胰岛素样生长因子-1对成骨细胞增殖影响的实验研究

目的：研究不同浓度胰岛素样生长因子－1（IGF－1）对兔成骨细胞增殖的影响。方法：采用组织块细胞培养技术进行兔成骨细胞分离培养,取第2代成骨细胞分别与0．1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,20ng/mlIGF-1培养,培养24、36小时后行四唑盐比色法检测细胞增殖情况。结果：IGF－1与成骨细胞培养24、36小时,经MTT法检测,不同浓度IGF－1与对照组比较,有显著性差异（P＜0．01）。IGF－1浓度为0．1、1、10ng/ml,各组之间相比存在显著性差异（P＜0．05）,结论：IGF－1对成骨细胞有明显促进增殖作用,在0．1－10ng/ml范围,存在浓度的依赖性。     

细胞因子在支气管上皮细胞一氧化氮产生中作用的研究

目的 探讨诱导气道上皮细胞NO产生的分子机制。方法 采用培养的人支气管上皮细胞系研究了TNF－α及IL－1β对气道上皮细胞NO终末产物硝酸盐和亚硝酸盐产生的影响。结果 培养的支气管上皮细胞到达单层时加入TNF－α和IL－1β，其硝酸盐及亚硝酸盐水平均较对照组明显增高（P＜0.001）。TNF－α浓度5μg/ml和IL－1β浓度10μg/ml时，刺激气道上皮细胞NO产生达高峰。时间曲线研究发现TNF－α1和L－1β刺激气上皮细胞产生NO的作用随时间增加而增强，在3小时达高峰。结论 研究表明气道上皮细胞是气道内源性NO产生的主要细胞之一，TNF－α和IL－1β在气道上皮细胞NO产生中起重要作用。     

细胞因子在气道上皮细胞iNOS表达中的作用研究

目的：探讨气道上皮细胞表达诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS)的能力及炎性细胞因子在气道上皮细胞一氧化氮（NO）产生中的调节作用。方法：取原代培养的大鼠气道 上皮细胞用IL－1β(10ng/ml)或TNF－α（5ng/ml)处理16小时，而后用特异性引物RT－PCR研究iNOS mRNA的表达，用特异性抗iNOS单克隆抗体免疫细胞化学方法研究iNOS蛋白的表达。NO的终末产物硝酸盐及亚硝酸盐水平的测定采用改良Griess法。结果：RT－PCR显示，经IL－1β及TNF－α处理16小时的大鼠气道上皮细胞表达iNOS mRNA。免疫组织化学提示，IL－1β及TNF－α可诱导大鼠气道上皮细胞iNOS蛋白的表达并刺激NO产生，其硝酸盐及亚硝酸盐水平较正常对照组增高（P＜0．01）。结论：气道上此细胞具有表达iNOS的能力。细胞因子IL－1β及TNF-α可诱导大鼠气道上皮细胞iNOS的表达及NO产生。     

TNF-α及sTNFR I对子宫内膜异位症在位内膜基质细胞的作用

目的：探讨肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor，TNF—α）和可溶性肿瘤坏死因子受体（soluble TNFRI，sTNFRI）对体外培养的子宫内膜异位症（Endometriosis）患者在位内膜基质细胞的影响，为子宫内膜异位症的生物学治疗提供新思路。方法：对EMS患者的在位子宫内膜基质细胞进行体外培养，分别用不同浓度的TNF—α（0、0．1、1．0、10．0和100．0ng／m1）或者同-浓度TNF—α（1ng／ml）培养不同时间（4、8、12、24、48和72h）或者TNF—α（1ng／m1）和sTNFRI（2μg／m1）对基质细胞进行刺激并收集细胞上清液，利用双抗体夹心ELISA检测细胞培养上清液中IL-6、基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinases，MMP-3）的水平。结果：TNF-α可促进体外培养的EMS子宫内膜基质细胞IL-6、MMP-3的分泌，而且IL-6、MMP-3浓度与TNF—α之间存在剂量、时间依赖关系（P〈0．05），而sTNFRI具有抑制TNF—α的作用。结论：TNF—α在EMS的发病机制中发挥重要的作用，其对EMS患者子宫内膜基质细胞的促黏附、侵袭、增殖等作用可能是通过促进IL-6、MMP-3的分泌来完成的；sTNFRⅠ有望用于EMS生物学治疗。     

