可疑产碳青霉烯酶肠杆菌的耐药性及与β-内酰胺酶的关系

目的观察本地区可疑产碳青霉烯酶肠杆菌的耐药性及与B．内酰胺酶的关系。方法采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测55株可疑产碳青霉烯酶肠杆菌对21种抗生素的药敏情况,以改良Hodge试验进行碳青霉烯酶筛选,以纸片扩散初筛试验、扩散确证试验进行超广谱B-内酰胺酶（ESBLs）表型检查,以头孢西丁三维试验进行头孢菌毒酶（AmpC酶）p-内酰胺酶表型检查,PCR法检测β-内酰胺酶基因表达并进行产物测序。结果55株菌株对青霉素类、头孢菌素类抗生素耐药率高达87％以上,对亚胺培南、美洛培南、丁胺卡那霉素耐药率在30％以下;β-内酰胺酶表型阳性率为74．54％,主要来自产ESBLs＋AmpC酶菌株,其次为单产ESBLs酶和单产AmpC酶菌株;肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶、DHA、CIT、TEM、CTX．M型β-内酰胺酶基因阳性率分别为7．27％、16．36％、27．27％、27．27％、16．36％。结论本地区耐碳青霉烯类抗生素的菌株呈不断增加趋势,目前尚缺乏有效治疗产酶细菌所致感染的方法;菌株耐碳青霉烯类药物的主要原因并非产碳青霉烯酶,而可能为同时产ESBLs＋AmpC酶或存在其他耐药机制。     

头孢西丁耐药肠杆菌科高产AmpC酶的细菌研究

目的 研究头孢西丁耐药肠杆菌科细菌高产头孢菌素酶（AmpC酶）菌株的分离、分布及耐药现状。方法 无重复收集临床分离头孢西丁耐药肠杆菌科细菌86株,酶提取物三维试验检测高产AmpC酶,纸片扩散法测定菌株对12种常用抗菌药物的敏感性。结果 头孢西丁耐药肠杆菌科细菌高产AmpC酶阳性率为23．3％（20／86）,以阴沟肠杆菌最高,达39．4％（13／33）。在常用β-内酰胺类抗生紊中,除亚胺培南和头孢吡肟外,高产AmpC酶菌株的耐药率显著高于非产酶株。结论 细菌高产AmpC酶是对头孢西丁耐药的主要原因之一;高产AmpC酶菌株的多重耐药和交叉耐药现象相当严重,应高度重视高产AmpC酶细菌的监测与控制。     

856株下呼吸道感染肠杆菌科细菌的ESBLs检测及相关分析

目的分析产ESBLs的下呼吸道感染的常见肠杆菌科细菌的耐药性及耐药特点,以及患者感染产ESBLs菌的危险因素,为临床用药提供参考。方法对我院2007年2月～2008年8月分离的下呼吸道感染的肠杆菌科细菌用梅里埃ATB152微生物分析仪进行鉴定,检测ESBLs表型和药物敏感试验。结果在检测的肠杆菌科细菌中,ESBLs总阳性率为41．3％,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产酶率分别为42．0％、52．0％和35．1％,产ESBLs的菌株对除碳青酶烯类之外的抗菌药物耐药率明显高于非产酶株,其中多数差异有统计学意义（P〈0．05）。结论感染产ESBLs菌的危险因素为长期使用三代头孢菌素、使用免疫抑制剂、ICU患者、做过导尿插管、动过大手术、患慢性消耗性疾病的患者。治疗产ESBLs菌引起的感染,应选用亚胺培南、或β-内酰胺酶抑制剂的复合物,慎用三代头孢。     

老年感染性疾病患者中肠杆菌科细菌产AmpC β-内酰胺酶菌株的临床分析

目的 了解产AmpC酶肠杆菌科细菌在老年感染性疾病患者中的感染情况，指导临床合理使用抗生素。方法 对233份老年患者的各类标本中分离出的肠杆菌科细菌进行分析鉴定，采用酶提取物三维试验检测产AmpC酶菌株，纸片扩散法测定产AmpC酶菌株对12种常用抗菌药物的敏感性。结果 检出产AmpC酶菌株20例，总检出率为8．6％，以阴沟肠杆菌检出率最高，达到35．1％(13／37)。产AmpC酶菌株对亚安培南、头孢吡肟较为敏感，其中对亚安培南的敏感率为100％；对第3代头孢菌素类抗生素及氨曲南有较高耐药性，耐药率在85％～100％之间。结论 产AmpC酶菌株对常用抗菌药物的耐药性已相当严重，应重视产AmpC酶细菌的监测与控制。     

