应用MTT比色法检测一定剂量LPS(50 mg/L)和不同浓度人参皂苷Rg1(5、10、20 μmol/L)对SK-N-SH细胞存活率的影响,应用RT-PCR观察细胞中NEP表达的变化.结果:50 mg/L的LPS能使SK-N-SH细胞存活率降低,细胞内NEP的表达下降.人参皂苷Rg1能提高LPS处理的SK-N-SH细胞的存活率,使NEP的表达增高.结论:人参皂苷Rg1对LPS造成的细胞毒性具有一定的保护作用,并可对抗LPS对细胞内NEP表达的降低.     

银杏内酯B对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的:探讨银杏内酯B对谷氨酸诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:用2mmol/L谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡建立模型,以不同浓度的银杏内酯B(10、50和250μmol/L)进行保护,MTT比色法检测细胞存活率;Hoechst 33258染色法观察药物作用后细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Fura-2/AM双波长荧光法测定细胞内钙离子浓度;Western blot检测线粒体和胞浆中Cyt C蛋白的表达。结果:2 mmol/L谷氨酸作用SH-SY5Y细胞24 h后细胞存活率为0.721±0.013,与正常组相比明显降低;细胞核固缩裂解,呈凋亡特征性改变;细胞凋亡率为(13.27±0.08)%、细胞内钙离子浓度为359±11 nmol/L,均明显升高。与凋亡组相比,银杏内酯B(10、50、250)μmol/L保护组细胞存活率分别为0.768±0.014、0.819±0.013、0.897±0.010,均明显升高;细胞核核固缩裂解减少,形态有所改善;细胞凋亡率分别为11.33±0.57、7.02±0.47、5.85±0.24;细胞内钙离子浓度为302±9 nmol/L、243±9 nmol/L、186±8 nmol/L,均明显降低;Western blot结果显示,与凋亡组相比银杏内酯B保护组可以显著减少细胞线粒体以及胞浆中Cyt C蛋白的含量。结论:银杏内酯B对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与银杏内酯B降低了细胞内钙离子的浓度及阻断了Cyt C从线粒体释放入胞浆中有关。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注海马细胞Ca~(2 )及线粒体膜电位的影响

目的:观察缺血再灌注后海马区细胞内游离钙离子(Ca2 )、线粒体跨膜电位(Δψm)的变化以及三七总皂苷的保护作用。方法:用大脑中动脉栓塞(MCAO)再通法建立大鼠脑缺血再灌注模型,以荧光染色流式细胞仪检测各实验组海马区细胞内游离Ca2 浓度和线粒体Δψm的变化。结果:与假手术组相比,模型组海马区细胞内游离Ca2 浓度显著升高(P<0.01)、线粒体Δψm显著降低(P<0.01),与模型组相比,三七总皂苷组海马细胞内游离Ca2 浓度显著降低(P<0.01)、线粒体Δψm显著升高(P<0.05)。结论:三七总皂苷能抑制缺血再灌注引起的海马区细胞内Ca2 浓度升高,抑制线粒体Δψm下降,保护海马区细胞线粒体功能,这可能是其抗脑缺血再灌注损伤作用机制之一。     

α常春藤皂苷抗结肠癌增殖作用研究

目的:探讨α常春藤皂苷对结肠癌细胞凋亡、增殖的作用。方法:采用MTT、流式细胞仪、Western Blot检测α常春藤皂苷对结肠癌Lo Vo细胞形态、增殖、周期、凋亡的影响。结果:α常春藤皂苷改变结肠癌Lo Vo细胞形态,α常春藤皂苷4.18 mg/L组、α常春藤皂苷8.37 mg/L组、α常春藤皂苷16.73 mg/L组、奥沙利铂9.23×10-3g/L组、α常春藤皂苷8.37 mg/L+奥沙利铂9.23×10-3g/L组对Lo Vo细胞的抑制率(%)依次为:12.49±2.36,24.02±3.98,51.00±4.50,17.92±2.28,59.66±7.93组间差异显著;空白对照组、α常春藤皂苷4.18 mg/L组、α常春藤皂苷8.37 mg/L组、α常春藤皂苷16.73 mg/L组、奥沙利铂9.23×10-3g/L组、α常春藤皂苷8.37 mg/L+奥沙利铂9.23×10-3g/L组Lo Vo细胞G1期、G2期、S期百分比分别依次为:63.17±0.92,62.32±0.86,61.01±0.74,54.45±0.96,43.80±0.60,45.96±0.68;22.71±0.65,31.27±0.59,22.54±0.51,13.45±0.40,44.54±0.40,44.49±0.61;14.47±0.21,7.59±0.43,16.35±0.44,31.28±0.97,11.58±0.34,9.61±0.20,组内无显著差异。对Lo Vo细胞的凋亡率依次为:5.43±2.13,8.18±0.11,10.80±0.26,12.37±1.27,16.87±1.52,20.55±0.99,与空白对照组相比差异显著。使Lo Vo细胞各组caspase 3的相对表达量均增加,与空白对照组相比差异显著。结论:α常春藤皂苷影响结肠癌Lo Vo细胞形态、改变其周期分布,增加caspase 3表达量,促进其凋亡,抑制其增殖,与化疗药有协同作用。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