硫酸多糖916对细胞因子和H2O诱导ECV304细胞产生一氧化氮的影响

目的：研究硫酸多糖916（PS916）对TNFα、IL-1β和H2O2诱导ECV304细胞产生一氧化氮（NO）的影响。方法：用Griess试剂测定ECV304细胞产生的NO，用MTT法测定细胞的增殖，用荧光法测定NO合酶的活性。结果：40ng/mlTNFα和40ng/mlIL-1β使ECV304细胞NO产生下降，0.1mmol/L H2O2使NO的产生增加。PS916剂量依赖性增加TNFα、IL-β诱导的ECV304细胞NO的产生，降低H2O2诱导ECV304细胞产生的NO。TNFa和H2O2抑制ECV304细胞的增殖，而IL-1β对ECV304细胞的增殖没有明显影响。PS916剂量依赖性的抑制TNFα和H2O2的作用，增加存活细胞数。在体外，PS916对细胞的NO合酶无明显的影响。结论：PS916在体外实验中对细胞因子和H2O2引起的ECV304细胞损伤有拮抗作用，对细胞表现出明显的保护作用。     

MCP-1诱导的肾小管上皮-间充质细胞转化与整合素连接激酶表达变化的关系

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）诱导体外培养的肾小管上皮细胞转分化的作用及其与细胞整合素连接激酶（ILK）表达变化的关系。方法体外培养的HKC,以未处理的HKC为阴性对照,以8ng／mlTGF-81处理的HKC为阳性对照,以不同浓度的MCP-1（0．1、1．0、10、100ng／m1）处理细胞,或以同一浓度的MCP-1（1ng／ml）在不同时间点（0h、12h、24h、36h、48h、72h）处理细胞。用半定量RT-PCR方法测定各组HKC细胞α—SMA mRNA的表达,Western blot方法测定各组HKC细胞α-SMA及ILK表达。在上述实验基础上进一步观察MEK抑制剂（PD98059,10μmol／L）,p38MAPK抑制剂（SB203580,5／μmol／L）和ROCK抑制剂（Y27632,500μmol／L）对HKC细胞ILK表达的影响。结果MCP-1（0．1、1．0ng／m1）作用后HKC细胞α-SMA mRNA和α—SMA、ILK蛋白表达显著高于阴性对照组（P＜0．01）,但低于阳性对照组（P＜0．01）;其中以1．0ng／ml MCP-1组作用后α—SMAmRNA和α—SMA、ILK蛋白表达水平增高更为显著（P＜1．001）。1．0ng／ml MCP-1作用后细胞α-SMA mRNA和α-SMA、ILK蛋白表达在0-48h内逐渐增加,48h达最高峰（P＜0．01）,72h时呈下降趋势。分别加入阻断剂PD98059、SB203580和Y27632后,HKC细胞ILK蛋白表达水平与MCP-1单独作用无显著性差异（P＞0．05）。结论MCP-1可诱导肾小管上皮细胞转分化并呈时间浓度依赖性,该作用可能与MCP-1上调ILK的表达有关;本研究未发现MCP-1上调ILK的信号传导途径与MEK1、p38MAPK、ROCK途径有关。     