96株大肠埃希菌耐药性及其产ESBLs、AmpC酶菌株基因型检测

目的 了解大肠埃希菌耐药现状及其及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpCβ-内酰胺酶（AmpC酶）菌株基因型,以指导临床医师合理使用抗菌药物。方法自本院尿路感染患者标本中分离大肠埃希菌96株,采用确证试验和改良三维试验检测其ESBLs、AmpC酶表达情况,用K-B法测定其对亚胺培南等16种抗菌药物的敏感性,用PCR法检测TEM、SHV、PER、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX—M-3群、DHA和ACT-1基因型分布情况,用接合转移试验了解耐药基因转移方式。结果96株大肠埃希菌单产ESBLs30株,同时产ESBLs和AmpC酶4株,单产AmpC酶2株;产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟四种抗生素耐药率达到100％,而对左氧氟沙星、复方新诺明和呋喃妥因的耐药率亦〉80％,对亚胺培南和美罗培南均敏感;ESBLs基因型以CTX—M和TEM型为主,AmpC酶基因为DHA型,两酶能通过接合转移方式将质粒携带的耐药性传递至受体菌。结论大肠埃希菌所致感染对碳青霉烯类药物较为敏感;临床应及时了解本地区产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌的耐药表型和基因型,以指导临床合理使用抗生素、延缓细菌耐药性产生、控制耐药菌株播散和流行。     

老年患者医院感染前五位常见革兰阴性杆菌ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶分析

目的了解华东医院老年患者前5位常见革兰阴性杆菌产酶类型,为指导临床合理选用抗菌药物提供依据。方法收集2011年9月-2012年8月分离自老年医院感染患者的前5位常见的耐头孢西丁的革兰阴性杆菌,用改良的三维试验检测并分析革兰阴性杆菌的产酶类型。结果前5位常见的革兰阴性杆菌分别为鲍曼不动杆菌（88株）、铜绿假单胞菌（61株）、阴沟肠杆菌（42株）、产气肠杆菌（21株）和肺炎克雷伯菌（15株）,共计227个菌株;AmpCβ-内酰胺酶（简称AmpC酶）阳性率9．25％（21株）,ESBLs阳性率14．10％（32株）,同时产AmpC酶和ESBLs酶（简称SSBLs）的阳性率12．78％（29株）,其他水解酶阳性率28．19％（64株）。结论老年医院感染患者前5位常见细菌的产酶率高,耐药现象严重,应加强耐药性监测和控制。     

院内产ESBLs肠杆菌科下呼吸道感染临床分析

目的分析医院内产ESBLs肠杆菌科细菌的下呼吸道感染的常见的耐药性及耐药特点及其危险因素。方法对我院2008年1月～2009年6月分离的下呼吸道感染的肠杆菌科细菌用K-B纸片法和双纸片协同实验,检测ESBLs表型和药物敏感试验。结果在检测的138株肠杆菌科细菌中,ESBLs总阳性率为35.5%,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的产酶率分别为18.1%和17.4%。产ESBLs的菌株对三代头孢菌素普遍耐药,耐药率明显高于非产酶株,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论感染产ESBLs菌的危险因素有多脏器损害、使用三代头孢菌素、入住ICU、有介入治疗等患者。治疗产ESBLs菌引起的感染,应根据药敏结果 ,避免选择如头孢噻肟等易耐药三代头孢。     

