缺氧时培养的肺动脉平滑肌细胞的增殖与内皮素自分泌关系的探讨

目的：缺氧能否中通过影响血管平滑肌细胞血管活性肽的自分泌功能而参与缺氧性肺动脉高压的发生尚不明确,本实验在培养的新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）上探讨内皮素－１（ＥＴ－１）自分泌在其中的作用。方法：采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入研究ＰＡＳＭ增殖,放免测定和斑点杂交技术研究ＥＴ－１分泌和表达。结果：无氧培养（０％Ｏ２）２４ｈ使新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）的＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入与常氧组相比增加４２．     

^3H—TdR参入DNA技术在组织培养中的应用

探讨＾３Ｈ－ＴｄＲ参入ＤＮＡ技术在组织培养中的合理应用。测定１６周龄ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠培养的胸主动脉血管平滑肌细胞的自然增长曲线以及接种后６０ｈ期间，每隔４－６ｈ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入的变化。ＳＨＲ大鼠ＡＳＭＣ分裂增殖能力比ＷＫＹ强，在１５％ＦＢＳ－１６４０培养基作用下，１－６０ｈ期间，ＳＨＲ ＡＳＭＣ ＾３Ｈ－ＴｄＲ高峰参入率在２０－２４，５０－５５ｈ之间，ＷＫＹ的高峰参入率在４０－５０ｈ之间。     

亮氨酸脑啡肽对缺氧时肺动脉平滑平细胞增殖的影响

目的：研究缺氧对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）增殖、ＤＮＡ合成和细胞周期的作用,并观察亮氨酸脑啡肽（Ｌ－Ｅｎｋ）和阿片受体阻断剂纳洛酮（Ｎａｌ）的影响．方法：离体培养兔ＰＡＳＭＣ,采用四唑盐比色试验（ＭＴＴ）,３Ｈ－ＴｄＲ参入技术和流式细胞仪分析细胞周期等方法,观察ＰＡＳＭＣ增殖、ＤＮＡ合成和细胞周期的变化．结果：ＰＡＳＭＣ缺氧培养１２ｈ,２４ｈ后,ＭＴＴ的Ａ值和３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别为（１７９±１９．１）％,（１８５±２０．３）％和（１５８±１３．６）％,（１６７±１７．４）％,比常氧对照组（１００％）显著增加（Ｐ＜０．０１）．缺氧培养２４ｈ后,在Ｇ２,Ｍ期的细胞比例显著升高,Ｇ０,Ｇ１期的细胞比例显著减少（Ｐ＜０．０１）．Ｌ－Ｅｎｋ（１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ）可明显抑制缺氧促进ＰＡＳＭＣ增殖和ＤＮＡ合成的作用（Ｐ＜０．０１）,该抑制作用可被Ｎａｌ阻断．结论：Ｌ－Ｅｎｋ可抑制缺氧时ＰＡＳＭＣ的增殖和ＤＮＡ的合成作用,该抑制效应是通过阿片受体介导的．     

溶血磷脂酸刺激兔血管平滑肌细胞增殖的信号转导途径

目的：探讨溶血磷脂酸（ＬＰＡ）刺激兔血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的信号转导途径，方法：在培养的家兔血管平滑肌细胞上，测定＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）参入和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果：ＬＰＡ呈浓度依赖地刺激＾３Ｈ－ＴｄＲ参入，并平行地激活ＭＡＰＫ二间呈显正相关，乙二醇－双（氨基乙酯）－四乙酸（ＥＧＴＡ）尼卡地平，ｒｙａｎｏｄｉｎｅｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎｈｅｒｂｉｍｙｃ     

自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统的关系

目的以２０周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压大鼠（ＷＫＹ）胸主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）为模型，探讨ＳＨＲＡＳＭＣ异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）的关系。方法用３Ｈ－ＴｄＲ参入量和倍增时间（ＤＴ）反映ＡＳＭＣ的增殖能力，放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）浓度，紫外分光光度法测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性。结果（１）ＳＨＲＡＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ，ＤＴ显著短于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。基础状态下，ＳＨＲＡＳＭＣ合成ＡｎｇⅡ、ＡＣＥ以及分泌ＡｎｇⅡ的量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。（２）在含２％ＦＣＳ的培养基中，１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲ、ＷＫＹ的３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别提高到对照组的３．３倍、２．２倍（Ｐ＜０．０１），ＳＨＲＡＳＭＣ在不同浓度ＡｎｇⅡ刺激时的３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１），１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲＡＳＭＣ细胞数增加７２．５±２３．１％（Ｐ＜０．０１），ＷＫＹＡＳＭＣ细胞数无显著增加，１０倍浓度ＡｎｇⅡ的Ｓａｒａｌａｓｉｎ对ＳＨＲ、ＷＫＹ３Ｈ－ＴｄＲ参入的抑制率分别为６６．７±３．３％，４４．７±９．９％（Ｐ＜０．０１）     

尾加压素在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制

目的 观察近年新发现的活性肽尾加压素（Ｕｒｏｔｅｎｓｉｎ Ⅱ,ＵⅡ）在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制。方法 （１）采用＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＵⅡ对原代培养的大鼠气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的影响,应用不同阻断剂观察ＵⅡ诱导细胞ＤＮＡ合成的信号转导通路。（２）采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针,测定ＵⅡ对胞浆游离钙浓度的影响。结果 （１）ＵⅡ呈浓度（１０＾－１０～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）依赖性刺激ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时,为对照组的７倍（Ｐ〈０．０１）;（２）蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）阻断剂Ｈ７、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）阻断剂ＰＤ９８０５９及钙通道阻断剂尼卡的平均能抑制ＵⅡ刺激的ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,其抑制率分别为２９％（Ｐ〈０．０５）,４５％（Ｐ〈     

异搏定对缺氧和缩血管物质促肺动脉平滑肌细胞增生的影响

采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、结晶紫染色以及ＰＣＮＡ免疫细胞化学方法观察异搏定对缺氧和４种缩血管物质促肺动脉平滑肌细胞增生的影响。结果发现：①４种缩血管物质（ＥＴ－１、ＡＴⅡ,Ａ２３１７８、ＫＣ１）均有不同程度的促肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的作用,其作用可被Ｃａ＾２＋通道阻滞剂异搏定阻断;③缺氧所致ＰＡＳＭＣ增殖的３项指标变化同样可被异搏定阻断。表明〖（Ｃａ＾２＋〗ｉ升高可能为缩血管物质引     

肺微血管内皮细胞的培养液对血管平滑肌细胞的效应

目的 观察缺氧条件下培养的肺微血管内皮细胞（ＰＭＥＣ）培养液对大鼠主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的作用,方法 应用倒置显微镜和电镜观察细胞形态,同位素放射测定＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）摄取量,流式细胞仪测定细胞的周期和蛋白含量。结果 单纯缺氧可使ＡＳＭＣ Ｇ０／Ｇ１期数目增多,＾３Ｈ－ＴｄＲ摄取量降低,蛋白质含量减少;缺氧的ＰＭＥＣ培养液能促进大鼠ＡＳＭＣ从Ｇ０／Ｇ１期进入Ｓ期,＾３Ｈ－     

去甲肾上腺素促进兔肺动脉平滑肌细胞增殖的受体亚型研究

目的：观察肾上腺素能受体亚型β１、α１、α２在去甲肾上腺素（ＮＥ）促进肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）增殖中的作用，并观察钙通道阻滞剂的影响。方法：离体培养新西兰兔ＰＡＳＭＣ，采用四唑盐比色法（ＭＴＴ）和＾３Ｈ－ＴｄＲ参入实验观察ＰＡＳＭＣ增殖和ＤＮＡ合成量的变化。结果：ＮＥ（１×１０＾－５￣１×１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ）对ＰＡＳＭＣ的增殖和ＤＮＡ的合成有显著的促进作用。β１受体阻断剂Ｐｒｏｐｒａｎｏｌ     