腹腔镜诊治不孕症58例分析

目的:探讨腹腔镜诊治不孕症的临床意义和疗效。方法:选取2008年8月—2009年1月入住我院的98名不孕症妇女,将其分为腹腔镜组和经腹手术组,比较两组术后妊娠情况。结果:输卵管粘连Ⅰ～Ⅲ级者,不孕时间要短于输卵管Ⅳ级的患者。腹腔镜组术后妊娠23例,其中临床正常妊娠18例,异位妊娠5例;经腹术组术后妊娠13例,其中临床正常妊娠10例,异位妊娠3例。两组输卵管粘连Ⅰ～Ⅲ级的妊娠率均明显高于Ⅳ级者,差异有统计学意义(P<0.05);两组疗效比较无显著性差异(P>0.05)。结论:腹腔镜诊治不孕症临床疗效确切,值得推广应用。     

肩周炎的经筋病机实质与治疗探讨

[目的]探讨肩周炎的经筋病机实质与治疗方法。[方法]从《黄帝内经》原文及现代相关文献出发,分析经筋与肩关节的生理解剖联系、肩周炎发病机制及治疗方法。[结果]生理上,肩关节与手六经之经筋和足少阳、足太阳经筋相联属;病理上,分为"瘀沫期"、"经筋拘急期"、"筋结病灶形成期",但三病理过程相互杂揉与绞结;治疗上,宜遵循"以痛为俞"、采用粗银质针温针治疗,是解除瘀、沫、筋结病灶的重要手段与方法,临床疗效显著。[结论]认真探讨中医生理、解剖学,有利于中医理论的深入理解及拓展临床治疗思路。     

对中医学科建设与学科带头人培养的思考

通过中医学术发展的历史沿革回顾,提出了中医药学科建设的总体构思,指出要发展一个大的一级学科,首先要有教育,这是发展学科的基础;其次是科研来提高教育水平,并指导临床;再次是临床;三者缺一不可。同时提出了学科带头人应具备的条件及如何培养学科带头人。     

中医方剂学考试改革的探索与实践

传统的闭卷考试不能很好地反映方剂学教学的效果,因此,我们试行了以多种形式相结合的考试改革,考试成绩由笔试、机试、平时3个方面组成。结果大大提高了学生分析问题和解决问题的能力,激发了学生学习的兴趣,提高了教师教学水平,带动了教学改革和教学研究的全面进行。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

针灸治疗椎动脉型颈椎病的取穴规律分析

目的:探寻椎动脉型颈椎病针灸取穴规律。方法:检索CNKI、VIP,建立椎动脉型颈椎病针灸取穴数据库,采用SPSS17.0统计软件统计描述。结果:治疗椎动脉型颈椎病的针灸穴位共计72个,使用频次为1005次;所用腧穴归属为督脉、足少阳胆经、经外奇穴、足太阳膀胱经及足阳明胃经频次最多,其累积频率达82.29%;其中风池穴的频率为19.11%;夹脊穴的频率为17.13%;百会穴的频率为12.3%,三穴累积频率达64.28%。结论:针灸治疗本病,以疏通局部经络,调节阴阳气血,临床选取督脉、足少阳胆经、奇穴以及风池、夹脊、百会三穴治疗最多。