蛋白免疫印迹法分析纤维连接蛋白分子降解状态

为了解蛋白免疫印迹法在纤维连接蛋白（Ｆｎ）分子降解状态分析中应用效果，观察了８６便慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）患者血浆Ｆｎ和５３例急性白血病、１２例淋巴瘤患者脑脊髓液（ＣＳＦ）－Ｆｎ分子状态。发现ＣＯＰＤ患者血浆Ｆｎ降解程度增加，并与ＣＯＰＤ病程和病情相关；急性白血病和淋巴瘤浸润中枢神经系统者，ＣＳＦ－Ｆｎ增高系Ｆｎ片段所致，表明蛋白免疫印迹法是一项适合研究体液中Ｆｎ降解片段特性和发现新片段的方法     

蛋白印迹技术研究进展

蛋白印迹技术(westem blotting)是继DNA印迹(southern blotting)和RNA印迹(northern blotting)之后发展起来的,集电泳、转印和免疫标记为一体的一项蛋白质分离检测技术。本文就此项技术近年来在转印、免疫检测等方面所取得的进展作一概述。     

生物可降解分子印迹聚合物的制备及评价

背景：交联剂是支撑分子印迹聚合物骨架的主要单元,分子印迹聚合物是否生物友好与交联剂的性能密不可分,但目前常用交联剂的生物相容性和生物降解性还不明确。 目的：制备新型生物可降解分子印迹聚合物,分析其吸附性能和可降解性能。 方法：以丙烯酰化的聚ε-己内酯为交联剂,以丙烯酸为功能单体,采用紫外光引发聚合法制备茶碱分子印迹聚合物,通过等温吸附、Scatchard分析和动力学曲线研究其吸附能力,在模拟人体生理环境体系中进行体外降解实验。 结果与结论：等温吸附曲线表明茶碱分子印迹聚合物和非分子印迹聚合物对模板分子茶碱均有吸附能力,但茶碱分子印迹聚合物的吸附量显著高于非分子印迹聚合物。茶碱分子印迹聚合物对茶碱的载药量为1.54%,包封率为12.48%,茶碱分子印迹聚合物和聚ε-己内酯二醇在观察时间内的体外降解率分别为6.60%和1.33%。制备的分子印迹聚合物不仅对目标分子有特异的吸附性能,而且具有良好的生物降解性能,可在模拟人体环境中进行降解。     

WestemBlot测定脊神经感觉神经元一种35KD蛋白的初步研究

本文采用免疫组化间接过氧化物酶ＡＢＣ技术和免疫印迹技术（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔａｎａｌｙｓｉｓ）,测定兔脊神经感染神经元蛋白３５ｋＤ,结果发现,背根神经节细胞呈阳性反应,胞核不着色,该蛋白主要存在轴浆,免疫印迹技术发现感觉神经３５ｋＤ是一种感觉神经特有的抗原物质,此项技术为探讨该蛋白作为鉴定感觉神经元及其纤维的标志物和研究感觉神经元在某种疾病情况下的演变过程的分子机理提供基础。     

免疫印迹技术检测ENA实验中常见问题及注意事项

免疫印迹技术 (immunblotting technique,IBT)是从分子水平识别各种自身抗体与特异性蛋白多肽结合的分子量 [1 ]。ENA是盐水可提取抗原的英文缩写 ,又称可提取性核抗原抗体 ,该部分核抗原可溶于盐水 ,许多自身免疫性疾病 (例如 :系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征、硬皮病等 )患者可产生针对可提取核抗原的抗体 ,例如 :抗 Sm、抗 U1RNP、抗 SSA、抗SSB、抗 Sc L- 70等十几种抗体 ,因此该检测对疾病的诊断有重大的帮助。免疫印迹法检测可提取核抗原即 ENA多肽抗体谱的实验原理是 :将已知的与自身免疫性疾病相关的抗原通过…     

分子诊断在检验科的发展与未来

随着人类基因图谱绘制的完成和生物医学的发展，分子诊断技术成为21世纪最有潜力的学科之一。分子诊断是将分子生物学原理和技术应用于疾病诊断而产生的一门新兴的检验医学技术，是以疾病相关基因及其产物为检测对象，从分子水平来探讨疾病发生和发展的机制，从而为疾病的预防、诊断、疗效评估、预后判断等提供关键信息和决策依据。是当代医学发展的重要前沿领域之一，其核心是基因诊断技术。     