异搏定对缺氧和缩血管物质促肺动脉平滑肌细胞增生的影响

采用~３Ｈ－ＴｄＲ掺入、结晶紫染色以及ＰＣＮＡ免疫细胞化学方法观察异搏定对缺氧和４种缩血管物质促肺动脉平滑肌细胞增生的影响。结果发现：①４种缩血管物质（ＥＴ－１、ＡＴⅡ、Ａ_（２３１７８）、ＫＣｌ）均有不同程度的促肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的作用,其作用可被Ｃａ~（２＋）通道阻滞剂异搏定阻断;②缺氧所致ＰＡＳＭＣ增殖的３项指标变化同样可被异搏定阻断。表明［Ｃａ~（２＋）］ｉ升高可能为缺氧和缩血管物质引起肺血管ＳＭＣ收缩和增生的信息传递的共同途径。     

骨髓纤维化发病机制的研究进展

骨髓纤维化为骨髓增殖性疾病，临床比较少见，该病进行描述虽已有100多年，但由于受限于对疾病的认知水平，它的发病机制至今仍存在争议。近年来，随着对其细胞和分子生物学特征的研究，使人们对该类疾病的发病机制有了一些新的认识。目前研究最多的是原发性骨髓纤维化（idiopathic myelofibrosis，IMF），其次还有慢性特发性骨髓纤维化（chronicidiopathic myelofibrosis，CIMF）、髓样化生性骨髓纤维化（myelofibrosis with myeloid metaplasia，MMM），本文现将它们发病机制的研究现状作一综述。     

S-腺苷蛋氨酸对慢性乙肝患者血清中TGF-β1和PDGF的影响

目的研究S-腺苷蛋氨酸对慢性肝病患者血清中的TGF-β1和PDGF的影响,为临床使用S-腺苷蛋氨酸抗纤维化提供理论基础。方法选择乙肝表面抗原和HBV-DNA阳性的慢乙肝患者随机分为治疗组及对照组,用ELISA法观察2组患者在治疗前后血清中的TGF-β1和PDGF的浓度的变化情况。结果治疗组肝病患者治疗后TGF-β1和PDGF较治疗前均有下降,有显著性意义（P〈0.05）。对照组肝病患者血清TGF-β1和PDGF治疗前后比较,无统计学差异。结论 S腺苷蛋氨酸通过降低慢性乙肝患者血清中TGF-β1和PDGF的浓度,而发挥抗肝纤维化的作用。     

ACEI抑制球囊扩张术后动脉再狭窄的机制

目的研究血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）抑制球囊扩张术后大鼠颈总动脉再狭窄的机制。方法大鼠20只，制备颈总动脉球囊导管扩张模型，术前2d始对照给予ACEI或安慰剂。测定术后第2d和第5d动脉中膜平滑肌细胞（SMC）的血小板衍生生长因子（PDGF）-B和弹性蛋白酶ⅢB阳性细胞率。结果ACEI显著降低大鼠扩张动脉中膜SMC的PDGF-B和弹性蛋白酶阳性细胞率（P〈0.01）。结论ACEI通过抑制PDGF和弹性蛋白酶减轻球囊扩张术后动脉再狭窄。     

