冬虫夏草菌丝体水提物抗氧化和保护氧化损伤活性研究

[目的]研究冬虫夏草(Cordyceps sinesis)菌丝体热水提物(CS-HWE)抗氧化活性及体外氧化损伤保护作用。[方法]采用铁离子还原法(FRAP)和H2O2氧化损伤的PC12细胞模型对CS-HWE抗氧化活性及对氧化损伤保护活性分别进行了测定。[结果]样品抗氧化活性为(158.03±5.39)μmolFe2 ·g-1,相当于天然虫草提取物活性的75%。CS-HWE在50￣100mg·L-1时可明显提高PC12细胞对H2O2氧化损伤的保护作用,活性与天然虫草提取物相当。[结论]虫草菌丝体热水提物具有一定的抗氧化作用,可作为开发天然抗氧化药物的潜在资源。     

两种不同产地龟板抗氧化活性研究

[目的]研究两种不同产地龟科动物乌龟Chinemys reeresii(Gray)腹甲提取物的抗氧化活性。[方法]采用DPPH法分别测定两种不同产地龟板的石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇等不同极性溶剂提取物的抗氧化活性。[结果]不同产地龟板95%乙醇提取物抗氧化活性均最强;海南产龟板抗氧化活性比湖北汉阳产龟板强,差异有统计学意义(P﹤0.01)。[结论]不同产地的龟板所含抗氧化成分存在一定的差异。     

林蛙油复方冲剂对超重辐射大鼠血清HK、血脂、血糖等的影响

[目的]探讨以长白山特产林蛙油为主要成分的复方冲剂对超重辐射大鼠血清HK、葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、总蛋白质含量的影响。[方法]大鼠复制超重辐射模型,用林蛙油复方冲剂进行干预,检测各组大鼠血清HK、葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、总蛋白质含量。[结果]超重辐射协同作用,可导致大鼠血清HK活性降低,林蛙油复方冲剂可导致血清总蛋白含量升高。[结论]以林蛙油为主要成分的复方冲剂,可降低大鼠血清HK活性,可升高血清总蛋白浓度。     

白果清蛋白抑制肿瘤活性及其机制的初步研究

目的:研究白果清蛋白(Ginkgoalbumin,GA)对S180肿瘤的抑制活性,并探讨其抗肿瘤作用机制。方法:采用质谱法测定了白果清蛋白GAⅡa的分子量;采用D-脱氧核糖法和硝基蓝四唑(NBT)光化还原法研究了GA抗氧化活性;观察GA的体内抗S180肿瘤作用,用甲基噻唑四唑MTT法测定GA体外对S180细胞的抑制生长作用。结果:GA的分子量为29248u;能抑制体内S180实体瘤和体外S180肿瘤细胞的生长,具有较强的体外清除OH及O2的能力。结论:抑制S180肿瘤生长的作用可能与其抗氧化活性有关。     

铅对SH-SY5Y细胞的Nrf2转录活性及HO-1和γ-GCSc蛋白表达的影响

[目的]研究铅对人神经母细胞瘤细胞株(SH-SYSY)的细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)转录活性以及下游血红素加氧酶1(HO-1)和谷氨酸半胱氨酸合成酶(γ-GCSc)表达的影响. [方法]用不同剂量的醋酸铅溶液(0、5、25、125 μmol/L)对体外培养的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)染毒12、24h后,用四甲基偶氮唑蓝法测细胞存活率;用凝胶迁移试验测细胞核内Nrf2-抗氧化反应元件(ARE)结合能力;用Western blot法检测染毒细胞内HO-1和γ-GCSc的蛋白水平.[结果]与对照组相比,醋酸铅染毒使SH-SY5Y的存活率降低,细胞核内Nrf2-ARE结合能力升高,Nrf2调控的下游基因HO-1和γ-GCSc的蛋白表达水平也明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05). [结论]铅对SH-SY5Y细胞毒性作用具有剂量反应关系.铅可激活SH-SY5Y细胞Nrf2的转录活性,并导致Nrf2介导的抗氧化酶HO-1和γ-GCSc的表达水平升高.     