DNA微阵列对进行性肌营养不良基因缺失检测的分析

背景：目前对Duchenne型肌营养不良(DMD)基因缺失的检测主要是Southem印迹或聚合酶链反应(PCR)的方法，在实际应用中有一定的局限性。DNA微阵列技术已广泛应用于基因突变的检测。目的：制备简易DNA微阵列检测DMD基因常见外显子缺失，作为一项新技术的方法学摸索，为开发更完善的DMD基因诊断芯片做准备。设计t非随机对照研究。地点和对象：5例患来自2000-01／2001—12解放军第四军医大学西京医院神经内科门诊，所有患均为男性。健康为患的父亲。方法：应用分子克隆的方法扩增DMD基因18个常见易缺失外显子片段，以此作为探针制备出简易DNA微阵列，对DMD患和健康对照的基因进行检测分析。主要观察指标：微阵列杂交结果；PCR结果。结果：应用简易DNA微阵列检测出4例DMD患具有不同程度的外显子缺失，其结果与PCR验证相符，对照满意。结论：DNA微阵列技术适用于DMD基因缺失检测，具有简便、高通量、灵敏等特点。     

蛋白免疫印迹法分析纤维连接蛋白分子降解状态

为了解蛋白免疫印迹法在纤维连接蛋白（Ｆｎ）分子降解状态分析中应用效果，观察了８６例慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）患者血浆Ｆｎ和５３例急性白血病、１２例淋巴瘤患者脑脊髓液（ＣＳＦ）－Ｆｎ分子状态。发现ＣＯＰＤ患者血浆Ｆｎ降解程度增加，并与ＣＯＰＤ病程和病情相关；急性白血病和淋巴瘤浸润中枢神经系统者，ＣＳＦ－Ｆｎ增高系Ｆｎ片段产生所致。表明蛋白免疫印迹法是一项适合研究体液中Ｆｎ降解片段特性和发现新片段的方法。     

印迹术在临床检验中的应用简介

印迹术(Blotting)也称为印渍术或转印术。它是将待测标本经凝胶电泳后,把生物大分子从凝胶上转移到硝酸纤维薄膜(NC)上,然后根据检测目的用已知试剂检测欲测物的存在与否,是一种非常有效的分析技术。自1975年Southern开创DNA印迹术以来,检测不同生物大分子的印迹术的方法相继建立,并不断改进。由于这种分析技术既具有凝     

DNA测序技术新进展

分子诊断技术在遗传性疾病、肿瘤和感染性疾病的诊断领域内占有重要的位置 ,DNA测序 (DNAsequencing)为其中最精确的一种方法 ,主要用于鉴定基因 ,检测突变 ,分析噬菌体文库等方面。本文介绍了DNA测序技术近年的新进展     

分子信标技术和毛细管电泳技术结合进行基因检测

近年来疾病与基因的联系已成为医学研究的热点，基因水平的分析及评估对疾病的综合防治有深远意义。毛细管电泳技术和分子信标技术都是近几年新兴并逐步走向成熟的现代分子生物学技术，这两种技术的结合可以极大地提高基因检测的准确性和灵敏度，此方法学的建立为无数需要基因诊断的患者带来希望；将极大推动医学检验技术，分析化学领域向分子水平，更精确，更灵敏的方向发展。     

免疫印迹法测定血清载脂蛋白E的表型

介绍了一种免疫印迹法测定载脂蛋白Ｅ表型。通过唾液酸酶处理血清、脱脂、等电聚焦电泳和免疫印迹得到ａｐｏＥ表型图谱。本法主要特点是：①用唾液酸酶消化处理，减轻唾液酸型ａｐｏＥ的干扰；②使用宽ｐＨ范围（ｐＨ４～８）的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，适用于分离包括Ｅ５、Ｅ７的所有ａｐｏＥ表型；③利用ａｐｏＥ多克隆抗血清与Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ＾ＲＡＢＣ试剂盒，使免疫显色更为敏感，从而使血清标本的用量减少到０．１～０     

253例风湿性疾病的ENA自身抗体谱检测及临床意义

从分子水平识别细胞核内各种可抽提核抗原(ENA)是八十年代以来抗核抗体(ANA)研究的重大进展,其在各种风湿性疾病的诊断、分型、治疗及预后推测等方面应用日趋广泛。我们以兔胸腺提取物为抗原,应用免疫印迹技术从分子水平检测相应的抗体,以子解这些自身抗体在各种风湿性疾病中的意义,结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 受检血清:共293份,包括各种风湿性疾病253份和正常人血清30份。血清均来源于我院。     