1831株宋内志贺菌耐药性调查及其产ESBLs的研究

目的了解分离自腹泻患者的1831株宋内志贺菌的流行趋势及耐药情况,探讨宋内志贺菌多重耐药机制。方法采用志贺菌及沙门菌琼脂培养基培养及K—B法检测14种抗生素的耐药率。多重耐药菌用纸片确认试验检测产超广谱β内酰胺酶（extended-spectrum β-laetamases,ESBLs）,改良三维试验检测ESBLs和AmpC β内酰胺酶（AmpC β-lactamase,AmIpC酶）。结果1831株宋内志贺菌感染腹泻患者中,男女比例为1．25：1。高发季节为7～9月。1～20岁发病人数占总发病人数的71．0％。宋内志贺菌对复方磺胺甲嗯唑、氨苄西林和头孢曲松的耐药率较高,分别达87．7％、23．0％和9．5％,且增高趋势明显;对氟喹诺酮类,头孢吡肟、头孢美唑、氯霉素、磷霉素和庆大霉素的耐药率较低,明显低于头孢曲松、头孢噻肟（P〈0．05）。43株多重耐药菌均为ESBLs阳性株,未发现产AmpC酶株。结论在北京地区,宋内志贺菌感染腹泻患者发病年龄以青少年为主。其存志贺菌属感染的比例中有增高的趋势,对头孢曲松、头孢噻肟、复方磺胺甲嗯唑、氨苄西林的耐药率较高且有上升趋势。宋内志贺菌耐头孢菌素者以产ESBLs为主。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒中AmpC酶基因型的检测

目的探讨台州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株质粒介导的AmpC酶基因型流行状况。方法应用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按NCCLS推荐的确证试验测定β-内酰胺酶(ESBLs);采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并通过酶粗提物头孢西丁三维试验、接合试验和PCR测序等实验分析该菌株的基因型及基因表型。结果299株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率为19.73%(59/299),AmpC酶纸片扩散法筛选阳性率为12.04%(36/299),且36株AmpC酶筛选阳性菌株均为ESBLs阳性株;该菌株中有15株经三维试验证实为AmpC酶阳性,阳性率5.02%(15/299);15株产AmpC菌经接合试验得到15株接合子,经PCR及测序证实与原菌株表型基本一致。质粒型AmpC基因中13株为CIT型,2株为DHA型。结论台州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中已出现质粒携带的AmpC基因,基因型以CIT型为主,其次是DHA型。AmpC基因可能与编码ESBLs的基因存在于同一质粒上,编码的AmpC酶的质粒可在细菌间传递。     

铜绿假单胞菌耐药性与产β内酰胺酶的关系

目的分析临床分离的93株铜绿假单胞菌的耐药性与β内酰胺酶类型的关系。方法采用K-B法测定亚胺培南等16种抗菌药物对93株铜绿假单胞菌的体外抗菌活性；采用等电聚焦电泳(isoelectric focusing，IEF)、三维试验、2-巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应(PCR)分析β内酰胺酶类型。结果阿米卡星敏感性最高为82．8％，其次依次为头孢吡肟(81．7％)、头孢哌酮／舒巴坦(81．7％)、头孢他啶(80．6％)、美罗培南(77．4％)、亚胺培南(71．0％)。三维试验结果表明，14株(15．1％)产碳青霉烯酶，其中2株产金属酶；15株(16．1％)产AmpC酶，其中2株同时产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)。等电聚焦电泳显示产AmpC的细菌均具有9．0的条带；19号和54号菌株有一个6．3的条带。2．巯基丙酸抑制试验筛选金属酶2株阳性，与三维试验结果相符。设计金属酶VIM-2特异性引物，PCR反应结果阳性，经克隆测序证实为VIM-2型金属酶。结论铜绿假单胞菌感染中产B内酰胺酶较常见，其中产碳青霉烯酶和AmpC酶占一定比率，是造成临床上铜绿假单胞菌对碳青霉烯类和头孢菌素第3、4代耐药的主要原因。     

上海部分地区肠杆菌科细菌产超广谱β内酰胺酶情况及 …

目的 了解上海地区肠杆菌科细菌产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）的情况;比较产ＥＳＢＬｓ菌与非产ＥＳＢＬｓ菌对１１种抗生素的耐药率。方法 收集１９９９年３月￣１９９９年１０月上海地区４家医院分离的肠杆菌细菌１０２６株,用双纸片协同扩散法检测ＥＳＢＬｓ,用Ｋｉｒｂｙ－Ｂａｕｅｒ琼脂扩散法作药敏。结果 １０２６株肠杆菌科细菌中,共检出产ＥＳＢＬｓ菌３５２株,检出率为３４．３１％,其中肺炎克雷伯菌为３７     