肿瘤坏死因子-α对人脐静脉内皮细胞中组织蛋白酶K表达的影响

目的：观察不同浓度肿瘤坏死因子-α（ TNF-α）和不同TNF-α作用时间对人脐静脉内皮细胞（ HUVEC ）中组织蛋白酶K（Cat K）表达的影响。方法取对数生长期HUVEC进行实验。将HUVEC分为正常对照组、0．1 ng／ml TNF-α组、1 ng／ml TNF-α组、10 ng／ml TNF-α组、100 ng／ml TNF-α组,分别采用DMEM培养基、0．1 ng／ml TNF-α、1 ng／ml TNF-α、10 ng／ml TNF-α、100 ng／ml TNF-α作用24 h。另取HUVEC分为对照组、TNF-α6 h组、TNF-α12 h组、TNF-α24 h组、TNF-α48 h组,对照组DMEM培养基作用24 h,其他组采用10 ng／ml TNF-α作用相应时间。检测各组HUVEC 中的Cat K mRNA和蛋白的表达情况。结果与正常对照组比较,不同TNF-α浓度组的Cat K mRNA和Cat K蛋白表达水平均升高（P＜0．05）。0．1 ng／ml TNF-α组、1 ng／ml TNF-α组、10 ng／ml TNF-α组 Cat K mRNA 和 Cat K 蛋白的表达水平依次增高（P＜0．05）,100 ng／ml TNF-α组Cat K mRNA和Cat K蛋白表达水平较10 ng／ml TNF-α组下降（P＜0．05）。与对照组比较,TNF-α各作用时间组Cat K mRNA和Cat K蛋白的表达水平增高（P＜0．05）;TNF-α6 h组、TNF-α12 h组、TNF-α24 h组Cat K mRNA和Cat K蛋白的表达水平依次增高（P＜0．05）;TNF-α48 h组Cat K mRNA和Cat K蛋白的表达水平较TNF-α24 h组明显下降（P＜0．05）。结论在一定作用浓度及作用时间内,TNF-α可以呈剂量和时间依赖性刺激HUVEC中Cat K表达。 TNF-α可能通过促进Cat K的表达促进动脉硬化的发生。     

血清和腹腔液中IL-6、TNF-α及CA125与子宫内膜异位症关系探讨

目的探讨IL-6、TNF-α及CA125在子宫内膜异位症患者血清和腹腔液中水平及其关系,寻找可以对疾病的发展进行监测较为准确而快捷的途径和方法．方法分别采用放射免疫法及免疫放射法测定内异症患者（内异症组）和对照组的血清及腹腔液中IL-6、TNF-α、CA125的浓度,并把内异症患者按r-AFS分期法分为Ⅰ-Ⅳ期,其中Ⅰ、Ⅱ期纳为1组,Ⅲ、Ⅳ期纳为2组．结果（1）内异症组血清中IL-6（207．91±40．24）pg／mL、TNF—α（1．28±0．55）ng／mL及CA125（65．56±49．32）U／mL的浓度分别明显高于对照组血清中IL-6（178．62±69．79）pg／mL、TNF-α（0．92±0．16）ng／mL及CA125（39．82±22．64）U／mL的浓度,各组比较均有统计学差异（P〈0．05）．（2）内异症组腹腔液中IL-6（208．87±44．87）pg／mL、TNF-α[（1．32±0．17）ng／mL的浓度分别明显高于对照组腹腔液中IL-6（164．12±41．33）pg／mL、TNF—α（1．08±0．16）ng／mL的浓度,各组比较均差异有统计学意义（P〈0．05）,而内异症组腹腔液中CA125的浓度（243．43±161．04）U／mL与对照组的浓度（166．18±65．72）U／mL比较差异无统计学意义（P〉0．05）．（3）内异症组中1组血清IL-6（202．90±45．63）pg／mL、TNF—α（1．30±0．18）ng／mL及CA125（61．54±39．32）u／mL的浓度分别与2组血清IL-6（210．60±37．66）pg／mL、TNF-α（1．35±0．13）ng／mL及CA125（71．60±62．36）U/mL的浓度比较均差异无统计学意义（P〉0．05）．（4）内异症组中1组腹腔液IL-6（204．58±33．65）pg／mL、TNF—α（1．18±0．11）ng／mL及CA125（148．30±40．22）U/mL的浓度分别与2组腹腔液IL-6（210．22±48．60）pg／mL、TNF-α[（1．47±0．93）ng／mL及CA125（173．73±77．12）U/mL的浓度比较差异均无统计学意义（P〉0．05）．结论内异症患者血清或腹腔液中TNF—α、IL-6及CA125与内异症的发生、发展     

丹参抗严重烧伤早期中性粒细胞-内皮细胞粘附机理的研究

目的：研究丹参对兔严重烧伤早期，中性粒细胞（PMN）与内皮细胞（EC）粘附的作用及对血浆肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的影响。方法：24只日本大耳兔，建立兔30％Ⅲ度烧伤模型，随机分为丹参组和生理盐水组。分别于烧伤后即刻，2、4、8、16、24、48h，取血分离获得PMN，与体外培养的兔血管EC作用测定PMN－EC的粘附率，并测定各时点血浆TNF－α值。结果：烧伤后即刻生理盐水组与丹参组粘附率均升高，生理盐水组伤后4h达高峰，丹参组2、4、8、16、24、48h各时点的粘附率均低于生理盐水组（P＜0．05）。生理盐水组于伤后2hTNF－α开始升高，8h达高峰，48h仍高于正常，丹参组2、4、8、16、24、48h各时点的TNF－α的值低于生理盐水组（P＜0．05）。结论：丹参能降低严重烧伤后血浆TNF－α的水平，进而抑制PMN－CE粘附，改善微循环及减轻组织病理损伤。     