乙型和丙型肝炎患者及正常人外周血中热休克蛋白70的检测

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是一类结构和功能高度保守的蛋白质,广泛存在于原核及真核细胞内,如胞浆、内质网、线粒体及细胞核内。除了作为构成性表达外(约占生理状态下总蛋白含量的5~10%),HSP还可在各种应激条件下诱导表达,如高温、氧自由基、紫外线辐射、感染和恶性肿瘤等[1]。HSP根据分子量不同可分为若干类,病毒感染后产生的蛋白质可诱导宿主细胞表达HSP70。已报道的如腺病毒[2]、vaccinia病毒[3]、巨细胞病毒[4]等均可诱导HSP70蛋白质及mRNA的增高。在一些病毒(如水疱性口炎病毒、流感病毒A等)的成熟病毒颗粒中也可检…     

辛硫磷对大鼠卵巢抗氧化系统功能的影响

[目的 ]研究辛硫磷 (phoxim ,pho)对大鼠卵巢抗氧化系统功能的影响。 [方法 ]雌性SD大鼠经口染毒农药辛硫磷 ,剂量为 5 .88、2 9.4和 98.0mg·kg-1,对照组给予等量色拉油。阴道脱落细胞涂片法观察动情周期变化 ,连续染毒 3 0d后处死 ,分离卵巢、子宫、脑、肝、脾、肾、肾上腺等脏器 ,计算脏器系数 ;分光光度法测定大鼠卵巢组织和血清中的超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽硫转移酶 (GST)的活性以及丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)的含量 ;提取卵巢组织的DNA ,进行琼脂糖凝胶电泳 ,观察DNA完整性 ;免疫组化SP法观察bcl 2蛋白在卵巢组织中的表达。 [结果 ]各染毒组大鼠的动情周期异常率均高于对照组 ,体重增长均低于对照组 ,其中高剂量组与对照组相比差异具有显著性 ;各染毒组大鼠的卵巢、子宫重量均显著降低 ,卵巢中的SOD、GST和GSH水平均增高 ,MDA含量降低 ,血清中SOD、GST水平显著降低 ,MDA含量升高 ;卵巢bcl 2蛋白表达增强 ,低剂量组与对照组比较差别有显著性。 [结论 ]在 5 .88、2 9.4和 98.0mg·kg-1剂量下 ,辛硫磷对卵巢功能可产生一定影响 ,可使卵巢的抗氧化能力代偿性增强 ,但未对卵巢的抗氧化系统功能造成损伤。     

新城疫病毒膜融合脂质体疫苗抑瘤的实验研究

[目的]用新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)Ⅳ系弱毒株构建新型膜融合脂质体,并用此载体制备Hep-A22肝腹水瘤疫苗,免疫小鼠并考查疫苗的效应. [方法]用NDV制备膜融合脂质体,包封肿瘤抗原制成疫苗.体外观察NDV膜融合脂质体诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应活性及体内抑瘤效应. [结果]游离蛋白抗原不能诱发细胞毒T淋巴细胞反应;以膜融合脂质体为载体的疫苗可产生强烈的CIL反应(P＜0.001),且作用强于NDV与游离蛋白混合液的肿瘤抑制作用. [结论]用NDV构建的膜融合脂质体是一种有效的肿瘤疫苗载体.     

ox-LDL诱导血管内皮细胞表达PECAM-1的研究

[目的]控讨ox-LDL致动脉粥样硬化作用的分子机制。[方法]体外培养人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),ox-LDL作用于血管内皮细胞后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测PECAM-1 mRNA表达,采用Western印迹法检测PECAM-1蛋白表达。[结果]在培养的HUVEC,ox-LDL在50 mg/L～200 mg/L浓度范围内呈浓度依赖性上调PECAM-1基因转录和蛋白表达。[结论]ox-LDL可在转录水平上调血管内皮细胞PECAM-1基因表达,从而促进血管内皮细胞高水平表达PECAM-1。     