产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药性及RAPD分型分析

目的了解医院感染阴沟肠杆菌的现状、耐药与流行状况。探讨产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药机制与基因分型。方法细菌的药敏试验采用K-B法;产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶检测分别采用双纸片确证试验和三维试验;基因分型采用随机扩增多态性DNA（RAPD）法。结果60株阴沟肠杆菌中产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶分别为23株和32株,产新型β-内酰胺酶株14株。RAPD将60株阴沟肠杆菌分为7种株型。其中Ⅰ、Ⅱ型、Ⅲ型占68.3%,是主要的流行株。产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌对11种常用抗生素的耐药率为21.3%～100%。结论医院感染阴沟肠杆菌对不同抗生素具有较高的耐药性,不同产酶类型对抗生素的耐药性不同。产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的出现与流行是阴沟肠杆菌多重耐药与高耐药的重要原因。     

2000年武汉地区产超广谱β-内酰胺酶菌种的分布及药敏分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的细菌分离、分布及对抗生素的敏感性。方法 用APl或V1TEK-AMS系统(Bio’Merieux，法国)鉴定菌种，用NCCLS推荐的初筛和确证法检测产ESBLs的细菌，并用K-B法测定其对14种抗生素的敏感性。结果 2000年武汉地区的269株大肠埃希菌、202株肺炎克雷伯菌、149株阴沟肠杆菌、67株费劳地枸椽酸杆菌、43株产酸克雷伯菌中：ESBLs的检出率分别为40．9％、29．2％、20．1％、29．9％、和23．3％。产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南全部敏感，产ESBLs的大肠埃希菌对阿米卡星的耐药率为22．4％，对其它抗生素有不同程度的耐药。结论 产ESBLs的菌株集中在肠杆菌科菌中，以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、费劳地枸椽酸杆菌的ESBLs产出最高。阴沟肠杆菌、产酸克雷伯菌ESBLs的产出应引起重视。治疗其感染时应首选亚胺培南。     

Plasmid-mediated Extended-spectrum beta-Lactamases in Organisms Other Than Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli: A Hidden Reservoir of Transferable Resistance Genes

Conclusions Resistance due to AmpC β-lactamases and ESBLs in gramnegative bacillary pathogens is a growing and important problem and is tied to extensive use of extended-spectrum cephalosporins The emergence of these β-lactamases is then amplified by spread of resistant clones or resistant genes among patients within institutions or among patients who move between institutions within a region. Genes encoding β-lactamases are frequently linked to resistance genes for other classes of antibiotics. Thus, use of any one class of antibiotic may select for emergence of resistance to another. Treatment of infections caused by these multidrug-resistant pathogens is often problematic. One strategy to circumvent β-lactamase production has been use of β-lactam/β-lactamase inhibitor combinations, but AmpC β-lactamases and hyperproduction of ESBLs evade this therapeutic strategy. Use of carbapenems and cefepime, which are the most stable of all β-lactam antibiotics to hydrolysis by ESBLs and AmpC β-lactamases, can be expected eventually to select for emergence of resistance to these drugs as well. Traditional isolation precautions that include use of gloves and gown have been shown to be effective during contact with the patient infected or colonized with ESBLproducing K. pneumoniae or E. coli. However, if infection control efforts are directed only at those isolates that the laboratory is capable of identifying as ESBL-producers, the presence in an institutional setting of undetected plasmidencoded ESBLs in Enterobacteriaceae, other than K. pneumoniae and E. coli, will likely be an epidemiologic hazard. A patient infected with these organisms is a hidden reservoir of plasmid-encoded resistance genes that can spread among different species of Enterobacteriaceae. Development of rapid assays to detect the presence of these resistance genes would be a major asset. Control measures that may be effective include early detection of ESBLs in any Enterobacteriaceae, especially Enterobacter species or P. aeruginosa; universal glove use and hand hygiene; cohorting of colonized or infected patients; implementation of control measures simultaneously in all health care facilities linked by patient transfers; and of greatest importance, control of unnecessary and inappropriate antibiotic use.     