肿瘤坏死因子在刀豆蛋白A诱导的肝损伤中的作用

利用刀豆蛋白A（ConA）诱导小鼠建立肝损伤模型,通过检测血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、观察光镜和电镜下肝组织病理学变化评价肝损伤,研究了抗鼠TNF－α单克隆抗体对该肝损伤模型的影响。结果发现,模型组血浆TNF－α含量（0．19±0．06ng／ml）,明显高于正常对照组（0．00±0．00ng／ml,P＜0．01）,且血浆TNF－α含量与肝损伤程度一致。肝损伤早期病理变化突出表现为肝细胞凋亡,抗鼠TNF－α单抗组血浆TNF－α含量（0．00±ml）明显低于模型组（P＜0．01）,肝组织学检查无肝损伤表现,显示抗鼠TNF－α单抗对该模型具有保护作用,表明ConA可诱导小鼠发生肝损伤,TNF－α起重要的介导作用,细胞调亡可能为ConA造成肝细胞死亡的一种重要机制。     

磨损颗粒刺激人单核细胞thp-1分泌TNF-α及其诱导成骨细胞凋亡作用

[目的]研究磨损颗粒刺激单核细胞thp-1后,细胞分泌TNF含量和刺激后条件培养基引起成骨细胞的凋亡。[方法]L929细胞测活和ELISA方法检测单核细胞TNF-α的分泌和分泌的量;TUNEL方法检测磨损颗粒条件培养基对成骨细胞的凋亡作用。[结果]不同种类磨损颗粒加入thp-1后TNF-α的结果用方差分析比较, 3组数据之间有显著性差异(P<0．05)。将不同颗粒的100 ng／ml组和10 ng／ml组分别两两比较,两组之间结果有显著性差异(P<0．05),100 ng／ml比10 ng／ml TNF值高。[结论]磨损颗粒PE、Co-Cr-Mo、Ti-6Al-4V刺激体外培养单核细胞thp-1分泌TNF-α,3种磨损颗粒之间有显著差异(P<0．05)。磨损颗粒PE、Co-Cr-Mo、Ti-6Al-4V刺激单核细胞thp-1的条件培养基可以引起体外培养成骨细胞凋亡。     

急性胰腺炎急性期血清TNF-α、IL-6和IL-10变化的实验研究

目的 研究急性胰腺炎急性期血清TNF－α、IL－6和IL－10的变化。方法 分别以1％和5％牛磺胆酸钠（0．1ml/100g)胰胆管注射建立急性水肿性胰腺炎（AEP）和急性坏死性胰腺炎（ANP）模型。雄性SD大鼠48只随机平均分为Sham(假手术）组，AEP组，ANP组3组。分别于造模后3h,6h处死8只动物，分别观察血清TNF－α、IL－6和IL－10的变化。结果 ANP组和AEP组血清TNF－α、IL－6和IL－10显著升高（均P＜0．001）。造模后6h的血清TNF－α，3h和6h的血清IL－6，IL－10在ANP组均较AEP组为高（分别P＜0．05，P＜0．001，P＜0．05）。ANP组血清TNF－α、IL－6水平在造模后6h比3h为高（均P＜0．05）。结论 在急性胰腺炎病程中细胞因子（TNF－α、IL－6，IL－10）起了重要的作用。IL－6有助于早期判断胰腺坏死。     