联合转染PDGF和c-myc反义寡核苷酸抑制移植血管狭窄研究

目的 探讨血管移植后联合应用血小板源性生长因子(PDGF)和原癌基因c-myc反义寡核苷酸(AODN)抑制血管平滑肌(VSMC)增殖和防止移植血管狭窄的作用.方法 选48只新西兰雄性白兔,随机分为对照组、PDGF-AODN组、c-myc-AODN组和PDGF-AODN加c-myc-AODN组,每组12只;将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0cm)对换移植,移植血管用PDGF-AODN和c-myc-AODN液浸泡,血管吻合口用AODN液浸泡过的缝线吻合;取移植血管制片显微镜下观察内膜增生情况,计算机图像分析测量其内膜厚度、内膜面积和移植血管狭窄率,并分别用原位杂交组织化学和免疫组织化学染色计数PDGF和c-myc阳性细胞数.结果 PDGF-AODN加c-myc-AODN组的移植血管内膜厚度、内膜面积、管腔狭窄程度和PDGF阳性细胞及c-myc阳性细胞数均显著低于对照组(P<0.01),而且亦明显低于单独转染PDGF-AODN组或c-myc-AODN组(P<0.05),PDGF-AODN组和c-myc-AODN组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 联合应用PDGF-AODN和c-myc-AODN能有效抑制VSMC增殖,阻止内膜增生,防止移植血管狭窄,为利用反义核酸技术联合调控多个基因防止移植器官内血管狭窄提供参考.     

血小板源性生长因子及其受体在子宫肌瘤组织中的表达

目的　探讨血小板源性生长因子 (PDGF)及受体的表达与子宫肌瘤的形成和发展的关系。方法　对 2 1对子宫肌瘤和邻近正常平滑肌的石蜡组织切片进行免疫组织化学染色 ,检测PDGF AA、PDGF BB、PDGFR α和PDGFR β的表达情况。结果　PDGF AA、PDGF BB及PDGF受体α、β在肌瘤组织中的表达量均较邻近正常平滑肌组织显著增高 (P <0 .0 5 ) ;其中PDGF BB的表达受月经周期的影响 ;子宫肌瘤组织中 ,PDGF BB的表达比PDGF AA高 (P <0 .0 1) ;PDGFR α的表达较PDGFR β高 (P <0 .0 1)。结论　PDGF及其受体在子宫肌瘤组织中局部的高表达可能与子宫肌瘤平滑肌细胞的高增殖状态有关 ,PDGF BB可能作为主要因子参与卵巢激素刺激的子宫肌瘤平滑肌细胞的增殖 ,而PDGFR α则作为主要的受体类型介导PDGF在子宫肌瘤发生、发展中的效应     

PDGF及PDGFR在大鼠肾间质纤维化过程中的作用

目的探讨PDGF及其受体PDGFR在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中的作用。方法24只SD大鼠,采用单侧输尿管梗阻模型,分别于造模后第3、7、14及21天各处死6只大鼠,取双侧肾脏(未手术侧为对照组)分别做光镜和电镜检查,观察其病理改变。并以免疫组织化学法检测肾组织中PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β以及α-SMA(活化肌成纤维细胞的标志)和Ⅲ型胶原的表达。结果与对照组相比PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β在不同时间点的梗阻肾脏中表达均增强,主要定位于扩张或萎缩的皮质肾小管上皮细胞,肾间质有少量表达。随着梗阻时间的延长,肾间质表达α-SMA的细胞和Ⅲ型胶原逐渐增多,两者呈正相关关系,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。肾间质α-SMA、Ⅲ型胶原的表达与肾小管PDGF-B和PDGFR-β的表达呈正相关,而与PDGF-A和PDGFR-α的表达无明显相关性。结论大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型中受损的肾小管过度表达PDGF-B、PDGFR-β,可促进肌成纤维细胞的形成和Ⅲ型胶原的沉积,在肾间质纤维化过程中可能起重要作用。     