86例肝移植术后抗菌素使用的合理性分析

目的 分析肝移植术后细菌性感染的特征、抗菌素使用与细菌性感染之间的关系,评价肝移植术后抗菌素使用的合理性,探讨预防高水平耐药细菌性感染的措施. 方法回顾性分析86例肝移植术后感染的主要病原菌、抗菌素使用量,采用限定日剂量、用药频度、药物利用指数评价抗菌素使用的合理性,运用三维试验检测革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶、AmpC β-内酰胺酶情况.结果 肝移植术后感染主要病原菌为粪肠球菌、阴沟肠杆菌、真菌,大肠杆菌,术前抗菌素使用率为83.7%,以单一抗菌素使用为主,术后抗菌素使用率达100.0%,以二联、三联抗菌素使用为主,抗菌素使用量居前3位为头孢菌素、含酶抑制剂复合抗菌素与青霉素类抗菌素,药物利用指数大于1.1的抗菌素包括氨苄西林、替考拉林,革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶、AmpCβ-内酰胺酶分别为43.3%,31.8%,同时产两种酶的细菌占21.3%. 结论肝移植术后细菌性感染发生率高,抗菌素使用量大,频率高,抗菌素使用基本合理,易发生高耐药性细菌性感染,预防高耐药性细菌性感染十分重要.     

细菌性痢疾流行特点及志贺菌耐药性研究

目的研究近年来肠道门诊细菌性痢疾流行概况及志贺菌耐药特点,为细菌性痢疾临床治疗和预防控制提供依据。方法采用志贺菌及沙门菌琼脂培养基培养,可疑菌株经VITEK-32细菌鉴定仪及血清凝集鉴定到群,K-B法检测抗菌药物的耐药性,纸片确认试验检测产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,三维试验检测AmpCβ-内酰胺酶（AmpC酶）。结果 279例细菌性痢疾感染患者主要以宋内志贺菌（201株,占72.4%）和福氏志贺菌（76株,占27.2%）感染为主,且患者主要集中在0～11岁年龄段,占总感染率的71.3%（199/279）,高发季节为7-11月。药敏结果显示,志贺菌对氨苄西林、哌拉西林和复方新诺明的耐药率较高,均〉60%;对环丙沙星和左旋氧氟沙星的耐药率较低,均〈40%,未发现耐哌拉西林/他唑巴坦和亚胺培南的志贺菌。151株志贺菌纸片确认试验为产ESBLs阳性菌株,占54.1%（151/279）;未发现AmpC酶阳性者。结论我院肠道门诊细菌性痢疾以感染宋内志贺菌和福氏志贺菌的婴幼儿为主,且宋内志贺菌有增高趋势,2种志贺菌对部分种类的抗菌药物药敏性差别较大,临床医师应根据菌群鉴定及药物敏感试验结果合理选择抗菌药物。     

产气肠杆菌连续分离株的耐药性及β-内酰胺类抗生素耐药机制的研究

目的 探讨临床连续分离的产气肠杆菌耐药性及耐碳青霉烯类药物菌株对β-内酰胺类药物耐药的主要机制。方法 用Vitek2-Compact仪对临床连续分离的240株产气肠杆菌进行鉴定和常规药敏试验,并筛选出耐碳青霉烯类药物的菌株;用琼脂稀释法测定其对碳青霉烯类药物的MIC值;用改良的三维试验方法分别检测耐药菌株的ESBLs与AmpC酶;改良Hodge试验法检测碳青霉烯酶;用PCR扩增法检测3种β-内酰胺酶的耐药基因;结果 240株产气肠杆菌对23种常用抗生素的耐药率在3.8%～100%之间,最高为头孢西丁(100%)、最低为亚胺培南(3.8%);筛选出10株耐碳青霉烯类产气肠杆菌;三维试验10株菌ESBLs 及AmpC酶均为阳性,Hodge试验阳性7株。PCR结果示,携带blaKPC基因7株;携带blaCTX-M基因7株,携带blaSHV基因2株;携带blaDHA基因6株,携带blaACT/MIR型ampC基因4株; 16SrRNA基因定量确定ampC基因的表达增加的3株。结论 产气肠杆菌对临床常用抗菌药物具有较高的耐药性,其主要耐药机制为产碳青霉烯酶、ESBLs与AmpC酶。