Exendin-4对肿瘤坏死因子-α诱导的单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的观察exendin-4对大鼠肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、纤维连接蛋白（FN）表达的影响。方法试验分
组：对照组、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）组（10 ng/ml）、TNF-α（10 ng/ml）+E1 组（1 nmol/L exendin-4）、TNF-α（10 ng/ml）+E5 组
（5 nmol/L exendin-4）、TNF-α（10 ng/ml）+E10组（10 nmol/L exendin-4）。收集24 h细胞,提取RNA,采用实时荧光定量检测细
胞内MCP-1 mRNA的表达;分别在24、48 h 收集各组细胞培养上清液,采用ELISA检测培养细胞上清中MCP-1、FN的浓度。
结果孵育24 h 时,TNF-α组MCP-1 mRNA和细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加（P<0.01）;与TNF-α组比较,
TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞内MCP-1 mRNA和培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低;孵育48 h时,TNF-α组细胞培养
上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加（P<0.01）;与TNF-α组比较,TNF-α+E1组、TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞培养上清
内MCP-1、FN含量均明显降低;并且随着时间的延长和exendin-4浓度的增加,培养上清内MCP-1、FN含量降低更加明显。结
论Exendin-4可明显抑制TNF-α诱导的系膜细胞MCP-1 mRNA的表达,并以剂量和时间依赖的方式抑制TNF-α诱导的系膜细
胞培养上清内MCP-1、FN的含量,提示exendin-4可能会对肾脏具有一定保护作用。
     

长时间重度失血性休克细胞因子、内毒素、一氧化氮的测定及其意义

目的：探讨内毒素,肿瘤坏死因子（TNFα）,白介素－6（IL－6）,白介素－8（IL－8）及一氧化氮（NO）在长时间重度失血性休克中的作用。方法：40只家兔随机分为对照组及失血性休克1h,4h,8h,组,从股动脉放血造成失血性休克,测定各组动物血浆内毒素,TNFα,IL－6,IL－8及NO水平。结果：血浆内毒素,TNFα,IL－6,IL－8及NO水平在休克后明显升高（P＜0．01）;血浆NO2^-活性水平以休克1h组最高,但与休克4h,8h组相比无显著差异（P＞0．05）,休克4h组与休克8h 组NO2^－含量呈逐渐下降趋势,随着休克时间的延长,各组动物的存活率明显下降。结论：长时间失血性休克可使血浆内毒素,细胞因子及一氧化氮水平升高,其水平与动物存活率呈正相关。     

辛伐他汀对内皮细胞分泌NO、NOS的影响

目的研究HMG-CoA还原酶抑制剂辛伐他汀对内皮细胞分泌NO和NOS活力的影响，并探讨其机制，以阐明其在治疗动脉粥样硬化中的降脂外作用。方法培养人脐静脉内皮细胞（ECV304），分别用不同浓度TNF-α刺激，在50ng／mlTNF-α刺激的基础上用不同浓度的辛伐他汀（0．1μmol／L、10μmol／L、10．0μmmol／L）及10μmmol／L辛伐他汀＋0．2mmol／L甲羟戊酸共育。用硝酸还原酶法测定培养上清NO的浓度，用化学比色法测定NOS的活力。结果不同浓度的TNF-α刺激24h后．培养液上清液NO浓度、eNOS活力明显低于空白对照组（P〈0．05），iNOS活力明显高于空白对照组（P〈0．05）。与TNF-α（50ng／ml）刺激组相比．各浓度的辛伐他汀明显增加NO的生成，提高eNOS的活性（P〈0．01），降低iNOS活力．而该作用可被甲羟戊酸逆转。结论TNF—α可以抑制血管内皮细胞NO的生成，降低cNOS的活性，辛伐他汀可以增加NO的生成。提高eNOS的活性，而该作用可被甲羟戊酸逆转。辛伐他汀降脂外作用部分是通过抑制甲羟戊酸的合成而实现的。     

17β-雌二醇和晚期糖化终末产物对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响

目的：探讨不同浓度的17β－雌二醇（17β－estrodiol)对成骨细胞增殖分化的影响及雌激素（estrogen)与晚期糖化终末产物（advanced glycosylation end-product,AGE)共存对成骨细胞的作用。方法：用不同浓度的17β－雌二醇加入大鼠成骨细胞培养体系,不同作用时间,观察对大鼠成骨细胞增殖分化的影响,以及17β－雌二醇与AGE共存时对成骨细胞增殖的影响。结果：17β－雌二醇＞10^-9mol/L主要表现为对大鼠成骨细胞增殖的抑制作用,10^-10和10^-11mol/L则显著促进大鼠成骨细胞的增殖（P＜0．01,P＜0．05）;10^-12-10^-14mol/L的17β－雌二醇培养48h显著抑制成骨细胞增高（P＜0．01）,10^-6-10^-8mol/L 17β-雌二醇存在下培养24,48,72h,均表现出显著抑制成骨细胞的分化,10^-10mol/L 17β－雌二醇与400－1000mg/L AGE共同存在,培养24h则均表现出促增殖作用（P＜0．01）。结论：雌激素在生理浓度对大鼠成骨细胞增殖产生抑制作用,低于生理浓度具有促增殖活性,浓度进一步降低,再次出现抑制作用,且适量浓度的雌激素与高浓度AGE共存时,促进大鼠成骨细胞增殖。     