桐油对小鼠机体抗氧化能力的影响

[目的 ]实验观察桐油对小鼠机体抗氧化能力的影响。 [方法 ]将 40只BALB/C小鼠分为 4组 ,分别经口染毒桐油 0 ,2 0 0 0 ,40 0 0 ,6 0 0 0mg/kg,1次 /d ,连续 5d。 7d后测定血清超氧化歧化酶 (SOD)、总抗氧化能力及全血谷胱甘肽氧化酶 (GSH Px)的活性。 [结果 ]桐油染毒 4 0 0 0 ,6 0 0 0mg/kg的 2组小鼠 ,SOD、GSH Px活性和总抗氧化能力均低于对照组 (P <0 0 1 )。 [结论 ]口服 4 0 0 0mg/kg以上桐油有抑制小鼠机体抗氧化能力的作用     

黑木耳粗多糖对力竭小鼠抗氧化能力的影响

[目的]研究黑木耳粗多糖对力竭小鼠心肌、肝脏、骨骼肌抗氧化作用的影响。[方法]小鼠灌胃黑木耳粗多糖(2.502mg/kg/d)20d后测定安静小鼠心肌、肝脏、骨骼肌谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及力竭游泳运动小鼠心肌、肝脏、骨骼肌丙二醛(MDA)水平、脂褐素水平及血浆谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)等指标的变化。[结果]黑木耳粗多糖可明显提高安静小鼠心肌、肝脏SOD及骨骼肌GSH-Px活性。黑木耳粗多糖可明显降低力竭小鼠心肌、肝脏MDA及心肌脂褐素水平。黑木耳粗多糖可明显降低力竭小鼠血浆GPT及GOT水平。表明黑木耳粗多糖可明显提高力竭小鼠心肌、肝脏抗氧化能力。     

天然虾青素软胶囊对人体抗氧化功能试验研究

[目的]探讨天然虾青素软胶囊对人体的抗氧化作用。[方法]将106例年龄在45～65岁之间的健康志愿者按血清丙二醛含量随机分为受试组和对照组,受试组连续服用受试物90d。测定血清中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和安全性指标。[结果]试食后受试组MDA含量明显下降,自身前后比较差异有统计学意义(P﹤0.01),下降率为3.25%;SOD活性明显升高,自身前后比较差异有统计学意义(P﹤0.01),升高率为4.59%;GSH-PX活性明显升高,自身前后比较差异有统计学意义(P﹤0.01),升高率为5.54%。各项安全性指标试验前后均无明显改变。[结论]天然虾青素软胶囊对人体具有抗氧化作用。     

小麦胚芽蛋白组分酶解物降血压和抗氧化作用

目的探讨小麦胚芽中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的碱性蛋白酶alcalase酶解物的体外降血压和抗氧化作用。方法采用抑制血管紧张素转化酶(ACE)的方法评价降血压活性;对其抗氧化性能的评价采用化学模拟体系测定其清除1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)自由基、羟自由基以及还原力。结果小麦胚芽中,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白酶解物对ACE的半抑制率(IC50)分别为:3.98、2.64、5.53和3.62mg/ml。球蛋白酶解物的降血压活性显著高于另外3种蛋白酶解物(P0.05)。在抗氧化试验中,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白酶解物清除DPPH自由基的IC50值分别为1.85、2.82、2.46和2.04mg/ml;清除羟自由基的IC50值分别为:0.14、0.22、0.17和0.18mg/ml;它们的还原力与浓度呈显著的正相关性(P0.05),且清蛋白酶解物的还原力最高。结论小麦胚芽中,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的alcalase酶解物均具有体外降血压和抗氧化活性;球蛋白酶解物的降血压活性最高,而醇溶蛋白的最低;清蛋白酶解物的抗氧化活性最强,而球蛋白的最弱。     