脑外伤后血小板衍生生长因子及血管内皮生长因子对骨折愈合影响的实验研究

目的观察比较SD大鼠在骨折合并脑外伤以及在单纯骨折时,骨折愈合过程中骨痂内血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的变化;探讨VEGF和PDGF在大鼠骨折合并脑外伤后的加速骨折愈合中的作用机制,以期为临床治疗难治性骨折提供理论依据。方法将204只大鼠分为4组∶A组(正常对照组)、B组(脑外伤组)、C组(骨折组)和D组(骨折合并脑外伤组),其中A组12只,B组56只、C、D组各68只。建立大鼠脑外伤和骨折模型。术后分别于1 d、4 d、1周、2周、3周、4周和5周将B组、C组及D组大鼠各处死8只,在距离骨折断端大约1 cm处截取骨痂标本,进行免疫组化染色。4周、5周时C组和D组处死的大鼠需进行X线摄片。C组和D组大鼠于术后6周各处死12只,进行X线摄片,并取整根桡骨进行生物力学实验,A组大鼠于实验开始后1周处死,并取整根桡骨进行生物力学实验。结果1)X线观察:C组:4周和5周时,骨折线较清晰,有少量骨痂形成。6周时,骨折线模糊,仍隐约可见。D组:4周时,骨折线较清晰,5周时,骨折线模糊,6周时骨折线消失,骨折基本愈合。2)生物力学实验:6周时,D组桡骨可承受的最大负荷与A组基本相同,差异无统计学意义(P>0.05),而与C组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。3)免疫组织化学染色:PDGF:C组PDGF表达从1 d开始出现,2周左右达到高峰;D组PDGF表达从1 d开始出现,1周时接近高峰,2周达到高峰。在1 d、4 d、1周时,D组PDGF表达较C组显著增高(P<0.01)。C组VEGF表达从1周开始出现,持续到3周左右达高峰;D组VEGF表达4 d开始出现,2周达高峰,并持续到3周左右。在4 d、1周和2周时,D组VEGF表达较C组显著增高,差异有统计学意义(P(0.01)。结论1)根据X线观察结果及生物力学实验结果,D组大鼠骨折愈合速度快于C组。2)单纯骨折后2周左右为PDGF的表达高峰,脑外伤合并骨折后1～2周为PDGF的表达高峰。单纯骨折后3周左右为VEGF表达的高峰期,脑外伤合并骨折后2～3周为VEGF表达的高峰期。其表达高峰提前且持续时间较长。3)脑外伤后骨折愈合加速,这可能与大鼠体内生长因子,特别是VEGF和PDGF表达高峰提前且持续时间较长有关。     

细胞因子与甲状腺肿瘤

甲状腺肿瘤的发生，除了伴随着T3、T4、TSH等内分泌激素的一系列变化外，还与多种细胞因子的作用有着密切关系。本文介绍了表皮生长因子(EGF)、血小板源性生长因子(PDGF)、转化生长因子(TGF-α、TGF-β1)胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其各自受体与甲状腺肿瘤细胞生长的关系，以及各细胞因子之间的相互作用关系。     

血小板衍化生长因子与缺血性脑血管病

血小板衍化生成因子（PDGF）是一种由多种细胞合成和分泌的多功能蛋白质，对胶质细胞和间质细胞具有促有丝分裂和趋化作用，PDGF及其受体（PDGFR）在神经系统中广泛表达，与缺血性脑血管病的发生密切相关，章综述了PDGF及其PDGFR的结构，分布，生物学活性，以及与缺血性脑血管病的关系和作用机制。     

芪益强肾饮对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织PDGF和FN的影响

目的观察中药复方芪益强肾饮对系膜增生性肾炎大鼠肾组织血小板源性生长因子（PDGF）和纤维连接蛋白（FN）的影响。方法试验大鼠随机分为正常对照组、模型组、芪益强肾饮组、肾炎康复片组。制备系膜增生性肾小球肾炎大鼠模型;以芪益强肾饮、肾炎康复片灌胃;免疫组化法观察各组大鼠肾组织中PDGF和FN的表达情况。结果芪益强肾饮组及肾炎康复片组大鼠肾组织系膜细胞中PDGF、FN的表达均降低,芪益强肾饮组更为明显。结论芪益强肾饮对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织中PDGF和FN的表达有抑制作用,可能会延缓肾小球疾病的发展,在防治肾小球硬化方面有帮助。