TIMP-1对人牙周膜成纤维细胞增殖与ALP活性表达的影响

目的：探讨金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）对人牙周膜成纤维细胞的增殖与碱性磷酸酶（ALP）活性表达的影响。方法：采用MTT和ALP活性检测法,观察不同浓度的TIMP-1在第24、48和72h对体外培养的人牙周膜成纤维细胞（PDLF）的作用。结果：与对照组比较,1ng/ml的TIMP-1在24、48和72h,10ng/ml的TIMP-1在48、72h可显著促进PDLF的增殖; 1ng/ml的TIMP-1在24、48和72h,10ng/ml的TIMP-1在48h对PDLC有显著增强ALP活性作用。结论：TIMP-1可促进人PDLF生长和分化。     

糖耐量低减患者尿白蛋白排泄率与肿瘤坏死因子及一氧化氮水平的关系

目的：探讨老年患糖耐量低减（IGT）时尿白蛋白排泄率（UAER）与肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及一氧化氮（NO）水平之间的关系。方法：IGT微量白蛋白尿组和正常白蛋白尿组各30例,分别测定TNF－α和NO含量。结果：IGT微量蛋白组TNF－α和NO含量较正常白蛋白尿组显升高（P＜0．05）。结论TNF－α和NO共同参与IGT微量白蛋白尿的发生。     

支气管哮喘患者治疗前后血清IL-2、IL-8和TNF—α水平的变化及临床意义

目的：探讨支气管哮喘患者血清白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF—α）水平的动态变化和检测的临床意义。方法：对30例患者经中药治疗前后及26名正常对照者,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中上述三种细胞因子的含量。结果：血清IL-2水平在急性发作期患者为（10．2±3．2）ng／ml,明显低于正常对照组（24．8±11．5）ng／ml,P〈0．01,缓解期增至（20．9±5．4）ng／ml,与正常对照组差异无显著性（P〉0．05）;血清IL-8水平在急性发作期患者为（1085±503）ng／ml,明显高于正常对照组（189±71）ng／ml,P〈0．01,缓解期降至（212±115）ng／ml,与正常对照组差异无显著性（P〉0．05）;哮喘发作期TNF—α水平（207．34±31．29））ng／ml,明显高于对照组[（163．48±32．17）mg／ml,（P〈0．01）],哮喘缓解期TNF-α水平（201．65±33．08）ng／ml高于对照组（P〈0．05）,发作期TNF—α水平高于缓解期,但差异无显著性（P〉0．05）。结论：检测血清中IL-2、IL-8和TNF—α7水平变化是判断支气管哮喘病情变化的有益指标。     

pHGF对TNF-α体外介导小鼠肝细胞凋亡的抑制作用

目的：探讨促肝细胞生长因子（pHGF）对肿瘤坏死因子－α（TNF－α）介导小鼠原代肝细胞凋亡和坏死的抑制作用。方法：采用原位灌洗法分离小鼠肝细胞，体外培养后分别加入TNF-α、GalN、TNF－α＋GalN＋pHGF5h、10h、20h和30h后,观察小鼠肝细胞的形态及生化改变，测定培养上清液ALT和AST。结果：TNF－α单独作用于培养肝细胞，无肝细胞凋亡和坏死，经GalN致敏后，TNF－α可诱导大量肝细胞凋亡（10h ),随后（20h后）出现肝细胞坏死，其程度随培养时间延长和药物剂量的增加而明显。单独使用GalN也可造成肝细胞凋亡和坏死，但程度较TNF－α＋GalN合用轻，加用pHGF后可使肝细胞凋亡坏死明显减少，其效应在一定药物剂量范围内成正比。结论：pHGF对TNF－α诱导肝细胞凋亡和坏死具有抑制作用。