葛根素注射液对阿霉素所致大鼠心肌损伤保护作用的实验研究

[目的]探讨葛根素注射液对阿霉素所致大鼠心肌损伤保护作用及其机制。[方法]SD雄性大鼠随机分为5组(每组12只):①阿霉素(ADM)组:腹腔注射ADM,每次2.5mg/kg,每周1次,共用药10周;②对照组:用相同容量的生理盐水代替ADM,用法同ADM组;③葛根素低、中、高剂量组(共3组):ADM用药方法同ADM组,同时经腹腔分别注射15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg,每天1次,连续用药10周。10周末测量各组大鼠心功能及血流动力学指标;测定各组大鼠血清门冬氨酸氨基转移酶活性的测定、心肌肌酸激酶活性以及心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。[结果]与对照组相比,阿霉素组大鼠心功能显著降低(P﹤0.01)、SOD活性显著下降(P﹤0.01)、MDA含量显著增加(P﹤0.01);与阿霉素组相比,葛根素高中低剂量组心功能显著降低(P﹤0.01)、SOD活性显著提高(P﹤0.01)、MDA含量显著下降(P﹤0.01)。[结论]葛根素可通过降低阿霉素对大鼠心脏的氧化损伤,而起到对阿霉素所致心肌损伤的保护作用。     

维生素E对染镍肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化的影响

[目的 ]探讨维生素E拮抗镍所致细胞毒作用及作用机制。 [方法 ]采用体外细胞培养方法 ,观察维生素E对染镍肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)及超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响。 [结果 ]在体外染镍肺泡巨噬细胞培养过程中加入不同浓度的维生素E(2 5、5 0或 10 0 μmol/L)可提高肺泡巨噬细胞内SOD活性 ,具有剂量反应关系。维生素E能显著抑制MDA生成量 ,其中以 5 0和 10 0 μmol/L浓度组作用最为明显。[结论 ]镍可增加细胞脂质过氧化 ,维生素E具有拮抗镍所致细胞毒性的作用 ,可能与其抗氧化功能有关     

饮用水有机提取物致大鼠肝脏损伤中GSTs活性及其编码基因表达的变化

[目的]观察饮用水有机提取物对大鼠肝脏谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase,GSTs)活性及谷胱甘肽-S-转移酶A1(GSTA1)基因m RNA和蛋白表达的影响,探讨其在饮用水有机提取物肝脏损伤中作用。[方法]采用固相萃取法提取水样中有机污染物,50只SD大鼠随机分成5组,分别为空白对照组、溶剂对照组(玉米油)和低、中、高3个染毒组(剂量分别为每天5、20、80 L/kg·bw),进行经口灌胃染毒12周。分光光度法检测GSTs的活性,实时荧光定量聚合酶链反应法和Western blot法分别检测GSTA1基因的m RNA和蛋白质表达水平,同时检测肝功能各指标。[结果](1)大鼠肝脏GSTs酶活性:与空白对照、溶剂对照及低剂量组相比,中剂量[(50.66±5.62)U/mg蛋白]和高剂量组[(39.80±12.95)U/mg蛋白]的GSTs酶活性升高(P<0.05);与中剂量组相比,高剂量组GSTs的酶活性则明显降低(P<0.05)。(2)GSTA1的m RNA及蛋白表达水平:中、高剂量组高于空白对照组、溶剂对照及低剂量组(P<0.05);而与中剂量组相比,高剂量组GSTA1的m RNA表达水平下降(P<0.05)。Western blot检测结果显示,随染毒剂量的增加,GSTA1蛋白表达呈先升高后降低的趋势,与空白对照、溶剂对照及低剂量组比较,中、高剂量组的升高,差异具有统计学意义(P<0.05);而与中剂量组比较,高剂量GSTA1的蛋白表达则下降(P<0.05)。(3)肝功能指标:与对照组比较,血清胆碱酯酶(CHE)在中、高剂量染毒组升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转换酶(AST)则仅在高剂量组升高(P<0.05)。总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)在高剂量组下降(P<0.05)。GSTA1蛋白表达、GSTs活性与染毒大鼠肝脏CHE水平均呈正相关关系(r=0.490 5,r=0.685 2;P<0.05)。[结论]在本实验条件下,饮用水有机提取物较高剂量染毒可上调大鼠肝脏GSTA1的m RNA及蛋白质表达水平,调控GSTs活性改变,从而导致大鼠肝细胞对毒物的易感性增强,肝损伤加重。     