DNA测序技术新进展

分子诊断技术在遗传性疾病、肿瘤和感染性疾病的诊断领域内占有重要的位置,ＤＮＡ测序（ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）为其中最精确的一种方法,主要用于鉴定基因,检测突变,分析噬菌体文库等方面。本文介绍了ＤＮＡ测序技术近年的新进展。     

伤寒沙门菌鞭毛蛋白抗原的提取和免疫印迹检测方法的研究

目的：建立一种伤寒沙门菌鞭毛抗原的提取方法和免疫印迹酶 联检测伤寒特异性抗体的方法。方法：创用玻璃渣高夺动法打脱细菌鞭毛，可提高鞭毛抗原得率，然后分二步离心去掉细菌，再收集鞭毛。盐酸调ｐＨ２．０，使鞭毛蛋白解离，再调节ｐＨ７．０使蛋白重聚合。以此作电泳和电转运免疫印迹，用酶联法检测伤寒特异性Ｈｄ抗体。结果：共检测确诊早期伤寒病人血清２１例，肥达氏反应Ｈｄ阳性８例，免疫印迹酶 联试验Ｈｄ阳性２１例。     

免疫印迹技术检测抗ENA抗体谱的应用现状及技术进展

目的 分析探讨免疫印迹法(IBT)检测可提取核抗原(ENA)多肽抗体谱报告结果和临床应用中出现的常见问题、解决措施及技术进展。方法 利用万浮生物技术公司的IBT试剂盒检测抗ENA抗体进行观察，分析总结近年来该项检测结果出现的问题。结果 因为对抗ENA自身抗体谱的谱带特征认识不足，对免疫印迹法缺乏深入了解，在临床中出现抗Sm、抗U1RNAP、抗SSA、抗rRNP等抗体的错误判断；另一方面，临床医师过分地看重实验报告，以至为数不少的病人被误诊、误治，造成不可弥补的医源性疾患。结论 为了使免疫印迹法测定抗ENA抗体谱更好地运用于，临床，不论检验人员还是风湿免疫科医师，均应正确看待多肽抗体检测的临床意义。     

免疫印迹技术在临床幽门螺杆菌检测中的应用

目的 分析临床慢性上消化道疾病患者幽门螺杆菌的分型及检出率。方法 应用免疫印迹技术对779例慢性上消化道疾病患者进行血清学分析。结果 Ⅰ型检出率为65．08％，Ⅱ型检出率为28．11％，总检出率93．20％。结论 免疫印迹技术具有高特异性、高灵敏度及易操作性的特点，较适合临床广泛推广应用。     

肿瘤分子地址、分子靶确认与超声分子成像

肿瘤分子靶确认是借助于分子影像技术对肿瘤特异性分子地址进行分子成像,为肿瘤的早期发现、治疗方案的制定以及治疗效果的评估提供依据.超声分子成像为肿瘤分子靶确认这一崭新的肿瘤诊治理念的实现带来了巨大机遇,在肿瘤"分子靶确认"领域展示明确的应用前景.     

表面增强拉曼散射技术在生物医学检测中的研究及应用

拉曼光谱在检验医学领域的应用正在不断进步和发展, 基于拉曼光谱技术的生物传感平台为疾病精准分子诊断提供了一种新的手段, 特别是表面增强拉曼散射(SERS)技术作为一种快速无损的检测方法, 具有样品制备简单、受水的干扰小、实时检测等优点, 在医学检验领域显示出巨大的应用潜力。同时, 随着SERS与其他技术包括电化学、纳米新材料、微流控、生物芯片、DNA纳米机器、人工智能和机器学习等技术的集成结合, 其在医学检验领域将发挥越来越重要的作用。相信随着对SERS研究的不断深入以及多个学科领域之间的交叉融合, 其在生物医学检测领域将得到广泛应用, 并有望成为下一代精准诊断的重要技术平台。     

《分子诊断与治疗杂志》稿约

《分子诊断与治疗杂志》是中山大学主办的分子医学专业学术期刊,主要报道我国医学分子诊断学和分子治疗学相关领域中的基础理论研究、临床实践和技术方法等的最新研究成果以及国内外分子医学新技术、新理论和新