恩施硒茶对大鼠心脏缺血-再灌注性心律失常的保护及抗氧化作用研究

[目的]探讨恩施硒茶对大鼠在体心肌缺血-再灌注性心律失常的保护及抗氧化作用。[方法]将40只健康SD大鼠随机分为2组,生理盐水对照组和恩施硒茶处理组,分别用生理盐水和恩施硒茶灌胃4周后,造成缺血-再灌注模型,观察缺血5、10min和再灌注10、20min后心律失常发生情况。Ⅱ导联心电图监测室性早搏(PVB)、室性心动过速(VT)及心室颤动与扑动(VF)的发生率和血中超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)活性、活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量的变化。[结果]缺血10min时,恩施硒茶能明显改善PVB的发生率(P﹤0.01);而且明显减少再灌注10min和20min时VT、VF(P﹤0.01)的发生率;恩施硒茶能明显提高再灌注10min时血中SOD活性(P﹤0.01),降低MDA和ROS的含量(P﹤0.01)。[结论]恩施硒茶能明显降低大鼠在体心肌缺血-再灌注性心律失常的发生率,可提高血中SOD活性,降低MDA和ROS的含量。     

五溴联苯醚对MCF-7细胞c-myc和p53 mRNA及蛋白表达的影响

[目的]观察五溴联苯醚(5-BDEs)对乳腺癌细胞MCF-7c-myc和p53 mRNA及蛋白表达的影响,以探讨5-BDEs雌激素活性的分子生物学作用机制.[方法]将MCF-7细胞在DMEM培养液中进行常规传代培养.采用MTT比色法观察5-BDEs对MCF-7细胞增殖的影响,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组化方法检测5-BDEs对c-myc原癌基因和p53抑癌基因表达的影响.[结果]与溶剂对照组相比,在1×(10-4～10-8)mol/L浓度范围内,5-BDEs与1×10-8mol/L雌二醇作用类似可显著促进MCF-7细胞增殖(P<0.05),并表现出良好的剂量-效应和时间-效应关系.RT-PCR及免疫组化结果显示,1×(10-4～10-8)mol/L的5-BDEs可促进MCF-7 c-myc和抑制p53 mRNA及蛋白表达.[结论]5-BDEs具有雌激素样生物活性,可促进雌激素反应性肿瘤细胞MCF-7增殖,这一效应主要是通过影响c-myc mRNA和蛋白质的表达而实现的.     

蛋白质粉对老龄大鼠抗衰老作用的研究

目的 观察补充蛋白质粉(protein powder,PP)对老龄大鼠抗氧化、抗衰老的作用,并探讨其可能机制.方法 12月龄雌性SD大鼠40只,随机分成对照组和蛋白质粉低(PPL,0.167 g/kg.bw)、中(PPM,0.833 g/kg.bw)、高(PPH,1.667 g/kg.bw)剂量组.对照组大鼠灌胃蒸馏水,另三组分别灌胃不同剂量的蛋白质粉混悬液,每日1次连续60d.实验结束时,心脏采血检测生化指标及抗氧化指标;取脑、肝、肾、脾脏等称重、检测总蛋白含量及脑脂褐质、脑单胺氧化酶(MAO)活性.结果 补充蛋白质粉对老龄大鼠体重无显著影响,但实验组大鼠脑、肝脏、肾脏总蛋白浓度较对照组高.血清总蛋白、总铁结合力实验组显著高于对照组,血清总胆固醇、尿素氮显著低于对照组.血清超氧化物歧化酶(SOD)活性蛋白质粉中剂量组显著高于对照组,血清丙二醛(MDA)含量蛋白质粉低、中剂量组大鼠显著低于对照组.实验组大鼠MAO活性显著降低.结论 适量的蛋白质粉补充能有效改善老龄大鼠营养状况并具有抗氧化、抗衰老作用.     

蓝莓叶黄酮提取物抗氧化活性的研究

<正>蓝莓(blueberry),又称越橘,属杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium.spp)多年生落叶或常绿灌木。其叶含丰富的黄酮类化合物,它具有广泛的生物活性[1],最主要的是抗氧化活性。目前国内外主要研究蓝莓叶中活性物质的提取和抗癌作用[2,3]。本试验旨在探讨蓝莓叶黄酮提取物的抗氧化活性,以寻求新型高效的天然抗氧化剂,提高蓝莓的利用价值。